神经干细胞对脊髓前角运动神经元保护作用的实验研究

目的观察臂丛根性撕脱伤后神经干细胞脊髓内移植对前角运动神经元的保护作用。方法取孕龄15～18d胎鼠脑组织，分离获得神经干细胞，在体外培养、扩增，并用5溴-2脱氧尿苷(BrdU)标记。取Wistar大鼠72只，随机分成实验组与对照组。先将C5～T1神经根撕脱，实验组把体外培养的神经干细胞移植于C5～T1脊髓节段前角附近，而对照组则用缓冲液替代神经干细胞。术后1、2、4、6、8、12周取脊髓标本进行组织学与免疫组化染色观察。结果臂丛根性撕脱伤后脊髓前角运动神经元数目明显减少，到术后12周时，对照组运动神经元减少达80．3％，实验组达63．7％。并且，各时间点实验组运动神经元的存活率均高于对照组。实验组脊髓前角内可见散在但仍保持未分化特征的神经干细胞。结论神经干细胞在植入臂丛根性撕脱伤的脊髓后能存活，并能明显减少前角运动神经元的继发性死亡。     

大鼠臂丛神经根性回植后脊髓病理改变和轴突再生

目的 探讨臂丛神经根性撕脱后神经根再植入脊髓的可行性。方法 采用大鼠颈5-7，神经根性撕脱伤实验动物模型，伤后将C5-7，神经根即刻植入脊髓。分别于神经根植入后3周、3个月、6个月取材。应用组织病理活检、免疫组化技术及神经示踪技术，对神经中枢及吻合口下段神经干检查。观察脊髓前角运动神经元和神经元内尼氏体数目和形态的改变；周围神经纤维再生数目、距离，轴索和髓鞘发育情况。结果 臂丛神经根性撕脱伤对动物生长和存活有较大的影响。脊髓前角运动神经元数目在3个月内持续减少，3个月后趋于稳定，6个月时脊髓前角大型运动细胞坏死比率在40％左右，残存的神经元多为受损的神经元，尼氏体减少或消失。脊髓前角运动神经元再生轴突可重新生长入周围神经干，再生神经纤维轴索较细，大部分髓鞘发育不完全，轴突再生距离较短，肌皮神经6个月内无神经纤维再生。结论 臂丛神经根性撕脱伤，神经根回植入脊髓后，脊髓前角运动神经元坏死比率为40％左右，残存神经元多为受损神经元，再生神经纤维表现为动力不足和发育不全，对终末器官功能恢复没有意义。     

细胞外ATP对臂丛神经根性撕脱伤后脊髓运动神经元保护的实验研究

目的 观察细胞外ATP对臂丛神经根性撕脱伤所致脊髓前角运动神经元损伤的保护作用. 方法 Wistar大鼠36只,随机分为两组:单纯神经根撕脱组和神经根撕脱加ATP治疗组.行左侧臂丛神经根性撕脱术,术后实验组腹腔注射ATP(2 mg/kg)0.4 nd,对照组腹腔注射生理盐水0.4 ml,均为1次/日,连续应用ATP或生理盐水2周.术后2周、4周和6周后取材,处死动物后取C5～C8脊髓分别行一氧化氮合酶(NOS)、神经丝蛋白(NF-200)免疫组织化学染色. 结果 术后2、4和6周,实验组脊髓前角运动神经元存活率为80.48%、73.55%、53.43%,对照组为68.90%、63.58%、37.72%,实验组与对照组比较脊髓前角运动神经元死亡率分别降低了11.58%、9.87%和15.71%(P<0.01);实验组脊髓前角运动神经元中NOS阳性率为17.85%、40.20%、18.03%,对照组为25.53%、53.88%、25.58%,实验组与对照组比较.脊髓前角运动神经元中NOS阳性率分别下降了7.68%(P<0.01)、13.68%和7.55%(P<0.05);实验组脊髓前角运动神经元的NF-200阳性细胞数均高于对照组,两者比较差异有统计学意义. 结论 ATP对臂丛神经根性撕脱伤后脊髓前角运动神经元具有保护作用.     

神经根修复时间对脊髓前角运动神经元存活的影响

目的评价神经根修复时间对脊髓前角运动神经元存活的影响。方法采用大鼠颈。神经根性撕脱伤和椎孔外切断实验动物模型，根据动物神经根损伤类型和损伤后修复时间分为A、B、C、D四组，每组16只。A、C组分别将撕脱与切断的神经根即刻回植入脊髓和于椎孔外直接吻合，B、D组将撕脱和椎孔外切断的神经根旷置3周后再重复上述手术。分别于神经根撕脱和椎孔外切断术后3周、3个月、6个月取材。应用组织病理活检、免疫组化技术及神经示踪技术，对神经中枢及吻合口下段神经干检查，观察脊髓病理改变和轴突再生情况，进行A、B组和C、D组间对比。结果臂丛神经根性损伤即刻修复组脊髓前角运动神经元和尼氏体数目、形态、减少程度及周围再生神经纤维数目、发育程度均优于损伤后3周修复组。结论神经根早期修复对脊髓前角运动神经元有明确的保护作用，对外周神经再生有促进作用。     

臂丛损伤神经干细胞脊髓前角移植后分化情况及对运动神经元的保护作用

目的观察臂丛根性撕脱伤后将脊髓源性神经干细胞(neuralstemcell,NSC)移植于脊髓前角后的存活、分化情况及对脊髓前角受损运动神经元的保护作用。方法取新生鼠脊髓,分离获得脊髓源性神经干细胞,体外培养、扩增、鉴定、5溴2-脱氧尿苷(BrdU)标记。取SD大鼠60只,随机分成实验组、对照组和单纯组。从后路制备C5~C7臂丛神经根性撕脱伤动物模型。实验组移植神经干细胞于C6脊髓前角,对照组移植灭活神经干细胞,单纯组不作移植。术后1、2、4、8、12周取脊髓标本进行组织学与免疫组化染色观察。结果神经干细胞移植入脊髓后能存活、分化;臂丛根性撕脱伤后脊髓前角运动神经元数目明显减少;实验组神经干细胞移植后2、4、8、12周各个时间点运动神经元的存活率均高于对照组和单纯组。结论臂丛根性撕脱伤脊髓前角神经干细胞移植后能存活并分化为神经元及星型胶质细胞,脊髓源性神经干细胞移植能明显减少前角运动神经元的继发性死亡,对脊髓前角受损运动神经元有保护作用。     

条件性损伤对脊神经根撕脱伤后脊髓运动神经元一氧化氮合 …

目的 探索条件性损伤对脊神经根撕脱后脊髓前角运动神经元一氧化合酶（ＮＯＳ）表达及神经细胞死亡的影响。方法 雌性ＳＤ大鼠７８只,分为两组,实验组在臂丛神经干压榨术后１周行神经根撕脱术;对照组仅施行神经根撕脱术,术后３ｄ～８周于不同时间点处死动物,取Ｃ５～Ｃ６节段脊髓,行ＮＡＤＰＨ－ｄ组化染色,中性红复染。结果 单纯神经根撕脱组术后第５ｄ脊髓前角运动神经元开始表达ＮＯＳ,至术后２周ＮＯＳ阳性神经元数达     

抗氧化剂对脊神经根撕脱伤后脊髓运动神经元的影响

目的 观察抗氧化剂对脊神经根撕脱后脊髓前角运动神经元NOS、c-jun表达和神经元死亡的保护作用。方法 成年Sprague-Dawley雌性大鼠20骨只，随机分为；单纯神经根撕脱组和神经根撕脱加抗氧化剂治疗组。在手术显微镜下进行脊髓C6-C8节段神经根撕脱术，术后治疗组每天给予腹腔注射0.5%抗氧化剂（TA9902）水溶液1ml，对照组仅腹腔注射等量生理盐水，术后2组均饲养3周和6周后处死动物并分别行c-jun免疫组织化学染色和NADPH-d黄递酶染色。结果 术后3周和6周抗氧化剂给药组的NOS阳性率均明显低于对照组；给药组的神经细胞存活率分别为76.25%和39.16%，术后3周与对照组比较，差异有显著性，而术后6周，其神经细胞存活率与对照组比较差异无显著性。给药组脊髓前角运动神经元的c-jun阳性细胞数均高于对照组，两者之间的差异有显著性。结论 抗氧化剂具有抑制神经元NOS表达的作用。并对损伤的神经元具有保护效应。但该药物的神经元保护作用主要在损伤后早期有效。     

颈椎后纵韧带骨化术后C5神经根麻痹

目的探讨颈椎后纵韧带骨化患者后路减压术后发生C5神经根麻痹的临床特点、病理机制及其危险因素。方法2000年1月至2005年8月，采用后路椎板切除减压及侧块钉棒（板）系统固定治疗颈椎后纵韧带骨化患者49例，男35例，女14例；年龄39-75岁，平均53．7岁。在术后6-64h，9例患者发生C5神经根麻痹，表现为患肢三角肌和（或）肱二头肌肌力下降，伴有肩部及上臂外侧感觉减退或消失。比较麻痹患者与非麻痹患者侧位X线片上颈椎前凸角度的变化、C4-5水平CT横断面上椎管狭窄率和MRI T2加权像脊髓高信号区改变的差异。结果9例C5神经根麻痹患者均接受保守治疗，治疗措施包括功能锻炼、口服药物及高压氧治疗。随访1-4年，平均2．2年，9例患者肌力均恢复至3-4级。麻痹患者颈椎曲度矫正值（12．5°±3．0°）大于非麻痹患者（1．9°±1．1°），差异有统计学意义（P=0．04）；麻痹患者椎管狭窄率（62．6％±6．8％）高于非麻痹患者（35．1％±5．4％），但差异无统计学意义（P=0．12）；麻痹患者术后仅有3例脊髓高信号区范围扩大而超过原椎间隙水平，与非麻痹患者脊髓高信号区改变的比例差异无统计学意义（P=0．32）。结论C5神经根麻痹在颈椎后纵韧带骨化患者中具有较高发生率，后路手术中应适度矫正颈椎前凸角度。     

臂丛根性损伤脊髓前角α运动神经无数目变化的实验研究

以Sprague-Dawly大鼠为研究对象，设计臂丛根性撕脱伤的实验模型，研究臂丛根性撕脱后脊髓前角α运动神经元数目变化。实验结果表明：臂丛根性撕脱伤后脊髓前角α运动神经元死亡23．7％。     

Nogo抗体治疗脊髓损伤的实验研究

目的探讨Nogo抗体应用于脊髓损伤动物模型中的疗效。方法压迫法制成Wistar大鼠T10脊髓损伤模型共40例，随机分为两组，实验组采用Nogo抗体治疗，对照组注入生理盐水。术后第1天及4、8、12周，对两组动物的双后肢进行躯体感觉诱发电位（somatosensory evoked potentials，SEP）和运动诱发电位（motor evoked potentials，MEP）检查，记录N1及D波潜伏期和波幅；术后第1天及2、4、6、8、10、12周对动物进行Basso Beatlie Bresnahan（BBB）运动功能评分。术后12周处死动物，取出脊髓组织，冷冻切片后进行HE染色和免疫组化染色，观察神经元中丝改变；神经纤维免疫荧光染色观察神经纤维再生情况，并测量染色阳性面积，综合评估脊髓损伤后功能恢复的程度。结果术后第1天及4、8、12周，实验组SEP-N1潜伏期分别为（38．51±0．70）ms、（37．54±0．47）ms、（35．43±0．30）ms、（34．88±0．27）ms，对照组为（38．76±0．33）ms、（38．55±0．49）ms、（36．61±0．38）ms、（36．06±0．20）ms，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组SEP-N1波幅及MEP-D潜伏期和波幅、BBB评分的差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验组神经纤维免疫荧光染色阳性面积高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），实验组的疗效优于对照组。结论Nogo抗体治疗脊髓损伤能促进神经元的再生，恢复脊髓功能。Nogo抗体的获取比较方便，技术操作简便易行，为其真正应用于临床奠定良好的基础。     

Axon regeneration of spinal motoneurons following a lesion at the cord-ventral root interface

Those insults to the spinal cord which occur when ventral or dorsal roots are avulsed from the surface of the cord have been considered unfavourable with regard to both survival and axon regeneration of lesioned neurons. In this review, we describe the development of a surgical procedure aiming at a restoration of motor function after ventral root avulsion lesions. This development includes a series of investigations in animals, where an unexpected capacity for cell survival and axon regeneration of motoneurons after a cut lesion in the spinal cord was demonstrated and analyzed in great detail. Based on these findings, a surgical technique was tested, where avulsed ventral roots were replanted into the cord. After confirmation that such implanted roots could serve as a conduit for outgrowing motor axons in animals, the technique has been evaluated in a limited number of human cases of root avulsion lesions. We conclude that surgical intervention may indeed lead to return of motor function also in human cases of ventral root avulsion lesions. Interestingly, the procedure also seems to have an attenuating effect on the pain that develops in cases with a combined dorsal root avulsion. Lastly, we conclude that the cut lesion in the ventral part of the spinal cord, followed by axon regeneration in motoneurons may serve as a model for axon regeneration in the central nervous system.     

Lumbosacral intersegmental epispinal axons and ectopic ventral nerve rootlets

An epispinal system of motor axons virtually covers the ventral and lateral funiculi of the human conus medullaris between the L-2 and S-2 levels. These nerve fibers apparently arise from motor cells of the ventral horn nuclei and join spinal nerve roots caudal to their level of origin. In all observed spinal cords, many of these axons converged at the cord surface and formed an irregular group of ectopic rootlets that could be visually traced to join conventional spinal nerve roots at one to several segments inferior to their original segmental level; occasional rootlets joined a dorsal nerve root. As almost all previous reports of nerve root interconnections involved only the dorsal roots and have been cited to explain a lack of an absolute segmental sensory nerve distribution, it is believed that these intersegmental motor fibers may similarly explain a more diffuse efferent distribution than has previously been suspected.     

Experimental studies on surgical treatment of avulsed spinal nerve roots in brachial plexus injury.

This review summarises studies aiming at a surgical treatment of spinal nerve root avulsions from the spinal cord in brachial plexus lesions. After dorsal root injury, regrowth of nerve fibres into the spinal cord occurs only in the immature animal. After ventral root avulsion and subsequent implantation into the spinal cord, neuroanatomical and neurophysiological data show that motoneurons are capable of producing new axons which enter the implanted root. Intra-neuronal physiological experiments demonstrate that new axons can conduct action potentials and elicit muscle responses. The neurons are reconnected in segmental spinal cord activity and respond to impulses in sensory nerve fibres. In primate experiments, implantation of avulsed ventral roots in the brachial plexus resulted in functional restitution. These studies indicate the possibility of surgical treatment of ventral root avulsion injuries in brachial plexus lesions in humans.     

臂丛神经根性撕脱伤前根椎管内植入手术入路探讨

目的通过对臂丛神经根部及椎管内结构的显微外科解剖学研究,寻找臂丛神经前根再植入脊髓的最佳手术入路。方法在成人19例38侧颈胸段尸体标本上,显露臂丛神经并追踪至椎间孔,切除椎弓,切开硬脊膜,暴露脊髓及臂丛神经根,对臂丛神经根走行、长度及周围相关骨性结构,各脊髓节段与对应椎间盘相对位置和椎动脉与臂丛神经的关系进行观测。结果脊髓节段与椎间盘的对应关系为：C_(5-7)脊髓节段对应C_(3-4)、C_(4-5)、C_(5-6)椎间盘,C_8、T_1脊髓节段对应C_6、C_7椎体,根据解剖学结果寻找出侧前方、椎间孔扩大侧方、侧后方、侧-后方联合四条可行的手术入路。结论侧前方及侧方入路是臂从神经前根再植入脊髓的最佳入路,侧后方及侧-后方联合入路再植入脊髓的位点差,但其难度和危险小。     

Pathology of the peripheral nervous system

This review deals with papers on important topics in peripheral nerve surgery. Some new diagnostic tools and microsurgical procedures are brought to the attention of neurosurgeons. The first four papers are related to new surgical strategies in treating brachial plexus injury (BPI), particularly root avulsion. Concepts based on experimental studies are applied to clinical practice. Re-establishment of the continuity of interrupted spinal roots or reimplantation of the avulsed spinal roots into the spinal cord are attempted. The authors demonstrate how computed tomography (CT) myelography can be used to plan surgical treatment correctly. The use of reinnervated free-muscle transfer after complete brachial plexus C5-T1 root avulsion is described and critically evaluated. The results obtained after repair of interrupted spinal roots or reimplantation of avulsed spinal roots into the spinal cord are not as clear as described by the authors. Further experimental studies and surgical outcomes are necessary before accepting the efficacy of such surgical procedures in BPI. Reinnervated free-muscle transfer appears to be a promising method for treating such severe lesions. The fifth paper is a case report in which the trapezius branch of the spinal accessory nerve was neurotized with the dorsal branch of the third cervical nerve. This procedure was performed after an injury to the spinal accessory nerve in the neck. The proximal stump of the spinal accessory nerve was available only intracranially. Using this procedure, the risk related to an intracranial approach to the spinal accessory nerve is avoided. A review of one case of primitive neuroectodermal malignant tumor of the median nerve is used to discuss some controversies related to the treatment of malignant tumors involving peripheral nerves.     

补阳还五汤促进周围神经损伤后神经元存活的实验研究

目的 研究补阳还五汤对周围神经损伤后脊髓前角运动神经元和脊神经节感觉神经元存活的影响。方法 成年SD大鼠20只，在右侧梨状肌下缘0.5cm处切断坐骨神经，随机分为两组，对照组以生理盐水灌胃，实验组以补阳还五汤灌胃，4W后观察相应节段运动神经元和感觉神经元存活率、神经元胞体直径和面积。结果 4W后相应节段脊髓前角运动神经元存活率：对照组为59．87％，实验组为69．22％（P＜0．01）；脊神经节感觉神经元存活率：对照组为70．99％，实验组为79．13％（P＜0．01）。对照组运动神经元和感觉神经元胞体直径、面积明显小于实验组（P＜0．01）。结论 补阳还五汤能提高周围神经损伤后脊髓前角运动神经元和脊神经节感觉神经元存活率，减轻神经元胞体萎缩程度，有利于周围神经损伤后神经功能的恢复。     

嗅鞘细胞移植对坐骨神经切断后神经元的作用

目的研究嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植对周围神经切断后脊髓及神经节内神经元的保护作用。方法SD大鼠55只,随机分为3个组:空白组5只、实验组及对照组各25只。行右侧坐骨神经切断,近端断端行肌肉内包埋,实验组和对照组分别予OECs及细胞培养液,空白组暴露神经后不作任何处理。术后1、2、3、7和14d,分批处死,行组织学观察及TUNEL标记观察神经元的改变。结果空白组术后14d均无阳性变化。大鼠坐骨神经切断后,脊髓及神经节内均有神经元凋亡发生。术后1、2、3d实验组细胞存活率分别为98.4%±6.5%、97.6%±6.5%及95.2%±6.7%,对照组分别为97.8%±6.7%、97.4%±6.4%及94.3%±6.8%,比较差异无统计学意义(P>0.05);7、14d实验组细胞存活率分别为92.4%±8.9%、87.7%±9.4%,较对照组87.4%±8.6%、83.4%±8.5%高,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1、2d实验组及对照组脊髓前角运动神经元无细胞凋亡;3、7、14d实验组脊髓前角运动神经元凋亡指数分别为1.2±0.8、1.4±0.6及4.1±1.3,较对照组2.1±1.1、3.1±1.1、6.1±1.8低,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1、2、3d神经节内细胞无凋亡;7d实验组神经节内的凋亡指数2.10±0.32,较对照组4.40±0.56低,差异有统计学意义(P<0.05);14d实验组神经节内的凋亡指数4.3±1.80与对照组6.70±2.50比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论周围神经损伤后脊髓及神经节内神经元有神经元凋亡发生,OECs移植对神经元凋亡有保护作用。     

脊髓电刺激对坐骨神经损伤大鼠背根神经节神经元和脊髓神经元的保护作用

目的 观察脊髓电刺激对大鼠坐骨神经切断后背根神经节(DRG)神经元和脊髓神经元的影响.方法 建立大鼠坐骨神经损伤模型,随机分为实验组(n=15)和对照组(n=15);实验组行脊髓电刺激,对照组行假治疗.观察不同时期两组大鼠DRG神经元和脊髓神经元计数和超微结构;测定再生神经纤维髓鞘厚度及传导速度(NCV).结果 术后1、4、8周,实验组DRG神经元计数为15.74±1.47、14.17±1.20、13.33±0.47;对照组为10.99±1.38、10.33±0.78、9.20±0.56两者差异有统计学意义(P＜0.05).实验组脊髓神经元计数为17.16±0.50、15.86±1.27、11.55±0.95;对照组为12.16±0.92、10.27±0.44、9.24±0.78,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脊髓电刺激对周围神经损伤后DRG神经元和脊髓神经元具有保护作用.