知母种苗质量分级标准研究

目的:研究制定符合生产实际的知母种苗质量分级标准,为知母药材规范化生产提供依据。方法:对知母主产区基地以及药材市场销售的种苗进行质量指标调查,通过相关分析、主成分分析,并结合生产实践确定知母种苗的质量分级指标,通过K-均值聚类分析将知母种苗分为3个等级,并以不同等级种苗为处理材料进行田间试验,连续2年观测植株生长、药材产量及质量指标。结果:确定种球直径和百株质量作为知母种苗的质量分级指标,将种苗分为3个质量等级,Ⅰ级种苗:种球直径≥1.2 cm,百株质量≤2.0 kg;Ⅱ级种苗:种球直径≥0.8 cm,百株质量≤1.5 kg;Ⅲ级种苗:种球直径≥0.5 cm,百株质量≤1.0 kg且≥0.5 kg。不同等级种苗对植株根系生长、药材产量有显著影响,均表现为:Ⅰ级>Ⅱ级>Ⅲ级。不同等级种苗种植后药材的有效成分含量差异不显著,但均高于《中华人民共和国药典》的标准。结论:本研究制定的知母种苗质量标准即具科学性,也更符合生产实际,可为知母药材的规范化栽培提供理论依据。     

知母的HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的采用HPLC-ELSD法建立知母的指纹图谱,全面综合反映和控制知母整体质量。方法 Thermo色谱柱C8(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%冰醋酸水溶液(B)梯度洗脱:0~5 min,5%~7%A;5~15 min,7%~15%A;15~36 min,15%~22%A;36~43 min,22%~35%A;43~51 min,35%~50%A;51~60 min,100%A;柱温25℃,体积流量1 m L/min,ELSD检测器雾化器(空气)体积流量2.6 L/min,漂移管温度100℃,进样量20μL。结果在60 min内获得了较好分离效果的特征图谱,确定12个主要特征峰作为共有峰,建立了能够使多数化学成分色谱分离的知母药材HPLC-ELSD指纹图谱。结论该方法简便、可靠,并且同时指认了知母中皂苷类和双苯吡酮类成分,能较全面地反映知母整体性的化学成分特征,可用于全面有效地控制知母的质量。     

蝉蜕中泥沙等杂质含量检测的研究

目的:对市场上不同批次的蝉蜕与洗净品之间泥沙含量差异进行研究,为蝉蜕的质量控制提供依据.方法:中国药典(2000版一部)附录Ⅸ K灰分测定法.结果:市场上不同批次蝉蜕的总灰分、酸不溶性灰分均明显比洗净品高.结论:市场上蝉蜕均或多或少有泥沙掺杂,运用总灰分、酸不溶性灰分能有效控制.     

蝉蜕中泥沙等杂质含量检测的研究

目的：对市场上不同批次的蝉蜕与洗净品之间泥沙含量差异进行研究，为蝉蜕的质量控制提供依据。方法：中国药典(2000版一部)附录Ⅸ K灰分测定法。结果：市场上不同批次蝉蜕的总灰分、酸不溶性灰分均明显比洗净品高。结论：市场上蝉蜕均或多或少有泥沙掺杂，运用总灰分、酸不溶性灰分能有效控制。     

知母总黄酮提取工艺的研究

目的建立知母中总黄酮提取工艺，为知母总黄酮开发和利用提供依据。方法对提取方法、提取溶剂、提取时间进行研究，采用紫外分光光度法测定知母中总黄酮含量。结果知母中总黄酮较佳提取工艺为：70％乙醇超声提取30min。结论该方法简便、快速、准确，可作为知母中总黄酮提取及含量测定方法。     

徐长卿基肥的施用初探

目的考查徐长卿基肥的施用效果。方法研究基肥的种类及施用量对徐长卿产量和质量的影响。结果农家肥增产效果明显,增施一定量的N,P,K复合肥可有效提高徐长卿产量。结论徐长卿基肥较佳的施用方案为施农家肥9~15万kg/ka,加施900~1200 kg/ha的N,P,K复合肥。     

维吾尔药材莴苣子的水分、灰分和浸出物的测定

目的测定莴苣子药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分以及浸出物的含量,为制定其质量标准提供科学依据。方法按《中国药典》(一部)2010版附录IX H中水分测定法(烘干法)、附录IX K中的灰分测定法和附录X A中的浸出物测定法测定。结果莴苣子水分含量4.21%⁵.47%,总灰分为4.21%5.47%,总灰分为4.21%¹5.79%,酸不溶性灰分为0.63%15.79%,酸不溶性灰分为0.63%².45%,水溶性浸出物(热浸)量为13.01%2.45%,水溶性浸出物(热浸)量为13.01%¹6.09%。结论莴苣子水分含量不超过6.0%,总灰分不超过11.0%,酸不溶性灰分不超过2.0%,水溶性浸出物(热浸)量不低于13.0%,所得结果为建立药材标准提供了科学依据。     

不同部位和不同产地加工方法的知母质量评价研究

目的 采用UPLC-QQQ-MS/MS法同时测定不同部位和不同产地加工方法知母Anemarrhenae Rhizoma中9个成分的含量,并比较其差异。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相为0.01%甲酸溶液（A）-乙腈（B）,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,进样量2μL,柱温30℃;质谱采用电喷雾离子源、负离子模式（ESI^-）,多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）。结果 知母中新芒果苷、芒果苷、异芒果苷、知母皂苷AII、知母皂苷AIII、知母皂苷BII、知母皂苷BIII、知母皂苷E₁、知母皂苷I 9个成分在各自范围内呈良好的线性关系,加样回收率97.23%~100.76%。知母的5个不同部位中知母须根中芒果苷、异芒果苷的含量最高;知母肉中知母皂苷E₁、知母皂苷BII、知母皂苷I含量最高;知母头与知母片、知母肉成分差异较小。比较知母的不同产地加工方法,趁鲜切片新芒果苷和知母皂苷BII的含量较高,润切片芒果苷和知母皂苷AIII的含量较高。结论 知母须根具有一定的开发利用价值,知母肉具有其存在的合理性;知母产地加工,可不切去知母头,以减少工序,提高知母根茎的综合利用率;趁鲜切片可加速干燥,降低饮片霉变风险。     

石榴籽质量标准的研究

石榴籽为维吾尔族习用药材。有关石榴籽的研究资料基本上是空白,仅有一些简单的功效描述。国家标准和地方标准均未见收载。因此,我们研究并起草了石榴籽质量标准,其中包括性状、显微和薄层色谱鉴别项以及水分、总灰分、酸不溶性灰分、漫出物的检查项。     

不同产地山羊角药材灰分测定研究

目的测定山羊角药材灰分的含量,修订山羊角药材质量标准。方法按照《中华人民共和国药典》2010年版(一部)附录ⅨK灰分测定法对10批不同产地山羊角药材的灰分进行测定。结果 10批不同产地山羊角药材,总灰分测定结果示浙江金华总灰分含量最高(2.522%),广东电白最低(0.799%),平均值为1.432%;酸不溶性灰分测定结果最高为1.659%(浙江金华),最低为0.333%(广东电白),平均值为0.678%;总灰分测定结果均未超过3.0%,酸不溶性灰分均未超过2.0%。结论山羊角药材中灰分测定对其质量标准研究有重要意义。     

知母中菝葜皂甙元含量测定

目的：知母中菝葜皂甙元含量测定方法的改进。方法：薄层扫描法：显色剂10%高氯酸乙醇溶液。测定波长530nm。结果：此方法斑点稳定时间长,线性关系良好,平均加样回收率为96.7%。结论：本方法适用于知母中菝葜皂甙元的含量测定。     

生 盐知母水煎液中芒果苷在大鼠体内的组织分布

目的:考察生、盐知母水煎液中芒果苷在大鼠体内的组织分布情况,探讨盐知母引药入肾的作用机制。方法:将40只大鼠随机分为对照组、生知母(10 g·kg^-1)组、盐知母(10 g·kg^-1)组、芒果苷(200 mg·kg^-1)组,灌胃给药2 h后处死,立即解剖采集心、肝、脾、肺、肾组织,采用高效液相色谱法(HPLC)测定组织样品中的芒果苷含量。结果:方法专属性、日内和日间精密度、稳定性及提取回收率均符合生物样品分析要求;各组织样本在检测浓度范围内呈良好线性关系;生、盐知母及芒果苷组大鼠给药2 h内芒果苷主要集中在肺、肾组织中,含量从高到低的顺序为肺>肾>脾>肝>心。结论:生、盐知母和芒果苷组大鼠体内芒果苷均集中分布在肺、肾组织中,与知母的归经特点相符。生、盐知母组大鼠体内芒果苷在肺、肾组织中的含量明显高于芒果苷组,但生、盐知母组大鼠各组织中芒果苷含量差异无统计学意义。     

知母的效用与临床应用分析

<正>知母首见于《神农本草经》,列为中品,为百合科植物知母的干燥根茎。李时珍云:"宿根之旁,出生子根,状如蚔虫之状,故谓之蚔母,讹为知母。"知母气味苦、辛、寒,无毒,入手太阴、足阳明、足少阴经。知母虽属苦寒,但质地柔润,具有清热除烦、清肺润燥、滋阴降火等功效,能治疗上、中、下焦诸多病变。唐代以前以清热除烦、滋阴润燥作用为主,唐宋以后以滋阴泻火、止嗽除蒸作用为主,临床用于肺热咳嗽、阴虚潮热和消渴等症的治疗。     

知母化学成分和药理作用

知母具有"清热泻火、滋阴润燥、止渴除烦"的功效。近代研究证明其化学成分主要为皂苷类、双苯吡酮类、生物碱类、氨基酸类、挥发油类等化合物。知母的药理研究表明,知母具有抗血小板血栓、改善阿尔茨海默症、抗肿瘤、抗炎、解热等作用。目前国内对知母的药理研究主要表现在对阿尔茨海默症的治疗效果上。     

硫磺熏蒸知母的化学标志物分析

中药知母经硫磺熏蒸制备成含硫知母饮片,利用UPLC-Q-TOF-MS~E结合UNIFI数据分析平台、主成分分析法(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),分析并在线鉴定了硫磺熏蒸前后知母饮片中的16个主要的差异性成分,其中9个主要存在于熏蒸后知母饮片中;确定了熏蒸后知母饮片中的化学标志物,为硫熏后新产生的亚硫酸酯化衍生物。同时利用UPLC-Q-TOF-MS~E寻找主要化学标志物——知母皂苷BⅡ亚硫酸酯(m/z 983)的手段,建立了知母饮片硫磺熏蒸的快速筛查方法,该方法便捷准确,可作为知母质量控制的有效辅助手段。这是首次分析鉴定了甾体皂苷类成分的亚硫酸酯化衍生物,并应用这一方法筛查硫磺熏蒸的知母饮片。     

基于民国中医名家临床用药的知母剂量研究

目的研究知母在汤剂中的用药剂量。方法以知母为检索词,以汤剂为示范,对民国中医名家运用知母的经验方进行逐篇检索。采用均数、百分位数和极差等统计方法进行统计处理,并与2010年版《中国药典》中法定的知母剂量作对比分析。结果民国中医名家运用知母的剂量80%分布在4g-23g之间。与《中国药典》法定剂量的完全符合率为77.5%,不符合率为22.5%。结论知母在汤剂中的剂量以4g-23g为宜。     

HPLC-ELSD法同时测定知母药材中2种皂苷含量

目的:用HPLC-ELSD同时测定知母药材中2种皂苷的含量.方法:采用Kromasil C12柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温为30℃.蒸发光散射检测器漂移管温度50℃,蒸发温度70℃,以氮气为雾化气,压力为1.03×105Pa.结果:知母皂苷C在0.310～3.10 μg,知母皂苷AⅢ在0.323～3.23μg,进样质量的对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系.知母皂苷C回归方程为lgA=1.25421gM+5.734.7,r=0.9995,测定的平均回收率(n=6)98.1%,RSD2.0%;知母皂苷AⅢ回归方程为lgA=1.32841gM+5.937,r=0.9996,测定的平均回收率(n=6)97.3%,RSD1.5%.结论:建立的含量测定方法准确、快速,是控制知母药材质量较理想的方法.对我国北方主要知母产地药材中两种皂苷含量测定和比较表明不同产地野生知母质量差异较大.     

基于DNA条形码技术的知母种子基原鉴定

目的:建立基于中药材DNA条形码技术的知母种子基原鉴定方法,保障知母种子基原的真实性。方法:收集知母的30份基原植物样品和9份生药材样品,获取其参考DNA条形码序列,采用克隆测序方法验证参考序列的准确性。收集51份待检测知母种子样品,获取其DNA条形码序列,基于BLAST法、遗传距离法和邻接(NJ)系统发育树法进行物种鉴定。结果:对于基原植物和生药材样品,由于基因组内存在异质性,核糖体DNA第2内部转录间隔区(ITS2)序列无法稳定获得,但可成功获得psbA-trnH序列。知母psbA-trnH序列分为6个单倍型,有3个变异位点,2处插入/缺失,种内变异最大值0.003 5,种间变异最小值0.1,在NJ系统发育树上聚为独立的支。共获得153条知母种子的psbA-trnH序列,经BLAST法、遗传距离法和NJ系统发育树法鉴定均为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides。结论:psbA-trnH是知母种子鉴定的适合条形码序列,可用于知母种子的真实性鉴定。所收集51份知母种子样品的基原均符合2015年版《中国药典》(一部)相关项下规定,未发现伪品。     

经典名方中知母的本草考证

通过查阅历代本草、医籍、方书,并结合近现代文献资料,笔者对知母药材的名称、基原、产地变迁、品质评价、采收加工与炮制方法等方面进行全面梳理与考证,以期为含有知母的经典名方开发与研究提供参考。经考证可知,知母始载于《神农本草经》,历代本草皆以“知母”为正名;历代所用的知母主流来源为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides的根茎;历代著录的产区为今河北、山西、陕西、内蒙古及北京房山等地,近代以来河北易县所产“西陵知母”较为知名,奉为道地,现栽培知母主产地为河北易县、河北安国,安徽亳州等;近代以来总结其品质以条粗肥大、质硬、外皮色黄、断面色白者为佳;古籍记载的采收时间通常在二月、八月,曝干,现代采收多为春秋两季;历代炮制方法主要为用时去毛,切制时忌铁,用酒制或盐水制等,而现代主要有生品和盐制品两大规格。基于考证结论,建议经典名方中知母选用百合科植物知母A. asphodeloides的干燥根茎,原方注明炮制要求的根据要求操作,未注明炮制要求的可以生品入药。     

知母药材的HPLC/PDA/ELSD指纹图谱研究

[目的]建立知母药材的高效液相色谱仪-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用(HPLC/PDA/ELSD)指纹图谱。[方法]采用Waters Symmetry Shield TM RP C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长258 nm,ELSD检测器载气气压30 Psi,漂移管温度80℃。[结果]建立了知母的HPLC/PDA/ELSD指纹图谱,在HPLC-PDA色谱图中标定了17个共有峰,HPLC-ELSD色谱图中标定了14个共有峰。[结论]该方法重复性好,可用于知母药材的全面质量控制。