CFTR在超排卵幼龄大鼠卵巢的分布与表达

目的探讨囊性纤维化跨膜转导调节器(CFTR)在超排卵幼龄大鼠各期卵泡和黄体中表达的变化及其意义。方法采用免疫组化和免疫印迹方法检测超排卵幼龄Wistar大鼠注射HCG前,注射HCG后24h、48h及72h卵巢中CFTR的蛋白分布与含量变化。结果CFTR在超排卵幼龄Wistar大鼠的各级卵泡颗粒细胞、黄体细胞均有表达,随着黄体期延长其表达量逐渐下降,各时段卵巢表达量比较有显著性差异。免疫印记法证实各时段卵巢中均存在特异性的、相对分子质量为170KD的CFTR条带。结论卵泡期CFTR表达可能促进卵泡中卵泡液的积聚,卵泡直径增大,利于卵泡成熟;而黄体期CFTR表达下降则可能利于黄体形成,CFTR过多表达可能导致卵泡囊肿和黄体囊肿。     

囊性纤维化跨膜转导调节器在卵巢过度刺激综合征模型大鼠卵巢中表达的变化

目的建立大鼠卵巢过度刺激综合征(OHSS)模型,研究囊性纤维化跨膜转导调节器(CFTR)在OHSS大鼠卵巢中表达的变化及意义。方法未成年Wistar雌鼠,随机分为过度刺激组和常规刺激组,建立OHSS模型;比较两组间卵巢重量,血雌二醇水平;并分别通过免疫组织化学和免疫印迹法比较两组间卵巢组织中CFTR蛋白表达量的变化。结果过度刺激组大鼠卵巢重量、血雌二醇水平显著高于常规刺激组;免疫组化方法检测到CFTR呈棕黄色颗粒表达于大鼠卵巢黄体细胞以及未排卵泡的黄素化颗粒细胞和卵泡膜细胞胞质,免疫组化和免疫印迹定量分析均显示过度刺激组卵巢CFTR蛋白表达量显著高于常规刺激组。结论注射过量促性腺激素致大鼠血雌二醇水平异常升高,使卵巢内CFTR表达量显著增加,卵巢形成多发性滤泡囊肿和黄体囊肿,间质水肿,体积和重量增加,参与诱发OHSS。     

核受体NR4A1蛋白在大鼠卵泡发育中的定位及其表达规律

目的：通过研究核受体NR4A1蛋白在正常雌性SD大鼠不同卵巢功能周期和不同发育阶段卵泡及黄体细胞中的表达，推测其在卵泡发育中的生物学作用。方法：利用阴道涂片的方法，按不同的卵巢功能周期将实验大鼠24只分为四组，采集不同时期卵巢标本，采用免疫组织化学方法观察卵巢中NR4A1蛋白的定位及其表达情况。结果：NR4A1蛋白主要表达于卵巢卵泡膜细胞和黄体细胞胞质中，且在成熟卵泡卵泡膜细胞的表达量显著高于生长卵泡（P〈0．01）；在新鲜黄体细胞中表达量最高，显著高于动情前期和动情期的生长卵泡和成熟卵泡以及陈旧黄体细胞中的表达水平（P〈0．01）。结论：核受体NR4A1蛋白表达与卵泡的发育、成熟、闭锁、黄体萎缩有明显的相关性。     

RLF mRNA在不同阶段大鼠卵巢中的表达

目的 探讨松弛素样因子(RLF)在啮齿类动物的正常卵巢中有无表达以及与卵巢功能的关系，对RLF在大鼠卵巢动情周期、假孕模型中的表达进行研究。方法 采用RT-PCR方法。结果 在成年大鼠整个动情周期中都有RLF的表达，RLF的表达强度在动情前期、动情期卵巢较强，动情间期和动情后期卵巢较弱；未成年大鼠，激素处理使卵泡发育至窦前期、排卵前期时，RLF呈现持续的强表达，在黄体早期RLF的表达明显升高，而黄体中期、黄体晚期中RLF表达下降。结论 RLF与卵泡发育、排卵、黄体形成和退化密切相关。     

Increased Oocyte Production after Acupuncture Treatment during Superovulation Process in Mice

Objective To investigate whether acupuncture treatment during superovulation process improves ovarian response and increases egg production. Methods ICR female mice aged 12 -5 weeks were divided into control group, anaesthesia group and acupuncture group. Female mice were injected intraperitoneally with pregnant mare＇s serum gonadotropin （PMSG）, followed by human chorionic gonadotropin （hCG） injection 56 h later. Anaesthesia group and acupuncture group were anaesthetized three times by injecting 10% nembutal solution according to 7.5-10.0μl/g weight. Acupuncture group was treated three times with puncture Sanyinjiao Points（SP6） under anaesthesia. After 17 h of hCG injection, eggs were recovered and ovaries were isolated. Matured eggs were counted, ovarian histology and expression of follicle stimulating hormone receptor（FSH-R） in ovary were analyzed. Results Acupuncture treatment statistically increased the number of ovulated eggs. Histological section showed that some matured follicles left in the ovaries of control and anaesthesia groups after ovulation. On the contrary, all matured follicles ruptured and converted into corpus lutea in Acupuncture group. Expression of FSH-R in ovary was decreased in acupuncture group compared with those of the two others. Conclusion Acupuncture treatment during superovulation process improves ovarian response so as to increase egg production. The positive effect of acupuncture may be associated with regulated FSH-R expression.     

血管生成素1在小鼠卵巢组织中的表达及其意义

目的：观察血管生成素1(Ang-1)在小鼠卵巢组织中的表达,探讨其对小鼠卵泡发育、排卵以及黄体形成与退化的影响。方法：建立小鼠性成熟模型、马绒毛膜促性腺激素(eCG)诱导的卵泡发育模型、人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导的排卵模型以及黄体形成和退化模型,RT-PCR法检测不同时间Ang-1在不同模型的小鼠卵巢组织中的表达。结果：Ang-1 mRNA在小鼠出生后第10和20天表达较低;在出生后第25天,Ang-1 mRNA的表达量升高,与第10天比较差异有统计学意义(P<0.01);之后Ang-1表达逐渐降低。在注射eCG后,Ang-1 mRNA的表达量均高于0 h组,在48 h表达量达到最高值(P<0.01)。注射hCG后3、5和9 h,Ang-1 mRNA表达量降低;而在hCG注射后0.5和7.0 h,Ang-1的表达量较高;各组与0.5 h组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Ang-1 mRNA在hCG注射后1~15 d均有表达,且在注射后5~15 d,Ang-1的表达逐渐升高,与1 d组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在注射hCG后第15天,Ang-1的表达水平最高。结论：Ang-1可能参与了小鼠卵泡发育、排卵和黄
体形成与退化的过程。     

小鼠卵巢巨噬细胞的免疫组化研究

目的：探讨卵巢内巨噬细胞在卵巢微细结构中的分布特征。方法：用抗巨噬细胞表面的F4/80抗原的单克隆抗体对小鼠卵巢组织中巨噬细胞进行免疫组化染色后观察。结果：巨噬细胞主要分布在卵巢的卵泡膜层、卵巢皮质和髓质的间质、闭镇卵泡和黄体组织中。排卵前卵巢表面包膜层出现大量的巨噬细胞，而妊娠期黄体中巨噬细胞骤减。结论：巨噬细胞可能在不同的卵巢结构中对卵巢的生殖内分泌起不同的调节作用。     

大鼠黄体萎缩时期细胞超微结构的研究

本实验以ＰＭＳＧ和ｈＣＧ处理后黄体萎缩时期大鼠为实验材料研究黄体萎缩与细胞凋亡关系。经电镜细胞超微结构分析发现黄体组织萎缩时大量黄体细胞发生调亡，其染色质浓缩，边集，被膜包裹形成表面光滑有的凋亡小体，而这一过程中细胞器却基本完整，这些凋亡小体的所吞噬。以上均上显示出细胞凋亡所具有的形态学特征，从而有力地证明了细胞凋亡参与了黄体组织萎缩，为深入了解黄体退化机制提供了依据。     

未破裂型宫外孕与妊娠小黄体囊肿经阴道的超声鉴别

目的对未破裂型宫外孕与妊娠小黄体囊肿经阴道的超声进行对比研究,以提高官外孕的早期检出率。方法对80例未破裂型宫外孕（孕囊型）和105例妊娠小黄体囊肿超声图像进行回顾性分析。结果69．5％（73／105）黄体囊肿周围有卵泡回声,而无一例宫外孕孕囊周围有小卵泡回声（P〈0．01）;73．8％（59／80）宫外孕孕囊囊壁回声高于内膜回声,而仅有5．7％（6／105）黄体囊肿高于内膜回声（P〈O．01）;76．2％（61例）宫外孕孕囊囊壁回声比卵巢实质回声高,而90．5％（95例）黄体囊肿囊壁回声等于或低于卵巢实质回声（P〈0．01）.结论通过对未破裂型宫外孕及妊娠小黄体囊肿的经阴道超声,比较两者与卵巢的关系、与子宫内膜回声的对比,可以鉴别未破裂型官外孕与妊娠小黄体囊肿,未破裂型官外孕位于卵巢外,囊壁回声大多高于内膜及卵巢实质。     

Cyclin G1在小鼠卵巢的表达及其与卵泡发育的关系

目的观察细胞周期素G1（Cyclin G1）在小鼠卵巢中各级卵泡的表达及其与卵泡发育的关系。方法性成熟前小鼠用孕马血清促性腺激素（PMSG）刺激卵泡生长,用绒毛膜促性腺激素（hCG）刺激卵泡排卵及向黄体转化。于给药后不同时间取出卵巢,用免疫组化方法检测不同发育阶段卵泡Cyclin G1蛋白的表达和分布;用细胞免疫荧光方法检测不同成熟阶段的卵细胞中Cyclin G1蛋白表达。结果免疫组化染色结果显示,颗粒细胞中Cyclin G1的表达水平随卵泡发育成熟而逐渐增强,且一直定位在胞核;Cyclin G1在各个时期卵泡的卵母细胞中均有表达。该表达的定位与卵泡生长发育的不同阶段有关。随着卵泡的发育,Cyclin G1在卵母细胞的表达由胞核转至胞浆。至排卵前卵泡颗粒细胞,Cyclin G1表达水平减弱,当颗粒细胞分化为黄体细胞后表达水平进一步减弱。闭锁卵泡中Cyclin G1的表达水平很弱。细胞免疫荧光染色结果显示,处于生发泡时期（GV）卵母细胞仅有较弱的Cyclin G1表达,当卵母细胞生发泡破裂（GVBD）后,该表达增强;与处于第二次减数分裂中期（MⅡ）的卵母细胞相比,受精卵的Cyclin G1表达明显增强。结论Cyclin G1在小鼠卵泡发育及卵母细胞成熟过程中的表达具有时空特异性,可能作为细胞周期的正调节因子参与了卵泡生长发育和卵母细胞成熟过程的调控。     

前列腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移 的影响

目的探究前列腺素E2（PGE2）对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子（VEGF）的调控作用以及对人脐静 脉内皮细胞（HUVEC）趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑 制剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑制剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑制 剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水 平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法, 观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。结果随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增高,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）;0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液 可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加（P<0.05）;HUVECs的迁移运动也 随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高（P<0.05）;研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮 抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著抑制PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应（P<0.05）。结论PGE2可以通过作用NR8383细胞表面对应的EP2/EP4受体 调控VEGF的合成,促进HUVEC趋化和成管效应。     

RNA干扰OPN对人卵巢癌细胞HO-8910PM体外增殖的影响

目的观察骨桥蛋白(OPN)基因沉默对卵巢癌细胞系HO-8910PM细胞的影响,为探索卵巢癌基因治疗提供理论依据。方法以脂质体法将已构建的骨桥蛋白特异性小干扰RNA真核表达载体(pSilencer3.1/OPN-shRNA)转染卵巢癌细胞HO-8910PM,48h后用Western blotting技术检测重组质粒组、空质粒组和空白对照组中卵巢癌细胞内骨桥蛋白的表达情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法连续5天测定转染后细胞的增殖情况并绘制曲线图。结果 pSilencer3.1/OPN-shRNA转染卵巢癌细胞株HO-8910PM后48h骨桥蛋白表达下降,差异有统计学意义(同空质粒组、空白对照组相比P<0.05);空质粒组与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。重组质粒组同空质粒组、空白对照组比较其增殖于第1天差异无统计学意义(P>0.05),第2～5天差异有统计学意义(P<0.05);空质粒组与空白对照组比较,第1～5天其增殖差异均无统计学意义(P>0.05)。结论构建的骨桥蛋白特异性小干扰RNA真核表达载体可以抑制卵巢癌细胞HO-8910PM中骨桥蛋白的表达。骨桥蛋白可能与卵巢癌细胞HO-8910P...     

调经汤治疗卵巢早衰的药效学研究

目的:观察调经汤对卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响。方法:将60只雌性成熟未交配Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、阳性药物(雌二醇)对照组、调经汤高、中、低剂量组,腹腔注射顺铂溶液制作大鼠卵巢早衰动物模型,观察大鼠动情周期、血清性激素FSH、E2和LH的变化及卵巢组织的病理改变。结果: 模型组和阳性药物对照组大鼠无稳定的动情周期,调经汤高、中剂量组逐渐恢复规律的动情周期。模型组血清E2水平含量降低,血清FSH和LH含量均升高,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,调经汤高中低剂量组血清FSH水平含量明显降低、E2含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);血清LH含量水平降低,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠卵巢萎缩,卵泡生长少,闭锁卵泡增加,部分被纤维组织代替,黄体数量少,子宫内膜明显变薄。调经汤高、中、低剂量组能不同程度的增多卵泡数量和黄体数目,子宫内膜也有所增厚。结论:调经汤能有效改善顺铂诱导的模型大鼠卵巢功能。     

温肾养血方对无排卵模型大鼠卵巢质量和形态的影响

目的 探讨温肾养血方对无排卵大鼠子宫指数、卵巢指数及卵巢组织形态的影响.方法 采用丙酸睾酮皮下注射法复制无排卵大鼠模型.将模型大鼠分为模型组,西药组,温肾养血方大、中、小剂量组,分别给予生理盐水,枸橼酸氯米芬,温肾养血方大剂量(52 mg/kg)、中剂量(26 mg/kg)、小剂量(13mg/kg)灌胃.另选22日龄大鼠作为正常组.连续灌胃21 d后,测定各组大鼠体质量、子宫指数和卵巢指数,光镜下观察卵巢组织形态.结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量无明显变化(P＞0.05),子宫指数和卵巢指数显著降低(P＜0.05).与模型组比较,各给药组大鼠体质量和子宫指数、卵巢指数无明显变化(P＞0.05).温肾养血方大、中剂量组卵巢形态近似正常组,结构明显改善,多数卵巢可见发育期的各级卵泡,可见卵丘、卵细胞及典型黄体形成.西药组和温肾养血方小剂量组卵巢形态类似模型组,卵巢体积较小,卵巢表面苍白,无斑点,色泽苍白,卵泡数目少,卵泡较小,且形状不规则,多呈囊性扩张,无黄体.结论 温肾养血方能改善卵巢结构和促进卵泡发育.     

组织缺氧在黄体形成过程中的作用

黄体是雌性动物生殖周期中形成和退化的一种暂时性的内分泌组织,由排卵后残留的卵泡组织发育而来,这一过程与血管的快速增生密切相关。血管内皮生长因子(VEGF)是调节血管增生过程的最重要的刺激因子,在新生黄体形成中同样具有重要调节作用。VEGF受缺氧诱导因子(HIF)-1α亚单元和β亚单元组成的异二聚体转录因子HIF-1调控。由于卵巢卵泡的破裂排卵以及新生血管网的缺乏,导致卵巢局部处于缺氧状态,诱导了HIF-1α表达的增加,并通过VEGF依赖性血管增生参与新生黄体的形成过程。本文主要从排卵前与排卵后卵巢局部缺氧情况阐述黄体形成过程中卵巢功能与组织结构的变化情况,旨在进一步理解缺氧在黄体形成与卵巢生理调节中的重要作用。     

睾酮联合hCG诱导大鼠多囊卵巢综合征模型的实验研究

目的：研究皮下注射睾酮及人绒毛膜促性腺激素（hCG）是否可制造出理想的多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）大鼠模型。方法：对青春期前大鼠持续皮下注射睾酮及hCG,观察发情周期、体重、睾酮及卵巢组织病理学变化。结果：5周、11周后PCOSI组、II组大鼠血清睾酮升高（P〈0.01）;卵巢呈典型多囊样改变;阴道开口日龄提前（P〈0.01）;发情周期紊乱;体重增加（P〈0.01）。13周后PCOSI组血清睾酮回落至正常水平（P〉0.05）,同时伴有囊性卵泡数量的减少,并出现黄体。结论：对青春期前大鼠持续皮下注射睾酮及hCG可成功诱导出PCOS动物模型,其具有血清性激素改变及卵巢多囊样变等特点,适用于观察具有短期疗效的药物。     

黄体酮促进培养乳腺癌细胞的增殖和迁移

目的研究黄体酮对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法100nM黄体酮刺激黄体酮受体阳性的乳腺癌细胞株T-47D和MCF-748小时后,用MTT方法检测细胞增殖,用细胞划痕愈合实验检测细胞迁移,用Western blotting检测细胞内E-Cadherin的表达。结果黄体酮刺激MCF-7和T-47D细胞的增殖和迁移;并且可以下调MCF-7和T-47DE-Cadherin的表达。结论黄体酮能够促进培养乳腺癌细胞的增殖和迁移,提示抗黄体酮治疗可能有临床意义。     

GnRH-a和HCG在诱发排卵中的作用比较研究

目的比较促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropic releasing hormone agonist,GnRH-a）和人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrophin,HCG）在不孕症患者诱发排卵治疗中模拟黄体生成素（luteinizing hormone,LH）峰的作用。方法在广西人口和计划生育研究中心就医的66例排卵障碍行促排卵治疗的患者,选取80个在优势卵泡成熟时未能出现预期LH峰的促排卵周期,随机分为两组,一组注射HCG6000~10000IU,共40个周期,另一组注射GnRH-a（醋酸曲谱瑞林）0.1mg,共40个周期,以模拟LH峰诱发排卵。比较注射GnRH-a和HCG两组患者间的排卵率、妊娠率、未破卵泡黄素化、黄体不足、卵巢过度刺激综合征（ovarian hyper stimulation syndrome,OHSS）、多胎妊娠和下周期囊肿发生率等指标。结果两组患者的排卵率、妊娠率、未破卵泡黄素化、黄体不足发生率、多胎发生率、差异均无统计学意义,但注射GnRH-a组的OHSS发生率、下周期囊肿发生率显著低于注射HCG组。结论在诱发排卵模拟LH峰时,使用GnRH-a比HCG更接近自然周期。     

Effects of Progestin and Antiprogestin on the Expression of FSH Receptor and LH Receptor mRNA in Porcine Granulosa and Thecal Cells

We havereported thattheprogestin and antiprogestin both inhibited secretion ofsteroid by porcine granulosa and thecal cells cultured in a dual chambersystem.Theprevious results suggested that this inhibition seemed to be via reduction of go-nadotropin stimulation[1 ,2 ] . The anterior pituitary cell types are responsible for thesynthesis and secretion of LH and FSH known as gonadotropes. LH and FSH exerttheir effects through activation of gonadotropin receptors present on the plasmamembran…