大鼠冠状动脉平滑肌细胞离子通道研究中的急性酶分离技术

膜片钳技术的应用,为从分子水平了解生物膜离子通道的门控动力学特征及通透性、选择性等膜信息提供了最直接的手段,使人们对细胞膜通道功能的认识进入了一个崭新的阶段,对研究心脑血管离子通道电生理特性具有相当重要的意义。急性分离的单个血管平滑肌细胞对研究生理和病理状态下血管张力及其反应性变化机制极为重要,细胞分离的好坏很大程度上决定着膜片钳离子通道研究的成败。     

作用于心肌细胞离子通道的抗心律失常中药研究进展

心肌电生理信号传导的基础是各种离子通过心肌细胞膜上的通道形成跨膜电流。当离子通道结构、数目及功能异常时将会导致离子通道跨膜平衡的破坏,使各主要离子通道间数目比例改变从而诱发心律失常。近年来中医对心肌细胞跨膜离子通道异常导致的心律失常有一定的研究,发现多种中药成分具有抑制离子转运、调节膜内外离子浓度、改变动作电位等作用,进而抑制心律失常的发生。对中医药单药及成方总结与归纳,对作用于心肌细胞离子通道的抗心律失常中药进行综述。     

人心肌细胞电生理学研究进展

人心肌细胞电生理学研究，始于60年代初。70年代曾有不少关于人心肌标本电生理研究报道，初步观察认为，它们和哺乳类动物的心肌相似，因而这方面的研究逐渐减少。80年代以来，随着膜片钳技术的广泛应用，哺乳动物心肌细胞电生理学研究迅猛发展，不仅研究了细胞膜，也研究了细胞内小器如肌浆网和线粒体的膜，发现的离子通道数目不下半百，克隆通道也已有十余种。但是，与此同时人们也发现膜离子通道存在着动物种属差     

重视药物与心电的关联

心肌细胞电位活动的整体平衡协调性是心脏正常电生理活动的基础，而每个心肌细胞的动作电位又取决于细胞的各种跨膜电流。临床中应用的各种药物可以作用于不同的离子通道，影响跨膜电流，进而影响心脏电生理活动，而这些心电活动的改变大多可以在心电图中找到。     

离子通道与心房颤动发生的研究进展

与心房颤动(房颤)有关的离子通道改变主要包括:钾离子通道、钙离子通道、钠离子通道以及起搏离子通道。房颤发病机制可能与多通道改变导致心脏电生理重塑有相关性。对房颤心肌细胞离子通道基因表达水平及电生理的研究,将为进一步了解房颤发生、发展提供有用的信息。     

心脏电生理学新概念:(11) 膜片钳技术在心血管基础和药物研究中的应用

膜片钳技术，特别是全细胞记录技术发明20年来，极大地推动了心血管生理、病理生理及药理学的研究，使人们对心血管系统生理调节，分子水平的病理学改变，及药物的作用机制有了更深的认识和研究手段，解决了大量的理论和实际问题。今后膜片钳技术在心血管基础和药物研究中仍将发挥重要的作用。本文简要介绍膜片钳技术在心血管研究中的应用及进展情况。１ 心肌细胞膜离子通道电流的记录 这是膜片钳全细胞记录的主要优势之一，也是最常用的手段。目前应用这一技术可以检测到心肌细胞上各种离子通道。如钠通道，钙通道，钾通道和氯通道等及其亚…     

Islet-1促C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化过程中的电生理特性

目的:研究Islet-1体外诱导C3H10T1/2细胞分化为心肌样细胞过程中,钠、钙离子通道电流的表达情况。方法:Islet-1慢病毒载体感染C3H10T1/2细胞,观察细胞形态变化。差速贴壁法分离培养新生小鼠心肌细胞,以免疫荧光法进行鉴定。RT-PCR检测相应钠、钙离子通道基因mRNA表达水平。全细胞膜片钳技术检测细胞钠、钙离子通道电流表达情况。结果:实验组细胞形态呈心肌样改变;实验组钠、钙离子通道基因SCN5A(INa离子通道基因)、CACNA1C(IL-Ca离子通道基因)和CACNA1H(IT-Ca离子通道基因)表达量均明显高于空白组和阴性对照组(均P0.05);膜片钳检测空白组和阴性对照组无内向离子通道电流表达,实验组检测到与心肌细胞相似的钠电流(INa)和T型钙电流(IT-Ca),峰值电流呈现不均一性,总体水平低于小鼠心肌细胞;IL-Ca的离子通道基因虽表达增高,但未测得电流表达。结论:实验组钠、钙离子通道基因表达增高,可产生与心肌细胞相似的钠、钙离子通道电流,说明Islet-1可诱导C3H10T1/2细胞分化为有电生理功能的心肌样细胞。     

膜片钳技术在高血压研究中的应用

膜片钳技术(patch - clamp technique)是1976年由Nehetr 和Sakroann在电压钳的基础上发展而来的一种记录细胞膜离子通道电生理活动的技术.通过微电机与细胞膜之间形成紧密接触,采用电压钳或电流钳技术对生物膜上离子通道的电活动进行记录.膜片钳技术的应用将细胞水平和分子水平的生理学研究联系在一起,已成为现代细胞电生理研究的常规方法,使人们对于疾病和药物作用的认识不断更新.膜片钳技术用于心血管领域的研究也越来越多.本文拟对膜片钳技术在高血压病研究中的应用作一综述.     

人心房肌细胞膜脑子通道研究进展

离子通道是细胞生物电活动的基础。研究人心肌细胞膜离子通道，有助于人心肌细胞生物电活动的机制的认识，亦有助于认识及治疗人类疾病。本文将着重介绍了人心房细胞的分离方法及其膜离子通道特性。     

Ⅰ类和Ⅱ类抗心律失常药物对心电图的影响(126)

正根据对心肌细胞膜上不同离子通道的作用,可将抗心律失常药物分成四类,因对不同离子通道的作用不同,使各类药物对心肌细胞动作电位和心电图的影响各不相同。Ⅰ类抗心律失常药物又称钠通道阻滞剂或膜稳定剂。其阻断钠离子的跨膜内流,使开放的钠通道很快变为关闭状态,结束跨心肌细     

缝隙连接、连接蛋白43及其与心律失常的关系

缝隙连接(GJ)通道是介导心肌细胞间电化学信息交流,保证心脏整体活动的协调性和同步性的特殊通道。在致心律失常发生上,GJ通道介导的细胞间电耦联障碍甚至比膜离子通道功能紊乱起了更重要的作用。连接蛋白43(Cx43)是心室GJ通道的主要构成成份,其表达和分布的异常将导致心室肌细胞的整体性异常,从而传导速度和传导各向异性发生改变,产生折返和传导阻滞。以GJ通道为作用靶点的新一代抗心律失常药的出现将为心律失常的治疗带来新的希望。     

人心房肌细胞膜离子通道研究进展

离子通道是细胞生物电活动的基础。研究人心肌细胞膜离子通道,有助于对人心肌细胞生物电活动的机制的认识,亦有助于认识及治疗人类疾病。本文将着重介绍人心房肌细胞的分离方法及其膜离子通道特性。     

磺酰脲受体、离子通道与果蝇

作者对磺酰脲受体、离子通道及胰岛素分泌之间的关系进行了实验研究和阐述。 β细胞有多种离子通道调节其兴奋性。1981年,Hamill等人发明的斑—钳技术(Patchclamptechnique)可对单离子通道的电流进行研究。当磺酰脲类使β细胞的受体达到饱和的浓度时,可与细胞膜上的ATP抑制性K~+通道的外表面的蛋白质结合,抑制通道电的活性,使细胞内的K~+外流减少、静息膜电位降低,导致细胞去极化,造成电压     

离子通道

组成人体的具有生命特征的最小单位为细胞,离子通道则是细胞膜上的一种特殊结构,是神经、骨骼肌、心肌细胞等生物电产生的基础,随着现代分子生物学技术的发展,人们对离子通道的结构、功能及特性的了解更加深入。一.离子通道的特性离子通道是细胞膜上的一种蛋白结构,顾名思义,其     

Na~+通道的静息关闭与开放(102)

正离子通道是一类跨膜糖蛋白,因有亲水性孔道,故可使带电荷的离子进行跨膜转运,进而产生和传导电信号。目前,心肌细胞膜上已发现Na~+、Ca~+2、K~+和Cl-4种离子通道,以Na~+通道的密度最大,在每个心肌细胞膜上的数量高达100万个,而Ca~+2通道仅2万个。心肌细胞膜Na~+通道的结构和特性与神经细胞或骨骼肌细胞膜上的Na~+通道明显不同。Na~+通道有除极心肌细胞,传导动作电位的作用,在整个动作电位时程中,Na~+通道有着三种不同状态,并循环转换。静息关闭(左图A):Na~+通道此时处于不活动的关闭状态,     

线粒体氧化应激在心房颤动电重构机制中的研究进展

线粒体是心肌细胞的发电厂,为心肌细胞的各项活动提供能量,心肌细胞中线粒体的含量较为丰富。近年来越来越多的研究表明,心脏电重构是心律失常的电基础。线粒体发生氧化应激时,线粒体的结构和功能发生改变,引起心房肌细胞的离子通道和缝隙连接通道发生改变,从而导致心房电重构。因此,心房肌细胞线粒体氧化应激在心房电重构过程中发挥着重要作用。     

心肌阴离子通道与阳离子通道的相互关系

近年来发现离子通道在细胞的信号转导、代谢、分泌、增殖、分化和凋亡过程中起重要作用。离子通道之间还能以通道—通道相互作用方式调节通道的功能 ,通道调控通道的现象同样可能存在于心肌细胞的各种离子通道之间     

心肌细胞离子通道与心律失常

从生物物理学的观点来看 ,离子通道应具有三个最重要性质 :通透性、选择性及门控机制。离子通道是以该通道允许通透的主要离子命名的 ,门控机制则调节着该离子的流动过程。细胞膜离子通道根据其门控机制可以分为三类 :电压门控性通道、配体门控性通道以及机械敏感性通道。另外 ,还有细胞器离子通道和细胞间离子通道。膜片钳技术与分子克隆、基因突变技术相结合 ,已成为一种非常有力的研究手段 ,从分子水平解释离子通道的孔道特性、动力学过程、结构和功能的关系以及功能的调节。本文将系统介绍心脏细胞离子通道的研究进展 ;根据各种离子通道…     

人心室肌细胞电生理学研究进展

人心室肌细胞电生理学研究进展徐有秋心肌细胞电生理学研究由于采用了膜片钳和克隆技术，获得了突飞猛进的发展。据不完全统计，目前已知钙通道有三种，钾通道有十四种，氯通道五种，非选择性正离子通道九种。如果再加上离子交换通道、缝隙连接通道、肌浆网通道、线粒体膜...     

第64届美国心血管病年会有关心电学的一些研究动态

由美国心脏学会主办的第64届美国心血管病年会1991年11月11-14日在美国加州 Anaheim 城举行。笔者有章参加了这次盛会。现就本届年会上有关心电学方面的一些研究动态作一简要介绍,以飨读者。一.基础研究1981年开始发展起来的片膜吸附术(patch clamp)和原已有的电压固定术结合起来研究单个心肌细胞的离子电流、离子通道是近年研究细胞电生理的最新方法。它采用尖端抛光的微玻璃电极吸附小片心肌细胞膜,并通过一系列生化方法