不同生长期博落回果实中血根碱与白屈菜红碱的含量

本文用HPLC法测定了不同生长时间博落回果实中的血根碱与白屈菜红碱的含量,以八月份采集的样品最高。     

不同生长环境中博落回生物碱含量变化的研究

目的：确定博落回在不同生长环境中生物碱的含量，为进一步开发利用博落回植物资源，提供科学依据。方法：采用正交试验，以浸膏得率和生物碱含量为考察指标，对博落回生物碱的提取条件进行优选。然后，在该条件下对同一时期采集的不同生长环境中的博落回进行生物碱提取及其含量的测定。结果：各考察因素对博落回生物碱提取工艺的影响程度为乙醇溶液的pH值〉提取时间〉溶剂量倍〉提取次数。pH值为2的85％醇溶液中浸18h，固液比20倍量、回流提取3次、每次40min为最佳工艺条件。博落回野生植株生物碱含量大于栽培的。结论：博落回生物碱提取的最佳条件为A1B2C3D1；博落回栽培植株与野生的生物碱含量是有差异的。     

高效毛细管电泳测定小果博落回中血根碱 和白屈菜红碱

目的:建立测定小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量的新方法。方法:采用高效毛细管电泳法,盐酸小檗碱为内标,运行缓冲液为25 mmol.L-1磷酸氢二钠与25 mmol.L-1磷酸二氢钠的混合体系(磷酸调pH为7.0)-甲醇(2.5∶1);运行电压18 kV;柱温25℃;检测波长200 nm。结果:血根碱和白屈菜红碱的线性范围分别为0.0124～0.0828mg.mL-1(r=0.999 8);白屈菜红碱的线性范围0.018 8～0.125 6 mg.mL-1(r=0.999 6),平均加样回收率(n=6)分别为98.7%(RSD1.01%)、98.4%(RSD 1.27%)。结论:高效毛细管电泳操作简便,分析快速,结果准确、重现性好,适用于小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量的测定。     

不同生长环境中博落回生物碱含量及提取工艺研究

目的：确定博落回在不同生长环境中生物碱的含量，为进一步开发利用博落回植物资源，提供科学依据。方法：采用正交试验，以浸膏得率和生物碱含量为考察指标，对博落回生物碱的提取条件进行优选。然后，在该条件下对同一时期采集的不同生长环境中的博落回进行生物碱提取及其含量的测定。结果：各考察因素对博落回生物碱提取工艺的影响程度为乙醇溶液的pH值〉提取时间〉溶剂量倍〉提取次数。pH值为2的85％醇溶液中浸18h，固液比20倍量、回流提取3次、每次40min为最佳工艺条件。博落回野生植株生物碱含量大于栽培的。结论：博落回生物碱提取的最佳条件为A1B2C3D1；博落回栽培植株与野生的生物碱含量是有差异的。     

白屈菜红碱、血根碱单体的分离和鉴定

目的:分离及鉴定白屈菜红碱和血根碱单体.方法:采用柱色谱分离技术对白屈菜红碱和血根碱进行分离纯化,通过HPLC进行鉴定.结果:采用柱色谱法可获得单一成分,经HPLC鉴定为白屈菜红碱和血根碱单体,纯度分别为98.6％,95.7％.结论:采用柱色谱技术可从博落回中提取、分离到高纯度的白屈菜红碱和血根碱单体.     

RP—HPLC法同时测定小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量

目的测定小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量.方法反相高效液相色谱法.色谱柱Kromasil C18柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液(2575),检测波长270nm,流速1.0ml·min.结果白屈菜红碱、血根碱的回收率分别为90.2%,92.8%;RSD分别为1.5%,2.4%.结论为测定小果博落回中生物碱含量提供了准确、灵敏、可靠的分析方法.     

HPLC同时测定东北产区白屈菜6个生物碱成分的含量

目的 建立测定东北产区白屈菜中6种生物碱含量的方法,完善和提升白屈菜药材现有的质量评价体系。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-1%三乙胺（用磷酸调节pH值至3.0）,梯度洗脱（0~5 min,10%~20%A;5~15 min,20%~24%A;15~55 min,24%A;55~60 min,24%~10%A）,流速1.0 mL?min^–1,柱温35 ℃,检测波长274 mm。结果 12批东北产区白屈菜药材中白屈菜碱、二氢黄连碱、人血草碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱的质量浓度分别在1.68~33.60、3.40~68.00、2.32~46.40、3.84~76.80、1.72~34.40、1.89~37.76 μg?mL^–1与峰面积呈良好的线性关系（r≥0.999 9）,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%,平均加样回收率分别为99.12%、98.79%、98.60%、98.94%、98.25%、99.39%,RSD均小于2.0%。结论 该方法操作简单、准确、灵敏、重复性好,可为东北产区白屈菜药材质量标准的提升和完善提供实验依据和参考。     

博落回抗肿瘤作用及诱导人体端粒DNA形成G-四链体分子机制研究

目的从博落回的2个主要活性成分血根碱(San)和白屈菜红碱(Che)入手研究博落回的抗肿瘤作用分子机制。方法采用MTT法测定San与Che对3种肿瘤细胞(肺癌细胞A-549、结肠癌细胞HCT-8、肝癌细胞Bel-7402)的IC50值,从而确定这两种成分是否为博落回的抗肿瘤活性成分;采用UV-vis、FL、CD法研究San和Che与人体端粒DNA(HT4)的相互作用。结果 San与Che对肿瘤细胞有不同能力的杀伤作用,说明该2种成分是博落回的抗肿瘤活性成分;San和Che能够与HT4相互作用,可以得出San与HT4的结合常数为5×108,并能诱导单链HT4完全形成反平行结构,而Che与HT4的结合常数为930,并能诱导单链HT4部分形成反平行结构。结论博落回含有的2种活性成分San和Che具有诱导人体端粒DNA形成G-四链体结构的能力,从而抑制端粒酶活性,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的 ,这可能是博落回抗肿瘤的分子机制之一。     

血水草中血根碱和白屈菜红碱的提取与分离

血水草（Eomecon chionantha Hance）系罂粟科（Papaveraceae）白屈菜族（Chelidonium）血水草属（Eomecon）多年生草本植物,1884年由H．F．Hance建立命名,是罂粟科白屈菜族中我国独属、独种的特有物种。广泛分布在我国长江流域、华南、华东、西南地区,西北秦岭也有分布。     

不同产地博落回果化学成分指纹图谱研究

目的构建博落回Macleaya cordata果化学成分指纹图谱,建立博落回果品质评价方法。方法根据湖南省长沙市地方标准2009年版测定博落回中原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱含量;采用高效液相色谱法构建基于不同产地的博落回果化学成分指纹图谱;利用主成分分析和聚类分析方法,分析博落回果中共有指纹峰、产地和药材品质的关联性。结果构建不同产地博落回果化学成分指纹图谱,确定11个共有指纹峰;主成分分析和聚类分析将8个产地的博落回果分为2大类,其中共有峰5、7、8、9和11对指纹图谱差异贡献较大,6号峰是指纹图谱参照峰的最佳选择。结论本实验建立的博落回果化学成分指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,能够对不同产地博落回果进行品质评价。     

博落回的生物碱成分

目的:研究博落回Macleaya cordata的生物碱成分.方法:应用多种柱色谱法结合重结晶进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.结果:从博落回中分离并鉴定出13种生物碱,分别鉴定为6-甲氧基二氢血根碱(6-methoxy-dihydrosanguinarine,1),去甲血根碱(norsanguinarine,2),6-丙酮基二氢白屈菜红碱(6-acetonyldihyrochelerythrine,3),6-丙酮基二氢血根碱(6-acetonyldihyrosanguinnarine,4),sanguidimerine(5),chelidimerine(6),(±)-bocconarborine A(7),(±)-bocconarborine B(8),隐品碱(cryptopine,9),二氢血根碱(dihydrosanguinarine,10),二氢白屈菜红碱(dihydrochelerythrine,11),原阿片碱(protopine,12),α-别隐品碱(α-allocryptopine,13).结论:化合物1为首次从博落回中分得,化合物2,3,5～9均为首次从博落回属植物中分得.     

基于异喹啉生物碱质谱裂解规律推断博落回茎中的生物碱

目的:快速分析博落回茎中的生物碱成分。方法:应用高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱对博落回茎的生物碱进行分析,根据一级质谱的分子离子和二级质谱的碎片离子,结合博落回中异喹啉类生物碱的质谱裂解规律,推断博落回茎中的生物碱结构。结果:从博落回茎中推断出11个生物碱的结构,分别为木兰箭毒碱(Magnocurarine,1),网脉番荔枝碱(Reticuline,2),金黄紫堇碱(Scoulerine,3),轮环藤酚碱(Cyclanoline,4),13-甲氧基小檗碱(13-methoxyberberine,5),四氢巴马丁(Tetrahydropalmatine,6),原阿片碱(Protopine,7),别隐品碱(Allocryptopine,8),N-甲基氢化小檗碱(N-methylcanadine,9),血根碱(Sanguinarine,10),白屈菜红碱(Chelerythrine,11),其中化合物1~6及9首次在博落回中报道。结论:经验证,基于异喹啉生物碱质谱裂解规律推断博落回茎中生物碱的方法可行。     

博落回总生物碱分离纯化工艺研究

本研究以博落回总生物碱含量及回收率等为考察指标，研究大孔吸附树脂分离纯化博落回总生物碱工艺。结果表明：AB．8型大孔吸附树脂对博落回总生物碱静态饱和吸附量为104．65mg／g（干树脂），洗脱率95．9％，动态饱和吸附量为96．5mg／g（干树脂），总生物碱回收率在91．24％、纯度在90％以上，是实验树脂中分离纯化博落回总生物碱的最佳大孔吸附树脂。分离纯化博落回总生物碱最佳工艺条件为：AB-8型大孔吸附树脂，洗脱剂为90％乙醇，洗脱剂用量为2-3倍树脂体积，上柱总生物碱量与树脂比为1：10．4，上柱液总生物碱浓度为21．57mg／ml，流速2-3ml／min，上柱液pH值7—8。     

博落回鲜叶中生物碱类化学成分的分离与结构鉴定

目的:研究博落回叶的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱以及制备液相色谱法进行分离纯化,并根据波谱数据鉴定化合物结构。结果:从博落回新鲜叶的乙醇提取物中分离纯化得到14个生物碱,分别鉴定为:原阿片碱(1)、别隐品碱(2)、血根碱(3)、白屈菜红碱(4)、去甲基白屈菜红碱(5)、去氢紫堇碱(6)、N-甲基四氢黄连碱(7)、黄柏碱(8)、6-甲氧基去甲基血根碱(9)、6-氰基二氢血根碱(10)、6-氰基二氢白屈菜红碱(11)、6-丙酮基二氢血根碱(12)、二氢血根碱(13)、二氢白屈菜红碱(14)。结论:其中化合物5~9为首次在博落回属植物中分离得到。     

博落回和小果博落回不同部位中生物碱类成分的比较

目的:比较博落回属植物博落回和小果博落回不同部位中生物碱随生长期积累的动态量化规律,为博落回属资源品质评价和合理利用提供依据。方法:采用HPLC对不同药用部位中血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱的含量进行测定,并对数据进行比较分校。结果:在根、茎、叶和果实不同部位中,两种植物的果实中生物碱类化合物量均为最多;茎中积累生物碱的量最少;根中积累较多的原阿片碱;生物碱在叶中的积累具有显著的种属特异性;另外,小果博落回果实中别隐品碱的量远高于其他生物碱。结论:该研究为博落回属植物资源的综合利用提供了有力的科学依据,由于生物碱类成分在该属植物中的累积具有种属特异性,在植物资源利用方面需要综合考虑具体的药用部位及其生物量。     

博落回的药效研究

博落回对四氯化碳、半乳糖胺所致急性肝损伤模型,均有显著改善肝脏功能作用;对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠模型,博落回可显著降低血清LDH水平,降低动物死亡率,提高血清A/G比值,有效保护肝细胞膜,抑制肝脏纤维化;博落回还可显著增强T和B淋巴细胞功能。     

博落回中生物碱对5种皮癣真菌抑制作用的初步研究

目的:研究博落回(Macleaya Cordata(Willd)R.Br)提取物对皮癣致病真菌的抑制作用。方法:以常见的皮癣真菌包括红色毛癣菌(Trichophyton rubrum),许兰黄癣菌(Trichophyton schoenleini),玫瑰色癣菌(Trichophyton rosaceum),须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes),絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccos)为供试病原菌,通过采用琼脂打孔法;平板稀释法;固体培养基稀释法;对博落回提取物进行离体抑菌活性以及最低抑菌浓度的测定。结果:博落回提取物有抑制皮癣真菌的活性,博落回提取物对红色毛癣菌,许兰黄癣菌以及絮状表皮癣菌的最低抑菌浓度均为1.6mg/mL,对玫瑰色癣菌,须癣毛癣菌的最低抑菌浓度为0.8mg/mL。结论:博落回提取物对上述几种皮癣病原真菌有明显的抑制作用,随着浓度的增大,其抑制作用明显增加。     

博落回中苄基异喹啉类生物碱生物合成与代谢工程研究概况

植物生长产生多种多样的次生代谢产物,其中许多还有非常重要的药用价值。但是植物中具有药用价值的次生代谢产物含量较低,而利用微生物代谢工程技术可以为次生代谢产物提供新的药源途径。本文对植物次生代谢产物特别是博落回属植物中苄基异喹啉类生物碱的生物合成以及国内外研究中利用微生物代谢工程技术在酵母中异源表达生产苄基异喹啉类生物碱的研究进展进行综述,同时结合博落回研究进展对未来博落回资源的综合利用进行展望。     

不同产地博落回离体培养与植株再生研究

目的:探索不同产地的博落回离体培养效果差异,为筛选最适博落回植株再生材料提供研究基础。方法:采用植物组织培养技术对博落回叶片组织进行愈伤诱导及胚状体分化,并对结果进行分析。结果:安徽祁门、湖南炎陵和湖南高坊产地分别在不同培养阶段与其他产地比诱导率和分化率最高。结论:湖南高坊和安徽祁门的愈伤组织和胚状体的诱导及分化能力优于其他产地的样本。因此,不同产地叶片离体培养效果差异显著。     

博落回白绢病的病原鉴定及防治

目的:明确博落回根腐病致病菌病原,提出合理的防治措施。方法:运用致病菌形态学观察、致病菌内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析生开展鉴定研究,针对致病菌的生物学特性分析其防治策略。结果:通过形态学和分子生物学鉴定证明病害为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii sacc.)导致的白绢病,防治方法需要以生物防治为主,最终实现白绢病安全、有效防控。结论:通过研究证明博落回的病害为白绢病,提出了安全有效地防治策略,能够保证药材的品质,保护生态环境。