HPLC同时测定衢枳壳中7种指标成分的含量

目的 建立HPLC同时测定衢枳壳中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、木犀草素、川陈皮素和桔皮素含量。方法 采用Agilent Extend C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,检测波长：330 nm,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速：1 ml·min^-1,柱温：30℃。结果 芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、木犀草素、川陈皮素、桔皮素分别在23.30~1 164.80 ng,170.84~8 541.91 ng,17.22~861.20 ng,156.17~7 808.64 ng,3.13~156.48 ng,0.90~45.23 ng,0.85~42.27 ng内线性关系良好（r ≥ 0.999 5,n=6）,平均回收率分别为98.8%,101.3%,98.3%,96.8%,101.8%,101.7%,108.9%。结论 首次建立了衢枳壳中7个成分HPLC含量测定方法,该方法简便,结果准确,可为综合评价衢枳壳质量提供依据。     

玳玳果黄酮降脂提取物体内效应组分排泄动力学研究

目的 建立同时测定大鼠尿液及粪便中提取物效应组分新橙皮苷和柚皮苷含量方法,研究大鼠口服玳玳果黄酮降脂提取物后的尿药排泄动力学及排泄特征。方法 采用UPLC-MS/MS建立效应组分新橙皮苷及柚皮苷在大鼠尿液及粪便的定量分析方法,计算口服玳玳果黄酮降脂提取物后不同时间点新橙皮苷及柚皮苷在尿液及粪便中的排泄率,并以亏量法计算尿液中的消除半衰期及消除速率常数,评价大鼠口服玳玳果黄酮降脂提取物后尿药排泄动力学及排泄特征。结果 所建立的UPLC-MS/MS定量分析方法专属性良好、标准曲线及线性范围良好,方法准确度与精密度、定量下限均符合有关规定,该方法能够满足大鼠尿液及粪便中效应组分的定量检测需要;口服72 h后,大鼠尿液中新橙皮苷、柚皮苷的平均累计排泄率分别为（1.76±0.76）‰和（1.39±0.57）‰;大鼠粪便中新橙皮苷、柚皮苷的平均累计排泄率分别为（52.45±6.30）%和（51.57±4.80）%;口服后效应组分新橙皮苷及柚皮苷在尿液及粪便中的排泄量分别在24~36 h和4~8 h达到峰值;72 h后仍有药物经尿液排泄,给药后24 h粪便累计排泄率便达坪值;亏量法计算得新橙皮苷消除速率常数为（0.080±0.021）·h^-1,消除半衰期为（9.41±3.22）h,柚皮苷消除速率常数为（0.077±0.017）·h^-1,消除半衰期为（9.51±2.97）h,新橙皮苷及柚皮苷的动力学参数间差异无统计学意义。结论 口服给药后效应组分原形即通过粪便较快地排出体外,粪便排泄是效应组分排出体外的主要途径,新橙皮苷及柚皮苷经尿液排泄的特征无明显差异。     

健胃合剂质量控制方法研究

目的 建立健胃合剂质量控制的方法。方法 采用薄层色谱法对甘草、黄连和麸炒枳壳进行定性鉴别;采用HPLC测定柚皮苷含量。色谱柱为Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸（40：60）,检测波长为283 nm,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30℃,进样量为5 μL。结果 建立的薄层色谱法样品斑点清晰,分离度好。含量测定结果显示,柚皮苷在0.005 33~0.085 23 mg·mL^-1内线性关系良好,平均回收率为99.42%,RSD为0.76%。结论 该方法准确可靠,专属性好,可以用于健胃合剂的质量控制。     

白藤梨根体外抗肿瘤作用部位筛选及总三萜含量测定

目的 筛选白藤梨根体外抗肿瘤作用部位并测定总三萜含量。方法 采用RTCA DP实时细胞分析系统研究白藤梨根提取物对人肺癌A549细胞和人肝癌HepG2细胞体外增殖的抑制作用,筛选其抗肿瘤作用的活性部位;并通过紫外分光光度法测定白藤梨根活性部位中总三萜的含量。结果 白藤梨根各提取物对人肺癌A549细胞和人肝癌HepG2细胞均有一定的抑制作用,其中白藤梨根石油醚部位、乙酸乙酯部位和乙醇部位对人肺癌A549细胞的IC₅₀值分别为2,0.15,3.8 mg·mL^-1,对人肝癌HepG2细胞的IC₅₀值分别为75,7.6,71 μg·mL^-1;紫外分光光度法测得白藤梨根乙酸乙酯提取物中总三萜含量高达45%。结论 白藤梨根体外抗人肺癌细胞和人肝癌细胞的主要部位为乙酸乙酯部位,其中总三萜为其主要抗肿瘤成分。     

HPLC同时测定半夏糖浆中琥珀酸、橙皮苷、甘草苷3种成分的含量

目的 建立HPLC同时测定半夏糖浆中琥珀酸、橙皮苷、甘草苷3种成分的含量。方法 采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸溶液（18：82）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长207 nm,柱温为常温。结果 3种待测成分分离度良好,阴性无干扰;3个成分线性范围分别为4.727~118.17 μg·mL^-1（r=0.999 9）,2.474~61.857 μg·mL^-1（r=0.999 6）,2.469~61.725 μg·mL^-1（r=0.999 9）;琥珀酸、橙皮苷、甘草苷平均回收率（n=9）分别为100.8%,99.3%,100.2%,RSD分别为1.3%,1.2%,1.8%,3批中琥珀酸、橙皮苷、甘草苷含量范围分别为0.072 2~0.079 4、0.029 9~0.034 8,0.022 8~0.029 0 mg·mL^-1。结论 该方法操作简单,缩短了分析时间,重复性好,可为半夏糖浆质量控制提供参考。     

柱前衍生-HPLC测定白消安在家兔体内的药动学参数

目的 建立测定家兔血清中白消安浓度和家兔体内药动学特征的柱前衍生化HPLC。方法 以1,5-戊二醇二甲磺酸酯为内标,二乙基二硫代氨基甲酸钠为衍生化试剂。流动相：甲醇-水（54∶46）,流速：0~20 min（1.0 mL·min^-1）,20~27 min（1.3 mL·min^-1）。柱温：30℃,检测波长：280 nm,进样量：25 μL。家兔分别以灌胃、静注的方式给予白消安,按本法测定血药浓度,DAS 3.0计算药动学参数。结果 白消安的血药浓度在0.1~3.4 mg·-L¹ 内线性关系良好（r=0.999 7）,日内、日间精密度以及样品稳定性符合中国药典2015年版的规定。低、中、高浓度的萃取回收率分别为90.0%,89.0%,91.5%。不同给药途径获得的药动学参数：单剂量口服t_1/2=（2.26±0.66）h,k=（0.33±0.12）·h^-1,k_a=（2.54±1.3）·h^-1,AUC_0–t=（1.95±0.18）h·mg·mL^-1;单剂量静脉注射t_1/2=（1.53±0.09）h,k=（0.45±0.03）·h^-1,AUC_0–∞=（4.38±0.26）h·mg·mL^-1。多剂量口服后C_ss=（0.48±0.03）mg·mL^-1,AUC_0–τ=（3.87±0.26）h·mg·mL^-1。结论 建立的柱前衍生-HPLC法适用于白消安血药浓度测定及药动学研究,不同给药途径的药动学参数为临床药动学研究提供了依据。     

LC-MS/MS测定阿齐沙坦及其盐在大鼠血浆中的药动学研究

目的 建立液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度并研究其药动学。方法 大鼠血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（50 mm×3.0 mm,1.8 μm）;流动相（乙腈：水=60：40）,流速为0.35 mL·min^-1,柱温为40℃;采用Agilent 6430三重四极杆串联质谱仪,离子化方式：电喷雾-正离子（API-ES）;监测方式：MRM;阿齐沙坦监测离子对457.3/233.1,缬沙坦监测离子对436.2/291.4,用作内标。SD大鼠灌胃给予阿齐沙坦1.0 mg·kg^-1及阿齐沙坦盐1.2 mg·kg^-1。结果 阿齐沙坦在5~30 000 ng·mL^-1内线性关系良好;回收率为85%~115%,精密度RSD在±15%内。阿齐沙坦盐大鼠体内主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（12.9±3.2）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（14.2±4.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（3.8±0.3）μg·mL^-1,T_1/2为（13.4±0.5）h。阿齐沙坦的主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（8.1±2.6）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（9.7±3.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（2.3±0.5）μg·mL^-1,T_1/2为（10.5±0.5）h。结论 本法经方法学验证,适用于大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度测定,可用于阿齐沙坦及其盐大鼠体内药动学研究。     

基于RBL-2H3与P815细胞体外模型的聚山梨酯80、维生素K1注射剂、注射用两性霉素B脂质体类过敏反应潜在风险评价

目的 基于 RBL-2H3及 P815细胞系,选择 Compound 48/80（C48/80）为阳性药构建类过敏反应的体外评价模型,初步评价聚山梨酯80、维生素K₁注射剂（VK₁I）、注射用两性霉素B脂质体（ABL）导致类过敏反应的潜在风险。方法 应用 CCK-8 法检测 C48/80（10、30、60、100 μg·mL^-1）、聚山梨酯 80（2.5、5.0、10.0、50.0 mg·mL^-1）、VK₁I（0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mg·mL^-1）、ABL（0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 mg·mL^-1）对 RBL-2H3、P815 细胞活性的影响,计算半数抑制浓度（IC₅₀）,阳性药及受试物均选择＜IC₅₀浓度进行后续实验;结合中性红染色形态学观察,研究阳性药及受试物的细胞毒性;流式细胞仪检测Annexin V阳性细胞率及Fluo-4AM标记率;ELISA法检测β-氨基己糖苷酶（β-Hex）及组胺释放量。结果 中性红染色结果显示,在C48/80作用下RBL-2H3、P815细胞部分皱缩或者偶有破损,但大部分细胞仍维持完整细胞形态;在聚山梨酯 80、ABL、VK₁I高浓度的作用下,RBL-2H3、P815细胞大部分仍能保持正常形态。C48/80在＜IC₅₀浓度时能够引起较强的细胞脱颗粒反应,模型建立成功。聚山梨酯80、VK₁I在＜IC₅₀浓度时均出现了浓度相关性细胞脱颗粒现象,与对照组比较,2种细胞聚山梨酯80 2.5、5.0 mg·mL^-1组及VK₁I 0.75、1.50、3.00 mg·mL^-1组Annexin V阳性率、Fluo-4AM标记率均显著升高（P＜0.05、0.01）;聚山梨酯 80 2.5、5.0 mg · mL^-1 组及 VK₁I 1.5、3.0 mg·mL^-1组的组胺、β-Hex释放量显著升高（P＜0.05、0.01）。ABL 组 Annexin V 阳性率浓度相关性升高趋势不明显 ,与对照组比较 ,仅 P815 细胞 ABL 2.00 mg·mL^-1组显著升高（P＜0.05）,且升高幅度不大 ;与对照组比较 ,2种细胞ABL 1、2 mg·mL^-1组的Fluo-4AM标记率和组胺、β-Hex释放量显著升高（P＜0.05、0.01）。结论 聚山梨酯80、VK₁I高浓度具有导致类过敏反应产生风险,ABL 还需进一步研究。     

萝卜硫素对阿霉素诱导的肝细胞损伤保护作用及其与氧化应激关系的研究

目的 探讨萝卜硫素（sulforaphane,SFN）对阿霉素（adriamycin,ADM）诱导的肝细胞损伤保护作用及其与氧化应激的关系。方法 体外培养人正常肝细胞L02和人肝癌细胞株HepG2,加入不同浓度的SFN （6.25,12.5,25,50,100 μg·mL^-1）,培养48 h;另取HepG2细胞中加入3.75,7.5,15,31.25,62.5,125,250,500 μg·mL^-1 SFN,培养24,48 h,MTT法检测培养后细胞抑制率,计算50%抑制浓度（IC₅₀值）。体外培养L02细胞,试验组加入不同浓度的SFN （3.75,7.5,15 μg·mL^-1）,试验组与模型组分别于0.5,1,2,3 h后加入1.25 mg·mL^-1的ADM,通过酶联免疫的方法分别对细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、核因子NF-E2相关因子（Nrf2）进行测定评估。结果 SFN能显著抑制HepG2的体外增殖,而且呈一定的药物浓度-效应和时间-效应关系。SFN对L02的抑制作用相对较弱,其IC₅₀为47.7 μg·mL^-1,明显高于其对HepG2的IC₅₀值。另外,与模型组比较,SFN能够明显降低细胞培养上清液MDA、LDH、GLUT4、TNF-α的水平,升高SOD、Nrf2水平。结论 SFN可显著抑制肝癌细胞的体外增殖能力,对其具有一定的选择性抑制作用,而且对于ADM诱导的肝细胞损伤具有一定的保护作用。可能是通过Keap1-Nrf2/ARE通路,诱导二相抗氧化酶清除体内的致癌物质或其他毒物,从而减轻肝脏组织的氧化应激和炎症反应。     

米炒红娘子炮制工艺优化及其质量标准建立

目的 优化红娘子炮制工艺，建立米炒红娘子质量标准。方法 以浸出物、气味、色泽、破碎度及蛋白质含量为评价指标，结合熵权法-层次分析法建立综合评价方法，考察炒制时间、炒制温度及药材与辅料比例对米炒红娘子质量的影响，通过正交试验优选最佳炮制工艺。对米炒红娘子进行显微鉴别、薄层鉴别，测定其水分、灰分、浸出物及重金属含量，建立质量标准。结果 红娘子最佳炮制工艺为将2倍量大米投入炒药锅炒至冒烟时投入净制红娘子，140 ℃翻炒6 min。测得炮制品浸出物含量199 mg·g^-1，气味、色泽、破碎度分值均为5，蛋白质含量为136 mg·g^-1。米炒红娘子水分含量为2.97%，总灰分及酸不溶性灰分含量分别为3.79%，0.33%，重金属铅、镉、砷、汞、铜含量分别为2.26，1.91，0.06，0.13，38.14 mg·kg^-1，黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂均低于检出限0.1 μg·kg^-1，浸出物含量为20.10%。结论 红娘子炮制工艺可靠、稳定，为规范红娘子饮片的炮制工艺和质量标准提供科学依据。建议米炒红娘子水分含量<3.56%，总灰分及酸不溶性灰分分别<4.55%、0.40%，重金属铅含量<2.71 mg·kg^-1、镉<2.29 mg·kg^-1、砷<0.07 mg·kg^-1、汞< 0.16 mg·kg^-1、铜<45.77 mg·kg^-1，浸出物含量>16.08%，黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂<0.1 μg·kg^-1。     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

10例狂犬病误诊原因分析

狂犬病近年来发病率有逐年增加的趋势,近十二年来,我们共遇见狂大病２３例,其中１０例被误诊为其它疾病,现就其误诊原因进行分析如下。１临床资料１．１ 一般资料：男８例,女２例;年龄最大７８岁,最小４岁。发病季节为３月～１１月。首诊科室,儿科３例、内科３例、转院３例、急诊科１例。１．２ 临床表现：发热７例,恐风５例,恐水６例,怕光３例,流涎１０例,胸闷、气促、呼吸困难４例,烦躁不安１０例,多汗７例,恐惧６例,肢体麻木４例,抽搐４例,恶心、呕吐２例,昏厥１例。所有病例发病至死亡时间为２天～６天,死亡原因为…     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

The effect of temperature and of cetrimide on the rate of loss of refractility of spores of Bacillus megaterium

The rate of germination of spores of Bacillus megaterium at 30° is not significantly different from the rate at 37° but the onset of germination is delayed; outgrowth is normal. At 45° germination of some spores occurs but the rate is much slower than at 37°, and there is no lag; emergence occurs from only a proportion of the germinated spores and after 3 or 4 vegetative cells have been produced, replication ceases. A single regression equation can represent the germination rate of the spores at 37° in the presence of from 0.0005 to 0.02% w/v of cetrimide and in its absence. In 0.0005% w/v of cetrimide, germ cells emerge from some of the germinated spores but many of them become swollen and disintegrate. Concentrations of 0.00125% w/v or more progressively inhibit swelling and completely inhibit emergence.     

经尿道前列腺汽化电切术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的效果对比

目的 对比分析经尿道前列腺汽化电切术与经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生症的效果.方法 将本院2011年3月～2013年2月收治的90例前列腺增生症患者随机分为观察组（n=45）和对照组（n=45）,观察组患者采用经尿道前列腺汽化电切术治疗,对照组患者采用尿道前列腺电切术治疗,比较两组患者的疗效.结果 观察组的手术时间、术中出血量、术后冲洗时间、术后留置导尿管时间、住院时间少于对照组（P＜0.05）,残余尿量、国际前列腺症状评分和生活质量评分优于对照组（P＜0.05）,但是两组患者的并发症发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 经尿道前列腺汽化电切术治疗前列腺增生症具有疗效更确切、出血少、恢复快等优势,可以作为治疗前列腺增生症的首选方法.