扩张型心肌病抗肽抗体及免疫治疗研究

本文依据心肌线粒体腺苷酸转位酶（ＡＮＴ）的氨基酸序列合成了一个１１肽，用间接微固相放射免疫法检测了原发性扩张型心肌病（ＩＤＣ）患者的抗ＡＮＴ抗体。发现用此多肽和天然ＡＮＴ作抗原，检测的抗体结果符合率达９４％，且相关性良好。４８例ＩＤＣ患者抗ＡＮＴ抗体阳性１５例，阳性率为３１％；抗体阳性患者的心力衰竭病程多短于１年；风湿性心脏病、缺血性心脏病及健康对照者均未发现此种抗体。对抗ＡＮＴ抗体阳性的１５例患者，短程（６周）应用强的松治疗，１１例好转，４例稳定，疗效优于对照组，且无明显毒副作用。表明：人工合成ＡＮＴ抗原１１肽可替代制备困难的天然ＡＮＴ，在ＩＤＣ病因及发病机理研究、临床诊断、指导免疫治疗上具有重要价值。短程应用免疫抑制剂强的松治疗ＩＤＣ疗效好，值得推广应用。     

肠病毒RNA和抗ATN抗体在健康献血员中检出的意义

目的：探讨肠病毒ＲＮＡ和抗ＡＮＴ抗体在健康献血员中检出的临床意义。方法：应用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）和逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对健康献血员和扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者进行抗心肌多肽自身抗体（抗ＡＴＮＴ抗体）和肠病毒（ＲＮＡ）的检测。结果：４８例健康献血员中有４例抗ＡＮＴ抗体阳性（阳性率为８．３％），３例肠病毒ＲＮＡ阳性（阳性率为６．３％），而４８例ＤＣＭ患者中有３１例抗ＡＮ     

扩张型心肌病抗心肌线粒体ADP／ATP载体自身抗体的研究

应用免疫转印技术和细胞毒试验检测２１例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清中抗猪心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体。结果发现，ＤＣＭ患者血清中可检测出抗心肌线粒体３０千道尔顿（ｋＤ）多肽（ＡＤＰ／ＡＴＰ载体）自身抗体，检出率为５２．４％，而１９例对照组血清均为阴性（Ｐ＜０．００１）；该抗体与猪心肌细胞膜５２ｋＤ多肽发生交叉反应，直接引起的心肌细胞毒损害具有钙依赖性，可通过钙拮抗剂预防。本研究提示，抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体自身抗体可能是引起ＤＣＭ心肌功能损害的原因之一，检出该抗体可作为ＤＣＭ的重要诊断指标。     

扩张型心肌病抗二磷酸腺苷／三磷酸腺苷载体的自身抗体的研究

应用间接微固相放射免疫法检测了３８例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清中抗二磷酸腺苷／三磷酸腺苷（ＡＤＰ／ＡＴＰ）载体的抗体，阳性率为１６／３８（４２％），而冠心病、风湿性心脏病及正常人群未检出此抗体。抗体阳性的ＤＣＭ患者的心力衰竭时间多短于１年。抗体效价与患者左室射血分数无明显相关。但发现ＤＣＭ患者抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体的抗体阳性血清可抑制牛心肌细胞线粒体膜的１４Ｃ－ＡＤＰ转运，而不影响牛肝细胞线粒体的能量转运。提示抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体的抗体具有器官特异性及致病作用，在ＤＣＭ发病上可能起一定作用。     

高血压性心脏病抗G—蛋白偶联β1—肾上朱素能受体与M2—胆碱能受体自身抗体

目的 抗体肌β１和Ｍ２的自身全是否与高血压怀心脏病有关。方法 以心脏Ｇ－蛋白偶联受体β１和Ｍ２细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原，应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术检测４４例高血压性心脏病（ＨＣＤ）患者、３６例单纯性高血压患者和４１例正常（对照组）血清中抗β１和Ｍ２受体的自身抗体。结果 抗心肌β１受体自身抗体的检出率，高血压性心脏病患者为４７．７％（２２／２４），显著高于高血压患者１１．１％     

心肌炎和扩张型心肌病抗心肌自身抗体的研究进展

心肌炎（ＭＣ）和扩张型心肌病（ＤＣＭ）的发病与病毒感染后的自身免疫有关,两种疾病可能是心肌器官特异性自身免疫性疾病的不同阶段,ＤＣＭ在很多情况下被认为继发于ＭＣ。目前已有大量报道在ＭＣ和ＤＣＭ患者血清标本中检测出抗心肌的自身抗体（如抗线粒体ＡＮＴ抗体,抗β－肾上腺素能受体抗体,抗胆碱能受体抗体,抗肌球蛋白抗体,抗热休克蛋白抗体,抗支链α酮酸脱氢酶复合体抗体等）,这些自身抗体在ＭＣ和ＤＣＭ发病中起重要作用,本文就这方面的进展作一简要综述。     

高血压性心脏病抗G-蛋白偶联β_1-肾上腺素能受体与M_2-胆碱能受体自身抗体的初步研究

目的抗心肌β１和Ｍ２的自身抗体是否与高血压性心脏病有关。方法以心脏Ｇ－蛋白偶联受体β１和Ｍ２细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原，应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）技术检测４４例高血压性心脏病（ＨＣＤ）患者、３６例单纯性高血压患者和４１例正常人（对照组）血清中抗β１和Ｍ２受体的自身抗体。结果抗心肌β１受体自身抗体的检出率，高血压性心脏病患者为４７．７％（２２／４４），显著高于高血压患者１１．１％（４／３６）与正常人１２．１（５／４１）；抗心肌Ｍ２受体自身抗体的检出率，高血压性心脏病患者为４５．５％（２０／４４），显著高于高血压患者８．３％（３／３６）与正常人９．８％（４／３６）。高血压性心脏病患者血清中抗β１和Ｍ２受体的自身抗体滴度分别为１∶９６与１∶１０３，远高于单纯性高血压和对照组的１∶４０与１∶２４的相应抗体滴度（Ｐ＜０．０５）。结论高血压性心脏病患者不仅存在抗心肌β１和Ｍ２受体的自身抗体而且其抗体滴度也明显高于单纯性高血压及正常人，检测该抗体对预测原发性高血压患者是否并发心肌病变，可能有一定的参考价值。     

幽门螺杆菌cagA基因的克隆表达及其产物的应用

目的体外表达ＣａｇＡ蛋白，发展快速而简便的检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的免疫学方法．方法用ＰＣＲ技术克隆ｃａｇＡ基因５端片段（８５４ｂｐ）于ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α中温度诱导表达Ｍｒ３８０００的单体ＦＣａｇＡ，复性后分别作阴离子交换及凝胶柱层析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＦＣａｇＡ的抗原性．以重组ＦＣａｇＡ为抗原，通过制备胶体金及免疫胶体金，建立了斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法．结果ＦＣａｇＡ具有抗原性．以该抗原所建立的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法仅需２ｍｉｎ～３ｍｉｎ可完成，无需特殊设备，并可单人份操作．经过与ＥＩＡ法对比检测２６２例患者血清，本方法的特异性为９８５％，敏感度为９６８％．结论具有抗原活性的ＦＣａｇＡ蛋白的表达及ＤＩＧＦＡ检测抗ＣａｇＡ抗体方法的建立，对ＣａｇＡ＋Ｈｐ感染的流行病学研究具有重要意义     

免疫转印法检测扩张型心肌病患者抗ADP／ATP载体抗体的敏感性及特异性

为探讨免疫转印（ＩＢ）法检测扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体的特异性及敏感性，对ＤＣＭ患者６３例和冠心病患者、正常人各３０例的血清进行随机编号，经ＩＢ法分析，结果表明ＤＣＭ患者血清主要存在针对心肌线粒体３０ｋＤ肽的自身抗体，其敏感性为７３％，特异性为１００％。与近３年试验结果综合比较，相同ＤＣＭ患者血清阳性率分别为７０％和７３％，证明ＩＢ法重复性良好。因此，抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体阳性可作为ＤＣＭ临床诊断的重要指标之一。     

抗中性粒细胞胞浆抗体在炎性肠病中的意义

目的 研究抗中性粒细胞胞浆抗体（ＡＮＣＡ）在炎性肠病（ＩＢＤ）中的发生率、其针对的靶抗原及其与临床疾病活动性的关系。方法 用间接免疫荧光法对７６例溃疡性结肠炎（ＵＣ）、３６例克隆病（ＣＤ）及２１０例正常者进行ＡＮＣＡ的筛选测定，用ＥＬＩＳＡ检测ＡＮＣＡ针对的不同靶抗原。结果 ７６例ＵＣ患者中血清ＡＮＣＡ阳性者占７１．１％，均为核周型染色，明显高于ＣＤ患者ＡＮＣＡ的阳性率（８．３％，Ｐ〈０．００１）     

抗心肌线粒体自身抗体在扩张型心肌病诊断中的价值

采用ＤＩ－ＰＡＰ法和ＩＢＴ法，对心功能改变相似的２２例扩张型心肌病（ＤＣＭ）和２０例冠心病患者进行自身抗体检测，仅在ＤＣＭ患者血清中检测出抗心肌线粒体抗体（１５例阳性）和线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体（１６例阳性），两种方法的符合率８６．４％，总计１７例阳性；而冠心病组和正常人对照组均为阴性（Ｐ＜０．０１）．提示抗心肌线粒体抗体的检测，对ＤＣＭ诊断有很高的特异性和敏感性，可作为ＤＣＭ诊断的重要指标．     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用…

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株，分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，腹水效价１．２×１０＾６。将ＳｊＡ１１１ ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原，阳性者３９０例（７８．１６％）；２５例肺吸虫病人，３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）     

胰岛细胞抗体ABC法检测及临床意义初步探讨

胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）与机体的免疫功能紊乱有密切的关系。胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）是ＩＤＤＭ患者主要的免疫学标志之一。可采用免疫组织化学技术作ＩＣＡ定性检测。我们首次应用“Ｏ”型血正常人胰腺石蜡切片作为抗原，ＡＢＣ法（卵白素－生物素化过氧化物酶复合物法）检测血清中ＩＣＡ。结果：１７例ＩＤＤＭ患者，阳性检出率５２．９４％；２０例ＮＩＤＤＭ及２０例非糖尿病患者无阳性反应。与国外报道比较，其方法的可     

充血性心力衰竭患者血管内皮细胞损伤及其临床意义

血中循环内皮细胞（ＣＥＣ）检测，是血管内皮细胞损伤的指标。ＣＥＣ用免疫荧光ＶＩＩＩ因子相关抗原鉴定，并测定血中脂质过氧化物（ＭＤＡ）变化。本文对４２例有充血性心力衰竭（ＣＨＦ）患者与正常人、无ＣＨＦ的心脏病患者及治疗前后对照。结果显示，ＣＨＦ患者ＣＥＣ数和ＭＤＡ含量显著高于正常人及无ＣＨＦ的心脏病患者，两指标呈显著正相关（ｒ＝０．７５），ＣＥＣ数与ＣＨＦ患者病情严重程度相关。这提示，ＣＨＦ时伴有明显的血管内皮细胞损伤，还可能与脂质过氧化损伤有关。本文讨论了血管内皮损伤在ＣＨＦ病理生理过程中的意义，并提出ＣＥＣ检测可能作为临床判断病情的一项参考指标。     

多发性骨髓瘤克隆起源的研究

为了解外周血中肿瘤克隆细胞的分化阶段，进一步研究ＭＭ（多发性骨髓瘤）发病机理，采用针对Ｂ细胞不同分化阶段抗原ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ３８的单克隆抗体，用ＡＰＡＡＰ法（碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法）同时检测１７例外周血中不含浆细胞的ＭＭ患者骨髓及外周血的免疫表型，其中１０例外周血表达浆细胞抗原增高（Ｐ＜０．００１）且与骨髓一致。９例外周血表达ＣＤ３８和ＣＤ４５ＲＯ，３例表达ＣＤ３８、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ，１例表达ＣＤ３８、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＡ和ＣＤ１０。此结果显示ＭＭ患者外周血的Ｂ系抗原表达既与骨髓具有一致性，又具多样性，提示ＭＭ的外周血中存在多分化阶段的肿瘤前体细胞，呈现自早期Ｂ细胞，经活化Ｂ细胞及晚期Ｂ细胞向前浆细胞的持续分化过程，并验证了文献关于ＭＭ发病途径的推测。     

60 kD人SSA抗原表位免疫反应的特异性

目的：根据６０ｋＤ ＳＳＡ抗原分子不表位的氨基酸序列，人工合成多倍体寡肽抗原表位（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＭＡＰｓ），以检测这些表位的免疫特性。方法：用ＭＡＰｓ做亲和层析柱，用抗ＳＳＡ抗体的病人血清过柱，纯化抗ＭＡＰｓ抗体。这些纯化后的抗ＭＡＰｓ抗体与６０ｋＤＳＳＡ抗原及ＭＡＰｓ反应。这种的反应能被６０ｋＤ ＳＳＡ抗原及相对应的ＭＡＰｓ抑制。以ＭＡＰｓ做抗原检测６７     

单克隆抗体Dot-ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

作者用活化生物素标记抗细粒棘球蚴抗原单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｄ８，以聚氯乙烯（ＰＶＣ）白色薄膜凹孔板为载体，建立了ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ检测包虫病人循环抗原的方法。测定人源包虫囊液抗原的灵敏度为６ｎｇ／３μｌ样品．９２例确诊包虫病人血清循环抗原检出率为７６．１％（７０／９２），在抗体阳性者中循环抗原检出率为８１．６％（６２／７６），抗体阴性者中检出率为５０％（８／１６）。１００份正常人和１２２份羹虫病等其它寄生虫病人血清，仅１份囊虫病人血清出现交叉反应．测定循环抗原对包虫病人，尤其是血清抗体阴性者的免疫诊断有重要价值．本法简便、快速，适于推广．     

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗Hp细胞毒素相关蛋白A抗体

目的建立快速检测抗幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）．方法将ＣａｇＡ抗原点于硝酸纤维素膜上，然后依次加入患者血清及用抗人ＩｇＧ抗体标记的胶体金颗粒，如血清中存在抗ＣａｇＡ的ＩｇＧ，在膜上便出现一个红色斑点．结果ＤＩＧＦＡ仅需几分种便可完成．当用ＤＩＧＦＡ及ＥＩＡ对１０８份血清进行检测时，两种方法之特异性及敏感性相当．当以聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测胃粘膜组织中ＨｐＣａｇＡ的结果作为参照时，ＤＩＧＦＡ的特异性及敏感性分别为９８％（５７／５８）和９４％（４５／４８）．结论ＤＩＧＦＡ特异性强，敏感度高，操作快速且简便，在ＣａｇＡ阳性Ｈｐ感染的检测方面有广泛应用前景     

用基因工程表达的Cag-A和Hsp-58抗原检测人血清幽门螺杆菌抗体

１材料和方法１．１材料消化门诊及住院患者共计１２１例其中３３例分别进行ＣａｇＡ和Ｈｓｐ－５８基因Ｈｐ抗体的检测（２９例与常规尿素酶法进行比较）;８８例血清标本用ＣａｇＡ及Ｈｓｐ－５８抗原混合包被药盒进行检测１．２方法Ｃａｇ－Ａ和Ｈｓｐ－５８抗原购自ＭＩＣＲＯＧＥＮ生物技术有限公司,酶标抗体为羊抗人ＩｇＧ（ＤＡＫＯ,ｐ２１４）常规尿素酶检测（ＨＰＵ）试剂盒由协和医药集团提供;基因工程表达的ＣａｇＡ及Ｈｓｐ－５８抗原混合包被试剂盒由北京贝尔生物快检技术有限公司提供Ｃａｇ－Ａ和ｈｓｐ－５８抗原经ＳＤＳ…     

扩张型心肌病患者血清抗ADP／ATP载体抗体对心肌细胞胞浆游离钙浓度的影响

用荧光探针Ｆｕｒａ－２／ＡＭ观察扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体对培养大鼠心肌细胞胞浆游离钙浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）的影响，结果表明：１：３０～１２０倍稀释度抗血清均显著增加［Ｃａ￣（２＋）］ｉ，先加维拉帕米可抑制该效应。正常人及冠心病患者血清无此作用；ＤＣＭ患者抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体阴性血清亦无此作用。提示：抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体引起心肌细胞［Ｃａ￣（２＋）］ｉ增加可能是ＤＣＭ患者心肌损害的原因之一。