EB病毒LMP2A在鼻咽癌患者肿瘤组织中的表达及意义

目的:观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2A(LMP2A)在鼻咽癌(NPC)患者肿瘤组织中的表达,探讨采用LMP2A作为靶抗原进行NPC免疫治疗的可行性。方法:采用SP免疫组织化学方法,检测40例NPC组织及38例鼻咽黏膜慢性炎症组织标本LMP2A的表达。结果:40例NPC 标本中36例LMP2A表达阳性(90．0％);LMP2A的表达与NPC病理分化程度无明显相关性。38例鼻咽黏膜慢性炎症组织标本中33例 LMP2A阴性反应,5例阳性反应。鼻咽黏膜慢性炎组织与NPC组织中LMP2A阳性表达率间差异存在统计学意义。结论:在不同病理分化程度的NPC肿瘤组织中LMP2A均可广泛表达,在正常鼻咽组织细胞中基本不表达。采用LMP2A作为靶抗原诱导机体特异性细胞免疫反应杀伤NPC肿瘤细胞具一定可行性。图2表1参15     

人核迁移蛋白C 在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:明确鼻咽癌(NPC)组织中人核迁移蛋白C(hNudC)的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学方法和Western blot方法检测80例NPC和30例鼻咽黏膜慢性炎组织中hNudC的表达情况,并应用条带密度分析软件半定量分析Western blot条带密度.结果:在 NPC中,hNudC阳性表达率为83.75%(67/80),明显高于鼻咽部黏膜慢性炎症组织23.33%(7/30)(P<0.05), hNudC蛋白的阳性表达率随着NPC临床分期的进展而增加(P<0.05).结论:hNudC基因表达与NPC细胞恶性增殖密切相关,检测其表达对研究NPC的发生、发展具有一定临床意义.     

EB病毒LMP2A在鼻咽癌患者肿瘤组织中的表达及意义

目的：观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2A(LMP2A)在鼻咽癌(NPC)患者肿瘤组织中的表达,探讨采用LMP2A作为靶抗原进行NPC免疫治疗的可行性。方法：采用SP免疫组织化学方法,检测40例NPC组织及38例鼻咽黏膜慢性炎症组织标本LMP2A的表达。结果：40例NPC标本中36例LMP2A表达阳性(90．0％);LMP2A的表达与NPC病理分化程度无明显相关性。38例鼻咽黏膜慢性炎症组织标本中33例LMP2A阴性反应,5例阳性反应。鼻咽黏膜慢性炎组织与NPC组织中LMP2A阳性表达率间差异存在统计学意义。结论：在不同病理分化程度的NPC肿瘤组织中LMP2A均可广泛表达,在正常鼻咽组织细胞中基本不表达。采用LMP2A作为靶抗原诱导机体特异性细胞免疫反应杀伤NPC肿瘤细胞具一定可行性。     

鼻咽癌组织中程序性死亡配体-1的表达及其临床意义

目的:探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)在鼻咽癌(NPC)中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学染色法检测59例NPC患者的癌组织和10例正常鼻咽黏膜组织中PD-L1的表达,RT-PCR技术检测30例NPC患者的癌组织及其中10例距离肿瘤组织3 cm以外的正常鼻咽黏膜组织中PD-L1mRNA的表达,并对其表达水平与临床病理组织学参数之间的关系进行相关性分析.结果:正常鼻咽黏膜组织中不表达PD-L1分子,而NPC癌组织中免疫组织化学PD-L1阳性表达率为67.8%(40/59),RT-PCR检测PD-L1mRNA的阳性表达率为66.7%(20/30).PD-L1的表达与肿瘤分期及淋巴结转移明显相关(P<0.05),但与患者的年龄、性别无明显相关(P>0.05).结论:PD-L1 NPC组织中的高表达,可能在肿瘤的发生、发展中起到一定的作用,有希望成为NPC免疫治疗的一个新靶点.     

鼻咽癌组织中环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-2的表达及与淋巴结转移的关系

目的:研究环氧合酶-2(COX-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测86例NPC组织中COX-2和MMP-2蛋白的表达,并与淋巴结转移的临床资料进行对比分析.结果:COX-2和MMP-2在NPC组织中的阳性率分别为75.58%和66.28%,显著高于正常鼻咽黏膜组织(均P<0.01);它们的表达与淋巴结转移呈正相关(均P<0.01),2种蛋白的表达之间呈正相关(P<0.01).结论:NPC组织中COX-2和MMP-2的表达均增高;二者在肿瘤淋巴结转移的过程中可能起协调作用.     

胰岛素样生长因子-1受体蛋白在鼻咽癌细胞中的表达及其临床意义

目的:探讨鼻咽癌(NPC)组织中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)蛋白的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测63例NPC组织和鼻咽部炎性黏膜组织中IGF-1R的表达,对其中45例NPC患者进行5年随访观察,以及采用免疫印迹法检测3种体外培养的NPC细胞系中IGF-1R蛋白的表达情况。结果:63例NPC和21例鼻咽黏膜(伴慢性炎症)组织中的IGF-1R阳性表达率分别为82.5%和14.3%,在NPC中的表达阳性率明显高于鼻咽炎性组织(P<0.01)。NPC组织中IGF-IR的表达与TNM分期和颈淋巴结转移有关,有颈淋巴结转移者其表达阳性率较高(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期表达阳性率较Ⅲ~Ⅳ期低(P<0.01);NPC局部复发者IGF-lR阳性表达率(89.5%)明显高于无局部复发者(53.9%),P<0.05;NPC放疗后生存期小于5年者的阳性表达率(88.9%)明显高于5年以上生存期者的阳性表达率(51.9%),P<0.01;病理分化程度越高IGF-lR阳性表达率越低,但NPC病理类型间比较差异无统计学意义(P>0.05)。在3种NPC细胞系中IGF-1R的表达明显高于鼻咽炎症黏膜组织,其中TW03表达最强,CNE2其次,CNEl表达稍弱。结论:NPC组织中存在IGF-1R的过表达现象,IGF-1R的异常表达与NPC的发生、发展存在一定的关系。IGF-1R可能是复发或转移性NPC治疗中一个潜在的靶分子。     

主要热应激蛋白和p53在鼻咽癌中的表达

目的 :探讨鼻咽癌 (NPC)组织中主要热应激蛋白 (HSPs)和 p5 3表达水平及其临床意义。 方法 :用Westernblot方法检测 38例NPC组织和 17例鼻咽慢性炎症组织中HSPs和 p5 3的表达。 结果 :HSP 2 7和 p5 3在NPC组织中表达升高 ,与鼻咽炎症组织比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;但在NPC的组织分型和临床分期之间 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。HSP 90和HSP 70在NPC组织和慢性炎症组织间差异无显著性意义 (P>0 .0 5 )。结论 :HSPs和 p5 3在NPC组织中存在一定程度的异常表达 ,提示其在NPC的发病机制中可能发挥一定作用     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子在鼻咽癌中的表达及意义

目的 观察诱导型一氧化氮合酶(Inos)与血管内皮生长因子(VEGF)在鼻咽癌(NPC)肿瘤组织中的表达,探讨其在NPC发生、发展、侵袭和转移过程中的作用.方法 采用免疫组织化学染色法,观察50例NPC石蜡标本和15例正常鼻咽黏膜标体中Inos、VEGF的蛋白表达情况.结果 正常鼻咽组织中Inos、VEGF均无表达;在NPC组织中,Inos阳性表达率为74%(37/50),VEGF为62%(31/50),与正常组比较,差异均有统计学意义.两者的表达在不同临床分期及有无淋巴结转移之间差异有统计学意义.在不同年龄及性别之间,差异无统计学意义.两者的表达强度呈显著正相关(r=0.764,P<0.001).结论 Inos与VEGF 的共同过表达可能与NPC的发生、发展、浸润和转移有关.Inos抑制剂与抗血管治疗的联合应用可能有利于NPC化疗及同步放化疗疗效的提高.     

鼻咽癌组织细胞死亡受体DR4和DR5 mRNA的表达

目的：分析鼻咽癌（NPC）组织细胞死亡受体（death receptor,DR)DR4和DR5 mRNA的表达。方法：从NPC癌组织提取的细胞总RNA逆转录生成第一条cDNA链后,再用DNA多聚酶链式反应扩增,经电泳,臭乙锭染色后,分析DR4和DR5受体mRNA的表达。结果：20例NPC癌组织有12例可检测到DR4 mRNA的表达,表达阳性率为60％,而所有20例NPC癌组织均可检测到DR5 mRNA的表达,8例非NPC鼻咽组织也都可检测到DR5 mRNA的表达,但未能检测到DR4 mRNA的表达。结论：DR4受体mRNA在NPC癌组织与非NPC鼻咽组织之间表达不同,而DR5受体mRNA在NPC癌组织与非NPC鼻咽组织之间的表达无差别,提示DR4和DR5死亡受体在NPC癌组织与非NPC鼻咽组织可能起着不同的作用。     

癌-睾丸抗原SCP-1 mRNA在人鼻咽癌中的表达

目的：从基因水平了解癌-睾丸抗原SCP-1在人鼻咽癌（NPC）的表达情况。方法：用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测28例NPC组织和40例非癌鼻咽部组织SCP-1 mRNA的表达。随机抽取SCP-1表达阳性的PCR产物进行DNA测序并结合临床指标进行统计学处理。结果：SCP-1 mRNA在NPC的表达率为14．3％（4／28）,在非癌鼻咽部组织无表达;测序结果表明PCR扩增产物序列与目的基因序列相符;SCP-1 mRNA的表达率与NPC患者的年龄、性别和血清抗EB病毒水平无相关性（P〉0．05）。结论：SCP-1 mRNA在NPC组织中有表达,提示SCP-1可能是一种新的NPC肿瘤靶抗原。     

EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨沉默促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular re-ceptor,EphA2)与促血管生成因子(VEGF)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学技术检测EphA2、VEGF蛋白在69例喉鳞癌组织及15例癌旁黏膜组织中的表达,分析二者表达水平与临床病理特征的关系。结果 EphA2和VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率均高于癌旁黏膜组织(P均<0.05),EphA2蛋白表达尚与肿瘤原发部位相关(P<0.05),且EphA2和VEGF蛋白表达均与喉鳞癌患者的临床分期(P均<0.05)及转移(P均<0.05)密切相关,而二者表达与患者年龄、性别、组织学分级均无明显相关(P均>0.05)。喉鳞癌组织中EphA2及VEGF蛋白表达存在正相关性(P<0.05)。生存分析结果显示EphA2及VEGF蛋白表达水平与患者5年总生存率密切相关(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结有无转移及EphA2蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论 EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中表达均上调,提示二者可能存在相互作用,共同在喉鳞癌的发生、发展中起作用。     

鼻咽癌血管生成及血小板聚集功能与侵袭转移关系的研究

目的：探讨鼻咽癌（ＮＰＣ） 血管生成及血小板聚集功能与ＮＰＣ 侵袭转移关系,为在分子水平干预肿瘤血管形成,预防ＮＰＣ复发和转移打下基础。方法：采用免疫组织化学Ｓ－ Ｐ法检测了５６ 例ＮＰＣ,２０ 例无瘤鼻咽部石蜡标本组织中的微血管密度（ ＭＶＤ） 及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ） 表达。随访３ 年,ＮＰＣ复发转移１７ 例,无复发或转移３９ 例。结果：复发转移组的血小板聚集率ＭＡＲ,ＭＶＤ 及ＶＥＧＦ的表达较无复发转移的表达高,差异有统计学意义;ＭＶＤ 及ＶＥＧＦ的表达与临床分期相关。结论：ＮＰＣ 血管生成及血小板聚集功能亢进与癌浸润和转移行为密切相关,有可能作为判断肿瘤生物学行为及预后指标,对采用血管生成抑制剂及血小板聚集抑制剂防止ＮＰＣ转移有参考价值。     

EphA2调控头颈部鳞状细胞癌血管新生及转移的体内实验

目的 研究EphA2对头颈部鳞状细胞癌(简称鳞癌)血管新生及颈淋巴转移的影响.方法 利用慢病毒介导的短发夹RNA( short hairpin RNA,shRNA)沉默EphA2在高转移性头颈鳞癌细胞株M2中的表达,嘌呤霉素筛选稳定克隆,反转录PCR及Western blot技术检测EphA2沉默效果;构建头颈鳞癌高转移动物模型,通过HE染色验证其成瘤及颈淋巴转移情况;免疫组织化学技术检测移植瘤微血管密度,Western blot技术检测移植瘤标本中EphA2及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.结果 筛选出EphA2基因稳定沉默的M2细胞(定义为M2 EphA2 RNA+即实验组),并成功构建头颈鳞癌高转移动物模型,成瘤率达100％.25 d后,实验组移植瘤体积为(430.7±190.0) mm3(x±s,以下同)较对照组的(1179.0 ±289.4) mm3明显减少(t =5.597,P＜0.01),质量显著减轻(t=-4.560,P＜0.05),且双侧颈淋巴转移率明显降低(Mann-Whitney U=10.0,P＜0.05).Western blot 显示实验组移植瘤组织中EphA2及VEGF蛋白表达显著下调,免疫组织化学技术发现实验组瘤体微血管密度为(4.74±0.67)个/视野,显著少于对照组的(14.17±0.59)个/视野(t=26.751,P＜0.01).结论 EphA2沉默能抑制头颈部鳞癌细胞的生长及转移,并能明显减少头颈部鳞癌组织内的肿瘤新生血管,且该肿瘤新生血管的抑制可能与促血管生成因子VEGF的减少有关.     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

鼻咽癌病人端粒酶表达的研究

目的：研究端粒酶（ＴＬＭＡ）在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达。方法：采用ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ法探讨１８例ＮＰＣ，２例放疗后ＮＰＣ，４例癌旁组织及４例慢性鼻咽炎鼻咽部活检组织中ＴＬＭＡ表达。结果：１８例ＮＰＣ ＴＬＭＡ阳性率为８８．９％。４例癌旁组织阳性率为７５．０％，慢性鼻咽炎全部为阴性。１例复发性ＮＰＣ为阳性，１例疗后未复发为阴性。ＴＬＭＡ表达与ＮＰＣ分期、颈淋巴结转移似无明显关系。结论：ＴＬ     

The prognostic value of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and p53 protein expression in patients with advanced nasopharyngeal carcinoma

CONCLUSION: p53 protein and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were not ideal prognostic indicators in advanced nasopharyngeal carcinoma (NPC). Further investigation in searching for other potential biomarkers is needed to enhance the prediction of treatment outcome. OBJECTIVE: To assess the prognostic significance of p53 protein and PCNA expression in patients with advanced NPC. PATIENTS AND METHODS: This study included 46 patients with advanced NPC who had received treatment and regular follow-up for at least 5 years. We used immunohistochemistry (IHC) staining to assess p53 protein expression and PCNA labeling index, and correlate them with pathological subtypes, TNM stage, the presence of locoregional recurrence, and 5-year survival rate. RESULTS: p53 nuclear staining was positive in 32 patients (69.6%). All cases had positive PCNA nuclear staining with labeling index (LI) ranging from 6.5% to 92.9% (mean 53.4%). Only advanced T stage was found to be associated with high PCNA LI. Overexpression of p53 and PCNA LI had no impact on 5-year survival in this study group.     

鼻咽癌中环氧化酶-2和潜伏膜蛋白-1的表达和相互关系的初步研究

目的：探讨鼻咽癌组织中的环氧化酶2（COX-2）、潜伏膜蛋白-1（LMP1）的表达情况,同时分析了两者之间的关系。方法：53例鼻咽癌活检标本,8例鼻咽部慢性炎症常规石蜡切片标本作为对照组,用SP免疫组织化学法检测COX-2、LMP1的表达,采用sPsS12．0统计软件对实验数据进行统计。结果：在鼻咽癌组织中,COX-2阳性表达率为71．70％（38／5a）;LMPI阳性表达率为66．04％（35／53）。COX2、LMP1的表达在颈部淋巴结转移组中均明显高于无颈部淋巴结转移组（P％O．05）,但在年龄、性别、病理类型、临床分期的分组中均差异无统计学意义（均P〉0．05）。在鼻咽癌组织中,LMP1和COX-2的表达存在正相关（7—0．797,P〈0．01）。结论：COX-2、LMP1在鼻咽癌组织中均有表达。COX2、LMP1在鼻咽癌中的表达和鼻咽癌颈淋巴结转移存在显著相关性,但和年龄、性别、病理类型、临床分期无相关性。COX-2和LMP1在鼻咽癌组织中的表达呈正相关。LMP1可能通过多途径上调COX-2的表达,从而促进鼻咽癌颈部淋巴结转移。     

EphA2蛋白调控鼻咽癌紫杉醇敏感性的实验研究

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular re-ceptor,EphA2)蛋白对鼻咽癌细胞紫杉醇化疗敏感性的影响。方法采用脂质体2000将EphA2蛋白过表达载体pEGFP-N1-EphA2和空白载体pEGFP-N1分别转染鼻咽癌5-8F细胞,Western blot验证转染效果,CCK-8法检测各组细胞生存率,并计算各组紫杉醇药物IC50值;流式细胞术检测紫杉醇作用后鼻咽癌5-8F细胞周期及凋亡率的改变。结果鼻咽癌5-8F细胞EphA2蛋白上调后,紫杉醇药物在亲本细胞组和空白载体对照组中的IC50值分别为(1.4±0.05)nM/L和(1.3±0.06)nM/L,而实验组中的表达为(3.8±0.52)nM/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期结果显示实验组(45.76±3.89)%较亲本细胞组(65.85±2.28)%和对照组(64.52±3.31)%的G0/G1期细胞的比例明显减少,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);而S期细胞的实验组(31.56±1.59)%较亲本细胞组(2 5.7 6±1.8 9)%和对照组(2 4.5 5±3.6 4)%和G2/M期细胞的实验组(2 3.1 0±4.55)%较亲本细胞组(8.39±0.81)%和对照组(10.94±3.27)%的比例则明显增多,两组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);而细胞凋亡率3组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论该研究结果表明EphA2蛋白能通过影响鼻咽癌细胞周期改变而调控其对紫杉醇药物的敏感性。