缺氧缺血性脑病新生大鼠脑组织一氧化氮含量动态变化

目的　观察缺氧缺血后新生大鼠脑组织一氧化氮 (NO)含量动态变化。方法　 56只新生大鼠随机分成 6组 ,吸入 8%O2和 92 %N2 的混合气体建立缺氧缺血性脑病 (HIE)模型 ,观察不同时间脑组织中NO含量的变化。结果　缺氧缺血 30min后NO含量开始升高 ,在 48h内NO含量持续升高 ,与对照组相比差异有高度显著性 (P <0 .0 1 )。结论　缺氧缺血后NO含量明显升高 ,NO介导了新生大鼠缺氧缺血引起的脑损伤。     

缺氧缺血新生鼠脑组织Nogo-A含量变化

目的 探讨Nogo-A在缺氧缺血新生鼠脑组织中含量变化及其意义。方法 将SD大鼠的7日龄新生鼠（n=64）随机分为8组：4个不同时段的缺氧缺血后脑损伤组（HIBD后6h。24h,72h。7d组）和相对时段的假手术对照组,采用Nogo-A（S-19）多克隆抗体免疫组织化学SP法。结果 Nogo-A在HIBD后24h组新生鼠脑组织中含量明显升高达到峰值,72h及7d组降低。与假手术组无统计学差异。结论 Nogo-A在实验性缺氧缺血脑损伤后含量升高,可能抑制了中枢神经系统的再生。     

缺氧缺血新生鼠脑组织Ng-R含量变化

目的观察Ng-R在缺氧缺血新生鼠脑组织中含量变化,探讨Ng-R抑制神经再生的作用。方法将7日龄新生SD大鼠(rt=64)随机分为8组：4个不同时段的缺氧缺血后脑损伤组(HIBD后6h,24h,72h,7d组)和4个相对时段的假手术对照组,采用Ng—R(N-20)多克隆抗体免疫组织化学SP法观察Ng—R的表达变化。结果Ng-R在HIBD后6h组新生鼠脑组织中含量明显升高,24h组持续升高达到峰值,72h组开始降低,但与假手术组仍有统计学差异,7d组继续降低,与假手术组无统计学差异。结论Ng-R在实验性缺氧缺血脑损伤后含量升高,可能抑制了中枢神经系统的再生。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型的制作

OBJECTIVE: To duplicate a model of hypoxic-ischemic brain damage (HIBD) in the neonatal rat to create unilateral cerebral damage. METHODS: Healthy 7-day-old Sprague-Dawley (SD) rats were used as research subjects and randomly divided into 3 groups: the control group (n = 18), the sham operated group (n = 8), and the HIBD group (n = 19). The HIBD model was produced according to the traditional Rice model and the brains were collected when the rats were 14 days old. The weight, left/right brain weight ratio, behavioral ability, and neuropathologic changes were studied in each group. RESULTS: 1. The weight in the HIBD group increased obviously slowly and was lower than that in the control group and sham operated group (P < 0.01). 2. The abnormity of behavioral ability was found in the HIBD group, including turnover unability (63.16%), spontaneously turn left round (89.47%), convulsion (47.37%), and so on. 3. The left/right brain weight ratio was significantly lower in the HIBD group than in the other two groups (P < 0.01). 4. The pathologic features in the HIBD group were as follows: atrophy of left brain (84.21%), softening of left brain (31.58%), liquefaction of left brain (52.63%), and cavum brain (15.79%). HE staining showed the neuron damage and the proliferation of neuroglial cells in the HIBD group. There was no obvious abnormity found in the control group and the sham operated group. CONCLUSION: The model of HIBD is successful and worthy of spreading, with its cheap price, easy duplication, and higher successful rate. The reasonable ambient temperature should be kept in 36-37 degrees C.     

孕酮对缺氧缺血性脑病新生鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响

目的探讨孕酮对缺氧缺血性脑病(HIE)新生鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。方法40只7日龄新生Wistar大鼠随机分成5组。假手术组、缺氧缺血组、4 mg孕酮组、8 mg孕酮组和16 m孕酮组。动物先行左侧颈总动脉结扎术,再吸入8%O2和92%N2的混合气体2.5 h建立HIE动物模型。药物组于建立模型前30 min给予不同剂量孕酮溶液,24h后动物全部处死,观察各组新生鼠脑组织中SOD活性和MDA含量的变化。结果缺氧缺血组新生鼠脑组织中SOD活性明显低于假手术组(P<0.01),丙二醛含量明显高于假手术组(P<0.01),药物组SOD活性明显高于缺氧缺血组(P<0.05),丙二醛含量低于缺氧缺血组(P<0.05)。结论孕酮通过升高新生鼠缺氧缺血时脑组织中SOD活性和降低丙二醛含量发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用。     

别嘌呤醇对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的　探讨别嘌呤醇 (ALLO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的影响。方法　将新生 7日龄SD大鼠 14 3只随机分为别嘌呤醇治疗组、缺氧缺血对照组和假手术组 ,缺氧缺血后即刻、2 4和 4 8h分别腹腔注射ALLO或生理盐水 ,然后观察ALLO对HIBD模型鼠缺氧缺血 (HI)后 4 2h脑含水量、72h脑神经元凋亡(TUNEL法 )及超微结构改变、14d体质量增长率、脑病理改变 (海马神经元死亡率 )、30d学习分辨能力和记忆保持能力 (三臂迷宫试验 )等的影响。结果　脑含水量 :治疗组缺血侧 [( 84 .75± 4 .5 2 ) % ]含水量较对照组[( 92 .32± 3.75 ) % ]明显减少 (P <0 .0 1) ;TUNEL染色结果 :HI后 72h缺血侧脑组织可见较多凋亡细胞。治疗组缺血侧皮质凋亡细胞数明显低于对照组 [分别为 ( 93.6± 10 .8)和 ( 110 .5± 16 .9)个 / 30 0 0个细胞 ,P <0 .0 1],治疗组缺血侧海马凋亡细胞数明显低于对照组 [分别为 ( 83.2± 11.5 )和 ( 94 .2± 12 .3)个 / 30 0 0个细胞 ,P <0 .0 5 ];超微结构改变 :对照组凋亡细胞数为 18%左右 (计数 30个视野 ) ,而治疗组为 6 %左右 ,治疗组细胞坏死、丢失也较对照组减轻 ;HI后 14d体质量增长百分率 (WIP) :治疗组 [( 16 7.0± 33.6 ) % ]较对照组 [( 135 .6±4 7.5 ) % ]无显著性差异 (P >0 .0 5     

神经生长因子对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内ATP酶的影响

缺血缺氧性脑损伤 (HIE)在临床上致死率和致残率都很高 ,是严重威胁新生儿健康的疾病之一 ,而且病因相当复杂 ,其中脑内细胞膜酶活性的变化也是造成细胞膜损害的原因之一。神经生长因子 (NGF)对损伤神经细胞具有修复作用 ,对缺血缺氧性脑损伤有一定的治疗作用 [1 ] 。本文研究NGF对 HIE模型大鼠细胞 Na+ ,K+ - ATP酶和 Ca2 + - ATP酶活性的影响。1　材料和方法1.1　实验动物和分组　新生 7d龄 Wistar大鼠购自中国科学院实验动物中心 ,体质量 (10± 2 ) g,雌雄不限 ,随机分为假手术组、HIE对照组、NGF组和生理盐水组。 NGF由本…     

脑室内注射胰岛素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞凋亡的影响

目的 探讨胰岛素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIE)神经细胞凋亡的影响。方法 建立新生大鼠HIE模型 ,缺氧缺血后2h治疗组侧脑室注入胰岛素1IU/kg,对照组注入磷酸盐缓冲液5μl。缺氧缺血后3.5h监测血糖。缺氧缺血后24h利用透射电镜及末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位缺口末端标记法检测大脑皮层和海马两部位的神经细胞凋亡情况和采用免疫印迹法检测脑组织半胱天冬酶 -3(Caspase-3)P20亚单位表达。 结果 透射电镜下 ,对照组大脑皮层和海马部位易观察到凋亡神经细胞 ,治疗组则很少观察到凋亡神经细胞。治疗组皮层部位和海马部位的凋亡细胞明显低于对照组 (t=6.940和5.855,均P<0.01)。治疗组血糖水平与对照组差别无显著性意义(t=0.733,P>0.05)。治疗组Caspase -3P20亚单位ID值明显低于对照组 (w=24.00,P<0.05)。结论胰岛素具有减少HIE新生大鼠神经细胞凋亡的作用 ,其抗凋亡作用可能通过抑制Caspase-3的活化来实现。     

新生大鼠缺氧缺血性脑病脑组织内丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶的动态变化

利用生后７ｄＳＤ大鼠制成缺氧缺血脑病（ＨＩＥ）模型,在模型后２、１２、２４、４８、７２ｈ处死动物,检测脑组织内丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的变化。结果：模型后２ｈＭＤＡ显著升高,１２ｈ达高峰,以后逐渐下降,７２ｈ恢复正常;ＧＳＨ－ＰＸ在模型后２ｈ显著下降,以后逐渐升高,７２ｈ虽低于正常组,但无统计学差异。提示：新生大鼠ＨＩＥ时脂质过氧化增强,抗氧化减弱。     

亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的远期保护作用

目的：研究亚低温对缺氧缺血性脑损伤的远期保护作用。方法：Wistar 7d龄新生大鼠，随机分为缺氧缺血后24h亚低温干预组、48h亚低温干预组、72h亚低温干预组、常温（37℃）恢复组、正常对照组（假结扎组）。亚低温组每组12只动物，各取2只作为探针动物。其余每组10只动物。制造缺氧缺血性脑损伤模型，于亚低温干预后35d，用迷宫实验检测其学习和记忆能力，然后断头处死，制作脑组织病理切片，作微管关联蛋白－2免疫组织化学染色，染色结果经计算机图像分析系统处理，计算脑梗死面积。结果：亚低温干预各组第1d和第2d迷宫实验达标所需反应次数明显少于常温恢复组（P＜0．05），正确反应率明显高于常温恢复组（P＜0．05）。随着亚低温干预持续时间的延长，所需反应次数逐渐减少，正确反应率逐渐提高。亚低温干预各组脑梗死面积比常温恢复组显著减少（P＜0．05）。且随着亚低温干预持续时间的延长，梗死面积逐渐减少。结论：亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有远期保护作用，且随着亚低温干预持续时间的延长，保护作用增强。     

新生大鼠脑低氧缺血早期纹状体多巴胺含量的变化

采用新生大鼠脑低氧缺血及单纯缺氧模型,测定动物脑损伤早期纹状体多巴胺(DA)含量的变化.右颈总动脉结扎合并2h高温,低氧导致7日龄大鼠出现自发性向右旋转,左右侧纹状体DA含量失平衡,右侧低于左侧。单纯脑缺氧动物既无自发性旋转,又无DA含量失衡。提示脑缺氧缺血对纹状体DA末梢造成损伤。本文结合前文[1]工作结果,比较并讨论了发育中动物纹状体不同递质系统对脑缺氧缺血的敏感性。     

脑神经生长素对新生儿缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：探讨脑神经生长素对新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）脑损伤的保护作用。方法：选取本院新生儿科收治的98例 HIE 新生儿采用随机数字表法分为试验组和对照组各49例,两组患儿均采用常规治疗,试验组加用脑神经生长素治疗,两组患者均治疗7d 后观察临床效果。结果：治疗后第7d、第14d 两组患儿的 NBNA 评分均显著高于治疗第1d 和对照组;试验组患儿治疗3个月、6个月的 MDI、PDI 评分均显著的高于对照组患儿;试验组患儿治疗有效率81.63%显著高于对照组的63.27%。结论：脑神经生长素辅助常规疗法对 HIE 患儿脑损伤具有显著的保护作用,有利于患儿远期智能发育。     

缺氧缺血性脑损伤新生鼠Foxg1基因与脑皮质特定基因的表达变化及意义

目的检测缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）后Foxg1基因及脑皮质特定基因（Foxp2,ER81,Otx1,Foxp1,RORB,Reelin）的动态变化。方法采用Rice法制作新生鼠HIBD动物模型,假手术组作为对照组,分别在术后第3、7、14、28、56d取右侧脑半球。半定量RT—PCR检测各基因表达水平。结果HIBD后Foxg1基因表达水平模型组3d较对照组低（P〈0．05）,14、56d表达水平均较对照组高（P〈0．05）;Reelin基因表达水平在术后7d及28d均较对照组高（P〈0．05）;Foxp2基因在7、14、56d表达水平均较对照组高（P均〈0．05）。Otx-1基因在术后7、14、28、56d表达水平均较对照组高（P均〈0．05）,模型组与对照组Otx-1的表达均呈下降趋势;RORβ、Foxp1、ER81表达趋势尚不能肯定。结论HIBD后Foxg1、Reelin及Foxp2表达水平呈上升趋势,Otx1呈下调趋势,RORD、Foxp1、ER81表达趋势尚不能肯定,Foxg1基因表达变化与脑损伤后大脑结构自身修复的具体机制有待进一步研究。     

鼠脑损伤早期脑微血管多巴胺含量的变化及其临床意义

目的探讨大鼠脑损伤早期脑微血管多巴胺的变化及其临床意义。方法用改良的Ｆｅ－ｎｅｙ’ｓ法制作脑损伤模型,应用干－湿重法检测脑组织水含量,利用高效液相色谱－电化学检测器检测大鼠脑损伤不同时程脑微血管（ｂｒａｉｎｍｉｃｒｏｖｅｓｅｌｓ,ＢＭＶｓ）中多巴胺（ｄｏｐａｍｉｎｅ,ＤＡ）的含量。结果脑损伤后０．５ｈ,脑微血管中ＤＡ含量与对照值相比显著增加（Ｐ＜０．０１）,２４ｈ仍显著高于对照值（Ｐ＜０．０１）;脑损伤后０．５ｈ脑皮质及脑白质水含量显著高于对照值（Ｐ＜０．０１）,伤后２４ｈ达高峰,与对照值相比差别显著（Ｐ＜０．０１）。结论脑微血管ＤＡ与创伤性脑水肿的发生、发展有密切关系。     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑细胞凋亡的研究

目的　利用大鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型 ,观察缺氧缺血性脑损伤后不同时间细胞形态变化及细胞的死亡形式 ,为缺血缺氧性脑病提供实验和理论依据。方法　 7日龄SD大鼠 6 6只 ,随机分为对照组、假手术组和实验组 (缺氧缺血不同时间 ) ,实验组动物采用阻断左侧颈总动脉后置于含 8%O2 的低氧环境中 ,建立缺氧缺血性脑损伤动物模型。用HE、硫堇及TUNEL染色技术在光镜下观察脑组织的病理改变。结果　大鼠缺氧缺血后 3h时脑细胞即有水肿 ,6h时发现有局灶性坏死 ,12、2 4和 48h可发现大量坏死神经细胞 ;在缺氧缺血后 3h细胞凋亡出现 ,之后凋亡细胞数目明显增加。凋亡出现在细胞坏死之前。结论　新生鼠缺氧缺血性脑损伤后 ,细胞死亡有凋亡和坏死两种形式。     

葛根素在新生鼠缺氧缺血性脑损伤中的神经保护作用

目的:建立新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型,观察新生鼠缺氧缺血后脑组织一氧化氮(NO)和NO合成酶(NOS)及神经元凋亡的变化及葛根素对HIBD的保护作用及机制.方法:用7日龄SD大鼠制备HIBD模型,治疗组在缺氧缺血(HI)后早期腹腔注射葛根素50 mg/kg两次. 在HI后不同时间测定脑组织匀浆NO和NOS含量以及神经元凋亡数量.结果:HIBD组在HI后24 h脑组织NO,NOS明显高于对照组(P＜0.05) ;HI后6 h海马CA1区凋亡细胞增多,24 h达高峰;葛根素组24 h脑组织NO,NOS较HIBD组相比, 显著下降(P＜0.05),同时海马CA1区的凋亡细胞数在24 h较HIBD组明显减少(P＜0.05).结论:葛根素可通过抑制NOS的表达,减少NO的过量生成,从而减轻HIBD后的神经元凋亡,表明葛根素对新生大鼠HIBD有保护作用.     

灯盏乙素抗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用及对p38 MAPK表达的影响

目的：探讨灯盏乙素抗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用及对p38 MAPK表达的影响及机制。方法45只健康新生7日龄SD大鼠随机分为假手术组、缺血缺氧组、灯盏乙素组（25 mg/kg）。分别于用药后第24小时、3天、7天每组处死大鼠各5只，取脑组织切片。采用TUNEL染色检测神经细胞凋亡；采用免疫组织化学染色检测p38 MAPK的表达高峰、表达变化趋势。结果缺氧缺血后海马CA1区神经细胞凋亡，p38 MAPK表达增加；灯盏乙素组神经细胞凋亡及p38 MAPK表达均减少（与同一时间点缺氧缺血组比较差异有统计学意义P<0.05）。结论灯盏乙素可能是通过抑制p38 MAPK信号通路而减少神经细胞凋亡，从而发挥脑保护作用。     

缺氧预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的：观察缺氧预处理（HPC）对心肌细胞的保护作用,并对其保护机制进行探讨。方法：在培养的乳鼠心肌细胞HPC模型上,设正常对照组、缺氧/复氧组、缺氧预处理组、优降糖+缺氧预处理组,检测HPC对心肌细胞的存活率、培养液中乳酸脱氢酶（LDH） ,肌酸激酶（CK）和丙二醛（MDA）含量、细胞内ATP含量和细胞黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。结果：HPC可提高细胞生存率,减少细胞内ATP的降解,降低细胞内LDH及CK的漏出,减少细胞脂质过氧化物（MDA）的生成,并抑制ICAM-1的表达增加。ATP敏感性钾离子通道（ATP sensitive K+ channel,KATP通道）阻断剂优降糖可完全消除HPC对心肌细胞的保护作用。结论：在HPC心肌细胞保护作用机制中,KATP通道是重要的效应子,其机制与抑制ICAM-1的表达有关。     

实验性大鼠脑损伤胰岛A细胞和B细胞免疫组织化学变化

目的观察大鼠实验性脑损伤期间胰岛A、B细胞的变化。方法采用落体法制大鼠脑损伤模型,用免疫组织化学方法观察在大鼠脑损伤期间胰岛A、B细胞的变化,并对以上结果进行图像分析及统计学处理。结果与对照组相比,大鼠脑损伤后3d胰岛A细胞免疫反应明显增强(P<0.05),胰岛B细胞免疫反应明显减弱(P<0.05);脑损伤后7d、14d胰岛A细胞和B细胞免疫反应均无显著性差异(P>0.05)。结论在大鼠实验性脑损伤期间,胰岛A、B细胞可能共同参与了机体抗损伤的代谢活动,A细胞的作用更为显著。     

Neuroprotection by S-PBN in hyperglycemic ischemic brain injury in rats

Background

Hyperglycemia exacerbates focal ischemic brain damage supposedly through various mechanisms. One such mechanism is oxidative stress involving reactive oxygen and nitrogen species (RONS) production. Nitrones attenuate oxidative stress in various models of brain injury. Sodium 2-sulfophenyl-N-tert-butyl nitrone (S-PBN) can be administered experimentally and has been shown to be neuroprotective in experimental brain trauma.

Aims of the study

We hypothesized that S-PBN might be neuroprotective in hyperglycemic focal cerebral ischemia.

Material and methods

Rats were made hyperglycemic by an intraperitoneal bolus injection of glucose (2 g/kg) and then subjected to 90 min transient middle cerebral artery occlusion (MCAO). They were randomized to a therapeutic regime of S-PBN (156 mg/kg) or saline given intravenously. Neurological testing according to Bederson and tetrazolium red staining were performed after 1 day.

Results

S-PBN improved the neurological performance at day 1 both in Bederson score (1.3 ± 0.8 versus 2.7 ± 0.48) and on the inclined plane (74.5% ± 4.6 (S-PBN) versus 66% ± 8.3 (control), P < 0.05) but did not reduce the infarct size. Physiological data did not differ between groups.

Conclusion

S-PBN may improve neurological performance at short-term survival (1 day) in the present model of hyperglycemic-ischemic brain injury in rats. This effect appeared not to be primarily related to reduced infarct size.