碱性磷酸酶快速染色法的实验研究

目的建立一种简便快速中性粒细胞碱性磷酸酶染色方法。方法在改良Gomori钙钴法的基础上,利用2-氨基-2-甲基-1-丙醇为缓冲体系和磷酸基受体,加快转磷酸作用的酶促反应速度。结果快速法的孵育时间从改良Gomori钙钴法的4h缩短为15min。整个实验可在30min内完成。与改良Gomori钙钴法比较,120例标本配对试验,快速法NAP积分为97.7±8.4,改良Gomori法NAP积分为96.5±10.6(x±s),两者结果无显著性差异(P＞0.05)。批内和批间CV分别为2.9%和5.2%。结论该法设计合理,具有快速、简便、重复性和染色效果好等特点。     

网状纤维Gomori银氨染色法的改良及应用体会

正在日常的病理诊断中,经常使用特殊染色方法来辅助HE染色。其中网状纤维染色最为常用,它可以显示病变组织网状支架的破坏情况,对于判断病变的破坏程度以及发展转归等具有指导作用,尤其在鉴别间叶组织和上皮组织来源的恶性肿瘤具有重要意义。网状纤维的染色方法较多,传统的Gomori银氨染色法,由于是嗜银染色,容易受各种因素干扰,经常导致染色效果不理想。对此我们进行了改良,用过碘酸代替高锰酸钾氧化和草酸漂白~([1]),同时省略了氯化金调色和硫代硫酸钠固定,其染色方法更为简便,易于掌握,染色结果对比更加鲜明。同时对染色原理及染色过程中容易出现的问题进行分析,并提出具体的解决办法,使Gomori银氨染色法的染色质量得到明显改善。     

微波辐射PAS染色显示声带鳞状细胞癌早期的基底膜改变

目的观察微波辐射PAS染色法显示声带鳞状细胞癌早期基底膜改变的效果。方法对89例声带早期鳞状细胞癌改变的病理切片进行微波辐射PAS染色和传统PAS染色,比较两者显示基底膜的效果,并通过层黏连蛋白的免疫组化EnVision二步法对两种PAS染色结果进行验证。结果两种PAS染色结果与层黏连蛋白的染色结果一致。HE染色怀疑有微小浸润者52例,其中PAS染色显示43例可疑微浸润灶周边基底膜样物质消失或部分缺失,证实有微浸润;9例疑似微浸润灶周边有完整的基底膜着色,证实为上皮脚横切或斜切面造成的假象。另外,微波辐射PAS染色时间为15 min,传统PAS染色时间为56 min,微波辐射PAS染色显示基底膜较传统PAS染色清晰(P<0.001)。结论微波辐射PAS染色显示声带鳞状细胞癌早期改变基底膜的结果可靠,并可显著缩短显示时间,提高传统PAS染色显示基底膜的效果。     

光波-微波技术在常规HE染色中的应用

目的提高常规苏木素伊红（HE）手工染色质量,缩短染色时间。方法使用光波-微波技术对病理组织标本切片做HE染色,以本室常规处理方法作为对照。结果使用光波-微波技术的HE染色效果优于普通HE染色效果。结论在HE手工染色过程中,使用光波-微波技术能够有效改善染色效果,并缩短染色时间。     

抗凝剂和缓冲液对血涂片染色的影响

目的探讨抗凝剂和乙酸盐缓冲液提高血涂片染色质量中的使用方法。方法血涂片操作中对传统方法进行改良,精确使用抗凝剂,并用乙酸盐缓冲液(HAc-NaAc)代替磷酸盐缓冲液(KH_2PO_4-Na_2HPO_4),在乙酸盐缓冲液中加入5%~10%瑞氏-吉姆萨复合染液制备血涂片,光学显微镜下观察血涂片的血细胞染色形态。结果与传统方法比较,改良后的方法可缩短染色时间(由传统方法的8~13 min缩短为2 min左右);光学显微镜下观察血细胞染色形态时显示,各种血细胞结构清晰,着色稳定。结论该方法可提高血涂片染色的质量和人工复检的效率。     

改良SDS-PAGE法分析尿蛋白组成

目的　建立一种快速的尿蛋白组分分析方法。方法　将薄层垂直平板SDS PAGE与高敏的银染色和微波技术相结合 ,建立改良SDS PAGE法 ,快速分析蛋白尿组成。结果　此法缩短分析所需的时间 ,使整个分析过程在 7h内就可以完成 ,并且提高蛋白条带的分辨率 ,使检测灵敏度达ng级水平。结论　改良SDS PAGE法分析尿蛋白组成简便 ,快速 ,灵敏度高     

改良SD—PAGE法分析尿蛋白组成

目的：建立一种快速的尿蛋白组分分析方法。方法：将薄层垂直平板SDS－PAGE与高敏的银染色和微波技术相结合，建立改良SDS－PAGE法，快速分析蛋白尿组成，结果：此法缩短分析所需的时间，使整个分析过程在7h内就可以完成，并且提高蛋白条带的分辨带，使检测灵敏度达ng级水平。结论：改良SDS－PAGE法分析尿蛋白组成简便，快速，灵敏度高。     

碱性磷酸酶钙钴染色法的改进

碱性磷酸酶(ALP)染色是细胞化学染色中常用方法。国内仍有不少单位使用Gomori的钙钴法,但温育时间较长,工作不便。我们参考病理染色技术,筛选了简单的基质液配方,染色时间缩短,染色效果也很理想,现简要介绍如下。     

改良免疫组织化学与弹力纤维双重染色在非小细胞肺癌胸膜微浸润病理诊断中的应用

目的 探讨免疫组织化学AE1/AE3与弹力纤维Gomori醛品红法双重染色在非小细胞肺癌胸膜微浸润中的应用价值。方法 收集非小细胞肺癌且肿瘤临近胸膜的组织学标本54例。采用HE染色、弹力纤维染色及免疫组织化学AE1/AE3与弹力纤维双重染色方法,观察这三种染色方法在能否明确诊断肿瘤侵犯中的差别。结果 单一HE染色及单一弹力纤维染色在可以明确诊断胸膜是否侵犯中均占7%,而免疫组织化学AE1/AE3与弹力纤维双重染色方法可以100%明确诊断肿瘤是否侵犯胸膜。三组染色比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 在非小细胞肺癌肿瘤临近胸膜时,改良的免疫组织化学AE1/AE3与弹力纤维Gomori醛品红法双重染色能够更直观的显示肿瘤细胞胸膜侵犯的情况,优于单一的HE染色和单一的弹力纤维染色。对明确非小细胞肺癌肿瘤分期及精准治疗具有重要意义。     

大鼠脂肪间充质干细胞分离培养及成骨潜能的试验研究

【目的】研究大鼠脂肪间充质干细胞分离培养的方法和成骨分化的潜能。【方法】取大鼠腹股沟脂肪垫,酶消化法分离细胞,接种入含新生牛血清的DMEM培养基进行原代培养,用含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的DMEM培养基诱导其成骨分化。倒置显微镜、光学显微镜、透射电镜观察细胞形态,测定细胞倍增时间,检测碱性磷酸酶染色、钙结节染色。【结果】脂肪间充质干细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,倍增时问为35h,传代稳定;经成骨诱导,细胞呈多角形,体积明显增大,倍增时间为68h。Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色显示其胞浆内含碱性磷酸酶颗粒,阳性率为80％;茜素红S染色见钙结节形成。【结论】成功地建立了一种分离、培养大鼠脂肪问充质干细胞的方法;经成骨诱导,其具有成骨的潜能,可作为骨组织工程的种子细胞。     

钙钴法测NAP孵育时间探讨

中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的检测,临床上多采用改良戈(Gomori)氏钙-钴法,有关方法中的孵育时间(要求37℃4～6小时),有人探讨可以缩短.但我们发现,有些实验室为了方便,于当日下班前将固定好的血片放入基质孵育液,次日晨再取出染色,使孵育时间大为延长.为探讨延长孵育时间对结果是否有影响,我们做了如下实验.选择白细胞数大于10×10~9/L 的病人50例,各取其耳血制血片4张,经95%乙醇固定10分钟,水洗待干后,各两张血片放入同一基质液置37℃温箱分     

微波技术在病理组织特殊染色中的应用

目的 微波辐射技术在病理组织特殊染色中的影响及意义.方法 应用微波辐射技术进行病理组织特殊染色与常规病理组织特殊染色的比较.结果应用微波照射技术的染色切片,背景无气泡,反差大,颜色鲜艳.组织结构清晰,无脱片现象,染色结果完全达到甚至优于传统法,并大大缩短染色时间.结论 微波是一种高频电磁波,可以提高分子的运动速度,增加细胞的渗透性和溶剂分子的穿透力,并且可以产生均匀的热效应,从而缩短染色时间,提高工作效率.     

腹腔镜阑尾切除术方法改良

目的 探讨腹腔镜阑尾切除手术方法改良的临床效果和意义.方法 在30例腹腔镜阑尾切除术中使用全电凝法处理阑尾系膜,在20例单孔腹腔镜阑尾切除术中应用阑尾悬吊法操作.将以上手术的结果、并发症、中转开腹率和手术时间与同期施行的40例常规法腹腔镜阑尾切除术进行比较.结果 常规方法组和改良方法组均治疗结果良好,无并发症发生,改良方法组中转开腹率(2.4%)与常规方法组(2.5%)相同,改良方法组手术时间[(40.73±12.48)min]比常规方法组[(47.04±14.60)min明显缩短,P＜0.05.结论 腹腔镜阑尾切除方法的改良可在保证疗效和安全的前提下简化操作,缩短手术时间,降低麻醉费用,扩大术式适用范围,更加突出腹腔镜手术的微创优势.     

大鼠动静脉内瘘失功时血管内膜病理改变和血管剪切应力的相关研究CSCD

目的揭示自体动静脉内瘘失功血管内膜病理改变和血管剪切应力的变化规律。方法研究对象:选取C57BL/6小鼠,分假手术组(n=20)和手术组(n=20)。手术组应用显微外科技术建立小鼠颈动静脉内瘘模型,假手术组不建立动静脉内瘘。检测指标:①血流动力学:测定动脉压、心率、血流速度、剪切应力值;②组织病理学:HE染色观察静脉壁厚度;PAS染色观察血管壁蛋白粘多糖;Gomori银染色观察血管壁网状纤维组织;醛品红弹力纤维染色观察血管壁弹力纤维组织;CD31、CD34免疫染色观察血管壁血管内皮细胞变化。结果①血流动力学检查:与假手术组比,手术组颈动脉内径变细,血管剪切应力明显增加(t=-6.840,P<0,001)。②组织病理学检查:HE染色显示手术组静脉血管壁明显增厚,管腔狭窄;PAS染色显示手术组中性粘多糖含量明显增多;Gomori银染色显示手术组纤维增生明显;醛品红弹力纤维染色显示手术组弹力纤维增生明显,排列紊乱;CD31、CD34免疫染色显示手术组血管内皮细胞膜缺乏连续性,被纤维组织增生破坏。结论动静脉内瘘手术后血管剪切应力增加,血管内膜异常增生,伴纤维增生紊乱、炎性细胞浸润增殖,进而血管壁增厚、管腔狭窄,是导致维持性血液透析患者自体动静脉内瘘功能障碍的重要机制。     

白带常规检查改良前后结果分析

目的 通过对51 247例白带常规检查结果的分析,探讨如何在门诊检查中提高白带检查质量.方法 采用生理盐水涂片法和改良稀碱两步法,对2个医院门诊2004～2006年白带常规分析比较.结果 改良前真菌检出率15%,滴虫检出率4%.改良后真菌检出率19%,滴虫检出率3%.结果表明改良后真菌阳性率显著提高,滴虫检出率明显下降.分析结果同时还发现2004～2006年间白带清洁度有明显改变.结论 标准化操作、涂片稀碱两步法染色能有效提高门诊白带的检测质量.     

改良PASM染色法在肾穿刺活检组织中的应用

<正>肾穿刺活检组织诊断中,PASM(六胺银染色法)染色是重要的检查方法,能清晰地显示基底膜增厚"叮突"、"双轨"等病理变化,通过浸银染色,还可以观察肾小球毛细血管或球囊壁基底膜在炎性损伤(如断裂、增生、折叠等)中的形态学改变。为提高染色质量,我们对传统的方法进行了改良,在实际应用中取得了较好的效果,现将具体方法介绍如下。     

真菌性鼻窦炎5种真菌染色方法的比较

目的对比分析不同的真菌染色方法在真菌性鼻窦炎真菌染色中的特点及其应用。方法91例真菌性鼻窦炎的石蜡包埋组织标本,真菌类型包括曲霉菌属真菌52例、链格孢菌2例、白色念珠菌12例和毛霉目真菌25例。连续切片,进行HE、PAS、AB-PAS、GMS和MUC5B免疫组化染色。结果曲霉菌属真菌和白色念珠菌PAS、AB-PAS、GMS和MUC5B免疫组化染色效果很好;链格孢菌GMS染色效果最佳,呈明显的棕黑色,其他染色方法真菌均呈现自身的棕色;毛霉目真菌除MUC5B外,其余染色方法均着色;当背景组织为丰富的黏液时,AB-PAS法的染色效果优于单纯的PAS染色,真菌和背景反差较大,真菌轮廓明显;所有类型真菌HE染色的效果均欠佳,真菌轮廓不够明显。结论真菌染色可联合应用PAS、AB-PAS、GMS和MUC5B免疫组化染色方法,其各有优势。其中GMS染色显示真菌效果最佳,所有真菌均着色;组织背景为丰富的黏液时,AB-PAS的染色效果优于单纯的PAS染色;MUC5B染色方法具有一定的特异性,能鉴别出形态接近的曲霉菌和毛霉菌。     

蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

目的探索一种快速、灵敏的蛋白质凝胶电泳银染色方法.方法对蛋白质凝胶电泳银染色过程中的多种因素进行了实验探索,在此基础上探索出一种改良的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法.结果改进方法灵敏度为Coomassie Brilliant Blue R-250法的100倍以上,对牛血清白蛋白的检测限在0.5ng以下,整个染色过程不超过60min,染色重复性好.结论改进后的方法比以前使用的方法简便、快速、灵敏、成本相对低廉.     

Ag—NOR银染技术的改进

本文介绍一种改良的AgNOR银染技术方法。该法将现行的滴染技术改为用立式或卧式染缸染色,并调整了硝酸银溶液的浓度,摸索了不同组织在15％～50％硝酸银溶液的缸染时间及温度。改良后的方法在消除非特异性银沉淀颗粒及降低背景染色等方面有较好效果,染色结果可靠,操作更为方便。     

蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

目的探索一种快速、灵敏的蛋白质凝胶电泳银染色方法。方法对蛋白质凝胶电泳银染色过程中的多种因素进行了实验探索。在此基础上探索出一种改良的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法。结果改进方法灵敏度为Coomassie Brilliant Blue R-250法的100倍以上，对牛血清白蛋白的检测限在0．5ng以下，整个染色过程不超过60min，染色重复性好。结论改进后的方法比以前使用的方法简便、快速、灵敏、成本相对低廉。