视网膜色素变性中视紫红质与Peripherin／RDS基因的突变筛查

目的:迄今尚未见在国人中经序列分析确定该基因突变的报道。了解国人遗传性视网膜色素变性人群中视紫红质和peripherin/RDS基因的突变情况。方法:对83例遗传性视网膜色素变性先证者视紫红质基因全部编码区和peripherin/RDS部分编码区进行PCR扩增,用异源双链-SSCP法对扩增产物进行分析,寻找有差异电泳带纹的突变样本,序列分析确定突变。结果:83例中3例有视紫红质基因突变(Va1104Phe、Lys311Glu、Pro347Leu),其中两个新突变分别见于散发病例(Va1104Phe,杂合性)和常染色体隐性遗传视网膜色素变性家系(Lys311Glu,纯合性)。在peripherin/RDS基因中未发现突变。结论:在国人视网膜色素变性患者中视紫红质基因突变为常见致病原因。眼科学报1998;14:210～214     

X-连锁和双基因型视网膜色素变性的相关基因研究进展

视网膜色素变性（retinitis pigmentosa,RP)是一组进行性、可致盲的单基因遗传性视网膜疾病，以视网膜光感受器和色素上皮功能进行性受损为主要特征。X－连锁RP和双基因型RP是视网膜色素变性的不同类型，在遗传和临床上各具特点。目前，X－连锁RP已定位6个致病基因，并克隆了2个基因（RP2和RP3）；双基因型RP是由2种不同基因（peripherin/RDS和ROM1基因）的杂合子突变导致的。     

常染色体显性遗传视网膜色素变性患者视紫红质基因和视网膜变性慢基因突变检测分析

视网膜色素变性(RP)是一组常见的视网膜感光细胞和色素上皮细胞变性导致夜盲和进行性视野缺损的遗传性眼底病,其发病机制尚未完全明确.RP具有高度的遗传异质性,其遗传方式非常复杂,分为常染色体显性遗传(ADRP)、常染色体隐性遗传(ARRP)、X-连锁遗传(XLRP)和双基因型遗传(Digenic RP),最近报道还有线粒体遗传方式(mitochondrial RP)[1].视紫红质基因(RHO)是最早被识别的RP基因,在ADRP中发病率占30%～40%[2],而盘膜周边蛋白/视网膜变性慢基因(peripherin/RDS)在ADRP中占5%[3].我们对13个ADRP家系进行了RHO和视网膜变性慢基因(RDS)检测分析,观察其突变特征,现将其结果报道如下.     

中国人视网膜色素变性1基因突变频率及其与视网膜色素变性的关联分析

目的 研究常染色体显性遗传视网膜色素变性(ADRP)患者和散发视网膜色素变性（RP）患者RP1基因突变频率及特征，并探讨它们在RP发病机制中潜在的作用。 方法 运用聚合酶链反应和直接测序方法，对7个ADRP家系的55例成员、散发RP患者30例及75名健康成年人进行了RP1基因全编码区和邻近剪切位点的内含子区域序列突变的检测。运用单因素分析、多因素Logistic回归分析研究RP1基因突变位点对RP的作用。 结果 ADRP家系成员和散发的RP患者在RP1基因的第四外显子上均检测出852、872、921和939共4个变异位点。在ADRP家系和散发的RP患者中RP1基因的R872H位点改变与RP之间存在显著相关性(χ²=4.469，P=0.03)。P903L位点的改变仅在家系成员中检出，散发病例及正常人中均未检测出。 结论 RP1基因R872H位点多态性可增高RP的危险性，具有潜在的致病性，考虑为家系和散发RP患者的易感基因。P903L位点改变是否为致病基因有待于进一步证实。     

常染色体显性遗传RP患者视紫红质基因突变的检测分析

目的研究常染色体显性遗传视网膜色素变性（ADRP）患者视紫红质（RHO）基因的突变特征及其在视网膜色素变性（RP）发病机制中的作用。方法应用变性高效液相色谱分析（DHPLC）技术和直接及克隆测序方法对RHO基因进行突变检测。结果一家系4例ADRP患者RHO基因的第297密码子存在杂合的两种类型密码子（AGC和AGT）。该家系的另3名患者未检测到该突变，对照组发现1例此类型沉默型突变。该家系在第3外显子3’端下游第4个碱基处发生C—T转换，其11个成员中该位点呈T纯合子1例，呈杂合子状态8例。对照组发现2例该位点的杂合子状态。结论视紫红质基因Ser-297-Ser突变与RP疾病未出现“共分离”现象，因此该沉默型突变不是该ADRP家系的致病原因，系RHO基因的多态现象。     

一白族视网膜色素变性家系致病基因筛查

目的探讨一白族常染色体显性遗传视网膜色素变性（adRP）家系致病基因与PRPF31、IMPDH、RDS基因多发突变位点的关系。方法采集一连续5代发病的白族adRP家系静脉血3～5mL，提取基因组DNA。应用聚合酶链反应（PCR）对常见的3个adRP候选基因（PRPF31、IMPDH1、RDS）的多发突变位点进行扩增，PCR产物纯化后直接测序；测序结果与GenBank数据库中核酸序列进行Blast分析。结果该白族家系22例成员中，11例（50％）存在PRPF31基因第6内含子4个碱基的缺失（IVS6—78_IVS6—75del4CACA，rs57960425），其中包括7例（53．8％）adRP患者和4例（44．4％）正常个体；11例（50％）存在IVS6—31C／T（rs2303557）变异，包括8例（61．5％）adRP患者和3例（33．3％）正常个体。IMPDH1基因和RDS基因的多发突变位点在该白族家系中未发现任何变异。结论rs57960425及rs2303557为PRPF31基因中的单核苷酸多态，与该家系的发病无直接相关，该家系的致病基因可能与其他基因有关。     

常染色体隐性遗传视网膜色素变性CNGA1基因突变检测

目的检测常染色体隐性遗传视网膜色素变性患者杆体α—cGMP门离子通道基因（α—cGMP—gated cation channel，CNGA1）基因突变。设计对照性实验研究。研究对象35名常染色体隐性遗传视网膜色素变性（autosomal recessive retinitis pigmentosa，ARRP）家系的先证者和55名散发病例。随机收集100名正常人作为对照。方法采集患者外周血，应用DNA分离试剂盒提取DNA，应用11对CNGA1基因引物进行聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR），扩增CNGA1基因的全部编码区及内含子外显子的拼接区。利用单链构象多态性（single strand conformation polymorphism，SSCP）技术，将PCR产物进行10％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，用硝酸银染色，观察有无变异带。如果发现变异带，再将该PCR产物进行DNA测序。主要指标通过PCR，SSCP和DNA测序技术，发现CNGA1基因突变。结果未发现CNGA1基因突变。结论CNGA1基因突变在国人RP患者中的致病情况有待进一步研究。     

视网膜色素变性一家系与IMPDH1基因突变相关

目的检测一个常染色体显性遗传性视网膜色素变性家系的IMPDHl基因的突变特征以及与临床表型的关系，探讨其病因和发病机制，利用分子遗传学的方法，确定家系内遗传连锁关系。方法严格按照有关伦理学要求进行家系收集，所有现存家系成员行详细的眼科检查（包括视力检查、裂隙灯和眼底镜检查、视野、暗适应阈值以及ERG检查）。提取该家系lO例患者、lO例未患病成员外周血基因组DNA：应用聚合酶链反应扩增IMPDHl第7外显子基因片段，利用扩增产物直接测序方法对样本进行IMPDHl基因突变检测。结果该家系中lO例患者的IMPDHl基因发生了Asp-226-Asn（GAC→AAC）的错义突变，lO例家系未患病成员则没有此突变。结论IMPDHl基因的一种已知突变Asp-226-Asn与该家系所发生的视网膜色素变性存在紧密连锁关系。     

视网膜色素变性患者的相关致病基因PDE6B突变及其临床表型分析

目的：了解磷酸二酯酶β亚单位（phosphodiesterase β subunit,PDE6B）基因突变在我国视网膜色素变性（retinitis pigmentosa,RP）患者中的突变形式及其临床表型特征。方法：应用聚合酶链反应-异源双链-单链构像多态性及DNA序列分析技术,对收集的35个常染色体隐性家系和55例散发RP患者进行PDE6B基因的22个外显子和5′-端非编码区（5′-UTR）全基因扫描,并行眼部检查及家系分析。结果：检测出1例散发性RP患者第6外显子第2492位点T→C碱基突变异致其编码氨基酸由甘氨酸变为丝氨酸,第10外显子5′-端上游（第9内含子内）第27与28碱基之间有2个碱基（TG）插入突变。以上两种突变在100例正常人中均未检测出。RP患者表现为视乳头萎缩、血管变细及色素散布。多焦视网膜电图检测提示视杆细胞受损较重。1例常染色体隐性家系患者PDE6B基因第11外显子5′-端上游第19位碱基（第10内含子内）发生G→A颠换。另2例散发RP患者分别发现第4外显子5′-端上游30与31碱基间2个碱基（GT）插入和第18外显子3′-端下游第15个碱基发生G→C转换。结论：PDE6B基因的复合杂合突变可能是我国散发性RP患者的致病基因,通常以视杆细胞受累较重,其眼部临床表现符合典型的RP患者特征,我国RP患者的PDE6B基因内含子变异呈多种形式。     

常染色体隐性遗传视网膜色素变性家系视紫红质基因突变的检测分析

目的 观察一个近亲婚配常染色体隐性遗传视网膜色素变性（ARRP）家系中视紫红质基因（RHO）的突变特征，并探讨其视网膜色素变性(RP)发病机制。 方法 抽取8例该ARRP家系成员及10例正常对照者的外周静脉血5~8 ml；提取基因组DNA；采用聚合酶链反应（PCR）方法扩增RHO基因第1~5外显子和第1内含子基因 片段 ，用直接DNA测序法筛查RHO基因突变。 结果 来自同一家系3例患者RHO 基因的第5外显子第344密码子发生了A→G碱基的错义突变，导致了谷氨酰胺变成了精氨酸(G ln344Arg)，3例患者为该突变的纯合子。患者近亲婚配父母及1例未患病家庭成员为该突变 的杂合子。2例未患病家庭成员及10例正常对照者均未发现RHO基因突变。 结论 Gln344Arg突变可能是该ARRP家系的致病原因；在近亲婚配ARRP家系中RHO基因突变频率可能增加。 （中华眼底病杂志，2004，20：145-148）     

Variants of RP1 gene in Chinese patients with autosomal dominant retinitis pigmentosa

BACKGROUND: The objective of this study was to determine the frequency and characteristics of mutations in the RP1 gene and to characterize mutations with the clinical features in the Chinese family with autosomal dominant retinitis pigmentosa (ADRP). METHODS: Forty-three affected, unrelated Chinese individuals with ADRP were recruited between 2002 and 2006. Polymerase chain reaction and direct DNA sequencing were used to screen in the entire coding region and splice sites of the RP1 gene. Cosegregation analysis and population frequency studies were performed for patients with identified mutations. The clinical features were determined by complete ophthalmologic examinations. RESULTS: The mutation detectable rate of the RP1 gene in Chinese patients with ADRP was 1/43. A missense mutation, N985Y, was identified in exon 4 of the RP1 gene in 8 affected individuals from a Chinese family with ADRP. The ophthalmic findings with an N985Y mutation were similar to those of typical retinitis pigmentosa with delayed onset after age 40 years and slow progression. In addition, a total of 9 distinct variants were detected in our study population, most of which were RP1 gene polymorphisms; the pathological significance of P903L, a novel missense mutation, was unconfirmed. INTERPRETATION: Mutations in the RP1 gene are relatively rare in Chinese patients with ADRP. In our cases, N985Y mutation segregated with the phenotype from 1 Chinese family with mild and late-onset ADRP, a finding that has not been documented in other races.     

Novel 2336-2337delCT mutation in RP1 gene in a Japanese family with autosomal dominant retinitis pigmentosa

PURPOSE: To determine the frequency and kinds of mutations in the RP1 gene, and to characterize the clinical features of a Japanese family with autosomal dominant retinitis pigmentosa (ADRP) with a novel 2336 to 2337delCT mutation in the RP1 gene. DESIGN: Case reports and results of DNA analysis. METHODS: Mutational screening by direct sequencing was performed on 96 unrelated patients with ADRP. The clinical features were determined by complete ophthalmologic examinations. RESULTS: A novel 2336 to 2337delCT mutation in the RP1 gene was identified in two patients from a Japanese family with ADRP. In addition, three families with ADRP carried a previously reported nonpathogenic Arg1933X mutation. The ophthalmic findings with a 2336 to 2337delCT mutation were similar to those of typical retinitis pigmentosa with rapid progression after age 40 years. CONCLUSIONS: The most common Arg677X mutation in the white population was not found in the Japanese population; instead a novel mutation was found.     

视网膜色素变性1基因在常染色体显性遗传视网膜色素变性家系中的突变分析

目的:研究常染色体显性遗传视网膜色素变性(autosomal dominant retinitis pigmentosa,ADRP)家系中视网膜色素变性1(retinitis pigmentosa-1,RP1)基因的突变特征及其在RP发病机制中的作用。方法:运用聚合酶链反应和直接测序方法,对6个ADRP家系的47例成员和50例对照者进行了RP1基因全编码区和邻近剪切位点的内含子区域序列突变的筛选与检测。运用单因素分析、多因素Logistic回归分析研究RP1基因点突变在RP发病中的作用。结果:ADRP家系成员和对照组RP1基因第4外显子上检测出2个变异位点。在1691和1725密码子存在杂合的两种类型的密码子(S1691P,Ser-Pro,TCT→CCT;Q1725Q,Gln-Gln,CAA→CAG)。ADRP家系成员中Ser-1691-Pro及Gln-1725-Gln位点突变率显著高于正常对照组(χ2=11.202,P<0.05)。结论:RP1基因Ser-1691-Pro及Gln-1725-Gln位点多态性可增高RP的危险性,具有潜在的致病性,考虑为ADRP家系的易感基因。     

Mutation of human retinal fascin gene (FSCN2) causes autosomal dominant retinitis pigmentosa

PURPOSE: To characterize the clinical features of 14 Japanese patients with autosomal dominant retinitis pigmentosa (ADRP) who were found to have a mutation in the FSCN2 gene. METHODS: Mutation screening by single-strand conformation polymorphism (SSCP) was performed in 120 unrelated patients with ADRP, 200 unrelated patients with autosomal recessive retinitis pigmentosa (ARRP), and 100 patients with simplex RP (SRP). The DNA fragment that showed abnormal mobility on SSCP was sequenced. The clinical features of these patients were determined by visual acuity, slit lamp biomicroscopy, electroretinography, fluorescein angiography, and kinetic visual field testing. RESULTS: A novel 208delG mutation in the FSCN2 gene was identified in 14 patients from four unrelated families with ADRP. The ophthalmic findings were typical of RP. CONCLUSIONS: The findings show that a 208delG mutation in the FSCN2 gene produces ADRP. This mutation was found in 3.3% of the patients with ADRP in Japan, which suggests that it may be relatively common in Japanese patients with ADRP.     

视网膜色素变性与基因突变

视网膜色素变性 (RP)是常见的致盲性遗传疾病 ,目前已发现有数十个基因的 15 0多个突变位点与其有关。与常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传和性连锁遗传相对应的最常见的突变基因分别是视红紫质基因、杆体环鸟苷酸磷酸二脂酶基因和三磷酸鸟苷酸酶调节因子基因 ,其他的突变基因还有盘膜边缘蛋白基因 (常染色体显性遗传 )、杆体环鸟苷酸离子通道基因、RPE6 5基因、视黄醛结合蛋白基因和酪氨酸激酶受体基因 (常染色体隐性遗传 ) ,RP2基因(性连锁遗传 ) ,线粒体DNA细胞色素b基因等 ,每个突变基因对应于人群中不同的RP患者。基因治疗将成为治疗RP的根本方法 ,而对RP突变基因的定位、基因的生物学功能、突变所造成的分子病理机制的深入认识 ,是进行基因治疗的关键。     

The 208delG mutation in FSCN2 does not associate with retinal degeneration in Chinese individuals

PURPOSE: The 208delG (c.72delG, p.Thr25GlnfsX120) mutation in the FSCN2 gene was reported to cause autosomal dominant retinitis pigmentosa (ADRP) and autosomal dominant macular degeneration (ADMD). The purpose of this study was to detect the 208delG mutation in Chinese individuals, with or without hereditary retinal degeneration. METHODS: DNA fragments encompassing the 208delG mutation were amplified by polymerase chain reaction (PCR). The amplicons were analyzed by sequencing or/and heteroduplex- single-strand conformational polymorphism (SSCP) analysis. An ophthalmic evaluation was conducted in those individuals with the 208delG mutation. RESULTS: The 208delG mutation was detected in 8 of 242 unrelated probands: 175 with retinitis pigmentosa (RP), 20 with Leber congenital amaurosis (LCA), and 47 with cone-rod dystrophy (CORD). Of the eight, the retinal diseases were RP in six probands, LCA in one proband, and CORD in one proband. The disease was transmitted as an autosomal dominant (one family), autosomal recessive (two families), or sporadic (five families) trait. The mutation did not cosegregate with retinal degeneration in three families, whereas five normal family members also had the mutation. In addition, this mutation was also detected in 13 of 521 unrelated control subjects. CONCLUSIONS: The 208delG mutation in FSCN2 is not associated with hereditary retinal degeneration in the Chinese individuals examined, which contradicts the original report about mutation in FSCN2 as a cause of ADRP and ADMD. This finding reminds us that great care is needed in making mutation-disease associations.     

汉族常染色体显性视网膜色素变性一家系的连锁分析及突变筛查

背景 原发性视网膜色素变性(RP)有明显的遗传异质性和表型异质性,目前已确定的致病基因较多,确定患病家系的致病基因是进行基因治疗的基础. 目的 对患常染色体显性遗传性RP(ADRP)的一个汉族家系进行致病基因的定位和基因突变分析.方法 此家系的5代21名成员纳入研究,包括12例ADRP患者和9名表型正常者.12例患者进一步接受中心视野、间接检眼镜、眼电图(EOG)、视网膜电图(ERG)检查.对22个已知的ADRP致病基因所在染色体位点进行连锁分析,以确定该家系与疾病连锁的染色体区域,随后对该区域附近的候选基因视紫红质(RHO)进行直接测序评估其突变情况. 结果 间接检眼镜检查该家系先证者眼底表现符合原发性RP表现,EOG和ERG表现为波形记录不到,视野呈向心性缩小.两点连锁分析结果显示,该家系致病基因位点与遗传标记D3S1292连锁,在θ=0.0时得到最大优势对数(LOD)值为3.6671.候选的RHO基因直接测序结果发现,该家系所有患者第53位密码子的第2个核苷酸均出现了C→G的突变,致其氨基酸由脯氨酸变为精氨酸(Pro53Arg),而该家系正常成员中未发现此突变. 结论 RHO基因的错义突变Pro53Arg与RP疾病出现共分离现象,可确定为该ADRP家系的致病基因.     

中国视网膜色素变性相关基因研究现状

目的 分析20年来中国视网膜色素变性(RP)相关基因研究现状。方法 回顾性分析。通过检索中国知网(CNKI)中国学术文献网络出版总库、美国国家生物技术信息中心、人类基因突变数据库、人类基因组变异协会等数据库及查阅1991～2011年发表的相关文献,统计已研究的RP相关基因种类和研究结果,并与国外相关研究进行对比。结果 迄今已发现60个与RP相关的基因。我国自1991年开始开展RP相关基因的筛查。迄今为止,共有29所医院和研究机构,收集300个RP家系和1572例散发型RP患者,对17个RP相关基因进行了研究,发表RP基因突变的文献66篇,发现239个突变,其中致病性突变131个;关于基因治疗的文献有4篇。我国RP患者中,视紫红质(RHO)、特异性光感受器细胞核受体和RP1基因突变的发生率分别为2.0％、2.9％和1.0％。关于RP基因型与临床表型关系的研究较少,发表文献15篇,主要集中在ADRP致病基因RHO、视网膜变性慢(RDS)、RP1和RP三磷酸鸟苷酶调节子(RPGR,又名RP3)的突变热点区域。国外关于RP基因筛查的文献有718篇,发现2000多个突变,其中致病性突变352个;关于RP基因治疗的文献有391篇。RHO、RDS和RP1基因是导致白种人群ADRP最主要的3个基因,基因突变的发生率分别为25％～50％、8％、5％～10％。RPGR基因是导致白种人群XLRP最主要的基因,基因突变的发生率为70％～80％,其中外显子开放阅读框15的突变频率最高,约为50％～60％。结论 我国已对17个RP相关基因进行了研究,发现了131个致病性突变;RP基因治疗尚处于起步阶段。与国外研究相比存在较大差距。