MTSS1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨转移抑制因子1（MTSS1）在非小细胞肺癌（NSCLC）发生发展中的作用及临床价值。方法 收集本院2006年3月至2008年3月存档的98例NSCLC石蜡标本,构建组织芯片并采用免疫组织化学法检测98例NSCLC组织及对应癌旁组织中MTSS1的表达,分析其与临床病理参数（年龄、性别、淋巴结转移、病理类型、分化程度和TNM分期）的关系;随访不同MTSS1表达者的生存情况;构建pcDNA3.1-MTSS1表达载体（pcDNA3.1-MTSS1组）和pcDNA3.1空载体（pcDNA3.1组）并分别转染肺癌A549细胞,采用Western blotting法检测两组MTSS1的蛋白水平,采用四甲基偶氮唑盐MTT法和划痕试验检测两组细胞的增殖与迁移情况。结果 癌组织中MTSS1阳性表达率低于癌旁组织（56.1％ vs. 100.0％;P＜0.05）,MTSS1的表达与性别、年龄、分化程度和病理类型均无关,而与淋巴结转移和TNM分期有关（P＜0.05）;MTSS1阳性表达者的中位总生存期为40.9个月,高于阴性表达者的21.5个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox多因素分析显示MTSS1表达是影响NSCLC患者预后的独立因素。pcDNA3.1-MTSS1组的MTSS1蛋白水平高于pcDNA3.1组,且增殖比例和迁移率均低于pcDNA3.1组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 MTSS1缺失表达在NSCLC的发生发展过程中发挥了重要作用,逆转MTSS1的表达有助于肺癌的防治。     

BTG1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的作用

目的 探讨B细胞易位基因1（BTG1） 在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其对NSCLC细胞生物学行为的影响。方法 采用免疫组织化学染色和Western blotting分别检测82例NSCLC及38例癌旁正常组织中BTG1蛋白的表达。采用慢病毒转染建立BTG1过表达的NSCLC H1299细胞株。采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测BTG1转染后H1299细胞株中BTG1表达含量的变化。采用MTT法、流式细胞术及Transwell法检测BTG1过表达对NSCLC细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响。结果 BTG1蛋白在NSCLC及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为37.8％（31/82）、84.2％（32/38）,差异有统计学意义（P＜0.05）。NSCLC组织中BTG1蛋白的相对表达量为0.331±0.035,明显低于癌旁正常组织的0.673±0.072,差异有统计学意义（P＜0.05）。NSCLC组织中BTG1的表达与淋巴结转移、临床分期和组织学分级有关（P＜0.05）。BTG1过表达的NSCLC细胞增殖能力明显减弱、细胞凋亡增加及侵袭转移能力降低,且Bcl-2、MMP-9表达量明显下调。结论NSCLC组织中BTG1蛋白的表达明显降低;BTG1 可能通过调控Bcl-2及MMP-9蛋白的表达影响NSCLC细胞的增殖、凋亡与转移。     

iASPP蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中iASPP蛋白表达规律及其与p53表达状态的相关性。方法：收集NSCLC术后同一患者的新鲜肺癌组织、癌旁组织、肺组织共54例用于试验研究。采用免疫组织化学方法检测肺癌组织、正常肺组织中iASPP蛋白表达及癌组织中p53表达以确定各病例的p53表达状态;Western blot方法检测肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中iASPP蛋白表达。结果：p53阴性状态：免疫组织化学检测结果显示癌组织中iASPP蛋白表达阳性率为71％,显著高于肺组织的21％（P=0．001）。Western blot显示癌组织、癌旁组织、正常肺组织中表达量逐渐降低（P=0．020）;相互间比较发现癌组织iASPP蛋白表达水平显著高于肺组织（P=0．007）、与免疫组织化学检测结果相一致。p53阳性状态下：免疫组织化学与Western blot检测结果均显示iASPP蛋白在癌组织、癌旁组织、肺组织中表达元显著性差异。癌组织iASPP蛋白表达在p53阴性时显著高于p53阳性,p53阴性癌旁组织、肺组织iASPP表达与p53阳性比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：p53阴性状态下,NSCLC癌组织iASPP高表达,iASPP高表达可能与NSCLC的发生密切相关。     

Beclin-1、苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1在非小细胞肺癌中的表达及对预后的影响

目的 探讨Beclin-1、苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及对预后的影响。方法 收集109例NSCLC患者的临床资料,并选取其肿瘤组织及癌旁正常组织。比较不同组织中Beclin-1、BUB1阳性表达情况,分析二者与NSCLC患者临床特征的关系;随访2年,比较不同预后情况患者的Beclin-1、BUB1表达情况。结果 肿瘤组织中Beclin-1阳性表达率明显低于癌旁正常组织,BUB1阳性表达率明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义（P﹤0.01）。不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况NSCLC患者的NSCLC组织中Beclin-1及BUB1阳性表达率比较,差异均有统计学意义（P﹤0.01）。死亡患者Beclin-1阳性表达率低于生存患者,BUB1阳性表达率高于生存患者,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论Beclin-1、BUB1参与NSCLC的发生、发展过程,且Beclin-1阴性表达、BUB1阳性表达会增加NSCLC患者预后死亡的风险。     

非小细胞肺癌中ASPP1、ASPP2蛋白的不同表达状态及其意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中ASPPl、ASPP2蛋白表达规律及其与p53表达状态的相关性。方法：收集NSCLC术后同一病人的新鲜肺癌组织、癌旁组织、肺组织共54例用于试验研究。采用免疫组织化学Envision法检测肺癌组织、正常肺组织中ASPPl、ASPP2蛋白表达及癌组织中p53表达以确定各病例的p53表达状态；Western blot方法检测肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中ASPPl、ASPP2蛋白表达。结果：p63阴性状态：Westernblot显示癌组织、癌旁组织、正常肺组织中ASPPl表达量逐渐升高（P=0．012），比较发现癌组织ASPPl蛋白表达水平显著高于肺组织（P=0．029）；ASPP2表达在癌组织、癌旁组织、正常肺组织中表达无显著性差异。r63阳性状态下，免疫组织化学与Western blot检测结果均显示ASPPl、AS—PP2蛋白在癌组织、癌旁组织、肺组织中表达比较无显著性差异。癌组织ASPPl蛋白表达在p53阴性时显著低于p53阳性；癌组织ASPP2表达在p63阴性时与r63阳性无统计学意义。癌旁组织、肺组织中ASPPl、ASPP2表达与p63表达状态无相关性。结论：p53阴性状态下。NSCLC癌组织ASPPl表达降低，ASPP2表达无明显变化。ASPPl表达降低与NSCLC的发生密切相关。     

EphA2、E-钙黏蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中EphA2、E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法,检测60例NSCLC及10例正常肺组织（对照组）中EphA2、E-cadherin的表达。结果:EphA2在NSCLC中的阳性表达率为80.00%,明显高于癌旁正常肺组织20.00％（P=0.001）。E-cadherin在NSCLC中的阳性表达率为58.33%,明显低于癌旁正常肺组织100.00％（P=0.000）。EphA2、E-cadherin蛋白在NSCLC中的表达差异与患者性别、年龄、病变部位无关(均P>0.05),但与NSCLC的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移相关（P<0.05）。结论:EphA2可促进肿瘤细胞的转化、增殖、迁移,E-cadherin可促进肿瘤细胞的迁移,两者在NSCLC中的共同作用导致了NSCLC的恶性进展,可作为临床评估肺癌恶性程度的指标。     

非小细胞肺癌中Id蛋白的表达及预后意义

目的：研究4种分化抑制因子（inhibitors of differentiation,Id）Id1,Id2,Id3和Id4在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达及临床意义.方法：采用免疫组织化学方法检测68例非小细胞肺癌及对应癌旁肺组织中4种Id蛋白的表达水平并探讨其与NSCLC患者临床参数及生存时间的关系.结果：68例非小细胞肺癌中4种Id蛋白表达的阳性率分别为67.4％,89.7％,88.2％和64.7％,高于癌旁组织中的表达（P ＜0.05）;Id1和Id3蛋白与分化程度相关（P＜0.05）,Id2蛋白的表达与患者淋巴结转移正相关（P＜0.05）,4种Id蛋白的表达水平与患者的性别,年龄,组织类型及临床分期无关（P＞0.05）;Id2蛋白阴性与阳性表达的患者术后生存时间具有显著性差异（P＜0.05）.结论：4种Id蛋白在非小细胞肺癌患者中表达上调,Id1和Id3与NSCLC的分化程度相关,Id2蛋白与NSCLC的转移及患者的预后相关,可能作为评价其预后的标志.     

非小细胞肺癌中特异性富 AT 序列结合蛋白 1( SATB1) 的差异性表达及其与临床和预后的关系

目的：研究特异性富AT序列结合蛋白1（SATB1）在非小细胞肺癌（NSCLC）和正常肺组织中的差异性表达及其与临床、病理特征和预后之间的关系.方法：2008年8月至2009年12月间于我科接受手术治疗的60例NSCLC患者的60对NSCLC和癌旁正常肺组织标本,以实时定量RNA反转录聚合酶链式反应（real-time RT-PCR）验证SATB1在肺癌和正常肺组织间是否存在差异性表达.按SATB1基因表达量是否高于均值而将患者分为SATB1高、低表达两组,分析SATB1表达程度高低与NSCLC的病理类型、pTNM分期、无瘤生存时间（DFS）、总生存时间（OS）之间的关系.结果：SATB1 基因在NSCLC中的表达高于癌旁正常肺组织（P＜0.001）.该基因的表达程度与肺癌患者性别 （P=0.155）、病理类型（P=0.809）、肿瘤分化程度（P=0.937）以及病理分期（P=0.704）之间无明显相关性.2例患者失访,余58例患者中位随访时间44个月（4-58个月）.SATB1高、低表达组患者的3年无瘤生存率分别为33.7%和42.9%;中位DFS分别为18个月和28个月;3年总生存率分别为38.8%和71.4%,高表达组中位OS 21个月,低表达组中位OS未达到.结论：SATB1在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,肺癌组织中SATB1高表达组患者的预后较低表达组为差.     

SNAT1和EMP1在胃癌组织和细胞株中的表达及临床意义

目的 探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1（SNAT1）和上皮膜蛋白1（EMP1）在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达水平,分析两者在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化SP法检测82例胃癌组织和67例对应癌旁组织样本中SNAT1和EMP1的蛋白表达情况,根据二级计分法分为低表达（＜5分）和高表达（≥5分）,分析两者不同表达水平与胃癌临床病理特征的关系。同时采用Western blotting检测20例胃癌组织及其癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞株GES 1和胃癌不同分化细胞株（未分化BGC823、低分化AGS、中分化SGC7901和高分化MKN28）中SNAT1和EMP1的蛋白水平。结果 胃癌组织的SNAT1高表达率高于癌旁组织（67.1％ vs. 34.3％, P＜0.05）,而EMP1高表达率则低于癌旁组织（40.2％ vs. 62.7％, P＜0.05）。胃癌组织中SNAT1与EMP1表达呈负相关（r=-0.272, P=0.014）,且两者表达与临床分期和分化程度均有关;另外,SNAT1与年龄、淋巴结转移有关,EMP1与浸润深度有关。胃癌细胞株中的SNAT1蛋白水平均高于癌旁组织和CES-1细胞,而EMP1蛋白水平则相反,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论SNAT1表达在胃癌组织及细胞株中分别较癌旁组织和正常胃黏膜细胞株高,EMP1则相反,胃癌组织中两种蛋白均与临床分期和分化程度有关,提示两者可能在胃癌的发生发展中起重要作用,可用于辅助胃癌的诊断和病情评估。     

Twist与KiSS-1在非小细胞肺癌中的表达及其对预后的影响

背景与目的：Twist是一种促进肿瘤转移的转录因子,而KiSS-1为肿瘤转移抑制基因,它们的蛋白表达与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的淋巴结转移密切相关。本研究旨在探讨Twist和KiSS-1在NSCLC和正常肺组织中的表达及与患者预后的相关性。方法：收集61例有完整临床病理资料和随访资料的NSCLC标本及15例癌旁正常肺组织标本作为对照,采用免疫组织化学SP法分别检测Twist和KiSS-1的表达,分析其与患者各项临床指标及预后的关系。结果：Twist在NSCLC组织中的表达显著高于癌旁正常肺组织（P〈0.05）,KiSS-1在NSCLC组织中表达显著低于癌旁正常肺组织（P〈0.05）;NSCLC组织中Twist及KiSS-1表达均与临床分期、淋巴结转移情况、4年生存率密切相关（P〈0.05）;Kaplan-Meier生存曲线分析显示患者术后生存率随Twist阳性表达呈现下降趋势,而随KiSS-1阳性表达显著上升。结论：Twist高表达及KiSS-1低表达的患者易于发生淋巴结转移,术后4年生存率较低。     

非小细胞肺癌中PAX6表达及其对肿瘤细胞增殖与侵袭作用机制研究

背景与目的：转录因子PAX6主要表达于胚胎期,不同肿瘤中PAX6呈现高表达,通过不同的信号通路发挥肿瘤抑制或促进作用。检测PAX6在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,通过RNAi下调其表达,研究PAX6对肿瘤细胞侵袭和增殖力以及cyclin E、p38表达水平的影响。方法：应用蛋白印记检测86例NSCLC肿瘤组织及癌旁配对组织以及2例细胞系中PAX6的表达情况。应用PAX6特异性siRNA序列,转染NSCLC细胞系A549,MTT法、Transwell小室、划痕实验检测转染前后细胞增殖、侵袭和迁移能力的对比。蛋白质印记法(Western blot)检测转染前后cyclin E及p38表达情况。结果：对比癌旁组织及正常人支气管上皮细胞16HBE,PAX6在NSCLC组织及A549细胞系中显著高表达。选取高效siRNA序列转染细胞系后,PAX6表达的下调抑制了肿瘤细胞的增殖及集落形成,G1期细胞比例增加,细胞侵袭及迁移力均下降。PAX6基因敲低细胞cyclin E及p38活性受到抑制,表达下调。结论：PAX6通过调控MAPK通路及cyclin E的表达加速肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移,是潜在的NSCLC诊疗靶点。     

大肿瘤抑制激酶2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:检测大肿瘤抑制激酶2（large tumor suppressor kinase 2，LATS2)在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC)组织和细胞中的表达水平，对NSCLC细胞增殖、侵袭和患者临床特征的影响。方法:收集2017年6月-2019年6月在我院接受手术治疗的NSCLC患者260例，免疫组化实验检测NSCLC和癌旁组织中LATS2的表达水平；卡方检验分析LATS2的表达与患者临床特征的关系；qRT-PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中LATS2 mRNA的相对表达水平；转染实验将LATS2质粒转染至A549细胞中；MTT实验检测LATS2对A549细胞增殖的影响；Transwell实验检测LATS2对A549细胞侵袭的影响。结果:LATS2在癌组织中的表达低于癌旁组织；LATS2的高表达率为72.3%（188/260），低表达率为27.7%（72/260）；LATS2高表达组与低表达组患者在性别、肿瘤类型、胸膜侵犯、血管侵犯、淋巴管侵犯和T分期之间无统计学差异，在年龄、肿瘤直径、淋巴转移和病理分级之间有统计学差异（P＜0.05）；NSCLC组织和细胞中LATS2 mRNA的相对表达水平显著低于癌旁组织和人正常肺上皮细胞HPAEpiC；LATS2质粒转染至A549细胞中使其表达水平升高，LATS2高表达组细胞的OD值和发生侵袭的细胞数显著降低。结论:LATS2与患者的年龄、肿瘤直径、淋巴结转移和病理分级有关，其表达水平增加后可显著抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭，有可能成为NSCLC治疗的新作用靶点。     

长链非编码RNA HOTAIR对非小细胞肺癌迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨长链非编码RNA HOTAIR在非小细胞肺癌（NSCLC）组织及4株细胞系（A549、SPC-A1、SK-MES-1和16HBE）中的表达,并分析其对细胞侵袭和迁移能力的影响。方法通过定量反转录PCR（qRT-PCR）检测HOTAIR在38例NSCLC组织及4株细胞系中的表达水平,并进一步利用过表达和RNA干扰技术探讨HOTAIR的生物学功能。通过分别转染pcDNA-HOTAIR或si-HOTAIR来上调或下调HOTAIR的表达,以空载体（pcDNA3.1-NC）和阴性对照（si-NC）作为对照组,用qRT-PCR检测转染效率。用MTT法和Transwell法评估异常表达的HOTAIR对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 38例NSCLC组织中HOTAIR相对表达水平为24.48±59.55。与正常支气管上皮细胞系16HBE相比,HOTAIR在SPC-A1和SK-MES-1细胞中相对高表达,而在A549细胞中相对低表达。转染HOTAIR siRNA 48h后,A549和SPC-A1细胞中HOTAIR表达下调;转染pcDNA3.1 HOTAIR 48h后,A549细胞中HOTAIR表达上调。MTT实验显示,通过RNAi技术来抑制HOTAIR的表达,对NSCLC细胞的增殖能力无明显影响。Transwell实验显示,通过转染si-HOTAIR来下调HOTAIR表达可抑制癌细胞的迁移和侵袭（P＜0.05）;相反,过表达HOTAIR可以显著促进癌细胞的迁移和侵袭（P＜0.05）。结论 HOTAIR在NSCLC中异常高表达,能显著增强NSCLC细胞的迁移和侵袭能力,提示可能与不良预后相关。     

Cullin蛋白4B在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义和细胞功能分析

目的 探讨Cullin蛋白4B（CUL4B）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其对NSCLC细胞生物功能的影响。方法 采用免疫组化、实时荧光定量PCR（qPCR）检测77例NSCLC组织及42例癌旁正常组织中的CUL4B表达。qPCR检测常见NSCLC细胞株（H358、H460、H1299、A549和SK-MES-1）中的CUL4B mRNA水平,选取表达最高的细胞株分别转染CUL4B siRNA（CUL4B干扰组）和CUL4B阴性对照siRNA（阴性对照组）的慢病毒载体,qPCR验证转染效率;采用MTT法检测干扰CUL4B表达24、48、72、96 h对细胞增殖的影响,流式细胞术和Transwell法检测干扰CUL4B表达48 h对细胞凋亡及侵袭能力的影响。结果CUL4B蛋白在NSCLC组织及癌旁正常组织中的高表达率分别为63.6%（49/77）和38.1%（16/42）,差异有统计学意义（P<0.05）;CUL4B表达与肿瘤直径、淋巴结转移及临床分期均有关（P<0.05）,而与性别、年龄、病理分型及组织分级无关（P>0.05）;qPCR检测NSCLC组织中CUL4B mRNA相对水平为2.713±0.246,经干扰CUL4B表达,NSCLC细胞增殖能力明显减弱,细胞凋亡率增加且侵袭转移能力降低。结论NSCLC组织及细胞株中CUL4B蛋白表达均明显升高,NSCLC组织CUL4B表达与淋巴结转移、临床分期及细胞分化有关;沉默CUL4B表达可影响NSCLC细胞的增殖、凋亡与侵袭。     

miR-582-5p靶向抑制Rab27a对肺癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨microRNA-582-5p（miR-582-5p）在非小细胞肺癌（NSCLC）中表达及其对A549细胞增殖、侵袭的影响，以及对Rab27a基因的靶向调控作用。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测33例行手术治疗的NSCLC患者的癌组织、对应癌旁组织以及A549细胞株、人正常支气管肺上皮细胞株BEAS-2B中miR-582-5p的表达水平。采用miR-582-5p inhibitor（anti-miR-582-5p）和miR-582-5p mimics（mim-miR-582-5p）转染A549细胞，另分别转染miRNA inhibitor无关系列（anti-NC）和miRNA mimics无关系列（mim-NC）作阴性对照。采用双荧光素酶报告实验验证Rab27a与miR-582-5p的关系。采用MTT法和Transwell小室法检测各组细胞增殖、侵袭能力；采用QPCR和Western blotting检测各组A549细胞中Rab27a mRNA和蛋白水平。结果 NSCLC组织和癌旁组织中miR-582-5p表达水平分别为0.26±0.09和0.83±0.10；A549细胞株和BEAS-2B细胞株中miR-582-5p表达水平分别为0.63±0.08和1.17±0.09，差异均有统计学意义（P＜0.05）。anti-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96 h后的增殖率分别为（115.68±4.34）％、（130.48±5.48）％、（138.95±5.55）％、（147.03±5.69）％，明显高于anti-NC组；mim-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96 h后的增殖率分别为（91.31±4.18）％、（86.74±3.23）％、（79.45±3.20）％、（75.22±4.09）％，明显低于mim-NC组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。Transwell小室结果显示，anti-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为189±19，明显高于anti-NC组；mim-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为55±8，明显低于mim-NC组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。miR-582-5p可抑制野生型Rab27a 3’-UTR报告基因载体的荧光素酶活性，而对突变型Rab27a 3’-UTR的荧光素酶活性无影响。anti-miR-582-5p组A549细胞Rab27a mRNA和蛋白表达水平分别为2.01±0.29和0.85±0.12，高于anti-NC组；mimi-miR-582-5p组A549细胞Rab27a mRNA和蛋白表达水平分别为0.35±0.08和0.21±0.05，明显低于mim-NC组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 上调miR-582-5p表达可抑制Rab27a表达，从而抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭活性，miR-582-5p有望成为肺癌新的治疗靶点。     

非小细胞肺癌组织中白细胞介素17、基质金属蛋白酶9表达与pTNM分期的关系

目的 探讨白细胞介素17 (IL-17)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与pTNM分期的关系.方法 应用免疫组织化学法检测102例NSCLC组织和癌旁组织中IL-17、MMP-9的表达,并对其与pTNM分期的关系进行统计学分析.结果 IL-17、MMP-9 在NSCLC组织中阳性表达率分别为73.53％(75/102)和60.78％(62/102),癌旁组织中分别为71.57％(73/102)、7.84％(8/ 102);二者在不同pTNM分期癌组织中表达差异均有统计学意义(P＜0.05),癌组织中IL-17与MMP-9的表达有相关性(P＜0.05),在癌旁组织中二者表达无相关性(P＞0.05).结论 IL-17和MMP-9在NSCLC中表达上调,两者在癌组织中的表达呈正相关,可能共同参与了NSCLC的浸润和转移.     

miR-196a调控p27kip1促进非小细胞肺癌细胞增殖的机制研究

目的 探讨miR-196a在非小细胞肺癌（NSCLC）组织及细胞系中的表达,以及抑制或过表达miR-196a对NSCLC细胞增殖能力的影响及其作用的靶基因。方法 实时定量PCR（QPCR）技术检测NSCLC组织及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibitors及miR-196a mimics抑制或上调miR-196a的表达水平,并通过QPCR检测转染效率。用MTT和克隆形成实验检测上调或下调miR-196a对SPC-A1或A549细胞增殖能力的影响;生物信息学及Western blotting方法分析验证miR-196a对靶基因p27kip1的调控作用。结果 与正常肺组织及细胞相比,在NSCLC组织和细胞中miR-196a的表达出现显著上调,SPC-A1细胞和A549细胞中转染miR-196a inhibitors或miR-196a mimics能显著抑制或上调miR-196a的表达;抑制miR-196a的表达能降低SPC-A1细胞增殖能力,而上调miR-196a的表达则能促进A549细胞增殖。miR-196a能够负性调控p27kip1的表达。结论NSCLC组织及细胞中miR-196a的表达上调能够抑制p27kip1的表达,并显著促进NSCLC细胞增殖,影响NSCLC的发生与发展。     

白血病抑制因子对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor, LIF）对细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法 采用荧光定量PCR和Western blot检测LIF在人NSCLC组织和癌旁组织中的表达;应用重组LIF因子处理非小细胞肺癌细胞系A549和Z793, MTT技术检测重组LIF因子对细胞增殖的影响; Transwell实验检测重组LIF因子对细胞侵袭的影响;Western blot检测重组LIF因子对肿瘤细胞中AKT/mTOR信号通路的影响。结果 LIF在肺癌组织中的表达水平较正常癌旁组织显著上调（P=0.0078）。重组LIF处理A549和Z793细胞后,肿瘤细胞增殖较对照组明显增加（P<0.01）;肿瘤细胞的侵袭能力较对照组明显增强（P<0.01）;AKT蛋白的磷酸化水平明显增加,且其下游底物mTOR的表达显著上调。结论 LIF在非小细胞肺癌中表达上调,并通过激活AKT/mTOR信号通路促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。     

miR-140-5p靶向HDAC7抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制探讨

目的:探讨miR-140-5p靶向组蛋白去乙酰化酶7(histone deacetylase 7,HDAC7)调控非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:采用qRT-PCR检测人NSCLC组织及癌旁组织中miR-140-5p的表达水平。用miR-140-5p mimic（模拟物）及miR-140-5p NC（阴性对照）转染A549细胞,CCK8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-5p与HDAC7的靶向关系,Western blot检测各组细胞HDAC7及PI3K、p-PI3K、AKT、和p-AKT表达水平。结果:与癌旁组织相比,miR-140-5p在NSCLC组织中的表达水平明显减低,差异有统计学意义（P＜0.01）。与miR-140-5p NC组相比,过表达miR-140-5p后A549细胞在48和72 h的增殖能力明显降低（P＜0.05）;且细胞克隆形成、细胞迁移和侵袭能力均降低（均P＜0.05）,PI3K/AKT信号通路中关键分子p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显降低（均P＜0.05)。生物信息学预测HDAC7可能是miR-140-5p的一个靶基因,且双荧光素酶报告结果证实miR-140-5p直接靶向调节HDAC7表达。结论:miR-140-5p通过靶向HDAC7表达进而抑制NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与通过抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。