信号转导和转录激活因子3及其靶基因c-myc在喉鳞状细胞癌中的表达与意义

目的:检测喉鳞状细胞癌中信号转导和转录激活因子3(STAT3)基因及其靶基因c-myc的表达,探讨其临床意义及相关性.方法:采用原位杂交技术和免疫组织化学技术,在mRNA和蛋白2个水平检测STAT3和c-myc基因在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全(或近全)切除者癌旁(>2.0 cm)正常黏膜中的表达,应用显微图像分析系统测定阳性表达的平均吸收度值,并进行统计分析.结果:在喉鳞状细胞癌组织中存在STAT3和c-myc基因的mRNA和蛋白高表达;STAT3和c-myc基因的mRNA表达与喉鳞状细胞癌的临床分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01);STAT3和c-myc基因的蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01);在喉鳞状细胞癌组织中STAT3和c-myc基因的高表达呈正相关(r=0.622 4、0.7012,均P<0.01).结论:STAT3基因及其靶基因c-myc的表达与喉鳞状细胞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关.     

喉癌组织中Stat3及其靶基因Cyclin D1蛋白的表达及其相关性研究

目的：研究喉癌组织中Stat3及其靶基因Cyclin D1蛋白表达及两者的相关性。方法：应用免疫组织化学方法,研究喉癌组织中Stat3和Cyclin D1的表达情况,并且对Stat3表达的相关临床病理因素进行分析。结果：喉癌组织中Stat 3蛋白、Cyclin D1蛋白高表达,两者表达强度具有相关性（r=0．304,P〈0．01）。结论：喉癌中活化的Stat3可能通过促进靶基因Cyclin D1转录而发挥其促进癌变的作用。     

荧光定量PCR技术检测喉鳞状细胞癌标本中Skp2基因表达

目的:探讨细胞S相激酶相关蛋白(Skp2)基因在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用.方法:应用荧光定量逆转录PCR(FQ-PCR)技术检测40例喉鳞状细胞癌及10例癌旁正常组织中Skp2 mRNA拷贝数,并分析其与临床相关因素的关系.结果:40例喉鳞状细胞癌Skp2 mRNA中位拷贝数为6 622.54 copy/μg RNA,10例癌旁正常组织为0 copy/μg RNA,两组差异有统计学意义(P<0.01);喉鳞状细胞癌和癌旁正常组织Skp2mRNA阳性表达率分别为50%和0,差异有统计学意义(P<0.01).喉鳞状细胞癌中颈淋巴结转移组Skp2mRNA中位拷贝数为617 138.4 copy/μg RNA,颈淋巴结无转移组为0 copy/μg RNA,两组差异有统计学意义(P<0.05);喉鳞状细胞癌中颈淋巴结转移组和颈淋巴结无转移组Skp2 mRNA阳性表达率分别为100.00%和35.48%,差异有统计学意义(P<0.01).结论:Skp2基因可能与喉鳞状细胞癌颈淋巴结转移有关,FQ-PCR为一精确检测喉鳞状细胞癌Skp2 mRNA表达的方法,Skp2 mRNA表达水平可能成为预测喉鳞状细胞癌颈淋巴结转移的更加灵敏的指标.     

DNMT1基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测96例喉鳞状细胞癌中DNMT1基因蛋白的表达,其中66例喉癌组织同时进行实时定量PCR,并分析其DNMT1 mRNA的表达与临床病理因素的关系.结果:DNMT1 mRNA在喉鳞状细胞癌组织中表达上调(P<0.05).96例喉癌鳞状上皮细胞中DNMT1蛋白表达全部为阳性(96/96),36%(8/22)癌旁组织的鳞状上皮细胞中DNMT1蛋白表达为阳性,二者差异有统计学意义(P<0.05).DNMT1 mRNA在喉癌组织中表达上调,和患者年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况无关,但与患者吸烟史有显著相关性(P<0.05).结论:DNMT1可能在喉癌中表达增高从而引起肿瘤的发生,吸烟可能诱导DNMT1的表达增高.     

D型细胞周期蛋白在喉咽癌中的表达及临床意义

目的 探讨D型细胞周期蛋白(Cyclin D)与喉咽癌临床生物学行为之间的关系.方法 取喉咽鳞状细胞癌组织标本56例,正常喉黏膜14例,应用免疫组化方法检测Cyclin D在喉咽癌组织和正常黏膜中的表达,RT-PCR检测其mRNA表达.结果 CyclinD1在喉咽癌组织中的阳性表达率78.57％,显著高于正常黏膜,与T...     

Survivin、bcl-2和bax在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞癌中的表达,及其与bcl-2、bax基因表达的相关性。方法应用SP免疫组织化学法检测45例喉鳞状细胞癌及10例正常喉黏膜组织中survivin,bcl-2及bax基因的表达。结果喉鳞状细胞癌组织中,Survivin的表达率为80%,显著高于正常喉黏膜组织的表达率20%(P<0.05)。Survivin蛋白表达与喉鳞状细胞癌的TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。Survivin表达与bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.05),而与bax蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论Survivin在喉鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用,可能成为喉鳞状细胞癌基因治疗的新靶点;Survivin基因可能与凋亡相关基因bcl-2、bax在喉鳞状细胞癌的发展中分别起协同和拮抗作用。     

FoxM1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究FoxM1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:运用免疫组织化学方法检测89例喉鳞状细胞癌组织、89例癌旁组织及20例喉乳头状瘤组织中FoxM1蛋白的表达情况,分析其与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例喉鳞状细胞癌、20例喉乳头状瘤组织以及20例癌旁组织中FoxM1mRNA表达情况。结果:FoxM1mRNA和蛋白表达的阳性率在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及癌旁组织中逐渐降低,其差异有统计学意义(P<0.05)。FoxM1蛋白的表达随组织分化程度增高而降低(P<0.05);随T分期增高而增加(P<0.05);有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05),随临床分期的增加而表达增加(P<0.05)。FoxM1表达率与患者年龄、性别、癌原发部位无相关性(P>0.05)。结论:FoxM1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达的上调可能与喉鳞状细胞癌的发生及浸润转移有关。     

唐氏综合征侯选区域1基因在喉咽鳞状细胞癌与癌旁组织中的表达及意义

目的:通过研究喉咽鳞状细胞癌组织与癌旁组织中唐氏综合征侯选区域1(DSCR1)基因的表达,了解其表达与肿瘤临床特征的关系,探讨DSCR1基因对喉咽鳞状细胞癌的生物学行为的影响。方法:免疫组织化学p-V9000法,使用兔抗DSCR1抗体DCT3,检测DSCR1基因蛋白在喉咽鳞状细胞癌与正常癌旁组织中的表达,并将其与临床资料之间进行统计学分析。结果:肿瘤组织中DSCR1基因表达阳性率94.9%,癌旁组织中表达阳性率35.9%,差异有统计学意义(t=23.69,P<0.01);DSCR1基因的表达在不同的病理分化程度、TNM分期差异有统计学意义(P<0.05);DSCR1基因的表达在不同的肿瘤发病年龄、性别、部位、生长方式、淋巴结转移以及吸烟史组均差异无统计学意义。结论:DSCR1基因在喉咽鳞状细胞癌的发生、发展过程中有重要作用,可以影响肿瘤的生物学行为。     

基因芯片筛选喉鳞状上皮细胞癌相关基因的实验研究

目的:进行喉鳞状上皮细胞癌相关基因的验证研究,为喉鳞状上皮细胞癌相关基因的进一步研究打下基础。方法:在基因芯片筛选结果中挑出部分基因(SENP1、CD109、Lamininα2、Lamininα3),应用RT-PCR、Western blot进一步检测这些基因在12例喉鳞状上皮细胞癌及其癌旁正常组织中mRNA和蛋白水平的表达。结果:RT-PCR结果显示SENP1、CD109、Lamininα3基因在喉鳞状上皮细胞癌组织中表达上调,Lamininα2基因表达下调。Westernblot结果显示SENP1、CD109蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达明显高于对应的癌旁正常组织。结论:SENP1、CD109、Lamininα2、Lamininα3可能与喉鳞状上皮细胞癌的发生、发展相关,这对从分子水平研究喉癌的发病机制提供了有益的线索。     

葡萄糖转运蛋白1在人喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)在人喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理学的关系.方法:应用免疫组织化学的方法以及RT-PCR法检测57例喉鳞状细胞癌患者的肿瘤组织、癌旁喉组织以及远离肿瘤的正常喉组织中GLUT1的蛋白和mRNA的表达,并结合喉癌患者的临床病理特征进行分析.结果:①免疫组织化学:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.01);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3cm者(P<0.05).②RT-PCR结果:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于中分化和高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.05);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3 cm者(P<0.05).结论:GLUT1与喉癌发生、发展、分化、淋巴转移和转归等密切相关,可以作为喉癌的诊断、治疗和预后指标之一.     

细胞周期蛋白D1基因的表达与喉鳞癌相关性研究

目的：探讨细胞周期蛋白Ｄ１的表达与喉鳞癌（ＳＣＣＬ）的关系。方法：对３５例经病理证实ＳＣＣＬ患者的肿瘤组织及其邻近的正常粘膜,运用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、光密度半定量法,分别检测其ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达程度。结果：发现几乎所有的肿瘤标本的表达量要高于正常粘膜（Ｐ〈０．０５）,有淋巴结转移者的表达量要明显高于无淋巴结转移者（Ｐ〈０．０５）;表达量与ＴＭＮ分期也有明显的相关性（Ｐ〈０．０     

Stat3信号传导通路在喉癌中的表达及意义

目的本研究分析Stat3及其靶基因产物cyclinD1与Bcl-xl在喉癌组织与细胞中的表达情况,探讨Stat3及其靶基因产物在喉癌发病机制中的作用。方法用Western blot检测50例喉癌组织、10例喉癌旁黏膜以及喉癌细胞系Hep-2中Stat3、p-Stat3及其靶基因产物CyclinD1和Bcl-xl蛋白表达,用免疫组织化学染色进行细胞内定位,同时对喉癌组织中P-Stat3、CyclinD1及Bcl-xl表达情况与不同ll盎床病理特征进行统计学分析。结果喉癌组织中Stat3、p．Stat3、Cyclin D1及Bcl-xl蛋白表达水平（A值）分别为86．97±1．58、56．97±3．93、24．43±5．62、33．78±3．56;癌旁黏膜分别为36．10±0．526、16．52±0．529、5．94±1．75、14．68±2．14）P〈0．05）。p-Stat3表达水平与喉癌临床分期、病理分级及淋巴结转移有关（P=0．026、0．019、0．034）：CyclinD1表达水平与临床分期、病理分级、淋巴结转移（P=0．015、0．027、0．034）有关;Bcl-xl表达水平与临床分期、淋巴结转移（P=0．023、0．033）有关。P-Stat3与CyclinD1表达呈线性相关（r=0．451,P〈0．05）。结论Stat3信号转导通路可能在喉癌的发生发展过程中起重要作用,检测喉癌中Stat3及其靶基因产物的表达可以反映肿瘤的恶性程度和病情进展。     

细胞周期蛋白G2在喉癌中的表达

目的探讨细胞周期蛋白G2(Cyclin G2)的表达与喉鳞状细胞癌的关系。方法收集2000年1月～2000年12月共81例喉鳞状细胞癌患者的临床资料和石蜡块,用免疫组化方法检测肿瘤组织、喉癌旁黏膜Cyclin G2表达:并分析Cyclin G2的表达与喉癌患者年龄、性别、临床分期、肿瘤分化程度以及预后等的关系。统计学分析采用SPSS12.0软件。结果Cyclin G2在喉癌中阳性表达率为67.9%,并随分化程度的降低而降低,有、无淋巴结转移者阳性率分别为38.4%和73.5%,差异均具有显著性(P>0.05)。结论Cyclin G2表达强度与喉癌的恶性程度及发展趋势明显负相关,可作为预测喉癌预后的生物学指标之一。     

喉鳞状细胞癌及转移淋巴组织中Cyclin E的表达

目的：定量检测细胞周期素E（Cyclin E）在喉鳞状细胞癌及颈部淋巴组织中的表达,探讨其在喉癌转移中的可能作用。方法：采用激光共聚焦显微镜、多参数流式细胞技术对手术切除的21例喉鳞状细胞癌（7例伴颈淋巴结转移,14例不伴颈淋巴结转移）组织标本中Cyclin E的表达含量进行检测分析。结果：Cyclin E在喉鳞状细胞癌、阳性淋巴结、阴性淋巴结中均有不同程度的表达,喉鳞状细胞癌伴颈淋巴结转移平均荧光强度为78.12士6.54,略高于不伴颈淋巴结转移者（74.93士8．82）（P〉0．05）;阳性淋巴结平均荧光强度为93．65士7．48,明显高于阴性淋巴结（30．65士7．48）（P〈0．01）,且高于喉鳞状细胞癌伴颈淋巴结转移和不伴颈淋巴结转移者（P〈0．05）。结论：Cyclin E的异常表达是喉癌发生、发展过程中一个重要的分子事件;Cyclin E的检测可望成为临床评估喉癌淋巴结转移的指标之一。     

喉鳞癌组织中CDK_4、cyclin D_1、P~(16)蛋白表达

目的：细胞周期中G1／S转换受到G1期的细胞周期蛋白及细胞周期蛋白的依赖激酶（CDKs）和它们的抑制剂的调节,cyclinD1／CDK4复合物磷酸化（pRB）基因产物、P16与cyclinD1竞争性地抑制CDK4,这些蛋白质的不正常表达就使细胞增殖失控,进而导致肿瘤的形成和发展。本研究从细胞周期调控的角度来探讨喉鳞状细胞癌的发生、发展与CDK4、cyclinD1及P16的关系。方法：用SP免疫组织化学的方法,检测了105例喉癌（其中声门上癌51例,声门癌54例）及28例声带息肉中CDK4、cyclinD1、P16蛋白表达的水平。结果显示：在喉癌组织中cyclinD1的表达以＋＋～＋＋＋为主,而在声带息肉组织中以阴性及弱阳性为主。它们之间存在着显著性的差异（P＜0．05）;而同样P16的表达在喉癌及对照组之间的差异非常显著（P＜0．001）。P16、CDK4的表达在声门上癌与声门癌之间差异显著,P值分别为P=0．002,P=0．021。经Spearman相关分析得出：喉癌组织中CDK4的表达与P16的表达和cyclinD1的表达具有相关性,相关系数分别为0．235、0．253。伴转移的喉癌组织中CDK4的表达与cyclinD1的表达相关明显,相关系数r=0．534。而在非转移的喉癌组织中CDK4与P16相关,相关系数r=0．253。由此我们推论：在喉癌的发生、发展中CDK4、cyclinD1及P16是共     

Cyclin D1 expression and histopathologic features in vestibular schwannomas.

OBJECTIVE: To evaluate cyclin D1 expression in vestibular schwannoma and its relationship with histologic, clinical, and radiologic features. PATIENTS: Twenty-one patients with histologically confirmed vestibular schwannoma. INTERVENTION: Immunohistochemistry analysis was performed with anticyclin D1. Histopathologic features studied included Antoni pattern and nuclear and stromal degenerative changes. Clinical charts, audiometric data, and magnetic resonance imaging characteristics were reviewed. MAIN OUTCOME MEASURES: Cyclin D1 expression and its association with histologic, clinical, and radiologic findings. RESULTS: Cyclin D1 expression was found in 52% of cases. Cyclin D1 expression was more frequent in right-sided tumors (p = 0.02) and in tumors with nuclear degenerative changes (p < 0.0001). Patients with negative cyclin D1 expression had longer duration of deafness (p = 0.02) and higher 2,000-Hz hearing thresholds (p = 0.04) than cyclin D1+ patients. CONCLUSION: Cyclin D1 expression, present in nearly half of the cases, may play a role in the development of these tumors. Further studies are needed to fully understand the contributions of histopathologic and immunohistochemical factors to vestibular schwannoma biological activity.     

The clinical significance of methylation of MAGE-A1 and-A3 promoters and expression of DNA methyltransferase in patients with laryngeal squamous cell carcinoma

PurposeAbnormal DNA methylation plays an important role in clinical diagnosis and prognosis of various tumors. DNA methylation is catalyzed by DNA methyltransferase (DNMT). However, the methylation status of MAGE-A1 and MAGE-A3 promoter regions in LSCC is unclear. To investigate the methylation levels of MAGE-A1, -A3 in LSCC and corresponding normal tissues. The expression of DNMTs (DNMT1, DNMT3a and DNMT3b) in LSCC and the relationship between the methylation status of MAGE-A1, -A3 were analyzed.Materials and methodsWe examined methylation status of MAGE-A1, -A3 in LSCC by using MSP. Meanwhile, the expression level of DNMTs in LSCC was detected by immunohistochemistry. And further analysis the correlation between DNMTs expression level and methylation status of MAGE-A1 and MAGE-A3.ResultsThe unmethylation rate of MAGE-A1, -A3 were 39.62% and 46.23%. The expression of DNMTs was 33.02% to 37.74%. The level of demethylation of MAGE-A1 and MAGE-A3 were negative related to DNMTs protein. MAGE-A1 and MAGE-A3 unmethylation status and DNMT3a expression were independent prognostic factors for LSCC.ConclusionsThe DNMTs may participate in the methylation process of MAGE-A1 and MAGE-A3, which may play an important role in the occurrence and development of LSCC.     

MCM2和Ki-67及Rb蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨微染色体维持蛋白2(MCM2)、增殖细胞核抗原(Ki-67)和视网膜母细胞瘤易感基因(Rb)与人喉鳞状细胞癌(LSCC)发生、发展和预后的关系。方法:应用免疫组织化学ElivisionTMplus二步法检测60例LSCC、10例喉癌前病变、10例声带息肉及10例癌周正常喉组织中MCM2与Rb蛋白的表达,同时检测Ki-67蛋白在LSCC及癌周正常喉组织中的表达并结合临床资料进行分析。结果:①LSCC中MCM2蛋白的表达水平明显高于喉癌前病变及癌周正常喉组织(均P<0.05),且与喉癌病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(均P<0.05);LSCC中Rb蛋白表达水平明显低于癌前病变及癌周正常喉组织(均P<0.05);LSCC组织中MCM2与Rb蛋白的表达呈负相关(r=-0.542,P<0.05);②LSCC组织中Ki-67蛋白的阳性表达率(76.67%)明显高于癌周正常喉组织(30.00%),差异有统计学意义(P<0.01),MCM2、Ki-67蛋白在LSCC中的表达呈正相关(r=0.596,P<0.01),MCM2与Ki-67蛋白的标记指数在生存时间≥3年组和<3年组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MCM2蛋白的表达升高和Rb蛋白的表达下降与LSCC的发生、发展有关,检测MCM2有助于判定LSCC的恶性程度及预后。     

CDR1as在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨环状RNA ciR 7(CDR1as)在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）中的表达及临床意义,并分析CDR1as与miR 7的相关性。方法收集2011—2013年手术切除并病理确诊为鳞状细胞癌的标本61例,同期选取病理确诊为炎症或正常黏膜的癌旁组织（距肿瘤切缘大于0.5 cm）标本48例,采用实时荧光定量PCR方法检测喉癌及癌旁组织中CDR1as、miR 7的转录表达水平。结果Real time PCR显示,在LSCC组织中,CDR1as mRNA表达水平均显著高于癌旁组织（P＜0.001）;miR 7 mRNA表达水平均显著低于癌旁组织（P＜0.0001）; CDR1as在淋巴结转移患者的LSCC组织中表达水平较无淋巴结转移患者的LSCC组织中显著增高(P＜0.01);CDR1as在不同TNM分期患者的喉癌组织中表达水平差异具有统计学意义(P＜0.05);CDR1as在LSCC组织中表达水平与患者的预后相关 (P=0.02);同时,CDR1as表达水平与miR 7表达呈负性相关(r=-0.643,P=0．001)。结论CDR1as参与LSCC的发生和发展,其表达可以作为判断预后的一项指标,CDR1as与miR 7呈现出的一定的相关性,CDR1as可能通过靶向调控miR 7的表达影响喉癌进展。