胂酸基乙酸与10-羟基喜树碱对肝癌细胞 SMMC-7721生长的协同抑制作用

目的:了解胂酸基乙酸(ASAC)与10-羟基喜树碱(10-HCPT)对肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的协同抑制效果.方法:两药组合和单药以不同浓度分别作用于生长良好的SMMC-7721细胞,分别在第24h、48h和72h终止作用,以MTT实验测定每组药物对SMMC-7721细胞的抑制率大小.结果:协同作用组比单药组的抑制效果好.在第48h和72h协同组有显著性差异(P<0.05).结论:ASAC与10-HCPT这两种促癌细胞凋亡的药物对SMMC-7721细胞生长具有周期协同抑制作用.     

抑制肝癌SMMC-7721细胞TWIST基因表达对细胞侵袭能力的影响

目的:探讨抑制肝癌SMMC-7721细胞中TWIST基因表达对其侵袭能力的影响。方法:将靶向TWIST基因的siRNA序列和阴性对照siRNA序列转染入人肝癌SMMC-7721细胞,同时以未转染细胞作空白对照。于转染后48h,采用半定量RT-PCR和Western blot法检测各组细胞TWIST、E-cadherin mRNA和蛋白的表达,Boyden侵袭小室检测细胞体外侵袭能力的变化。结果:3组TWIST、E-cadherin mRNA和蛋白表达,以及穿膜细胞数差异有统计学意义(F=32.023、38.732和24.034、49.083、44.387,P<0.001);TWIST siRNA组TWIST mRNA和蛋白的表达低于空白和阴性对照组,E-cadherin mRNA和蛋白的表达高于空白和阴性对照组,TWIST siRNA组穿膜细胞数较空白对照组和阴性对照组下降(P<0.05)。结论:抑制肝癌SMMC-7721细胞TWIST基因表达可以抑制肝癌细胞上皮间质转化的发生,同时可有效降低肝癌细胞的侵袭转移能力。     

表阿霉素对人肝癌SMMC-7721细胞bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨表阿霉素诱导SMMC-7721细胞凋亡的可能分子机制。方法 采用流式细胞仪间接免疫荧光法检测表阿霉素作用于人肝癌SMMC-7721细胞后bcl-2蛋白的表达。结果 随着表阿霉素的浓度增加，作用于SMMC-7721细胞时间的延长，细胞bcl-2蛋白的表达逐渐降低，SMMC-7721细胞bcl-2蛋白的表达与表阿霉素作用浓度EY时间呈负相关。结论 Bcl-2基因表达下调可能是表阿霉素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的重要机制之一。     

微波和毫米波抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长的研究

目的 探讨微波和毫米波联合应用对于人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用。方法实验分为对照组、微波组、毫米波组及微波联合毫米波组，应用MTT比色法检测各组的OD值，计算其抑制率。结果微波或毫米波对人肝癌细胞SMMC-7721均有生长抑制作用，二者联合应用抑制作用更强。结论微波联合毫米波对于人肝癌细胞SMMC-7721有明显的协同抑制效应，这些结果将为临床上肝癌等肿瘤的辅助治疗提供一定的实验基础。     

靶向STAT5的siRNA诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

目的 采用RNA干扰技术阻断STAT5基因的表达,观察其对人肝癌SMMC-7721凋亡的影响.方法 构建3种靶向STAT5的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,采用LipofectamineTM2000转染肝癌细胞SMMC-7721;分别采用半定量RT-PCR、Western blot技术检测转染前后SMMC-7721细胞STAT5 mRNA和蛋白质表达的变化;采用透射电镜技术观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 3条靶向STATS的序列特异性的siRNA可以有效地抑制SMMC-7721细胞STATS mRNA和蛋白质表达,STAT5 mRNA表达抑制率分别为70.43%、43.02%、45.07%,STAT5蛋白表达抑制率分别为67.45%、37.36%、41.86%;转染靶向STAT5的siRNA真核表达载体48 h后出现凋亡细胞的典型形态学变化,并诱导25.61%的SMMC-7721细胞发生凋亡.结论 靶向STAT5的siRNA真核表达载体可以有效、特异地阻断SMMC-7721细胞STAT5基因的表达,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,STAT5 siRNA在人肝癌的基因治疗中可能具有潜在的应用价值.     

人肝癌SMMC-7721细胞培养体会

根据长期培养人肝癌SMMC-7721细胞的经验,总结出了一套培养细胞的方法,使得复苏细胞成活率大为提高,为进一步的实验研究奠定了基础。     

HCV核心蛋白对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响

目的:观察HCV核心蛋白对低侵袭性人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响。方法:将HCV核心蛋白的原核表达质粒pcDNA3.0-C-EGFP转染SMMC-7721细胞,以空质粒pcDNA3.0(-)转染的细胞作对照。分别采用RT-PCR、Western blot和ELISA法检测转染细胞HCV核心蛋白mRNA、蛋白及培养上清中蛋白的表达水平;进行纤维连接蛋白黏附实验、侵袭实验及运动实验,MTT法观察细胞增殖情况。结果:重组质粒pcDNA3.0-C-EGFP转染的SMMC-7721细胞HCV核心蛋白mRNA、蛋白及培养上清中蛋白的表达水平,细胞黏附率,侵袭实验及运动实验穿膜细胞数均高于对照(t=8.141、5.762、19.931、2.961、4.112和4.213,P均<0.05)。pcDNA3.0-C-EGFP转染的SMMC-7721细胞增殖率也较对照明显增加(P<0.05)。结论:HCV核心蛋白外源基因可促进SMMC-7721细胞系的增殖。     

槲寄生碱对人肝癌细胞SMMC-7721生长抑制作用的研究

目的:研究槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用.方法:取对数生长期的人肝癌SMMC-7721细胞接种96孔板,待细胞生长良好后加入含不同浓度槲寄生碱培养液,取3个时间点(作用24h、48h、72h)采用MTT比色法观察槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用,抑制率(%)=(1-实验组A值/对照孔A值)×100%.结果:0.1mg/mL和0.2mg/mL浓度组在24h、48h、72h均表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,且作用强于5-Fu.0.05mg/mL组在3个时间点也表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用,但作用弱于5-Fu.0.025mg/mL组在作用48h后才表现出对SMMC-7721细胞生长抑制作用.结论:槲寄生碱对人肝癌SMMC-7721细胞生长有显著的抑制作用,且呈剂量和时间依赖方式.     

阿司匹林对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨阿司匹林对肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖的影响。方法:SMMC-7721细胞体外培养,阿司匹林处理细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞增殖程度,Tunel法检测细胞凋亡指数。结果:不同浓度的阿司匹林能明显抑制细胞增殖,且抑制程度呈现剂量和时间依赖关系。细胞凋亡指数也随阿司匹林浓度的增加而增加。结论:阿司匹林对SMMC-7721的增殖具有抑制作用,抑制程度与阿司匹林的浓度和作用时间呈正相关,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡来抑制细胞的增殖。     

姜黄素对人肝癌细胞SMMC-7721生长抑制和诱导凋亡的初步研究

目的:观察姜黄素对人肝癌细胞SM MC - 7721生长抑制和诱导凋亡的影响.方法:以不同浓度(10μmol/L、30μmoL/L、90μmol/L)的姜黄素作用于体外培养的SMMC - 7721细胞48h,MTT法检测姜黄素对细胞的生长抑制率;基于AnnexinV - FITC/PI双染的流式细胞方法检测不同浓度姜黄...     

山豆根水提物对体外培养人肝癌细胞增殖及代谢的影响

目的:研究中药山豆根(SSCC)提取物对体外培养的人肝癌细胞的抑癌活性。方法:SSCC经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得SSCC提取物。人肝癌SMMC-7721细胞经SSCC提取物处理不同时间后,以MTT法测SSCC提取物对人肝癌细胞线粒体代谢活性的影响,以细胞记数法观察了其对细胞增殖的影响。结果:1经SSCC提取物处理48h,其A570光吸收降为对照组的62.1%,72h为9.64%;2SSCC提取物处理7d后,人肝癌细胞数明显低于对照组;3经SSCC提取物处理24h后,在更换为正常培养基恢复培养过程中,细胞数呈现缓慢增长;4经SSCC提取物处理24h后其有丝分裂指数为对照组的50.6%。结论:中药SSCC提取物能抑制体外培养的人肝癌细胞的增殖,降低线粒体代谢活性。     

青蒿油多相脂质体对SMMC-7721和NB4细胞株的抑制作用

目的：研究青蒿油多相脂质体对不同肿瘤细胞株的抑制作用。方法：以不同药物浓度的青蒿油多相脂质体作用于SMMC-7721及NB4细胞48h,阿霉素为阳性对照药,采用MTT法检测该制剂对两种细胞株的生长抑制作用。结果：青蒿油多相脂质体对SMMC-7721细胞的半抑制浓度IC50为69.125μg.mL-1,浓度在157.500μg.mL-1时,抑制率高达94.73﹪;对NB4细胞的半抑制浓度IC50为0.098μg.mL-1,浓度在0.315μg.mL-1时,抑制率达到84.96﹪。结论：青蒿油多相脂质体制剂对SMMC-7721和NB4细胞株均具有明显的抑制作用,多相脂质体新剂型对青蒿油抗SMMC-7721细胞有一定的增敏效果。     

柴胡提取物对人肝癌细胞和小鼠S-180肉瘤的抑制作用

目的 :研究柴胡水提物对体外培养的人肝癌 SMMC-772 1细胞线粒体代谢活性、细胞增殖及小鼠移植性 S-1 80实体瘤的影响。方法 :中药柴胡 ( BCDC)经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得柴胡提取物。人肝癌 SMMC-772 1细胞经不同浓度柴胡提取物处理不同时间后 ,检测了各实验组和对照组细胞的有丝分裂指数、细胞增殖及线粒体活性几方面的变化。S-1 80肉瘤小鼠连续 9d腹腔注射 3 3 .3 mg/ kg体重 BCDC提取物 ,停药 1 5d后 ,杀死小鼠称量瘤重。结果 :1经 3 55mg/ L BCDC提取物处理人肝癌 SMMC-772 1细胞 2 4 h,其线粒体活性为对照组的 50 .2 6% ,处理 72 h为 2 4 .82 %。2以 3 55mg/ L BCDC提取物处理 7d中 ,人肝癌细胞数分别是血清对照组( FCS)的为 57.5% ,4 5.88% ,3 7.0 6% ,2 8.3 7% ,2 0 .90 % ,1 2 .89% ,1 4.1 8% ;无血清对照组 ( NON)的 65.0 9% ,62 .2 4 % ,56.99% ,4 9.0 8% ,4 0 .78% ,2 6.78% ,2 8.4 1 %。 3经 BCDC提取物处理 2 4 h后 ,即使更换正常培养基 ,人肝癌细胞数在 96h的恢复培养中仍低于处理前的细胞数。 4有丝分裂指数实验组为 0 .3 0 ,对照组分别为 5.3和5.4 ( P<0 .0 0 1 )。 5BCDC提取物对小鼠 S-1 80实体瘤抑制率为 87.2 1 %。     

视黄酸和硒对SMMC-7721肿瘤细胞的协同抑制作用

用 SMMC-7721人肝癌细胞株,经视黄酸(RA)、硒(Se)、RA+Se 的不同处理,发现1×10~(-6)mol/LRA 和2.5×10~(-(6))mol/LSe 的联合对细胞株生长有明显的抑制作用,生长率为40.1%;而单独应用 Se 或 RA,生长率分别为67.4%和65.2%.3~H-TdR 掺入试验也表明,掺入率由单独作用的 Se86.1%和 RA 87.5%下降到74%.瑞氏染色发现联合抑制组细胞有重分化的迹象。本文提示低浓度Se 和 RA 的联合对肿瘤细胞有显著的协同抑制作用。     

柴胡皂甙D对SMMC-7721细胞株体外分化的研究

摘要：目的　观察柴胡皂甙D（SSD）对SMMC-7721细胞的体外分化诱导作用,并初步探讨其作用机制。方法　通过观察细胞毒作用、平均核面积、细胞周期改变和P38MAPK、NF-κB信号转导分子的表达变化初步揭示其作用机制。结果　SSD具有明显的细胞抑制作用且,呈一定的量效关系;SSD2.5 mg/L、5 mg/L处理组能明显缩小平均核面积（p<0.05）;能使细胞周期阻滞于G0/G1期（p<0.005）;能明显上调P38MAP kinase表达（p<0.05）,显著抑制NF－κB的核内表达 (P<0.05)。结论　SSD对SMMC－7721细胞具有显著诱导分化作用;并且将SMMC-7721的细胞周期明显阻滞于G0/G1期,从而使细胞增殖活性降低,进而趋于分化或凋亡;其作用机制可能是通过上调 P38MAPK,下调NF－κB表达有关。     

沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖影响

目的 观察沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖的影响.方法 分别应用浓度为3.125、6.250、 12.500、 25.000、 50.000、 100.000及200.000 mg/L的沙利度胺溶液作用于SMMC-7721细胞,同时以等体积的RPMI 1640培养液为空白对照组,MTT法测定各组细胞增殖抑制率.结果 沙利度胺浓度从3.125 mg/L依次增至200.000 mg/L,其对SMMC-7721细胞增殖抑制率从11.70%依次增加至34.21%.25.000 mg/L以上浓度沙利度胺组的吸光度值与空白对照组比较差异有显著性(F=3.093,q=4.02～5.37,P<0.05、0.01).结论 沙利度胺能抑制SMMC-7721细胞的生长,且随着药物浓度的增加,细胞抑制作用逐渐增强.     

Ursolic acid induces human hepatoma cell line SMMC-7721 apoptosis via p53-dependent pathway

Background Ursolic acid （UA） is a ubiquitous molecule in the plant kingdom with specific anticancer effects that have been shown in vitro and in vivo. Although UA can inhibit the proliferation of liver cancer cells and induce apoptosis of many types of tumor cells, the molecular mechanism of its anti-hepatoma activity is still not well defined. The objective of this study was to investigate the inhibitory effect and mechanisms of UA on the human hepatoma cell line SMMC-7721. Methods After treatment with UA, the growth inhibition of SMMC-7721 cells was assessed by MTT assay. Cells were also evaluated by flow cytometric analysis, Wright-Giemasa staining, Hoechst 33258 staining and transmission electron microscope after they were induced by UA. DNA microarray technology was used to investigate the gene expression pattern of SMMC-7721 cells exposed to UA 40 pmol/L. The molecular mechanism of cells death was analyzed by real-time RT-PCR and Western blotting. Results The proliferation of SMMC-7721 cells was significantly inhibited in a dose- and time-dependent manner after UA treatment. UA induced cell cycle arrest and apoptosis. The DNA microarray analysis indicated that 64 genes were found to be markedly up- or down-expressed, including GDF15, SOD2, ATF3, and fos. The result of Western blotting showed the apoptotic proteins p53 and Bax were up-regulated while the anti-apoptotic protein Bcl-2 was down-regulated. Real-time RT-PCR confirmed UA could up-regulate the mRNA expressions of GDF15, SOD2, ATF3 and down-regulate the mRAN expression of fos. Meanwhile these effects were partly blocked by pretreatment with the p53 inhibitor Pft-a. Conclusion Activation of the p53 pathway is involved in UA inhibition of SMMC-7721 human hepatocellular carcinoma cell growth and induction of apoptosis.     

人体肝癌细胞系SMMC-7721的高分辨染色体研究

应用高分辨染色体技术,分析了人体肝癌细胞系SMMC-7721染色体核型。分析表明SMMC-7721细胞系核型染色体众数为54～73条,各核型中正常染色体55～65条,异常染色体7～15条,其中可识别其结构的标记染色体13条,包括缺失、易位及等臂染色体。在每个核型中X染色体均为2N,Y染色体为N。这些染色体的数目异常与结构畸变,对认识肝细胞的转化、恶变提供了细胞遗传学基础。