用微量ELISA法检测水痘—带状疱疹病毒IgG抗体

用微量ELISA法检测807例份不同年龄、性别的健康人血清中水痘－带状疱疹病毒疱疹病毒IgG抗体，0－1岁年龄组最低，为48．15％，25－35岁年龄达到高峰，以后逐渐下.降无性别差异。随机取95份血清与CF进行比较，两法的总符合率为90．53％，阳性符合率为94．20％，rs^1=0.7760,P<0.001,ELISA法的GMT是CF法的64倍。     

深圳市观澜街道健康儿童水痘-带状疱疹病毒感染状况及抗体水平调查

目的 了解深圳市观澜街道健康儿童水痘-带状疱疹病毒(VZV)的自然免疫状况.方法 采集3～14岁儿童血清标本共计179份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测VZV-IgG抗体.结果 179份血清标本中81份VZV-IgG抗体为阳性,阳性率为45.25%,抗体含量均值为357.40 mIU/ml.3岁年龄组的阳性率最低(16.67%),7-14岁年龄组的阳性率最高(73.33%);不同年龄组阳性率差异有统计学意义(P<0.001).结论 深圳市观澜街道7岁以下儿童水痘抗体阳性率低,建议接种水痘疫苗以提高其免疫水平.     

应用酶联金葡菌A蛋白的ELISA方法检测甲型肝炎抗体的初步研究

本文报告了酶联金葡菌 A 蛋白的 ELISA 检测甲型肝炎抗体的方法。该法对2岁以下婴幼儿血清,牛血清及恢复期病人血清进行检测,同时 PPA 法检测的阳性血清组与阴性血清组,用酶联羊抗人IgG-IgG(PSAH)法进行了比较,认为 PPA 可以代替 PSAH 用于检测甲肝抗体,并取得了较好的效果。PPA-ELISA 法检测359份正常人群血消中甲型肝炎抗体的水平,结果表明,1～3岁年龄组阳性率为36.2%,4～6岁组为43.3%,7～9岁组51.6%,10～20岁组为53.4%,20岁以上者为57.9%。     

中山市古镇健康人群水痘-带状疱疹病毒血清抗体阳性率调查

目的 应用膜抗原荧光抗体实验(FAMA)调查中山市古镇正常人群水痘-带状疱疹病毒(VZV)的流行现状,为水痘预防措施的制定提供依据.方法 采用以VZV感染的细胞作为抗原、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG作为二抗的FAMA实验对随机抽取的590份正常人血清进行特异性VZV抗体检测.结果 FAMA实验结果容易判定,并且具有较好敏感性、特异性和重复性.应用此法检测590份血清标本中,VZV抗体总体阳性率为77.12%;1～3岁、4～6岁、7～13岁、14～19岁、20～29岁、30～39岁、40～49岁及>50岁年龄组血清抗体阳性率分别是17.33%、51.56%、73.91%、91.26%、92.78%、95.65%、98.11%和100%.1～3岁年龄组血清抗体阳性率最低,血清抗体阳性率随年龄的增大而升高.不同性别间阳性率差异无统计学意义(P>0.005),不同年龄组间阳性率差异有统计学意义(P<0.001).结论 该研究采用的FAMA法检测人群中VZV抗体敏感性好、特异性高、结果易判定,是VZV抗体检测的可靠方法.VZV感染主要发生在儿童时期,预防水痘感染和流行,应以1～3岁儿童为VZV疫苗免疫的首选对象.3岁以上者宜选择没有水痘史的儿童作为免疫对象.     

小鼠诺如病毒间接免疫荧光检测方法的建立

目的建立小鼠诺如病毒(MNV)的间接免疫荧光试验(IFA)的检测方法。方法将MNV-1接种RAW264.7细胞,培养36 h收集病毒培养物及未感染细胞培养物,点制抗原玻片;以107TCID50的MNV-1灌胃接种BALB/c小鼠,收集感染血清做阳性对照血清。收集人工感染后不同时间点的血清样品,以1:10的稀释度使用IFA法测定感染血清MNV抗体滴度。选取80份送检小鼠血清样品,以IFA和ELISA方法测定,差异样品使用Western blot方法进行验证。结果 MNV-1感染RAW264.7细胞(36~48)h,细胞感染率为60%,以36 h感染细胞状态为佳;IFA法测定感染小鼠血清,小鼠感染1周后抗体水平逐渐提高,在4周时抗体滴度达到最高值,之后维持稳定,采集感染4周的动物血清做IFA方法的阳性质控品;80份血清中,IFA法测定阳性27份,阴性53份,ELISA法测定阳性32份,阴性48份;Western blot方法对差异样品验证,其中阳性3份,阴性2份,IFA法和ELISA法检测符合率分别为96.0%和97.5%。结论 IFA方法检测小鼠诺如病毒基本可以反应小鼠的感染情况,偶有假阴性的出现,可以选择IFA方法和ELISA方法作为初筛,差异样品用Western blot方法验证。     

醛化绵羊红细胞血凝板法测定嗜异性抗体

新鲜 SRBC 试管法和血凝板法同时检测100份血清 FAb 的校正符合率为97.8%;血凝板法两种 SRBC(新鲜、醛化)检测150份血清 FAb 的校正符合率为97.4%,新鲜 SRBC 试管法与醛化 SRBC 血凝法检查80份血清 FAb 的校正符合率为98.2%,说明醛化 SRBC 血凝板方法可以代替试管法,且具有微量、简便、易于判定及试剂来源方便等优点。     

应用ELISA方法快速检测抗巨细胞病毒IgM抗体

本文报道了应用ELISA方法检测173份婴儿肝炎综合征患儿血清抗巨细胞病毒IgM抗体(CMV IgM Ab),阳性率为32.37%(56/173)。同时做了173份临床标本病毒分离,阳性32份。分离阳性标本中,血清检测抗CMV IgM Ab阳性为28份。与病毒分离结果的符合率为81.5%。实验证明,ELISA检测抗CMV IgM Ab具有特异性,是一种检测抗CMV IgM Ab的敏感,快速而简便的方法。     

ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的临床意义

目的探讨基因重组抗原ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的临床意义。方法用甲苯胺红不加热血清实验（TPPA）对355份梅毒患者和非梅毒患者的临床血清标本进行检测。结果以TPPA阳性者为标准,TRUST有7份为假阴性,4份为假阳性;TRUST和ELISA的敏感性、特异性分别为92.7%、98.3%和100%、99.1%。TRUST与TP-PA的符合率为96.3%,ELISA与TPPA的符合率为99.4%。ELISA的敏感性、特异性都优于TRUST,与TPPA符合率高。结论重组抗原ELISA法检测梅毒螺旋体特异性抗体具有敏感性高、特异性好、结果客观、自动化程度高等优点,适用于梅毒初筛和确诊。     

两种免疫分析方法检测乙肝病毒血清标志物的差异分析

目的:比较酶联免疫吸附试验分析方法(ELISA)和化学发光免疫法(CLIA)检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb)的差异。方法:采用ELISA法和CLIA法对2011年1～12月在我院传染病门诊首次就诊300例患者的血清样本进行平行检测乙型肝炎病毒血清标志物,分析两种免疫分析方法灵敏度和阳性结果符合性。结果:CLIA法检测血清HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb检测的灵敏度分别为0.2ng/ml、10mIU/ml、0.1Ncu/ml、1Ncu/ml和0.5Ncu/ml,均高于ELISA法。CLIA法和ELISA法测定300份血样HB-sAg、HBsAb、HBeAg和HBcAb结果差异无统计学意义(P>0.05),CLIA法测定HBeAb差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法相对于CLIA法测定HBsAg、HBsAb、HBeAg和HBcAb的阳性符合率分别为94.17%、96.23%、97.20%和92.42%,而HBeAb阳性符合率仅为65.52%。结论:采用CLIA检测乙型肝炎血清标志物的灵敏度和符合率优于ELISA法,并且可以直接对血清标志物表达进行定量,值得临床推广应用。     

海岛居民中巨细胞病毒的抗体检测

用 ELISA 法和 CF 法检测海岛居民的巨细胞病毒感染,两法具有良好的正相关性,相关系数 r=0.5963,p<0.001。ELISA 法的敏感性高于 CF 法。ELISA 测得CMV 抗体的总阳性率达92.81%,GMT 为579.03,CF 测得的阳性率为78.16%,GMT 为21.95。GMT 有随年龄增长而升高的趋势,在性别上无显著性差异。     

输血前应用ELISA检测梅毒螺旋体抗体的临床研究

目的探讨输血应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测梅毒螺旋体抗体的临床价值。方法选择2007年1月～2011年1月我院住院接受输血治疗的患者5790例作为观察对象,应用ELISA试剂盒、TPPA试剂盒进行ELISA和TPPA血清梅毒螺旋体抗体检测。结果5790例入选观察对象中,应用ELISA法检测梅毒螺旋体抗体（TP—Ab）阳性50例,阳性率为0．864％;而应用TPPA法检测的梅毒螺旋体抗体阳性49例,阳性率为0．846％（49／5790）。两种检测方法差异无统计学意义（X2=0．643,P〉0．05）。≥70岁组的应用ELISA法检测的梅毒螺旋体抗体阳性率明显低于〈70岁组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论输血应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测梅毒螺旋体抗体具有较好的临床价值,与TPPA比较差异不大,值得推广和应用。     

血吸虫病门诊患者IHA与ELISA法抗体检测结果

目的 了解临床血吸虫病患者血清抗体检测结果及特点.方法 收集2005-2011年的门诊患者登记资料及IHA、ELISA方法血检结果等进行统计分析.结果 共检测患者5 979人,IHA血清抗体阳性率为7.96％,ELISA血清抗体阳性率为19.95％,双检血清抗体阳性率为7.18％.2008年后患者血清抗体阳性率逐年下降,2011年IHA法血清抗体阳性率为3.98％,ELISA法血清抗体阳性率为16.93％,双检血清抗体阳性率为3.70％,与2008年比较差异均有统计学意义(IHA:x2=51.76,P=0.000; ELISA:x2=36.17,P=0.000;双阳:x2=46.10,P=0.000).10～岁年龄组患者IHA、ELISA法血清抗体阳性率与双检阳性率均高于其他年龄组,差异有统计学意义(P＜0.05).就诊与血检阳性患者以男性为主.结论 血吸虫病门诊患者的血阳率处于近年最低水平,但男性与10～岁年龄组患病情况较突出,应引起有关方面的重视及采取针对性的防治措施.     

水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E胞外域基因的真核细胞稳定表达及其免疫反应性的初步研究

目的：真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒( VZV)糖蛋白E( gE)的胞外域基因,应用gE抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。方法构建含有VZV gE胞外域基因的真核表达质粒pCDNA3．1-gE,测序后脂质体转染 COS-7细胞,经 G418筛选出稳定表达VZV gE的细胞株。采用RT-PCR法检测VZV gE的mRNA, Western blot和间接免疫荧光法检测gE的免疫反应性,表达产物经Ni2+-NTA柱纯化后包被ELISA板,对127份0~10岁正常儿童血清中VZV-IgG抗体水平进行检测。结果成功筛选出能够稳定表达VZV gE胞外域基因的COS-7细胞株,RT-PCR检测到gE的mRNA,经Western blot和间接免疫荧光鉴定,gE具有明显的免疫反应性,COS-7细胞株和其培养上清液中均有gE融合蛋白,表达量约为0．632 mg/ml,纯度约为90%。 ELISA实验检测了127份0~10岁儿童血清中VZV-IgG抗体,总阳性率为81．89%,特异度和灵敏度分别为93．75%和88．24%。结论本实验获得稳定高效表达VZV gE胞外域基因的COS-7细胞株,建立的ELISA 血清学检测方法有助于 VZV感染的流行病学研究和对易感人群VZV感染的诊断和预防。     

三种检测梅毒螺旋体血清学方法评估

目的 寻求一种敏感度和特异性高的方法用于输血前和临床诊断检查梅毒螺旋体抗原血清学试验。方法 应用TPPA、ELISA、TRUST等三种梅毒螺旋体血清学检测方法，对25例各期梅毒血清标本进行检测，对其敏感性及特异性进行比较。结果 25例梅毒血清标本，ELISA法和TPPA法检测阳性率为100％，TRUST法为93％；经稀释法检测，ELISA法较TPPA法敏感。对815例临床标本检测，ELISA方法与TPPA法的检出符合率为100％。结论 ELISA法操作简单，结果判断可标准化，特异性强，敏感性高；既可用于过筛试验，又可用于筛检阳性样本的确认。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA相关性的探讨

目的：研究乙型肝炎前S1抗原与HBV-DNA检测的相关性。方法：前S1抗原检测采用酶联免疫吸附试验；HBV-DNA检测采用荧光定量PCR法。结果：HBsAg-HBeAb-HBcAb-PreSl组DNA阳性率为49％；HBsAg-HBeAb-HBcAb组DNA阳性率为34％；HBsAg-HBcAb-PreSl组DNA阳性率为32．5％；HB-sAg-HBcAb组DNA阳性率为15％。结论：含前S1抗原的阳性标志组HBV-DNA阳性率明显高于不含前S1抗原的阳性标志组。     

梅毒血清学检测分析

目的以梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）为标准,比较临床常用的检测梅毒的两种血清学方法的优劣性。方法用非特异性的甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对883名性病门诊患者进行梅毒筛检,阳性标本用梅毒确证试验（TPPA）法进行确证。结果TRUST法灵敏度为71．01％（245／345）,假阳性率8．92％（24／269）,漏检率28．99％（100／345）;ELISA法灵敏度为99．42％（343／345）,假阳性率0．58％（2／345）,漏捡率为0．58（2／345）。与TRUST相比,ELISA法检测敏感度（X^2=110．49,P〈0．01）、假阳性率（X^2=25．94,P〈0．01）以及漏检率均有明显差异（X^2=110．49,P〈0．01）。结论ELISA法具有较高的灵敏度和特异性,漏检率较低,适合用于性病门诊梅毒筛查。     

茂名市2005-2008年麻疹风疹疑似病例抗体测定分析

目的对2005—2008年茂名市麻疹、风疹疑似病例进行IgM抗体检测,为风疹、麻疹的诊断提供依据。方法采用抗体捕捉酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清标本中的麻疹和风疹抗体。结果麻疹IgM抗体总阳性率为69．20％,风疹IgM抗体总阳性率为3．6％。麻疹IgM阳性者中,0-9岁年龄组人数最多,占81．85％（708／865）。风疹IgM阳性者中,10—19岁年龄组人数最多,占82．22％（37／45）。不同性别人群麻疹、风疹IgM阳性无统计学意义。在茂名地区,2005、2006年6～7月出现麻疹流行小高峰,2007年6月到2008年6月麻疹持续流行近一年。结论保持疫苗高质量的常规免疫,适时开展强化免疫,加大强化的力度,加强实验室的检测,是控制麻疹、风疹的重要措施。     

HBV-DNA与其病毒免疫标志物的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV-DNA与病毒免疫标志物的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对568份HBV感染者血清中HBV-DNA含量进行检测,同时用ELISA法检测其HBV免疫标志物。结果:HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率约为98.9%;HBsAg、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为65.4%;HBsAb、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为13.9%;三组间HBV-DNA阳性率有明显差异(P<0.01)。HBeAg阳性标本中HBV-DNA阳性率最高,达92.0%;HBsAg与HBV-DNA的符合率最高,为77.6%。结论:检测HBV-DNA含量结合血清病毒标志物对乙型肝炎的临床诊断治疗以及病情判断有重要意义。     

乙肝患者血清中HBV C基因启动子变异与病毒含量及前S1抗原的关系

目的研究HBVc基因启动子(Basic Core Promoter，BCP)基因变异与前S1(Pre—S1)抗原的关系，以及BCP基因变异与HBV DNA含量的关系。方法94例HBeAg阳性乙肝患者，用PCR-微板核酸杂交ELISA技术检测BCP中nt1762A—T和nt 1764G—A的基因突变，酶联免疫吸附分析(ELISA)检测Pre—S1抗原，PCR荧光定量技术检测HBVDNA。结果在94例HBeAg阳性乙肝患者血清检测中，Pre—S1抗原阳性者65例，其中BCP阳性51例，BCP变异率为78．5％；Pre—S1抗原阴性者29例，其中BCP阳性23例，BCP变异率为79．3％。BCP基因突变血清中HBV DNA拷贝数明显高于非BCP基因突变血清中HBV含量。结论在e抗原阳性乙肝患者中，Pre—S1抗原的存在与BCP的变异无相关性，但BCP基因变异与HBV DNA拷贝数明显相关，可反映乙肝病情的严重程度及其愈后、转归。