应激对小鼠单纯疱疹病毒I型潜伏感染再激活的影响

目的探讨不同应激对小鼠三叉神经节潜伏感染的单纯疱疹病毒再激活的影响,以期对疱疹病毒复发性感染的发病机制有更深的了解.方法给潜伏感染单纯疱疹病毒I型的小鼠施加高热、过度疲劳、寒冷等不同刺激,然后检测小鼠应激反应后三叉神经节单纯疱疹病毒I型抗原的表达.结果高热、过度疲劳和寒冷应激在小鼠三叉神经节均不同程度地检测到活化的病毒,以高热应激组病毒再激活的数目最多.结论应激可以诱发小鼠三叉神经节内潜伏感染的单纯疱疹病毒I型再激活,是单纯疱疹病毒复发性感染的重要诱因.     

小鼠单纯疱疹病毒I型潜伏感染模型的建立

目的　建立简便易行的单纯疱疹病毒I型 (HSV_1)潜伏感染动物模型。方法　BALB c小鼠 6 0只随机分为 3组 ,分别为鼻黏膜病毒滴入组、尾静脉接种组和角膜划痕接种组 ,进行单纯疱疹病毒I型接种。 6周后行小鼠三叉神经节病毒抗原检测和病毒DNA片段检测 ,以确认潜伏感染的存在。结果　尾静脉接种组小鼠三叉神经节病毒DNA片段的检出率为 9 12 ,角膜划痕组小鼠三叉神经节病毒DNA片段的检出率为 13 16 ,均高于鼻黏膜接种 12 2 0 ;小鼠三叉神经节病毒抗原表达均为阴性 ;尾静脉接种组死亡率 4 15 ,高于其他两组。结论　鼻黏膜病毒滴入、尾静脉注射和角膜划痕接种均可建立小鼠HSV_1潜伏感染模型 ,以角膜划痕法引起疱疹病毒急性感染症状轻恢复快 ,潜伏感染发生率高 ,为最理想的建立HSV_1潜伏感染的方法。     

小鼠单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏感染模型的建立

目的建立简便易行的单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV—1)潜伏感染动物模型。方法BALB／c小鼠60只随机分为3组，分别为鼻黏膜病毒滴入组、尾静脉接种组和角膜划痕接种组，进行单纯疱疹病毒Ⅰ型接种。6周后行小鼠三叉神经节病毒抗原检测和病毒DNA片段检测，以确认潜伏感染的存在。结果尾静脉接种组小鼠三叉神经节病毒DNA片段的检出率为9／12，角膜划痕组小鼠三叉神经节病毒DNA片段的检出率为13／16，均高于鼻黏膜接种12／20；小鼠三叉神经节病毒抗原表达均为阴性；尾静脉接种组死亡率4／15，高于其他两组。结论鼻黏膜病毒滴入、尾静脉注射和角膜划痕接种均可建立小鼠HSV—1潜伏感染模型，以角膜划痕法引起疱疹病毒急性感染症状轻恢复快，潜伏感染发生率高，为最理想的建立HSV—1潜伏感染的方法。     

小鼠脑无症状性单纯疱疹病毒Ⅰ型感染的实验研究

【目的】观察单纯疱疹病毒Ⅰ型（herpes simplex virus—type one,HSV-1）是否可以引起脑组织的无症状性感染,探讨多发性硬化的发病机制。【方法】将Balb／c小鼠分为实验组、对照组和脑炎组,在不同时间点观察小鼠神经病学体征、行为学以及体重变化;用聚合酶链反应法检测三叉神经节病毒DNA片段;免疫荧光法检测脑组织疱疹病毒抗原表达,以判定脑组织病毒增殖性感染的存在。【结果】实验组小鼠各时相点神经病学体征、神经行为学和体重变化与对照组小鼠相比较差异无统计学意义。在病毒接种的各时相点,大部分小鼠三叉神经节检测到了疱疹病毒DNA片段,同时脑的颞叶、顶叶和额叶皮层均发现片状HSV抗原阳性表达神经元,以7d组阳性细胞最多,荧光亮度最强,15d组阳性细胞减少,荧光亮度减弱。【结论】单纯疱疹病毒Ⅰ型能够引发小鼠脑组织的急性、短暂性、无症状性非坏死性感染。     

口腔黏膜的单纯疱疹病毒感染患者的临床分析

HSV属DNA病毒,分为HSV-I和HSV-Ⅱ。口腔及其周围损害大多由HSV-I感染引起,腰以下皮肤黏膜感染多数由HSV-Ⅱ引起,两者可有交叉。病毒通过飞沫、唾液和密切接触传播。HSV造成原发损害后,可潜伏在神经节,当机体疲劳、发热、情绪波动、全身疾病等影响免疫系统功能和局部受到外伤、过度日照等刺激时,潜伏HSV被激活,发生复发性疱疹损害。成人疱疹病毒感染多为复发性疱疹病毒感染,主要表现为唇疱疹。回顾性分析我院2012年9月～2013年9月收治的患者资料,现报告如下。     

HSV-1在小鼠三叉神经节潜伏感染的研究

本文报道小鼠Balb/c角膜按种HSV-1 KOS株后病毒在三叉神经节建立潜伏感染。病毒在角膜、三叉神经节、脑干、大脑皮层上的繁殖高峰滴度出现的时间依次有一段延迟,同时动物血流中未检测出病毒。以上结果支持病毒是沿神经轴突传运至CNS。潜伏感染二个月以上的病毒可通过三叉神经节和Vero细胞单层的联合培养在体外重激活。这为进一步研究HSV-1潜伏感染的机制提供一个实验模型。     

用共同培养法分离小鼠三叉神经节潜伏病毒的实验研究

本实验取BalB/C纯系小鼠角膜接种单纯疱疹病毒1型(HSV-_1SM_(44)),进入潜伏期(21天)后,分批解剖小鼠用共同培养法分离三叉神经节的潜伏病毒,病毒分离阳性率为94.5％。实验结果提示:共同培养法是一种有效的分离潜伏期病毒的方法。     

健康兔眼角膜移植术后植片衰竭与疱疹病毒感染的关系

目的：探讨移植术后植片衰竭（PGF）与疱疹病毒感染的关系。方法：建立兔角膜疱疹病毒潜伏感染模型,实验分为健康兔移植潜伏感染供体角膜(A组)和潜伏感染兔移植健康供体角膜(B组)两组,行单眼穿透性角膜移植,A组健康兔7眼移植潜伏感染供体角膜,B组潜伏感染兔7眼移植供体健康角膜,分别于术后3、5、7、14和28 d裂隙灯显微镜观察角膜,同时采集角膜拭子,应用多重PCR检测单纯疱疹病毒1型（HSV-1）、单纯疱疹病毒2型（HSV-2）、巨细胞病毒（CMV）和水痘带状疱疹病毒（VZV）核酸,以PCR阳性结果判定存在病毒感染。结果：A组2眼（2/7,28.6%）分别在术后5和28 d发生角膜PGF,多重PCR检测角膜拭子、角膜植片,受体角膜边缘及三叉神经节分别为HSV-1和VZV阳性,未检测到HSV-2和CMV;A组其余5眼（5/7,71.4%）和B组7眼（7/7,100%）角膜植片透明,角膜拭子多重PCR结果均为阴性。 结论：供体角膜疱疹病毒感染是引起穿透性角膜移植术后PGF的主要因素, 其中HSV-1和VZV更易感染兔角膜,潜伏感染的病毒可以因手术刺激被活化,感染复发引起PGF。     

三叉神经痛的病毒病因学研究近况

单纯疱疹病毒1型（HSV-1）能够在宿主感觉神经节内长久潜伏,在某些因素的刺激下再次激活,从而引起各种疾病。关于原发性三叉神经痛的病因一直有很多争论,提出感染假说以来,学者们在基础和临床等方面进行了广泛研究,近年来通过分子生物学和动物模型的研究,认为HSV-1感染是原发性三叉神经痛的病因之一,其机理可能是由于潜伏在三叉神经节的HSV-1激活造成的三叉神经痛的发作。     

单纯疱疹病毒在再生肝细胞中的增殖

单纯疱疹病毒感染后,病毒对细胞作用的研究已较详尽,而被感染细胞的生理状态对病毒感染的作用则研究不多。作者在研究单纯疱疹病毒I型(HSV-1)的不同突变株引起潜伏感染性质时,意外地发现处于旺盛分裂状态的肝细胞有明显增加病毒繁殖的作用,这可能是由于病毒在旺盛分裂的肝细胞中感染中心数的增加所致。     

CTLA-4Ig对复发性单纯疱疹性角膜基质炎的抑制作用

目的：研究CTLA-4Ig对复发性单纯疱疹性角膜基质炎（HSK）的抑制作用。方法：采用复发性HSK的BALB/c鼠模型，经紫外线B光照射角膜诱导HSK复发；使用CTLA-4Ig作为负性调节因子，观察其对复发性HSK的影响。结果：注射CTLA-4Ig的小鼠，复发性HSK的角膜混浊程度及角膜炎性细胞浸润明显减轻，迟发型超敏反应明显减弱，外周血中CT4^ T细胞减少了92.8％。结论：CTLA-4Ig通过阻断B7:CD28/CTLA-4协同刺激途径，抑制了CD4^ T细胞的增殖，阻止了复发性HSK的发展。     

HSV-Ⅰ亚单位疫苗新制备方法的初步探讨

本实验从Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染的 Hep-2细胞提取单纯疱疹病毒的亚单位疫苗。以去污剂 NP-40溶解下病毒的亚单位以及与细胞膜结合的病毒特异性糖蛋白,用超速离心的方法将其分离出来。经免疫双扩散方法检测.提取物亚单位疫苗显示了特异的抗原性。疫苗接种小鼠之后,以间接免疫荧光技术测得小鼠血清中出现的 HSV-1抗体。     

Shedding of herpes simplex virus type 1 into tears and saliva in healthy Japanese adults

It is well known that asymptomatic viral shedding is one of the forms of reactivation of herpes simplex virus type-1 (HSV-1). Although there have been some long-term investigations of viral shedding into tears and saliva in healthy subjects in the U.S.A, there have previously been no investigation study in Japan. Racial differences in the incidence of reactivation of HSV-1 have been pointed out, and it has been considered that reactivation is found less often among Japanese people than among Westerners. In the present study, we selected 10 healthy adults (7 males and 3 females) to isolate HSV-1 from tears and saliva 3 times a week over 6 months, and the results were compared with the results of other studies conducted in the U.S.A. It was found that the virus was isolated in 5 (3 males and 2 females) of 10 subjects and of the 5 subjects, the virus was isolated from saliva in 4 and from tears in 1. The number of specimens was 1,742 for tears and 871 for saliva with isolation of 1 and 4, respectively. The duration of shedding was only 1 day in all of the 5 subjects in whom the virus was isolated. The isolation frequency was significantly lower among Japanese people than among American people when our results were compared with the results of studies conducted in the U.S.A. It was clear that the reactivation rate was lower for Japanese people in terms of asymptomatic shedding.     

Latent multiple infections by herpes simplex virus type 1

Viral strains obtained during the same period which were asymptomatically shed into the saliva of patients with oral cancer after surgery or isolated from the focus of patients with herpes simplex virus type 1 (HSV-1) infection after first visit to hospital were analyzed using molecular epidemiology. There were 10 subjects in each group. Viral strains used were from 3 to 5 strains (mean: 3.4 strains) in the malignant patients and from 3 to 8 strains (mean: 5 strains) in the herpetic patients. One of 10 patients with oral cancer showed a different DNA cleavage pattern in viral strains shed into saliva at the last day. In 10 patients with HSV-1 infection, all viral strains in each of the cases showed identical DNA cleavage patterns. These results suggested the existence of a latent multiple infection and a simultaneous reactivation of HSV-1.     

灰树花多糖在小鼠体内抗病毒作用的研究

灰树花多糖具有增强免疫应答的作用。为了研究其抗病毒的作用，作者将１０ＬＤ_（５０）的流行性感冒病毒（ＰＲ８／３４株）或Ⅰ型单纯疱疹病毒分别接种小鼠，观察该成分对小鼠的保护作用。结果证明，抗流行性感冒病毒的保护效应十分明显，且与使用的剂量相关。当灌胃剂量为２０００、１０００及５００ｍｇ／ｋｇ／ｄ，病毒对照组１００％死亡时，病死率分别下降７０、６０和３０％，而抗单纯疱疹病毒的最佳浓度则较低，其病死率分别下降１０、２０和７０％。总之，灰树花多糖具有较明显的对抗流行性感冒病毒和Ⅰ型单纯疱疹病毒的作用。     

一株红树林真菌抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的研究

目的 对分离自海南红树林真菌菌株PH1018的胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)活性进行研究.方法 收集纯化菌株PH1018产生的EPS,体外采用细胞病变观察EPS的细胞毒性和抗HSV-2作用.为观察EPS对HSV-2体内感染的治疗效果,小鼠颅内注射0.02 ml滴度为100 LD50/0.1 ml-1的HSV-2,24 h后以不同浓度EPS灌胃,持续7d,14d后计算小鼠存活率和存活时间.菌株分类采用形态学观察和ITS序列分析.结果 EPS可抑制HSV-2病毒活性,病毒感染的细胞病变的半抑制浓度(Inhibited concentration,IC50)为313 μg/ml,SI为11.43.EPS 25 mg·kg-1·d-1灌胃后,小鼠存活率为40.0％,存活时间为(9.82±1.87)d,相比模型组实验动物存活时间和存活率均有提高.菌株初步鉴定为杂色曲霉.结论 从海南红树林分离一株杂色曲霉,其产生的EPS具有抗HSV-2活性,值得进一步研究.     

小鼠HSV-2阴道炎粘膜上皮细胞凋亡和Fas/FasL异常表达关系的研究

目的 :探讨 HSV- 2在体内诱导细胞凋亡的效果、形态学特点和 Fas蛋白的表达。方法 :用 HSV- 2 333株感染小鼠阴道 ,光镜下进行原位观察 ,TUNEL末端标记染色显示凋亡的细胞 ,免疫组化技术检测 Fas蛋白的表达。结果 :感染后的第 1天粘膜上皮内即出现大量的凋亡细胞 ,第 3～ 6天凋亡细胞的数量及在上皮内的分布范围达最高水平。凋亡细胞被 TUNEL标记染成棕褐色 ,经免疫组化技术证实凋亡细胞有 Fas蛋白的表达。结论 :HSV- 2 333株阴道感染可同时诱导细胞坏死及凋亡 ,Fas蛋白的表达参与了细胞凋亡的发生。细胞凋亡可能在限制病毒产生子代及限制感染区域扩展中起重要作用     

单纯疱疹病毒潜伏和激活机制研究进展

单纯疱疹病毒（HSV，包括HSV-1和HSV-2）是引起多种疾病的重要病原，通常这些疾病具有反复发作和无法根治的特点。HSV在外周黏膜组织表面进行增殖式感染后，可进入感觉神经元并建立无复制的潜伏感染。潜伏的病毒还可以通过激活的方式重新进入复制周期，并回到外周组织进行复发感染。这种既能通过潜伏逃避宿主免疫攻击又能在激活过程中传播的能力是该病毒高超的生存策略，也是当前任何药物无法彻底消灭该病毒的根本原因。虽然HSV潜伏与激活的研究众多，且不断有新的研究进展，但由于潜伏和激活过程本身的复杂性和研究模型的局限性，其中很多具体过程相关机制依然不明确，甚至常有争议。本文重点梳理HSV-1潜伏和激活的主要研究成果，并讨论其发展趋势。