慢性缺氧对胸腺细胞凋亡的影响及Bcl—2基因的调控作用

目的：为了观察慢性缺氧对胸腺细胞凋亡的影响和Ｂｃｌ－２基因的调控作用。方法：本研究检测了大鼠腺细胞的增殖能力（ＭＴＴ比色法）、ＤＮＡ降解（琼脂糖凝胶电泳）、原位细胞凋亡（ＴＵＮＥＬ染色）、Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达（点杂交）。结果：缺氧１周、２周、３周后大鼠胸腺细胞ＤＮＡ琼脂凝胶电泳都再现典型的“梯状”条带,ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞明显增多,细胞增殖能力的明显降低,Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达量显著或极显     

大鼠脑缺血模型的改进和脑缺血再灌流损伤诱发细胞凋亡的研究

目的改进动脉内置线阻断法建立的大鼠大脑中动脉（ＭＣＡ）局灶性脑缺血模型,并探讨脑缺血诱发细胞凋亡的时效和量效关系。方法以顶端细,后逐渐增粗的涂抹硅橡胶改进栓子,ＴＴＣ染色鉴定缺血效果;ＴＵＮＥＬ－ＡＰ法和ＨＥ染色观察凋亡发生和形态学改变。结果ＴＴＣ染色证实了大脑缺血灶的的稳定出现;用ＴＵＮＥＬ法发现,缺血３０ｍｉｎ再灌流６ｈ后,凋亡阳性细胞即明显增多,４８ｈ再灌流后阳性细胞数最多;缺血５ｍｉｎ再灌流４８ｈ缺血脑区的凋亡细胞主要位于纹状体,１５ｍｉｎ缺血组皮层也开始散见阳性细胞;随缺血时间延长,凋亡细胞主要出现在缺血区周边。结论脑缺血可选择性诱发神经细胞凋亡。     

局灶性鼠脑缺血脑组织环氧酶—2的表达与细胞凋亡的关系

目的探讨环氧酶－２蛋白与细胞ＤＮＡ损伤的关系。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞脑缺血模型,应用ＨＥ染以观察缺血损伤的演变,免疫组化染色观察环氧酶－２蛋白的表达,ＤＮＡ末端标记法９ＴＵＮＥＬ）法观察细胞ＤＮＡ损伤。结果环氧酶－２蛋白的表达与ＴＵＮＥＬ阳性细胞在时程上一致,解剖部位上重叠。结论环氧酶－２是诱导细胞凋亡的重要因素,脑缺血后环氧酶－２的高度表达促进了梗死范围的扩大。     

实验性局灶性脑缺血再灌流后细胞凋亡的研究

目的：探讨细胞凋亡在局灶性脑缺血再灌流后的动态变化及其作用。方法：采用末端标记法（ＴＵＮＥＬ）观察大鼠局灶性脑缺血再灌流不同时间在皮层区和基底节区的凋亡细胞的变化。结果：大脑中动脉阻塞２ｈｒ后随再灌流时间延长其解剖分布不同。细胞凋亡在基底节区出现时间早，持续时间短；而皮层区出现时间较晚，持续时间较长，其中再灌流１ｄ细胞凋亡最显著。结论：本研究提示细胞凋亡与细胞坏死在局灶性脑缺血再灌流损伤中同时存在，细胞凋亡是梗塞灶形成的重要机制之一     

肾毒性血清肾炎大鼠心肌组织形态学改变的观察

目的：观察肾毒性血清肾炎（ＮＳＮ）大鼠心肌的组织形态学改变。方法：用兔抗鼠肾毒性血清静脉注射制作ＮＳＮ模型，取ＮＳＮ大鼠心肌组织作光镜、电镜和免疫组化ＩｇＧ染色检查。结果：心肌细胞肌膜和闰盘正常，肌浆网及线粒体结构清晰，肌小节内粗、细肌丝排列正常，细胞核核膜正常，核形态规则；心肌间质水肿，毛细血管扩张、充血，毛细血管管壁有兔ＩｇＧ沉积；心肌间质有散在的炎性细胞浸润。结论：ＮＳＮ可引起间质性心肌炎。     

细胞凋亡DNA检测技术概况

细胞凋亡一个是最直观的指标就是染色体ＤＮＡ的变化，故以检测ＤＮＡ来监测细胞凋亡是细胞凋亡实验室检测中的重要内容。本文综述了目前最常见的几种凋亡ＤＮＡ检测方法，有琼脂糖凝胶电泳法，原位ＴＵＮＥＬ法，ＥＬＩＳＡ法及流式细胞仪和光散射法。     

三丁酸甘油酯对早幼粒细胞白血病细胞株的诱导分化及促凋亡作 …

目的 研究三丁酸甘油酯（ＴＢ）与全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）不同浓度组合对ＮＢ４及ＭＲ２细胞的诱导分化作用,并观察ＴＢ对ＮＢ４,ＭＲ２细胞是否具有促凋亡作用。方法 通过硝基四唑氮蓝（ＮＢＴ）还原率及细胞表面抗原ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ３３表达观察细胞分化程度;通过细胞形态、ＤＮＡ片段化电泳,流式细胞术（ＦＣＭ）ＤＮＡ含量分析及凋亡细胞原位标记（ＴＵＮＥＬ）试剂盒检测细胞凋亡;用逆转录－聚合酶链反应（     

内毒素诱发小鼠肝细胞凋亡的观察

目的：观察内毒素攻击诱导小鼠肝细胞凋亡及与肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的关系。方法：用精制内毒素腹腔注射于实验小鼠，分别于不同时间点测其血清中ＴＮＦα、谷丙转氨酶（ＧＰＴ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）含量，同时取肝脏制成组织切片进行ＨＥ和末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（ＴＵＮＥＬ）染色，分别于光镜及荧光显微镜下观察肝细胞凋亡情况。结果：在内毒素攻击下，小鼠血清ＴＮＦα于９０分钟时首先达到峰值（１２９１．５０±１３４．４０）ｎｇ／Ｌ，其后即下降；２小时时肝细胞出现明显凋亡现象，肝组织坏死及血清酶学改变于４小时才明显产生。结论：内毒素首先诱导ＴＮＦα等释放，而ＴＮＦα及其诱生的其它细胞因子可使肝细胞发生凋亡     

纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠心肌细胞凋亡及BCL-2,BAX蛋白表达的影响

目的：在建立新生大鼠窒息的动物模型基础上。比较纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：采用SD新生大鼠建立窒息模型2．5h，并分组进行纯氧与空气复苏。实验分为正常对照组、纯氧复苏组（PO组）和空气复苏组（RA组），均在复苏后24h和72h取心肌组织，制成石蜡切片，HE染色光镜观察心肌组织病理变化，TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数，免疫组织化学S-P法检测心肌组织Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果：HE染色光镜观察，与正常对照组相比，PO组可见大部分心肌纤维肿胀，有少许断裂，心肌间质及小静脉明显淤血，RA组心肌纤维则表现明显的片状或灶性坏死。RA组心肌细胞凋亡指数明显高于PO组，且以24h升高最显著。PO组凋亡抑制基因Bcl-2表达高于RA组，RA组促凋亡基因Bax明显高于PO组。结论：空气复苏较纯氧复苏后心肌细胞凋亡更严重，且以复苏后24h最明显，空气复苏促进Bax基因的表达上调，纯氧复苏可使凋亡抑制基因Bcl-2表达上调，提示高浓度氧对窒息复苏后心肌有一定的保护作用     

生长抑素及Octreotide对急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的作用机制

目的：探讨生长抑素（ＳＳ）及其类似物（Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）治疗小鼠急性胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｂａｘ，ｐ５３的作用。方法：以雨蛙肽诱导ＣＤ－１小鼠急性胰腺炎模型，并应用细胞凋亡原位标记检测（ＴＵＮＥＬ）染色，免疫组化技术等检测胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｂａｘ，ｐ５３的蛋白表达，以及生长抑素及其类似物治疗后对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｂａｘ和ｐ５３蛋白表达的影响。结果：ＨＥ染色见胰腺组织中典型的     

缺氧诱导离体心肌细胞凋亡的动物实验研究

目的：建立一种新的SD乳鼠心肌细胞的缺氧模型,以探讨心肌细胞缺氧损伤后的细胞凋亡及其时序分布特点。方法：SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为5组：对照组,缺氧12h组(112h)、缺氧24h组(14h),缺氧48h组(148h)以及缺氧72h组(172h)。应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜等多种手段检测心肌细胞凋亡的改变。结果：在本实验的心肌细胞缺氧模型中,流式细胞仪检测发现,心肌细胞缺氧后的细胞凋亡百分率迅速增高。琼脂糖凝胶电泳分析。心肌细胞在缺氧48h、72h时均出现了凋亡特异性的“梯状”电泳带。结论：本实验培养乳鼠心肌细胞缺氧模型可导致心肌细胞凋亡,凋亡程度和心肌细胞缺氧时间有关,并可导致和在体心肌缺血相似的心肌损伤。细胞凋亡在心肌缺氧心肌细胞死亡中起重要作用。     

免疫介导再生障碍性贫血小鼠血清诱导骨髓造血细胞凋亡及？…

目的：探讨再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓造血细胞损伤的机制。方法：以重组的人ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３作为造血细胞存活因子，实验组以再障小鼠血清加入正常小鼠骨髓细胞培养体系，同时设立正常小鼠血清培养组和无小鼠血清培养组两个平行对照组。结果：实验从超微结构、流式细胞仪及ＤＮＡ裂解分析三方面证实再障小鼠血清诱导骨髓细胞发生凋亡。在一定浓度范围内，随再障小鼠血清浓度的增高，其诱导ＤＮＡ裂解百分率逐渐增高。再     

苦参碱诱导多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡的实验研究

本研究探讨苦参碱对人骨髓瘤细胞株RPMI8226的作用及其机制。用不同浓度苦参碱处理RPMI8226细胞24、48小时,通过形态学观察、Annexin-V分析、DNA琼脂糖电泳、线粒体膜电位检测观察苦参碱对RPMI8226细胞的促凋亡作用。结果表明：RPMI8226细胞经苦参碱处理后,出现典型的细胞凋亡形态,凋亡早期细胞膜外翻,DNA琼脂糖电泳出现典型的梯状结构,线粒体膜电位崩塌。结论：苦参碱能有效地诱导骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞凋亡,凋亡率与药物剂量和作用时间呈依赖性。     

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对HL-60细胞的促凋亡作用

为了研究基因重组荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导HL-60细胞凋亡的作用并探讨其抗癌作用机理,用不同浓度的重组荞麦胰蛋白酶抑制剂体外作用于HL-60细胞,采用MTT比色法检测其对HL-60细胞的抑制率,应用光学显微镜观察细胞核的形态学变化,用DNA凝胶电泳法检测HL-60细胞的凋亡,用流式细胞术检测该抑制剂作用于HL-60细胞后引起的凋亡现象。结果表明：重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对HL-60细胞的生长具有明显的抑制作用,且随着蛋白质浓度的增加对HL-60细胞生长抑制愈加明显,而对正常人外周血单个核细胞（PBMNC）无作用;荧光显微镜下观察发现经该蛋白作用后HL-60细胞核的形态呈现凋亡特征;流式细胞术分析表明,HL-60细胞经100μg/ml重组荞麦胰蛋白酶抑制剂作用后,凋亡率达到52％;琼脂糖凝胶电泳显示细胞DNA呈梯状降解。结论：重组荞麦胰蛋白酶抑制剂在体外能够明显抑制HL-60细胞的增长,并诱导细胞凋亡,这为重组荞麦胰蛋白酶抑制剂应用于急性髓细胞性白血病的治疗提供依据,也为重组基因工程植物蛋白药物的临床应用提供新思路。     

脂肪酸合酶抑制剂——浅蓝菌素阻遏K562细胞增殖及诱导凋亡 …

目的 探讨脂肪酸合酶抑制剂－浅蓝菌素对５６２白血病细胞增殖的影响及机制,并观察浅蓝菌素对人皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法 应用ＭＴＴ法观察浅蓝菌素对Ｋ５６２白血病细胞、人皮肤成纤维细胞增殖的抑制率;应用流式细胞术,ＤＮＡ凝胶电泳进行凋亡的检测和观察。     

肢体缺血再灌注后肝损伤中细胞凋亡的发生及牛磺酸的保护效应

目的 观察大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肝损伤和肝脏细胞凋亡情况及其发生机制,并探讨牛磺酸的保护效应.方法 实验采用Wistar大鼠30只,建立大鼠LIR损伤模型,随机分为对照组、缺血再灌注(IR)组和牛磺酸+缺血再灌注(TR)组,每组10只.分别测定各组大鼠肝组织丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)及Ca2+含量的改变;利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状条带,利用TUNEL法检测各组肝脏细胞的凋亡情况.HE染色观察肝脏形态学变化.结果 与对照组比较,IR组大鼠肝组织MDA、XOD、MPO、Ca2+含量均明显升高(P均<0.01),肝脏细胞DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带;TUNEL染色结果 显示凋亡百分率明显升高(P<0.01).与IR组相比,TR组血浆和肝组织中MDA、XOD、Ca2+含量和MPO反均有所下降(P<0.01或<0.05),肝脏细胞DNA琼脂糖凝胶电泳显示梯状条带不明显;凋亡百分率降低(P<0.01).结论 细胞凋亡参与了大鼠LIR后肝损伤的发生,而牛磺酸可减轻大鼠UR所致肝脏损伤及细胞凋亡的发生.     

D-柠檬烯对K562细胞增殖及凋亡的影响

本研究探讨D-柠檬烯对K562白血病细胞增殖的影响及机制。应用MTT试验观察不同浓度D-柠檬烯作用后K562细胞增殖的改变；应用细胞形态学检查、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果表明：在0．125-1．0mmol／L浓度范围内，D-柠檬烯对K562细胞增殖的抑制作用呈现剂量依赖的关系。典型的细胞形态学改变、DNA琼脂糖凝胶电泳梯形条带及流式细胞仪检测出亚G1峰共同证实了D-柠檬烯能诱导K562白血病细胞凋亡。结论：D-柠檬烯抑制K562细胞的增殖并呈剂量依赖的方式，使细胞滞留于G1期，诱导其凋亡。     

8-氯腺苷酸诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的实验研究

本研究探究8-氯腺苷酸对多发性骨髓瘤细胞的可能作用。以多发性骨髓瘤细胞株RPMl8226细胞为体外模型,在观察8-氯腺苷酸对细胞生长、活力及形态学影响的基础上,应用流式细胞术检测细胞DNA含量分布和细胞表面Annexin—V的含量,以DNA凝胶电泳技术评判细胞凋亡与否,并应用Westernblot检测药物处理前后细胞内细胞周期调控蛋白cylinE和CDK2的变化。结果表明：低浓度8-氯腺苷酸（1—30μmol／L）能够明显地抑制RPMl8226细胞的生长,显著降低其细胞活力,且呈时间和浓度依赖性。进一步细胞形态学观察、流式细胞术及DNA凝胶电泳分析显示,这些浓度的8-氯腺苷酸诱导RPMl8226细胞凋亡。Western blot检测表明,8-氯腺苷酸可通过影响细胞周期调控蛋白cylin E和CDK2的表达而干扰细胞增殖。结论：8-氯腺苷酸能够有效地抑制多发性骨髓瘤细胞生长并诱导其凋亡。     

As2O3对乳腺癌细胞系MDA—MB-435s作用的研究

目的：探讨不同浓度三氧化二砷（As2O3）对人乳腺癌细胞系MDA—MB-435s的生长抑制作用及其机理。方法：不同浓度As2O3作用于体外培养细胞MDA—MB-435s，采用MTT法检测细胞生长，倒置显微镜观察细胞形态，并通过DNA梯状电泳和TUNEL检测凋亡。结果：As2O3剂量依赖性抑制细胞生长；观察到典型的细胞凋亡形态学特征性改变；琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡DNA梯状条带；As2O3作用组的凋亡指数明显高于阴性对照组（P〈0．05）。结论：As2O3具有抑制乳腺癌MDA—MB-435s细胞生长的作用，其机理与诱导细胞凋亡有关。     

孤啡肽诱导白血病细胞K562凋亡

本研究探讨孤啡肽对白血病细胞K562增殖的影响及诱导凋亡的作用，采用MTT（四唑氮蓝）法检测不同浓度的孤啡肽对K562细胞生长的影响，应用瑞氏染色、电子显微镜观察药物作用后K562细胞形态的改变，流式细胞术检测孤啡肽对K562细胞细胞凋亡作用，DNA琼脂糖凝胶电泳观察孤啡肽作用后K562细胞内DNA的损伤程度。结果表明：10^-6～-10^-13mol／L孤啡肽明显抑制K562细胞的生长，且存在时间依赖性，而剂量依赖性不明显；10^-6-10^-7、10^-9、10^-12mol／L孤啡肽作用72小时后显示明显的细胞毒作用。与对照组相比，10^-9mol／L孤啡肽作用72小时后K562细胞出现典型凋亡特征；流式细胞术检测发现：0、10^-7、10^-8、10^-9mol／L孤啡肽作用72小时后出现凋亡峰，凋亡率分别为0％、22．8％、23．8％、26．5％；DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯状条带。结论：孤啡肽能够抑制K562细胞增殖，诱导其凋亡。