ELISA法检测梅毒螺旋体抗体钩状效应2例分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）检测梅毒螺旋体抗体（TP—Ab）由于其试剂成本低、灵敏度及特异性高、可采用自动化分析、结果易保存等优点，已成为健康人群筛查的首选方法。由于目前的梅毒螺旋体抗体检测试剂多采用一步法检测，当血清中TPAb浓度过高时可能会发生钩状产效应（HOOK效应），引起假阴性，一旦出现，后果严霞㈨。我们在今年4～6月份发现了，2例TP—Ab阴性而梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒快速血浆反应素试验（RPR）均阳性的病例，对标本进一步检测后发现为钩状效应引起假阴性。现将有关结果报道如下。     

临床ELISA检测干扰因素分析及处理

ELISA即酶联免疫吸附试验,是常用于各种抗原和抗体的测定.其操作简便、快速、消耗成本低,被临床实验室广泛用于传染病、肿瘤等的筛查和诊断.但ELISA测定中的干扰因素较多,而且操作中有一定的技术要求,在测定中常出现检测结果重复性较差或假阴性、 假阳性结果.因此,学会分析和处理引起ELISA测定误差的干扰因素就尤为重要.     

ELISA测定结果的影响因素及其排除方法

目前酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay,ELISA,简称酶免)是临床实验室最常用的一种标记免疫方法。ELISA在基础研究和常规的临床实验室中有着广泛的适用性,具有操作简便,灵敏度较高,试剂成本低,环保,适于大批量人群抗原抗体筛查等优点,已广泛应用于肝炎病毒,艾滋病毒筛查,癌胚抗原,甲胎蛋白和激素等项目的检测。但ELISA法测定结果的影响因素较多,影响因素主要有:(1)试剂因素;(2)标本因素;(3)实验原理或操作方法;(4)环境因素等。因此在临床检验工作中,除正常反应外,还常会出现一些假阳性和假阴性等异常结果。总结如…     

洗板对酶联免疫吸附试验检测结果的影响

目的 探讨酶标洗板机洗板程序对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果 的影响.方法 将已知乙肝表面抗原(HBsAg)阴性者血清样本30份和HBsAg 0.5 ng阳性及2 ng阳性质控血清按酶标仪清洗方式分行洗、板洗2组,每种洗板方式依清洗次数分为5小组,采用ELISA法对样本进行HBsAg检测.结果 在相同工作条件下,洗板次数以8～9次为宜,本次试验采用行洗法洗板假阳性率略低于板洗法洗板,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 酶标洗板机的洗涤次数直接影响ELISA法检测结果 判定,不同洗板机依据性能需设定相应的洗板程序,并严格操作规程,以降低由洗板引发的假阳性、假阴性结果 .     

ELISA实验常见问题分析及对策

酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是检测生物分子抗原和抗体的常用方法,其操作简单、灵敏度高、特异性好,广泛用于临床检验、医学实验、药物毒物检测等领域.虽然优质的试剂、先进仪器是保证ELISA结果准确的基本条件,但由于大部分试验操作步骤都是由实验者人工操作完成,人为误差较大.     

振动态ELISA可抑制钩状效应

酶联免疫吸附实验(ELISA)是目前应用较为广泛的一种免疫学方法,献血者体检 HBsAg、抗-HIV、抗-HCV均为ELISA方法检测.钩状效应(hook effect)是ELISA方法中因被测样本中抗原或抗体浓度过高而出现假阴性的带现象(zone phenomenon).笔者选择了15例因表面抗原浓度过高而引起后带(Post Zone)反应的标本,进行了振动态ELISA,现介绍如下.     

酶联免疫吸附试验在血液检测中应注意的问题及对策

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其具有敏感性高、特异性强、操作简便等优点,作为目前采供血机构血液检测最主要的方法[1],但仍有一些困扰实验室人员的问题需要注意及解决.探讨如下.     

检测乙型肝炎表面抗原的一步法试剂的钩状效应分析

目前,我国检测HBsAg绝大多数采用ELISA中的双抗体夹心双位点一步法。用该方法检测HBsAg,当标本中的HBsAg浓度过高时,会因钩状效应(HOOK)现象出现假阴性而造成漏检,严重威胁着人民的健康。HBeAg和HB-cAb两项阳性时,大多数HBsAg都为阳性,HBsAg阴性者也可能存在漏检问题。所以笔者将HBeAg和HBcAb两项阳性的血清标本进行不同比例稀释后,再用一步法和二步法分别进行检测和比较,以探讨一步法试剂的HOOK在HBsAg检测的漏检情况和二步法的临床实用价值。     

一步法检测梅毒抗体ELISA试剂的钩状效应分析

近年来,随着分子生物学技术的发展,以及对梅毒螺旋体表面脂蛋白抗原的核苷酸序列的了解,采用基因工程的方法,在体外表达得到了梅毒螺旋体的相应特异基因工程抗原,大大地提高了酶联免疫吸附试验（ELISA）测定的特异性。此外ELISA还具有简单、快速和高通量的优点,所以,ELISA成为了梅毒血清学诊断的首选方法。目前,国内检测梅毒抗体绝大多数采用ELISA中的双抗原夹心一步法。     

临床实验室ELISA的相关因素分析

临床上酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）的操作较为简便,但影响因素很多。在实际工作中,经常遇到诸如背景太深的“花板”现象,而导致结果判读错误,产生一定的假阳性和假阴性,导致临床上出现误诊漏诊。我们对ELISA的常见影响因素作如下分析。     

TP-ELISA法筛查受血者梅毒的适用性分析

梅毒是一种由苍白螺旋体所引起的性传播疾病。我国献血者健康检查标准规定：梅毒试验（RPR／TRusT）应为阴性。但是该试剂在方法学上与目前用于诊断梅毒的酶联免疫吸附试验（TP—ELISA）相比,其特异性和灵敏性较差,特别是当前我国梅毒流行呈上升趋势,因此,该方法难以满足确保临床受血者用血前诊断的需要。如何合理选择准确、快速的检测手段,进行诊断尤为重要。笔者用TRUST和TP—ELISA两种方法对2572例受血者血清学梅毒对比检测分析,现将结果报告如下。     

酶联免疫吸附试验一步法检测HBsAg的分析体会

乙型肝炎表面抗原的检测是诊断乙型肝炎的主要指标。随着检测技术的不断发展，ELISA一步法检测HBsAg的试剂、方法均已成熟，因其方法简便、灵敏度高、特异性强、实验要求条件不高而被各级医疗机构广泛采用。但其方法的缺点是干扰因素特别多，在实际操作中每一步控制不好都可能影响检测结果的质量，现针对操作中可能出现的问题进行分析，旨在提高HBsAg检测结果的准确性。     

酶标板法测定GPT的内部质量控制

目的：为提高GPT测定结果的准确性,保证血液质量。方法：酶标板法测定GPT原理是速率法,其实验参数是根据IFCC推荐的方法建立的,该方法操作简单,自动化程度高,设备性能价格比较适中,尤其适用于大量标本的检测。结果：实验过程中的影响因素多,易造成检测结果失控。结论：除参加卫生部临床检验中心和全国血液质量管理委员会的室间质评外,还应建立开展GPT的室内质量控制,保证检验结果的精密度和准确性,保证检测结果有效性。现将结果报告如下。     

增加洗板次数对HBsAg ELISA检测结果的影响

酶联免疫试验因其操作简单、灵敏度和特异性较高，现已被广泛应用，但影响酶免试验结果的因素较多，如加样量、洗板、温度和温育时间，控制不严就会影响试验结果，特别是洗板因素，许多实验室设定洗板次数的随意性较大。通过比较由同一人使用同一洗板设备经不同洗板次数后的两种质控物的检测结果，发现增加洗板次数对HBsAg ELISA检测结果的影响较大，报告如下。     

胶体金试纸法与酶联免疫法检测粪便隐血的对比分析

目的：对比胶体金试纸法与酶联免疫法检测粪便隐血的作用。方法：采用胶体金试纸法与酶联免疫法对600例患者粪便标本和血红蛋白标准液进行检测,并做统计学处理。结果：两法检测结果存在差异,胶体金法特异性高,灵敏度较差,前、后带效应影响较大;酶联免疫法灵敏度、特异度都比较高,可以定量测定。结论：胶体金法在检测消化道出血、便血等大量出血以及微量出血易引起的假阴性结果,酶联免疫法特异性较高。     

健康人群癌胚抗原轻度升高原因分析

目的 分析健康体检人群癌胚抗原(CEA)轻度升高的原因.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CEA.结果 580例中CEA轻度升高32例,其中以吸烟为主11例,占CEA轻度升高的34.4%;以慢性结肠炎为主6例,占CEA轻度升高的18.8%;以脂肪肝为主5例,占CEA轻度升高的15.6%;其他原因10例,占CEA升高的31.3%.结论健康人群CEA轻度升高可能与吸烟、慢性结肠炎、脂肪肝等有关,其他原因也会使CEA轻度升高.     

ELISA测定抗核抗体假阴性1例分析

对ELISA测定抗核抗体假阴性1例分析如下。1病历摘要女,27岁。因反复解黏液水样便1 a、加重伴全身皮疹10 d于2010-06-09收住我院。患者1 a前开始无明显诱因反复出现黏液水样便,偶有里急后重感、下腹痛不适,曾在当地医院得肠镜检查,考虑结肠炎,予中药治疗,病情无明显好转。10 d前患     

TP-ELISA二步法检测梅毒螺旋体抗体产生钩状效应分析

目的通过分析梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)双抗原夹心二步法检测梅毒螺旋体抗体中出现的钩状效应,探讨其对检测结果的影响及避免措施。方法 TP-ELISA双抗原夹心二步法检测结果为阴性,但快速血浆反应素试验(RPR)阳性的4例标本,用稀释法进一步检测。结果 4例标本TP-ELISA结果均为阳性。结论 TP-ELISA二步法在检测梅毒螺旋体抗体特异性抗体时也会出现钩状效应,用稀释法可避免。     

酶测定的影响因素分析

自动生化分析仪的应用 ,提高了临床生化检验的速度和精密度 ,但由于各种型号生化分析仪结构、分析方法的差异及各种试剂盒成份差异 ,使得酶类测定结果差异较大 ,同一份标本在不同实验室之间测定 ,结果可能相差几倍 ,实验室之间可比性较差 ,使得许多患者在甲医院所做的检验结果到乙医院需重做 ,既增加了患者的痛苦 ,又增加了患者不必要的负担。本文以AL T为例 ,分别在不同温度、不同波长条件下对患者血清进行观察 ,用葡萄糖 (HK法 )实测 NADH的摩尔吸光系数对 AL T测定进行了实验观察 ,所得结果报告如下。1　对象和方法1.1　对象　本院…     

ELISA法检测抗-HIV质控血清的制备和应用

ELISA（酶联免疫吸附法）检测抗-HIV影响检测结果的因素比较多。为了保证检测结果的准确性，试验时会设立一个弱阳性质控血清，来监测检测结果的稳定性及弱阳性标本能否检出，这样的弱阳性血清称之为质控血清。由于天然的弱阳性抗-HIV血清很难得到，我们试制了抗-HIV质控血清，现介绍如下。