树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养对白血病耐药细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨负载P-糖蛋白(P-gp)高表达的多药耐药(MDR)白血病K562/A02细胞冻融抗原的树突状细胞(DC)与同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养对MDRK562/A02杀伤作用的影响。方法提取健康人骨髓单个核细胞,常规诱导出DC及CIK,将K562/A02细胞冻融物作为抗原冲击的DC,与CIK共培养作为实验组,抗原不冲击的DC与CIK共培养作为对照组,以CIK及DC单独培养分别作为空白对照组1和空白对照组2。光镜下观察细胞形态,流式细胞术分析细胞表型,MTT法检测杀伤活性。结果实验组、对照组细胞增殖活性均大于CIK组(P<0.05)。实验组对K562/A02、K562的杀伤活性在效靶比5∶1、10∶1、20∶1时分别为(42.90±0.67)%、(49.85±0.28)%、(63.36±0.46)%和(23.56±0.43)%、(26.11±0.34)%、(34.46±0.35)%,均高于对照组及空白对照组1(P<0.05);实验组对K562/A02的杀伤活性高于K562和MCF7(P<0.05)。结论DC与CIK共培养物是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK的免疫活性细胞,而经冻融抗原冲击的DC与CIK共培养能明显提高对MDRK562/A02的杀伤活性。     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞抗肿瘤效应研究

树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)是肿瘤免疫治疗的两个重要部分,DC是人体内专职抗原递呈细胞,CIK是高效肿瘤杀伤细胞,前者识别病原,启动获得性免疫系统,后者通过发挥自身细胞毒性与分泌性细胞因子杀伤肿瘤,两者联合可以更好的杀伤肿瘤细胞,被认为是肿瘤过继免疫治疗的新希望。     

树突状细胞疫苗在抗肿瘤免疫治疗中的研究进展

树突状细胞(dendrtic cell DC)起源于造血干细胞(hemopoieticstemcell),是目前发现的功能最强大的抗原提呈细胞(APC)。DC自身具有免疫刺激能力,是目前发现的惟一能激活未致敏初始型T细胞的APC,DC不仅能够以抗原特异的形式启动T细胞,识别和杀伤肿瘤细胞,而且还可以激发免疫记忆保护,在宿主再次受到肿瘤细胞攻击时发挥保护作用。     

树突状细胞调节和细胞因子诱导的杀伤细胞的抗肿瘤机制及其在结直肠癌治疗中的应用前景

利用细胞因子诱导树突状细胞（dendritic cell，DC）和细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer，CIK细胞），以肿瘤抗原冲击DC，将经过抗原冲击的DC和CIK细胞按一定比例混合进行共培养，得到一种新的免疫效应细胞群，即DC调节和细胞因子诱导的杀伤细胞（DCIK细胞）。DCIK细胞具有识别和特异性杀伤恶性细胞的作用，打破了放化疗“敌我不分”的状况。DCIK细胞不但存活率高，增殖能力强．而且对肿瘤细胞具有特异性杀伤能力，为肿瘤免疫治疗开创了一条新的途径。     

细胞因子诱导的肿瘤杀伤细胞的临床应用

细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）是一类异质细胞群,由上世纪80年代中期Schmidt-wolf从外周血单核细胞中诱导产生,同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子,兼具T淋巴细胞强大的杀瘤活性和NK细胞的非MHC限制性,故又被称为NK细胞样T淋巴细胞。与以往报告的一些抗肿瘤效应细胞相比,CIK细胞杀瘤活性更强、杀瘤谱更广。     

体外培养的树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞相互作用的研究

目的 观察同源的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤（CIK）细胞于体外同一培养体系共同培养时的相互影响,为临床联合应用DC和CIK细胞进行肿瘤生物治疗提供依据.方法 用无血清培养基进行DC和CIK细胞的体外培养制作,共同培养1 w后,检测CIK细胞免疫表型、杀瘤活性的变化以及DC分泌IL-12的变化.结果 DC与CIK细胞的共培养会增加CIK细胞的CD3CD56双阳性细胞的比例和非特异性增强对K562细胞的杀伤活性;同时增强DC分泌IL-12的能力.结论 体外共培养DC与CIK细胞可相互增强抗肿瘤免疫活性.     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞杀伤作用

目的探讨树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞的杀伤作用。方法采用胃癌患者自身血液中单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经体外诱导分别扩增出DC和CIK细胞,二者共同培养后,利用MTT法检测DC细胞联合CIK细胞体外杀伤人胃癌细胞株(MNK-45、MNK-28、SG-7901)的活性。结果DC与CIK细胞共培养后得到的细胞群高表达CD3 CD56 ,平均值达到(56.74±7.63)%。通过彼此相互作用诱导出的细胞群体对胃癌细胞株MNK-45、MNK-28、SG-7901有杀伤作用,且杀伤活性随着效靶比的增加而增强。结论DC与CIK细胞共培养后有很强的增殖能力,对胃癌细胞具有杀伤活性,且其杀伤作用与胃癌细胞类型无相关性。     

树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞在抗肿瘤生长免疫治疗中的应用

目的研究树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在抗肿瘤生长免疫治疗中的应用情况。方法采集26例恶性肿瘤患者外周血进行细胞培养与回输,随机分为观察组(PC、CIK回输)和对照组(CIK回输)。采用流式细胞仪检测细胞免疫表型、采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α细胞因子水平,记录患者不良反应与疗效。结果观察组CD3~+/CD8~+细胞、CD3~+/CD56~+细胞双阳性细胞比例显著高于对照组(P<0.05);CIK细胞的IFN-γ、IL-12、TNF-α细胞因子均显著低于DC-CIK细胞(P<0.05);观察组不良反应率显著低于对照组、治疗效果显著优于对照组(P<0.05)。结论肿瘤患者免疫结构受损,DC-CIK免疫功能优于单纯CIK;DC-CIK生成IFN-γ、IL-12、TNF-α细胞因子能力强、杀伤肿瘤细胞效果优;DC-CIK免疫治疗可有效缓解治疗中发热、发量减少、白细胞数量降低等副作用。     

树突状细胞在寄生虫感染中的作用

树突状细胞是一类重要的抗原提呈细胞，在宿主针对寄生虫感染的免疫应答过程中起到了重要作用。该文通过分析血吸虫、疟原虫、利什曼原虫、弓形虫、锥虫、丝虫等寄生虫感染的研究现状，对树突状细胞在诱导机体保护性免疫以及参与形成寄生虫免疫逃避中的作用机制作进一步介绍。     

树突状细胞增强细胞因子诱导的杀伤细胞抗神经胶质瘤细胞作用及机制研究

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）与树突状细胞（DC）共培养后DC-CIK混合细胞抗神经胶质瘤细胞的免疫作用。方法分离健康人外周血单个核细胞,分别于体外诱导DC和CIK,然后共培养成DC-CIK细胞。实验分DC组、DC-CIK组、DC-T组和CIK组。Elisa试剂盒检测各组培养上清中IL-12和IFN．1的含量,流式细胞仪检测细胞表型,CCK一8法体外检测对神经胶质瘤细胞的杀伤活性。结果DC-CIK组培养上清中IL-12和IFN-1的含量分别为（110．24±2．22）mg／L和INF·Y／（913．46±20．64）mg／L,明显高于其它三组（P〈0．05）。DC—CIK组cDi细胞（61．34-1．31）％、CD3／CD56细胞（29．4±1．03）％也明显增加（P〈0．05）。对神经胶质瘤细胞的杀伤活性,DC—CIK组为（54．67±2．62）％,与DC组（19．44±1．07）％、DC—T组（21．27±1．85）％和CIK组（36．52±2．06）％比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DC—CIK细胞能诱导明显的神经胶质瘤细胞杀伤活性,为颅内肿瘤的免疫治疗提供了依据。     

DC与CIK或LAK联合对结肠癌细胞株SW480杀伤作用的研究

[目的]研究树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导或未诱导的杀伤细胞(CIK)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性.提供DC联合CIK或LAK治疗结肠癌的实验依据.[方法]取人外周血分离出单个核细胞(PBMNC),诱导生成DC、CIK、LAK细胞;流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后的表型变化;以CIK+DC细胞、CIK细胞、LAK+DC细胞及LAK细胞作为效应细胞,SW480为靶细胞,以15∶1、30∶1、45∶1为效靶比,LDH释放法测定细胞杀伤试验活性;ELISA检测杀伤试验中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-17的分泌水平.[结果]流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后,其表面分子HLA-DR、CD40、CD80和CD86表达分别平均为90.23％、73.68％、85.96％、57.55％,与未经肿瘤抗原冲击DC比较,DC成熟的表面标志分子表达明显增加(P＜0.01).相同效靶比下,CIK+DC细胞组对SW480的杀伤作用最强,明显高于其他细胞组(P＜0.01);CIK+ DC细胞组在效靶比为45∶1时,杀伤活性最强(P＜0.01);单独CIK细胞组的杀伤活性明显高于LAK+DC细胞组(P＜0.01);LAK+ DC细胞组的杀伤活性明显高于单独LAK细胞组(P＜0.01).效靶比为45∶1时,各杀伤试验细胞组上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17的分泌量,CIK+DC细胞组的IFN-γ、IL-12的分泌量显著高于其他细胞组(P＜0.05);LAK+DC、单独LAK细胞组IL-2的分泌量明显高于CIK+DC、单独CIK细胞组(P＜0.05);单独CIK细胞组IFN-γ的分泌量明显高于LAK+DC、单独LAK细胞组(P＜0.05).[结论]CIK+DC细胞组对SW480的杀伤活性明显强于单独CIK、LAK+ DC组、单独LAK细胞组.其机制可能是,SW480抗原致敏的DC分泌IFN-γ、IL-12等刺激、诱导CIK细胞的活化和增殖,明显增强CIK细胞杀伤SW480的活性.     

DCCIK细胞抗肿瘤的基础研究及临床应用进展

树突状细胞（dendritic cells，DC）分布于除脑和睾丸以外的身体的任何组织，是目前所知的功能最强大的专职抗原递呈细胞（antigen presenting cells，APC），亦是体内唯一具有激活幼稚T淋巴细胞诱导初次免疫应答能力的APC。     

DC-CIK联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的近期疗效观察

目的探讨DC-CIK联合化疗及常规化疗治疗晚期NSCLC患者的近期疗效。方法 64例临床确诊的晚期NSCLC患者随机分为两组,治疗组给予DC-CIK联合化疗,对照组给予常规化疗。观察治疗前后细胞免疫指标变化、KPS和疗效,及不良反应。结果治疗组CD 3＋、CD 4＋免疫学指标治疗前后比较,具有显著性差异（P值分别为0.018,0.047）,而CD 8＋、CD 4＋/CD 8＋无显著性差异;对照组CD 3＋、CD 4＋、CD 8＋、CD 4＋/CD 8＋免疫学指标治疗前后比较,无显著性差异。治疗组有效率43.75%,对照组有效率34.38%（P〉0.05）。治疗组KPS有效率84.4%,对照组KPS有效率62.5%（P〈0.05）。结论 DC-CIK联合化疗可明显改善晚期NSCLC患者外周血淋巴细胞亚群水平,能增加患者的临床疗效,提高患者的生活质量。     

化疗联合自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗急性白血病的临床观察

目的评价化疗联合自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗急性白血病(AL)的疗效。方法选择经化疗达完全缓解(CR)>6个月的AL患者41例。19例患者接受化疗联合自体CIK细胞治疗,22例接受同期单纯化疗作为对照组。CIK细胞治疗采用血细胞分离机大量采集患者的外周血单个核细胞,用抗CD3单抗、IL2、IFNγ培养10d,将细胞洗涤后经静脉于化疗后第一天回输给患者。结果CIK组19例患者化疗同时共接受52疗程CIK细胞治疗,每例患者平均接受2~3个疗程CIK细胞治疗。每疗程回输CIK细胞总数为(22~300)×109/L,平均(142±85)×109/L。4年持续CR(CCR)率CIK组为734%;单纯化疗组4年预期CCR率为273%。两者差异有统计学意义(P<0005)。接受≥3个疗程CIK治疗的10例患者至观察截止时均处于CCR,中位CCR期43个月(23~52个月);接受<3个疗程CIK治疗的患者4/9例复发。结论化疗联合自体CIK细胞治疗AL的CCR率明显优于单纯化疗;疗效与疗程有关,疗程≥3个患者的疗效优于疗程<3个的患者。     

骨髓瘤独特型抗原负载树突细胞介导的抗肿瘤效应研究

目的:研究骨髓瘤独特型抗原(Idiotype,Id)负载树突细胞(DC)对同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外抗瘤活性的影响。方法:采集健康供者外周血单个核细胞(PBMNC)用常规方法诱导DC和CIK细胞,将骨髓瘤OPM-2细胞培养上清提取的Id冲击或未冲击的DC与CIK细胞共培养(CIK、DC加CIK、Id-DC加CIK),用流式细胞术分析细胞表型,MTT法检测体外效应细胞杀伤活性。结果:在(5～20):1效靶比范围内, CIK细胞对OPM-2和K562细胞的杀伤率分别为(24．47±3．00)％～(40．64±1．62)％和(23．36±1．51)％～(42．52±2．06)％。DC加CIK及Id—DC加CIK对OPM-2和K562细胞的杀伤活性均高于CIK组,差异有统计学意义(P<0．05);而在相同效靶比之下,Id-DC加CIK对OPM-2细胞的杀伤活性最强,差异有统计学意义(P <0．05)。结论:CIK细胞对骨髓瘤细胞有强的杀伤活性,经Id负载的DC与CIK细胞共培养能进一步增强其特异性杀伤活性,对骨髓瘤可能有免疫治疗作用。     

恒定的自然杀伤T淋巴细胞在肝脏抗肿瘤免疫中的作用与机制

恒定的自然杀伤T淋巴细胞(iNKT细胞)是来源于胸腺的T淋巴细胞亚群,同时表达自然杀伤细胞相关受体和T淋巴细胞受体。iNKT细胞广泛分布于全身,在肝脏内富集,表现出独特的功能特性,可以分泌细胞因子并调节微环境其他免疫细胞活性,以达到免疫监视及预防疾病的作用,尤其是在肿瘤微环境中,iNKT细胞能够激发肝脏抗肿瘤免疫反应、逆转免疫抑制微环境状态。就iNKT细胞的生物学特性及其在肝脏免疫稳态中的特殊作用,尤其就iNKT细胞的抗肿瘤作用与机制作一综述。     

Probiotic modulation of dendritic cells co-cultured with intestinal epithelial cells

AIM:To investigate cytokine production and cell surface phenotypes of dendritic cells (DC) in the presence of epithelial cells stimulated by probiotics.METHODS:Mouse DC were cultured alone or together with mouse epithelial cell monolayers in normal or inverted systems and were stimulated with heat-killed probiotic bacteria,Bifidobacterium lactis AD011 (BL),Bifidobacterium bifidum BGN4 (BB),Lactobacillus casei IBS041 (LC),and Lactobacillus acidophilus AD031 (LA),for 12 h.Cytokine levels in the culture supernatants were determined by enzyme-linked immunosorbent assay and phenotypic analysis of DC was investigated by flow cytometry.RESULTS:BB and LC in single-cultured DC increased the expression of I-Ad,CD86 and CD40 (I-Ad,18.51 vs 30.88,46.11;CD86,62.74 vs 92.7,104.12;CD40,0.67 vs 6.39,3.37,P 0.05).All of the experimental probiot-ics increased the production of inflammatory cytokines,interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-α.However,in the normal co-culture systems,LC and LA decreased the expression of I-A d (39.46 vs 30.32,33.26,P 0.05),and none of the experimental probiotics increased the levels of IL-6 or TNF-α.In the inverted coculture systems,LC decreased the expression of CD40 (1.36 vs-2.27,P 0.05),and all of the experimental probiotics decreased the levels of IL-6.In addition,BL increased the production of IL-10 (103.8 vs 166.0,P 0.05) and LC and LA increased transforming growth factor-β secretion (235.9 vs 618.9,607.6,P 0.05).CONCLUSION:These results suggest that specific probiotic strains exert differential immune modulation mediated by the interaction of dendritic cells and epithelial cells in the homeostasis of gastrointestinal tract.