自然流产患者蜕膜组织TNF-α及TGF-β1mRNA的表达分析

目的研究自然流产患者子宫蜕膜组织中细胞因子TNF-α和TGF-β1mRNA的表达格局。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测了15例早期自然流产及20例同期正常早孕要求行人工流产者蜕膜组织的TNF-α和TGF-β1mRNA表达水平。结果流产组和对照组蜕膜组织TNF-αmRNA的表达水平分别为1.98±0.52和1.08±0.10;TGF-β1mRNA的表达水平分别为0.82±0.34和1.41±0.23。统计结果显示,与对照组相比,早期自然流产病人的蜕膜组织中TNF-αmRNA的表达水平明显增加(P<0.01),而TGF-β1mRNA的表达水平则显著降低(P<0.01)。结论早期自然流产的发生可能与母胎界面TNF-α和TGF-β1mRNA的异常表达有关。     

自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达

目的通过检测自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9表达,探讨二者与自然流产发生的关系。方法采用免疫组化SABC法测定30例自然流产与20例同期正常早孕要求行人工流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达。结果流产组蜕膜组织中TNF-α,MMP-9阳性表达率分别为86.7%,83.3%,高于对照组(13.3%,P=0.006;16.7%,P=0.005),两组蜕膜组织中二者的表达有显著性差异,P0.05。结论自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达增高,提示TNF-α,MMP-9在自然流产的发生中起重要作用。     

早期自然流产患者TNF-α异常表达

目的探讨自然流产患者母胎界面肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的异常表达.方法采用半定量免疫组化技术,检测30例早期自然流产患者(自然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)绒毛和蜕膜组织内TNF-α表达强度.结果自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组(P＜0.01).结论早期自然流产患者细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

血清TNF-α及sHLA-G水平与习惯性流产的关联性分析

目的通过定量方法研究测定习惯性流产（RSA）患者血清中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及可溶性人白细胞抗原G（sHLA-G）的水平,探讨TNF-α及sHLA-G与习惯性流产有无相关性。方法选择早期妊娠孕妇100例,正常对照组：无自然流产史早期妊娠健康孕妇42例,RSA组：有习惯性流产史二次及二次以上的早期妊娠妇女58例,采用酶联免疫（ELISA）法定量检测两组样本血清中TNF-α及sHLA-G的水平。结果 RSA组血清中外周血淋巴细胞的TNF-α表达水平则明显高于正常妊娠组差异有显著性（P〈0.05）,而sHLA-G的表达水平明显低于正常对照组,差异有显著性（P〈0.05）。结论妊娠早期孕妇血清中TNF-α及sHLA-G与妊娠成功有直接关系,TNF-α升高及sHLA-G降低可能会导致习惯性流产的发生。     

早期自然流产患者母胎界面E-钙黏素与β-连环素的异常表达

目的探讨早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织E-钙黏素（E—cadherin）与β-连环素（β-catenin）的异常表达。方法采用免疫组化sP法和显微图像分析系统，检测20例早期自然流产（自然流产组）及24例正常早期人工流产（正常妊娠组）绒毛和蜕膜组织内E—cadherin、β-catenin表达的平均光度及积分光度。结果E—cadherin、β-catenin．在自然流产组和正常妊娠组绒毛与蜕膜组织中均有表达。自然流产组绒毛细胞滋养细胞和蜕膜细胞表面E—cadherin、β-catenin表达平均光度及积分光度均明显高于正常妊娠组，P〈0．001，差异有统计学意义。结论E—cadherin及β-catenin对妊娠维持起一定的作用。蜕膜及绒毛组织E—cadherin与β-catenin的高表达可能是导致早期自然流产的原因之一。     

蜕膜组织MMP-9/TIMP-3水平与自然流产关系

目的研究蜕膜组织中MMP-9／TIMP-3之间的平衡与自然流产发生的关系。方法用免疫组化S-P法测定30例自然流产患者与20例正常妊娠者蜕膜组织中MMP-9／TIMP-3的表达。结果研究组蜕膜细胞MMP-9表达阳性率为76．7％，高于对照组(55．0％，P-0．02)，两组蜕膜细胞TIMP-3的表达差异无显著性。结论自然流产患者蜕膜组织中MMP-9的表达增高，TIMP-3表达正常所导致的MMP-9／TIMP-3比例升高，在自然流产的发生中起重要作用。     

整合素β1在早期自然流产患者蜕膜组织中的表达及意义

目的本实验通过测定早期自然流产蜕膜组织中整合素β1的表达,了解整合素β1在蜕膜组织中表达的主要部位,探讨其与自然流产的关系。方法应用免疫组织化学法,对41例妇女蜕膜组织中整合素β1的表达进行检测,其中20例为早期自然流产患者(流产组),21例为要求终止妊娠的正常早孕妇女(对照组)。结果整合素β1在早孕蜕膜组织的细胞浆内,在间质细胞、腺上皮细胞及腔上皮细胞浆内均有表达,在早期自然流产组蜕膜组织中整合素β1的表达(12例呈阴性,8例呈弱阳性,0例呈阳性,0例呈强阳性)明显低于对照组(3例阴性,4例弱阳性,11例阳性,3例强阳性),两者比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论整合素β1在早期自然流产中呈低表达或不表达,可能是导致自然流产相关因素之一。     

自然流产小鼠蜕膜组织和血清中TNF-α受体1的表达特点

目的比较正常妊娠与自然流产小鼠模型蜕膜组织受体1（TNFR1）和血清中可溶性TNFR1（sTNFR1）表达特征的差异,探讨TNFR1和sTNFR1与不明原因自然流产的关系。方法建立正常妊娠模型CBA×BALB／c和自然流产模型CBA×DBA／2。采用免疫组化SABC法测定两组模型孕13天蜕膜组织TNFR1的表达水平;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定两组模型孕13天血清sTNFR1的表达水平。结果自然流产模型蜕膜组织TNFR1的表达显著高于正常妊娠模型（P〈0．01）,血清sTNFR1的表达水平显著高于正常妊娠模型（P〈0．05）。结论TNFR1和sTNFR1与自然流产的发生发展有关。蜕膜组织TNFR1表达的增加是自然流产发生的原因之一,而血清sTNFR1水平的升高则对妊娠具有自我保护和自我调控的生理机制。     

正常妊娠与自然流产小鼠模型蜕膜组织和血清中TNFR1的表达

目的:比较正常妊娠与自然流产小鼠模型蜕膜组织肿瘤坏死因子受体1(Tumor necrosis factor receptor 1,TNFR1)和血清可溶性肿瘤坏死因子受体1(Soluble tumor necrosis factor receptor 1,sTNFR1)表达差异,探讨TNFR1和sTNFR1与不明原因自然流产的关系.方法:建立正常妊娠模型CBA×BALB/c和自然流产模型CBA×DBA/2.采用SABC法测定两组模型孕13天蜕膜组织TNFR1的表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)测定两组模型孕13天血清sTNFR1的表达水平. 结果:自然流产模型蜕膜组织TNFR1的表达显著高于正常妊娠模型(P<0.01),血清sTNFR1的表达水平显著高于正常妊娠模型(P<0.05).结论:TNFR1、sTNFR1与自然流产的发生发展有关.蜕膜组织TNFR1表达的增加是自然流产发生的原因之一,而血清sTNFR1水平升高可能对妊娠具有自我保护和自我调控作用.     

体外受精-胚胎移植术后早期自然流产蜕膜组织中Livin的表达

目的研究体外受精-胚胎移植（IVF-ET）术后早期自然流产与正常妊娠人工流产蜕膜组织中细胞凋亡与凋亡抑制蛋白Livin的表达,分析并探讨细胞凋亡及Livin与IVF-ET术后自然流产的关系。方法对30例IVF-ET术后早期自然流产患者（研究组）和22例正常妊娠要求人工流产患者（对照组）的蜕膜组织进行研究。应用TdT介导的dUTP缺口原位末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡情况;应用免疫组化SP法检测Livin的表达。结果研究组蜕膜组织细胞凋亡指数（AI）（42.07±8.26%）明显高于对照组（17.86±7.40%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;研究组蜕膜组织中Livin的表达（2.33±1.40分）明显低于对照组（5.64±1.94分）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 IVF-ET术后早期自然流产患者蜕膜组织中Livin蛋白表达下降导致细胞凋亡过度,可能在自然流产的发生发展中起重要作用。     

孕酮及其受体、IL-8与原因不明自然流产的相关性研究

目的：探讨孕酮（P）及其受体（PR）、IL-8在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达及相关性。方法：ELISA检测30例原因不明自然流产患者（流产组）和30例正常妊娠妇女（对照组）血清P、IL-8水平,免疫组织化学染色法检测两组流产绒毛和蜕膜组织PR、IL-8表达。结果：流产组血清P水平明显低于对照组（P<0.01）,血清IL-8水平明显高于对照组（P<0.01）。两组绒毛组织PR蛋白表达均为阴性;两组蜕膜组织中PR均表达于蜕膜细胞的细胞核,且流产组表达明显低于对照组（P<0.01）。两组绒毛组织中IL-8均表达于绒毛上皮细胞的细胞质,且流产组表达明显高于对照组（P<0.01）;两组蜕膜组织中IL-8均表达于蜕膜细胞的细胞质,且流产组表达高于对照组（P<0.05）。流产组血清P与IL-8呈显著负相关（r=-0.870,P<0.01）,流产组蜕膜组织PR与IL-8呈显著负相关（r=-0.650,P<0.01）。结论：P、PR低表达、IL-8高表达可能与原因不明自然流产发生相关,且P、PR可能通过下调IL-8表达维持正常妊娠。     

血清中TNF-α和IL-10与原因不明复发性流产的关系研究

目的本实验通过检测不明原因复发性流产(URSA)患者和健康早孕者外周血清中TNF-α及IL-10的水平,探讨TNF-α及IL-10与URSA是否存在相关性,以及在URSA发生发展中的可能途径。方法前瞻性研究2008-2010年在杭州市第一人民医院门诊患者。年龄25~35周岁,孕龄<12周,将有≥3次自然流产的URSA患者作为研究组;将曾有正常生育史,本次要求行人工流产终止妊娠的早孕健康妇女作为对照组,分别选择30例。用ELISA法检测血清TNF-α及IL-10的水平,比较是否存在统计学差异。结果 1.血清中TNF-α在研究组中的水平明显增高,有显著统计学意义(P<0.05);2.血清中IL-10在两组中的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 1.血清中TNF-α可作为判断URSA的参考指标;2.TNF-α可能参与URSA的发生发展。     

血清IL-2、TNF-α及IL-13在类风湿关节炎诊断与治疗中的临床意义

为探讨血清IL-2、TNF-α及IL-13在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断与治疗中的临床意义,收集了30例RA患者外周血,其中经过常规治疗的患者27例,常规治疗合并生物制剂治疗的患者3例,以30例健康体检者为正常对照,采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测RA患者治疗前后血清中IL-2、TNF-α及IL-13的表达水平,并分析IL-2、TNF-α及IL-13与临床指标RF、CRP、ESR的相关性。结果发现RA患者治疗前血清IL-2、TNF-α及IL-13表达水平明显高于健康对照组(P<0.05),常规治疗后IL-2表达水平降低(P<0.05),常规治疗合并生物制剂治疗后IL-2、IL-13表达水平明显降低(P<0.05);RA患者发病期血清IL-2、TNF-α及IL-13与RF、CRP、ESR呈正相关(P<0.05)。该研究提示RA患者血清中IL-2、TNF-α及IL-13的表达在RA的诊断与治疗中有一定的临床意义。     

反复自然流产患者母胎界面SOCS3蛋白、TNF-α及IL-10的表达

目的:研究反复自然流产患者蜕膜组织中细胞因子信号转导抑制因子SOCS3,细胞因子TNF-α及IL-10的表达,并与正常妊娠作对照。方法:Western blot检测SOCS3的表达,免疫组织化学法检测细胞因子TNF-α及IL-10的表达。结果:反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3的表达明显降低(P<0.01),差异有统计学意义,IL-10表达降低(P<0.01),TNF-α表达增高(P<0.05),差异有统计学意义。结论:与正常妊娠相比,反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3蛋白及IL-10表达降低,TNF-α表达增高,差异有统计学意义,说明反复自然流产患者母胎界面Th1/Th2失衡,SOCS3蛋白可能通过与细胞因子的相互调控作用影响Th1/Th2平衡导致流产发生。     

IL-1β和TNF-α表达量与新生儿缺血缺氧性脑病脑损伤程度的相关性

目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿脑脊液及血清中IL-1β和TNF-α的表达量与其脑损伤程度的关系.方法:采用双抗体夹心ELISA法检测24例HIE患儿(其中轻度5例、中度7例、重度12例)和13例正常新生儿脑脊液及血清中IL-1β、TNF-α水平,并对其表达量与HIE的严重程度的关系进行分析.结果:HIE患儿脑脊液及血清中IL-1β、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01)脑脊液中的IL-1β及TNF-α的表达量随HIE的脑损伤程度的增加而升高(P<0.01).结论:HIE患儿脑脊液及血清中的IL-1β及TNF-α水平与正常组具有统计学意义,HIE患儿脑脊液中的IL-1β及TNF-α水平随HIE患儿脑损伤程度的增加而升高.     

早孕期蜕膜基质细胞对蜕膜辅助性T细胞的调节作用

为了解蜕膜基质细胞(decidual stromal cell, DSC)对Th的免疫调节作用,分离及纯化27例不明原因自然流产(unexplained miscarriage, UM)与30例正常早孕妇女的原代DSC和蜕膜CD4~+ T细胞,并建立共培养体系。在正常早孕妇女的对照下,ELISA和FCM分析UM患者DSC和蜕膜CD4~+ T细胞,发现患者中两类细胞分泌TNF-α明显增加,而IL-4、IL-10明显减少;FCM法分析发现UM患者DSC表达CD80和CD86水平上升,表达PD-L1和PD-L2水平下降;UM患者蜕膜CD4~+ T细胞表达CTLA-4和PD-1下降;共培养5d后,UM患者CD4~+ T细胞分泌的TNF-α显著上升,而IL-4明显降低。由此UM患者母-胎界面的DSC传递协同刺激信号增强、协同抑制信号减弱,诱导CD4~+ T细胞发生Th1型免疫偏倚,可能是UM的免疫致病因素之一。     

早期自然流产患者TNF-α mRNA的异常表达

目的探讨自然流产患者外周血单个核细胞内肿瘤坏死因子-α mRNA的异常表达.方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例早期自然流产患者、25例正常妊娠妇女、25例正常未妊娠妇女外周血单个核细胞内TNF-α mRNA.结果早期自然流产患者、正常妊娠妇女、正常未妊娠妇女三组研究对象外周血单个核细胞表达TNF-α mRNA相对含量分别为20.1±9.4%、68.6±14.1%、97.0±11.6%.结论早期自然流产患者外周血单个核细胞TNF-α mRNA表达水平显著下降,提示流产过程中能分泌TNF-α的单个核细胞可能聚集于母胎界面,TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的研究CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达情况。方法应用免疫组织化学染色和图像分析技术,观察CXCR2在不明原因自然流产患者（病例组）和正常人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中的表达情况;HE染色后光镜下观察不明原因自然流产患者绒毛与蜕膜组织的形态学变化。结果免疫组化染色结果显示：两组CXCR2蛋白主要表达于绒毛的滋养层、蜕膜组织中的腺体,病例组绒毛滋养层和腺体CXCR2蛋白表达均强于对照组,两组比较,有显著性差异（P〈0.01）。病例组蜕膜细胞CXCR2蛋白呈阳性表达,对照组呈阴性;HE染色可见不明原因自然流产患者绒毛组织的滋养层变薄、滋养层细胞变性甚至坏死、滋养层嗜酸性增强、绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞连接松散、蜕膜细胞空泡化、蜕膜组织中有大量炎细胞浸润。结论 CXCR2可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与不明原因自然流产的病理过程。     

复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8的表达

目的:研究复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的表达。方法:应用免疫组化法及图像分析技术,对30例复发性自然流产患者绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析;H- E染色后光镜下观察绒毛及蜕膜组织的形态学变化。结果:在绒毛组织中,IL-8蛋白定位于绒毛上皮细胞的细胞质内,且病例组的表达明显高于对照组;在蜕膜组织中,病例组蜕膜细胞的胞质内可见IL-8蛋白表达,且高于对照组;H- E染色可见病例组绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性甚至坏死、嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞失去细胞间连接,部分蜕膜细胞解体、核消失。结论:病例组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达的增强与复发性自然流产有关,IL-8可能参与复发性自然流产的病理过程。     

Expression of CXCR2 in villous tissues and decidua tissues of patients with spontaneous abortion

目的:研究不明原因自然流产患者绒毛及蜕膜组织中CXCR2在mRNA水平和蛋白质水平的表达情况.方法:应用半定量RT-PCR、免疫组织化学显色和图像分析技术,观察CXCR2在不明原因自然流产患者(病例组)和正常人工流产者(对照组)绒毛及蜕膜组织中的表达情况.结果:CXCR2 mRNA在对照组和病例组的绒毛及蜕膜组织中均有表达,且2组CXCR2mRNA的表达并无差异；两组CXCR2蛋白主要表达于绒毛的滋养层,蜕膜组织中的腺体,病例组绒毛滋养层和腺体CXCR2蛋白表达均显著强于对照组.病例组蜕膜细胞CXCR2蛋白呈阳性表达,对照组呈阴性.结论:CXCR2可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与不明原因自然流产的病理过程.