三氧化二砷联合顺铂诱导人肝癌HepG2细胞株凋亡机制研究

研究发现,三氧化二砷（As2O3）对肿瘤具有明显的选择性,现已将单药As2O3注射液用于临床,在白血病治疗中取得了良好的疗效。顺铂（CDDP）属于细胞周期非特异性抗癌药物,为临床一线抗肝癌化疗药。但其抗肝癌的主要机制仍未明确,为探讨As2O3联合CDDP诱导肝癌凋亡的机制,进行了以下实验研究,现报告如下。     

三氧化二砷与顺铂联用对人乳腺癌细胞杀伤作用的研究

目的探讨三氧化二砷与顺铂联合应用对人乳腺癌细胞的杀伤作用。方法将三氧化二砷与顺铂单独及联合应用于体外培养的乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法测定细胞抑制率,于透射电镜下观察细胞超微结构变化;用流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果1μg/ml三氧化二砷与1μg/ml顺铂联合应用于乳腺癌MCF-7细胞48h后,细胞抑制率为27.01%,明显高于单用三氧化二砷（1μg/ml）时的12.12%及单用顺铂（1μg/ml）时的10.93%。细胞超微结构及流式细胞仪观察均显示,联合应用比单用促凋亡效应更显著（P〈0.01）。结论三氧化二砷与顺铂联合应用,可高效杀伤人乳腺癌细胞,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。     

顺铂联合姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的：研究应用顺铂联合姜黄素对诱导胃癌细胞HGC27凋亡的影响及机制。方法：用CCK8法检测单独或联合使用不同剂量顺铂或/和姜黄素对胃癌细胞HGC27增殖的影响;用Hochest33258染色检测联合应用顺铂和姜黄素诱导胃癌细胞HGC27凋亡的发生率。用Western blot检测细胞凋亡相关分子PARP1蛋白剪切体和DNA损伤蛋白p-γH2AX的表达变化。结果：单用顺铂可以呈剂量依赖性地促进HGC27细胞凋亡。5μmol·L-1姜黄素对HGC27细胞增殖无明显作用,10μmol·L-1姜黄素反而轻微促进HGC27细胞增殖。20、40、80μmol·L-1姜黄素对HGC27细胞的增殖抑制率分别为10.97%、15.15%、32.93%。分析联合用药组：5μmol·L-1姜黄素联合顺铂组反而促进HGC27细胞生长;10μmol·L-1姜黄素联合不同剂量顺铂和单用顺铂组比较,组间抑制率没有统计学差异（P>0.05）。20μmol·L-1姜黄素联合4、6μmol·L-1顺铂有明显的促进细胞的凋亡作用,抑制率分别为70.68%、87.30%。 Hochest33258染色结果显示,联合用药组细胞凋亡小体和坏死细胞明显增多。 Western blot结果显示,在联合用药组HGC27细胞PARP1剪切体蛋白和p-γH2AX蛋白表达明显增加。结论：顺铂联合姜黄素可以促进胃癌细胞HGC27的凋亡,机制是姜黄素可以加重顺铂引起的细胞DNA双链损伤。     

TRAIL联合顺铂诱导骨肉瘤HOS-8603细胞凋亡研究

目的研究TRAIL联合顺铂诱导HOS-8603细胞的凋亡及其机制。方法 MTT法分别测定TRAIL,顺铂,和TRAIL+顺铂对HOS-8603细胞的抑制率,流式细胞法测定亚G1期细胞百分率及PI和Rh123双染色后细胞的ΔΨm。结果三组分别由TRAIL、顺铂、TRAIL+顺铂处理过的HOS-8603细胞用MTT法测抑制率分别为29%、33.6%、58.5%。随着药物作用时间增加,HOS-8603细胞凋亡数增加和ΔΨm降低(P<0.01),两者呈直线相关。结论 TRAIL和顺铂能协同诱导HOS-8603细胞凋亡,其机制可能是通过使线粒体膜通透性转运孔开放,ΔΨm降低来实现的。     

三氧化二砷诱导实体瘤细胞凋亡的研究进展

近年来国内学者在研究三氧化二砷（As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病的作用机理时，发现其具有诱导白血病细胞凋亡的效应，而且更多的研究证实，这种效应不仅存在于血液肿瘤细胞，还存在于某些实体瘤，如胃癌细胞、胰腺癌细胞、食管癌细胞等，提示三氧化二砷具有一个相对较广的诱导凋亡效应谱。本文综述了近年来国内学者对三氧化二砷诱导某些实体瘤细胞，如肺癌细胞、肝癌细胞、胰腺癌细胞、结肠癌细胞、食管癌细胞、胃癌细胞、舌癌细胞、宫颈癌细胞、恶性淋巴瘤细胞、骨髓瘤细胞、神经母细胞瘤细胞凋亡的研究状况。     

三氧化二砷与顺铂联用对肝癌HepG2细胞的作用

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)与顺铂(CDDP)联合对肝癌细胞HepG2的作用.方法:应用普通光学显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪分别观察As2O3、CDDP和两者联合应用时对HepG2:细胞株的形态学改变和诱发凋亡率.结果:AO/EB荧光染色法显示在联合应用药物后,可看到较典型的细胞凋亡形态学改变.噻唑蓝(MTT)法检测各个浓度的As2O3与CDDP联合应用时,对HepG2细胞的生长抑制率均较单用相应一种药物时增强,而低浓度联合用药组合的生长抑制率增加尤为明显.结论:在体外Aa2O3和CDDP两种化疗药物联合应用具有明显的协同抗肝癌作用,显著抑制人肝癌细胞HepG2的细胞株的生长,并且具有明显的剂量时效关系.两药联用有显著的协同诱导肝癌细胞凋亡的作用.     

顺铂诱导膀胱癌细胞凋亡及其与凋亡相关蛋白的关系

目的　探讨CDDP诱导Scaber凋亡特点和与凋亡相关蛋白表达的关系。方法　选用CDDP诱导膀胱癌细胞株Scaber凋亡 ,运用HE、TUNEL、透射电镜等方法分别检测细胞凋亡、观察凋亡的形态变化特点及应用S P免疫组化方法检测凋亡相关蛋白bcl 2、Bax、caspase 3表达的动态变化。结果　①顺铂可诱导Scaber细胞凋亡 ,其诱导凋亡作用在一定范围内具有时间及剂量依赖性 ;②CDDP诱导Scaber细胞凋亡时 ,bcl 2降低、Bax增加 ,同时出现了bcl 2的核周及核内移位 ;③不同浓度的CDDP可使Scaber细胞中caspase 3的表达增强 ,并具有时间及剂量的依赖性。结论　顺铂可诱导Scaber细胞凋亡 ,CDDP诱导Scaber细胞凋亡与bcl 2降低、Bax增加及bcl 2移位有关 ;CDDP诱导Scaber细胞凋亡是Caspase 3依赖性的。     

三氧化二砷诱导宫颈癌细胞凋亡的研究

目的:研究三氧化二砷能否诱导宫颈癌细胞凋亡。方法:AnnexinV/PI双染,流式法检测早期凋亡;倒置显微镜观察、HE染色检测凋亡过程的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡晚期出现的DNALadder。结论:适合浓度的三氧化二砷可以诱导宫颈癌细胞发生明显凋亡。     

单用Acivicin和联用顺铂诱导HepG_2细胞凋亡的实验研究

目的 :观察Acivicin单用及联用顺铂后对HepG2 细胞凋亡及相关基因Bcl -2、c -myc、p53表达的影响。方法 :Acivicin和顺铂分别或联用处理HepG2 细胞 ,采用MTT法测定细胞毒性 ;采用细胞凋亡原位检测法检测细胞凋亡率 ;采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bcl -2、c -myc、p53 的表达。结果 :Acivicin为0 28、0 56、0 84、1 12、1 40mmol/L时 ,HepG2 细胞的凋亡率分别为(3±1 25) %、(3 7±2 0) %、(10±1 25) %、(17 4±4 5) %、(16 9±3 5) %。Acivicin(1 40mmol/L)在24、48、72h致HepG2 细胞的凋亡率分别为 (16 9±3 5) %、(27 9±4 3) %、(47 2±3 0) %,与对照组相比差异显著 (P<0 05) ;顺铂 (67μmol/L)致HepG2细胞 (24h)的凋亡率为 (73 4±1 5) %;Acivicin(1 40mmol/L)联用顺铂 (67μmol/L)致HepG2 细胞 (24h)的凋亡率为 (94 7±0 5) %,较两者单用显著增加 (P<0 01)。Bcl-2、c -myc、p53 检测结果显示 ,各组Bcl -2、c -myc、p53 的表达比对照组均有增加。结论 :Acivicin诱导HepG2 细胞凋亡呈剂量/时间依赖性 ;Acivicin与顺铂联用后可增强顺铂致HepG2 细胞凋亡的作用。     

塞来昔布顺铂对卵巢癌细胞HO-8910增殖与凋亡影响的研究

目的探讨选择性环氧化酶(COX)-2抑制剂塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的影响及Survivin、增殖细胞核抗原(PCNA)、COX-2蛋白表达情况。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度塞来昔布单用及其与顺铂联用时HO-8910细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Survivin、PCNA、COX-2蛋白的表达情况。采用方差分析和LSD-t检验进行统计分析。结果塞来昔布、顺铂均可抑制HO-8910细胞的生长(P<0.01);当两者合用时G0/G1期细胞增加,凋亡率增高更加明显(P<0.01),Survivin、PCNA、COX-2蛋白表达下调(P<0.01)。结论塞来昔布、顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910均有抑制作用,塞来昔布能增强顺铂的抗卵巢癌作用。     

三氧化二砷诱导体外多发性骨髓瘤细胞凋亡

目的探讨三氧化二砷（ATO）体外对多发性骨髓瘤（MM）增殖凋亡、粘附分子、细胞因子的作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测ATO对骨髓瘤细胞株U266抑制作用,求出其IC50,膜联蛋白V（Annexin-V）检测凋亡并进行细胞周期分布分析,流式细胞术检测细胞间粘附分子的表达强度,RT—PCR检测CXCR4、c-Myc、Rb、Bax／bcl—XL（Bcl-2家族基因）、RANK—L、CyclinD1及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达。结果ATO在体外可抑制U266细胞的增殖,且呈现剂量和时间依赖性。ATO可使骨髓瘤细胞分裂阻滞于G0／G1期,并促进U266发生早期凋亡。经ATO作用后U266细胞高表达CD11a等粘附分子。U266细胞高表达CXCR4、bcl—XL和c-Myc基因,经ATO作用后其表达显著下调。U266处理前后均未检测到Rb、CyclinD1、VEGF、Bax,尤其是RANK—L基因的表达。结论ATO通过下调c-Myc和bcl—XL基因促进U266细细胞凋亡,并使G0／G1期细胞分裂阻滞,影响粘附分子表达,并可能通过CXCR4影响归巢。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中血管内皮因子的变化

目的 通过观察三氧化二砷(As2O3)对人类慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞的作用.探讨其治疗CML的作用机制.方法 将K562细胞与不同浓度As2O3共同孵育,于24、48、72 h用MTT方法检测K562细胞存活率,用AnnexinV-FITC检测凋亡细胞,同时用酶联免疫吸附法(ELISA)检测K562细胞上清液中血管内皮因子(VEGF)的浓度.结果 As2O3＜2 μmol·L-1时,对K562细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用与空白对照组比较,无统计学意义(P＞0.05);As2O3＞2 μmol·L-1时则具统计学意义(P＜0.05);在相同作用时间下,AS2O3 浓度升高对K562细胞的增殖抑制率及细胞凋亡率亦升高;当As2O3＞8 μmol·L-1时,对K562细胞的抑制及细胞凋亡率不再上升. As2O3＜2 μmol·L-1时上清液中VEGF浓度与空白对照组比较无显著性(P＞0.05);As2O3＞2 μmol·L-1时VEGF的浓度差异有显著性(P＜0.05),且随As2O3 浓度的增加VEGF浓度上升;当As2O3＞8 μmol·L-1时则变化不显著(P＞0.05).结论 As2O3可抑制K562细胞增殖,并具诱导凋亡作用, As2O3在2.0～10.0 μmol·L-1梯度浓度,作用在24～72 h时段,表现为时间和剂量依赖性,还可下调VEGF表达水平.     

参一胶囊联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系 HO-8910PM的抑制作用

［摘要］目的观察参一胶囊（Rg3）对高转移人卵巢癌细胞系HO 8910PM的抑制作用。方法细胞分成6组：阴性对照组（A组）：只加新鲜的全培养液；低浓度组（B组）：含10 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；中浓度组（C组）：含20 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；高浓度组（D组）：含40 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液；顺铂阳性对照组（E组）：含10 μg &#8226;mL 1顺铂的培养液；顺铂+Rg3联合用药组（F组）：含10 μg&#8226;mL 1顺铂+20 μg&#8226;mL 1 Rg3培养液。分别从台盼蓝活细胞计数法、细胞的增殖抑制（CCK 8法）进行观察。结果Rg3对人卵巢癌HO 8910PM细胞有明显的抑制作用，显示了较好的细胞毒活性作用（P＜0.05）。Rg3与顺铂联合用药时，细胞毒作用与高浓度Rg3和顺铂组相似，但在微观结构上能造成更大的细胞形态结构损伤。结论Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的抑制作用，Rg3与顺铂联合用药在细胞结构破坏上可能有相加或协同作用，这将为临床卵巢癌患者进行抗肿瘤治疗提供依据。     

三氧化二砷诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡对端粒酶活性的影响

<正>乳腺癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,近年发病率逐年上升,且发病年龄也趋于年轻化。近年来研究发现As2O3不仅对APL细胞,而且对其他血液肿瘤细胞和许多实体瘤细胞均具有诱导凋亡作用。Wang等研究表明端粒酶与恶性肿瘤发生有着紧密的关联,p21特异性核苷     

三氧化二砷诱导人宫颈癌细胞凋亡及bcl-2高表达对其影响

采用脂染素（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）介导的ＤＮＡ 转染,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹, ＭＴＴ和克隆形成实验,流式细胞术和细胞凋亡原位检测法探讨Ａｓ２Ｏ３ 对人宫颈癌ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞的生物学效应和ｂｃｌ－２ 高表达对这一效应的影响． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 处理的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞,存活率和克隆形成能力明显降低,细胞周期的Ｇ１ 期前有低于２ 倍体的凋亡峰,细胞被阻滞在Ｇ２／Ｍ 期,有细胞凋亡时出现的ＤＮＡ 断裂． 而Ａｓ２Ｏ３ 处理的ｂｃｌ－２ 高表达的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞存活率和克隆形成能力增加,凋亡率减少,Ｇ２／Ｍ 期阻滞程度显著降低． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 可诱导ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞凋亡,Ｇ２／Ｍ 期阻滞可能是其诱导凋亡的原因之一;ｂｃｌ－２ 高表达可能通过减轻Ｇ２／Ｍ 期阻滞的程度而部分阻止Ａｓ２Ｏ３ 诱导的细胞凋亡．     

三氧化二砷与氟尿嘧啶、吉西他滨对胰腺癌细胞作用的对照研究

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人胰腺癌细胞的抑制作用.方法 应用Cell Counting Kit-8法(CCK-8法)测定As2O3对人胰腺癌PC-3细胞株的抑制率,并与氟尿嘧啶(5-Fu)、吉西他滨(GEM)进行比较.结果 与5-Fu、GEM相比,As2O3抑瘤作用最强(P＜0.01或P＜0.05).结论 As2O3体外试验能有效抑制人胰腺癌PC-3细胞株的生长;As2O3对人胰腺癌PC-3细胞株生长的抑制作用强于5-Fu、GEM.As2O3较强的抗胰腺癌细胞能力可能与其广泛而独特的抗癌机制有关.     

三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人三阴性乳腺癌细胞HCC1937的抑制作用。方法体外培养人乳腺癌HCC1937细胞,利用MTT法及倒置荧光显微镜观察三氧化二砷对人乳腺癌HCC1937细胞生长的抑制作用。结果不同浓度的三氧化二砷均可抑制人乳腺癌HCC1937细胞的增殖,促进其凋亡。三氧化二砷20μg/m1对肿瘤细胞作用72h,其生长抑制率达80.51%。结论三氧化二砷可有效抑制人乳腺癌HCC1937细胞生长,且呈时间、剂量依赖关系。     

Arsenic trioxide induces the apoptosis in bone marrow mesenchymal stem cells by intracellular calcium signal and caspase-3 pathways

It was previously reported that excessive arsenic trioxide would produce cardiovascular toxicity. Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) have been shown to play a supporting role in cardiovascular functions. The increasing apoptosis of BMSCs commonly would promote the development of cardiovascular diseases. Thus we hypothesize that arsenic trioxide caused apoptosis in BMSCs, which provided a better understanding of arsenic toxicity in hearts. The present study was designed to investigate the proapoptotic effects of arsenic trioxide on BMSCs and explore the mechanism underlying arsenic trioxide-induced BMSCs apoptosis. We demonstrate that arsenic trioxide significantly inhibited survival ratios of BMSCs in a concentration-dependent and time-dependent manner. The Annexin V/PI staining and terminal deoxynucleotidyl transferasemediated dUTP nick-end labelling (TUNEL) assay also showed that arsenic trioxide markedly induced the apoptosis of BMSCs. The caspase-3 activity was obviously enhanced in the presence of arsenic trioxide in a concentration-dependent manner in BMSCs. Additionally, arsenic trioxide caused the increase of intracellular free calcium ([Ca²⁺]_i) in rat BMSCs. BAPTA pretreatment may attenuate the apoptosis of BMSCs induced by arsenic trioxide. Taken together, arsenic trioxide could inhibit the proliferation and induce the apoptosis of BMSCs by modulating intracellular [Ca²⁺]_i, and activating the caspase-3 activity.     

砷诱导的肝癌细胞凋亡及端粒酶活性改变

目的：研究三氧化二砷（As2O3)对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法：1μmol/L As2O3处理培养的人肝癌HCC－9204细胞48h，用形态学观察、细胞超微结构分析和流式细胞仪检测等方法鉴定细胞凋亡。用噻唑蓝（MTT）比色试验观察蛋白质全盛抑制剂放线菌素D对As2O3凋亡诱导作用的影响。用TRAP－PCR－ELISA法检测As2O3处理前后肝癌细胞端粒酶活性的变化情况。结果：1μmol/L As2O3作用48h后，HCC－9204细胞出现了典型的凋亡形态学改变和超微结构变化；流式细胞仪检测到大量Annexin-阳性、PI－阴性细胞、放线菌素D可明显拮抗As2O3的凋亡诱导作用。细胞凋亡发生后端粒酶活性显著降低，A450/A630值从2．874降为0．767。结论：As2O3可以有效诱导肝癌细胞凋亡，端粒酶活性降低可能是其中的机制之一。     

紫杉醇联合顺铂不同给药途径治疗晚期卵巢癌的疗效观察

目的研究经腹腔灌注和静脉滴注两种途径应用紫杉醇联合顺铂治疗晚期卵巢癌的疗效和毒性反应。方法选择80例晚期卵巢癌患者随机分为紫杉醇联合顺铂静脉注射组(IV组)和紫杉醇联合顺铂腹腔灌注组(IP组)进行化疗。IV组给予紫杉醇135mg.m-2静脉滴注,24h后继以顺铂75mg.m-2静脉滴注。IP组予紫杉醇135mg.m-2静脉滴注,24h后继以顺铂100mg.m-2腹腔灌注,第8天予紫杉醇60mg.m-2腹腔灌注。每3周为1个疗程,完成6个疗程后观察疗效及毒副反应。结果 IP组在有效率、疾病控制率、无疾病进展生存期、中位生存期及2年生存率等方面均优于IV组(P<0.05)。不良反应主要有骨髓抑制、胃肠道反应、肝功能损害、神经毒性、关节肌肉痛和心功能异常等,以IP组发生率较高(P<0.05)。结论 IP组较IV组治疗晚期卵巢癌具有更好的疗效,但IP组毒副反应高于IV组,但可耐受。紫杉醇联合顺铂腹腔灌注化疗方案可作为晚期卵巢癌较为理想的化疗方法之一。