抗肿瘤药用植物及其内生菌活性代谢产物研究进展

综述近年来药用植物及其内生菌抗肿瘤活性代谢产物的研究成果.近年来国内外研究结果表明具有抗肿瘤活性的药用植物内生菌次生代谢产物主要包含紫杉醇类、鬼臼毒素类、香豆素类及其衍生物,长春碱、喜树碱及细胞松弛素等生物碱以及黄酮类和多糖等.认为从药用植物内生菌中筛选抗肿瘤活性成分有望成为开发抗癌药物的一条新途径.     

药用植物内生真菌产次生代谢产物的研究进展

植物内生真菌是一大类未被充分研究过的新的微生物资源,具有潜在的应用前景。随着对药用植物内生真菌研究的深入,从药用植物内生真菌中寻找新的生物活性成分已成为研究热点。总结近年药用植物内生真菌产生的抗肿瘤、抗菌等活性次生代谢产物最新的研究进展,内生真菌活性成分已成为发现新颖结构化合物及新药物的重要资源。     

半夏内生菌SY-Z5不同发酵方式代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性研究

[目的]通过固体和液体两种方式对实验室保存的半夏内生菌SY-Z5进行发酵,分别提取代谢产物,初步研究其抑菌和抗肿瘤活性。[方法]将固体培养和摇床发酵的产物预处理后,分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,通过抑菌实验和抗肿瘤实验初步检测其提取物活性。[结果]SY-Z5两种发酵方式的代谢产物均具有抑菌和抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯粗提物效果最明显,固体发酵效果好于液体发酵。[结论]内生菌SY-Z5代谢产物具有抑菌和抗肿瘤活性,活性代谢产物主要存在于乙酸乙酯相中,为进一步分离抑菌和抗肿瘤活性物质和新药开发筛选前体化合物奠定基础。     

土茯苓内生芒果球座菌的次级代谢产物及其抗肿瘤活性研究

目的 研究土茯苓内生芒果球座菌Guignardia mangiferae的次级代谢产物及其抗肿瘤活性。方法 采用硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱和制备薄层色谱等色谱技术进行分离纯化,通过现代波谱技术进行结构鉴定;以神经胶质瘤细胞SF-268、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460为供试细胞株,采用SRB法对化合物进行体外抗肿瘤活性研究。结果 从土茯苓内生芒果球座菌的100 L液体发酵提取物中分离得到12个化合物,经波谱数据分析鉴定其中10个化合物,分别为15-hydroxyl tricycloalternarene 5b（1）、guignardiaene D（2）、guignardiaene C（3）、guignardone A（4）、guignardone B（5）、3-(4-甲苯氧基)-丙酸（6）、2, 4-壬二醇（7）、麦角甾酮（8）、酪醇（9）、对羟基苯甲醛（10）。杂合萜类化合物1～5对SF-268细胞具有选择性的抑制作用,化合物6、7对MCF-7细胞具有选择性的抑制作用。结论 化合物6～10均为首次从该属真菌中得到,其中化合物6、7为新的天然产物。     

忽地笑内生菌的分离及发酵产物抑菌活性研究

目的 探讨忽地笑内生菌的分离及发酵产物抑菌活性.方法 从忽地笑鳞茎中分离内生菌,分别进行发酵培养,采用其发酵浓缩液做体外抑菌试验,观察对常见病原菌的抑制作用.结果 从忽地笑鳞茎中分离出10株内生菌,其中真菌L-10对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有不同程度的抑制作用,其抑菌圈直径分别达到15、11 mm.结论 忽地笑内生菌可以产生具有抑菌活性的次生代谢产物,为新型抗菌药物的筛选提供了新的分离途径.     

一株植物内生真菌漆斑菌次级代谢产物的研究

从一株植物内生漆斑菌属Myrothecium sp.真菌固体发酵物的乙酸乙酯提取物中分离得到12个化合物。采用硅胶、Sephadex LH-20和制备高效液相等柱色谱技术进行分离纯化,通过理化性质研究及波谱学手段对单体化合物进行结构鉴定,分别鉴定为3''-羟基疣孢菌素A（1）、疣孢菌素A（2）、乙酰基疣孢菌素L（3）、疣孢菌素J（4）、疣孢菌素K（5）、漆斑菌素A（6）、漆斑菌素D（7）、漆斑菌素H（8）、漆斑菌素J（9）、verrol 4-acetate （10）、（3S, 3aS, 6α, 6aR）-dihydrosporothrioride （11）和4,6-二羟基-1（3H）-异苯并呋喃（12）。其中,化合物1、5、9 ~ 12为首次从漆斑菌属真菌中分离得到,化合物2、3、4、7和8对白色念珠菌有较强的抑制作用,其最低抑菌浓度MIC₅₀分别是0.318、0.218、0.047、0.569和0.558 μg/mL。     

内生菌与药用植物活性成分相关性研究进展

从药用植物中提取分离出的内生菌的数量和种类不断增多,内生菌不仅自身能够产生活性成分,而且可以促进药用植物产生活性成分.就近年来药用植物内生菌与活性成分相关性研究进展及存在的问题做一综述.     

植物内生菌在药物研究中的应用

 【摘要】内生菌是指一类在其部分或全部生活史中存活于健康植物组织内部,而不使宿主植物表现出明显感染症状的微生物。几乎每种植物都有内生菌并且能够产生具有生物活性的天然代谢产物。本文综述了近几年来发现的具有不同生物功能的内生菌代谢产物及具有很大潜力的内生菌微生物转化作用。     

小多孢菌次级代谢产物的研究

目的:研究小多孢菌(Micropolysporasp.)次级代谢产物的化学成分。方法:应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR、IR和MS等方法解析其化学结构。结果:从小多孢菌次级代谢产物中分离到2个化合物,它们的结构分别被鉴定为:17-demethyl-lebrastatin(1)和4,6-二甲氧基-3-(3,5-二甲氧基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)-1-氢-茚-1-酮(2)。结论:化合物1是新化合物。     

一株海洋放线菌次级代谢产物的抗肿瘤活性研究

目的 对一株南海深海海洋沉积物来源放线菌SCSIO 11594分离出的5个天然次级代谢产物进行初步的抗肿瘤活性研究.方法 将5个天然次级代谢产物命名为化合物1~5,通过CCK8细胞毒性试验检测化合物作用于5株肿瘤细胞及1株正常肝脏细胞HL-7702后的效果,通过Graphad prism软件测定其IC50,并与经典抗肿瘤药物顺铂对比.结果 顺铂作用于5株肿瘤细胞的IC50值范围3.75~5.32μmol/L,化合物2作用于5株肿瘤细胞的IC50值范围0.24~0.74μmol/L,对肿瘤细胞的抑制作用是顺铂的10~20倍;化合物4作用于5株肿瘤细胞的IC50值范围0.28~6.93μmol/L,对肿瘤细胞的抑制作用是顺铂的1~10倍;化合物2和4作用于正常肝脏细胞HL-7702的IC50值分别为3.67μmol/L和12.47μmol/L,与作用于肿瘤细胞的IC50值相比,提示具有较好的抗肿瘤选择性.结论 放线菌SCSIO 11594分离出的次级代谢产物2和4具有较好的抗肿瘤活性和选择性,具有潜在的开发前景.     

Experiment study of Swainsonine‘s antineoplastic activity

ED_(50) of Pure Swainsonine (SW) to EMT6 cell strain is 1.2(0.8-1.6)mg/L and the dose of entire lethalis 6.4 mg/L with MTT method. After ig crude extraction of SW to S_(180) sareoma rooted in mouse and EMT_6 model micewith breast carcinoma for 12 d at dose of 16 mg/kg, the inhibitory rates of weight amounts to 49.7% and 49.4% re-spectively (P<0.01).Given crude extraction of SW at 4 mg/kg combined with irradiation at 5 Gy~(60)Co-γ, the inhibi-tory rate of weight of S_(180) amount to 64.5% (P<0.01).It shows that SW has obviously antineoplastic.     

家蝇幼虫淋巴液的抑菌作用及其SDS-PAGE分析

目的 观察针刺诱导家蝇幼虫血淋巴抗菌物质抑菌作用与抗菌分子.方法 室内饲养的家蝇三龄幼虫,经针刺体壁处理后48 h,提取其血淋巴,观察单独使用血淋巴和血淋巴与氨苄青霉素混合对9种应试细菌的抑菌效果,血淋巴与抗真菌药氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果,应用SDS-PAGE分析血淋巴抗菌分子表达.结果 针刺家蝇幼虫后48 h的血淋巴,作用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、黄色小球菌,结果显示:针刺家蝇幼虫后48 h的血淋巴对试验9个标准株细菌,均产生明显抑菌环,经单因素方差分析,显示各抑菌试验组的抑菌效果,皆有显著差异(P＜0.001).其中对黄色小球菌抑菌活力最强.1 μ1氨苄青酶素与7 μ1针刺诱导家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用.针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显协同增强作用.SDS-PAGE分析结果显示:针刺幼虫后发育的成蝇和针刺幼虫血淋巴的电泳条带与未针刺者相比,针刺幼虫后发育的成蝇,在24000～97000范围内表达尤为增强,在12000附近有一条特异性条带.针刺家蝇3龄幼虫血淋巴SDS-PAGE分析显示,在24 000、35000、40 000～96000范围内表达明显增强,其中35 000、12 000条带较为特异.结论 本研究进一步验证了家蝇血淋巴的抑菌活性,发现针刺诱导家蝇幼虫血淋巴对黄色小球菌抑菌活力最强,氨苄青霉素与家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用,针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显增强作用,上述发现在国内外报道较少,本研究结果,为进一步开发这类抗菌物质,提供了实验资料.     

载银硅灰石涂层制备及抗菌性能研究

目的制备载银等离子喷涂的硅灰石涂层,以期获得具有抗菌作用的植入物涂层材料。方法将硅灰石涂层浸入不同浓度（1％、5％、9％）硝酸银溶液中载银24h。经扫描电镜观察涂层表面形貌、配套能谱仪分析表面物质成分、X射线衍射仪测定物相组成及原子吸收光谱仪检测涂层载银量等方法筛选合适的载银工艺。运用所选工艺制备载银涂层,并进行银离子缓释和抑菌环试验。结果随着硝酸银浓度的提高,涂层载银量增加。同时考虑载银量和成本因素,选择5％硝酸银溶液载银工艺进行后续研究。5％硝酸银溶液载银涂层在去离子水中银呈均匀释放50d以上;抑菌环持续40d以上,其最大直径为（6．00&#177;0．25）mm,与未载银原始硅灰石涂层的抑菌环最大直径（0．23&#177;0．34）mm比较,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论硅灰石与硝酸银发生化学反应生成硅酸银,载银量随硝酸银浓度提高而增加。5％硝酸银溶液载银工艺所制备的载银硅灰石涂层具有良好的抗菌性能。     

松香基脲类衍生物的合成及其抗菌活性研究

目的：设计合成了一系列松香基脲类衍生物,初步研究了其抗菌活性。方法：以脱氢松香酸为起始原料,酰氯化后,经Curtius重排得到松香基异氰酸酯,然后与芳香胺反应得到松香基脲。结果：得到5个松香基脲类化合物,经IR、1H-NMR、元素分析等确证其结构。结论：初步药理实验表明,合成产物对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌具有良好的抗菌活性。     

人内皮抑素基因的克隆及其表达产物抗肿瘤活性

目的：克隆人内皮抑素（endostatin)基因并对其表达产物进行抗肿瘤活性研究。方法：从人肝cDNA文库中获得人endostatin基因，构建人载体PET15b，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，将表达产物（rhEndostatin)纯化后应用于小鼠Lewis肺癌治疗，并通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验。观察rhEndostatin的血管抑制作用。结果：rhEndostatin可抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成，明显抑制小鼠Lewis肺癌的生长。结论：rhEndostatin具有抗肿瘤活性。且此活性可能与其抑制肿瘤新生血管形成有关。     

诱导前后美洲大蠊血淋巴抗菌活性的研究

目的 研究美洲大蠊经大肠杆菌诱导后其血淋巴抗菌活性的变化.方法 将100只同龄期美洲大蠊成虫随机分为诱导组和未诱导组,诱导组虫体从腹部注射灭活的大肠杆菌菌悬液5 μL (3×1012个/L),未诱导组不做任何处理.24 h后分别采集两组美洲大蠊的血淋巴,并采用Hultmark比浊法测定各自血淋巴的抗菌活力,连续测定6 d,比较两组差异.结果 诱导组美洲大蠊血淋巴的抗菌活性明显强于未诱导组,且在第3天达到峰值. 结论美洲大蠊经大肠杆菌诱导后血淋巴的抗菌活性明显增强.     

普卢利沙星对呼吸道和泌尿道致病菌的体外抗菌活性研究

目的:研究普卢利沙星对呼吸道和泌尿道致病菌的体外抗菌活性.方法:采用琼脂二倍稀释法,测定普卢利沙星与左氧氟沙星对221株呼吸道和泌尿道致病菌的最低抑菌浓度(MIC).结果:普卢利沙星对所有测试菌的MIC5o、MICoo和敏感率范围分别为0.03～1μg/ml、0.5～4μg/ml及67%～100%,左氧氟沙星分别为0.125～2μg/ml、0.5～8μg/ml及61%～100%.普卢利沙星对大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌和卡他莫拉菌的MIC90是左氧氟沙星的MIC90的1/2;对肺炎克雷伯菌、变形杆菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌和粪肠球菌的MIC90与左氧氟沙星的MIC90相等;对流感嗜血杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC90是左氧氟沙星的MIC90的2倍.结论:普卢利沙星对呼吸道和泌尿道致病菌均具有抗菌活性.     

3种仙人掌植物内生真菌抑菌活性的研究

目的从墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的肉质茎中分离内生真菌,并进行初步鉴定及活性筛选。方法选择30种病原微生物作为指示菌进行抑菌试验。结果从3种仙人掌的茎中分离出111株内生真菌,其中49株内生真菌对一种或多种病原微生物有抑制作用,来自墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的抗菌活性菌株比例分别为48.4%、42.9%及42.3%,其中平板抑菌直径大于15mm的高抗菌株有20株。抗菌活性菌株主要分布于青霉属、曲霉属等19个属中。结论首次从仙人掌中分离和鉴定出111株内生真菌,仙人掌内生真菌中广泛分布着活性菌株。     

泰山黄精内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法 采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果 从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌,分属于7个属,分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.,占总菌株的31.3%,其次是不产孢真菌Sterile mycelia（28.1%）和链格孢属Alternaria sp.（21.9%）。各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,根中内生真菌的分离率最高,茎和叶中次之,果实中最少。共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性,其中8株具有广谱抗耐药菌活性。对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定,将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune。结论 泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌,为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径。