TrkA基因的表达抑制神经母细胞瘤血管生成的实验研究

目的:探讨TrkA基因通过抑制神经母细胞瘤(NB)血管生成而阻止其生长、转移的可行性.方法:常规培养对照组SY5Y细胞、TrkA基因高表达的实验组细胞(SY5Y-TrkA)和表达载体基因的空载体组细胞(SY5Y-Vec);比较三组细胞的裸鼠皮下致瘤性:通过RT-PCR、免疫组织化学、微血管面积计算检测并比较三种细胞所致的肿瘤瘤体内血管生成情况.结果:SY5Y-Trk A细胞在裸鼠皮下的致瘤性和其所致肿瘤的血管生成能力明显下降.肿瘤终体积:对照组1.736±0.485cm3,空载体组1.803±0.751cm3,实验组0.3945±0.015cm3(P＜0.01);对照组与实验组相比,血管内皮生长因子(VEGF)的表达差别显著(P＜0.01);微血管密度(MVD):对照组27.2l±14.58,空载体组27.76±14.15,实验组4.08±4.72(P＜0.01).结论:TrkA基因能有效抑制神经母细胞瘤的血管生成和肿瘤生长,为应用基因抗血管治疗神经母细胞瘤提供理论依据.     

反应停调控Lewis肺癌表达bFGF和MMP-2

目的探讨反应停抑制Lewis肺癌血管形成的机制.方法采用Lewis肺癌模型和免疫组化方法探讨反应停抑制肺癌生长的机制.结果反应停剂量为200、400 mg/kg时,对Lewis肺癌的生长有抑制作用,对微血管密度(microvessel density,MVD)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达有下调作用(P＜0.05).结论反应停可能通过抑制促进血管生长的因子bFGF和MMP-2的表达,抑制了血管生成,并进一步抑制了Lewis肺癌的生长.     

重组人血管内皮抑素联合重组人p53腺病毒治疗乳腺癌的实验性研究

背景与目的目前多基因、多靶点联合治疗已成为肿瘤研究的方向之一,本文探讨重组人血管内皮抑素(endostatin,ES)联合重组人p53腺病毒(rAd/p53)对乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用.方法建立人乳腺癌裸鼠模型,成瘤后随机分为对照组、ES组、rAd/p53组和联合组,分别给予处理;观察裸鼠的一般情况、体重和肿瘤的体积,并检测肿瘤组织微血管密度(MVD,microvessel density)和血管内皮生长因子(VEGF,vascular endothelial growth factor)的表达.结果成瘤后ES组,rAd/p53组和联合组抑瘤率分别为1.75%、43.36%和58.68%,rAd/p53组和联合组可明显抑制肿瘤生长(P＜0.05),联合组抑瘤作用更为显著;对照组、ES组、rAd/p53组与联合组肿瘤组织的MVD及VEGF表达H-评分分别为(30±5、24±4、24±4、18±4)和(46±8、39±8、40±5、29±5),联合组均低于其余各组,差异有显著性(P＜0.05);各组均未见不良反应,体重变化无显著性(P＞0.05).结论重组人血管内皮抑素联合rAd/p53可显著抑制裸鼠乳腺癌的生长及微血管生成.     

VEGF-A/VEGF-C反义脱氧寡核苷酸对乳腺癌生长及其脉管生成的影响

背景与目的:肿瘤脉管生成与肿瘤的生长和转移密切相关,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)可能是最强的促血管生成因子,而VEGF-C是VEGF家族中最强的促淋巴管生成因子,在肿瘤血管生成中与VEGF-A具有协同促进效应.本研究旨在探讨VEGF-A/VEGF-C反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleoude,ASODN)对乳腺癌生长及其脉管生成的影响.方法:将VEGF-A/VEGF-C ASODN注入人乳腺癌裸鼠原位移植癌模型中,观察肿瘤生长;运用RT-PCR法检测肿瘤组织VEGF-A/VEGF-C mRNA表达,免疫组织化学法检测其蛋白表达情况;5'-Nase-ALPase双重酶组织化学染色标记肿瘤微血管和微淋巴管,并计算肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)和微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD).结果:反义组成瘤时间较对照组长[(13.00±2.83)天vs.(7.67±1.63)天,P＜0.05],移植瘤生长速度较对照组缓慢,肿瘤重量明显低于对照组[(0.45±0.14)g vs.(0.92±0.37)g,P＜0.05],抑瘤率达51.09%;反义组VEGF-A和VEGF-C mRNA及蛋白表达较对照组明显减弱(P＜0.05),且MVD(21.83±2.86 vs.41.33±4.03)及LMVD(18.67±4.67 vs.31.83±2.33)显著低于对照组(P＜0.05).结论:VEGF-A/VEGF-C ASODN通过抑制VEGF-A及VEGF-C表达抑制乳腺癌脉管生成,进而抑制肿瘤生长.     

膜型基质金属蛋白酶-1上调人乳腺癌细胞血管内皮生长因子的表达并诱导肿瘤血管新生

目的 研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在肿瘤血管新生过程中的作用,探讨其诱导肿瘤血管新生的作用途径.方法 应用基因转染方法 ,将MT1-MMP导入人乳腺癌细胞系MCF-7细胞;应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色,比较转染前后肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化;通过裸鼠异种移植瘤模型,检测MT1-MMP对肿瘤生长速度、肿瘤组织微血管密度(MVD)和VEGF表达的影响.结果 在MT1-MMP稳定转染后的MCF-7细胞中,VEGF189、VEGF165和VEGF121 mRNA表达水平显著上调(P＜0.001).免疫荧光检测结果 显示,MT1-MMP组的VEGF蛋白免疫荧光强度为93.8±10.3,明显强于MCF-7组(42.9±5.3)和pcDNA3.1组(41.0±5.4,P＜0.001).裸鼠异种移植瘤模型结果 显示,MTI-MMP能够加快肿瘤生长速度.肿瘤组织MVD检测结果 显示,MT1-MMP能够显著提高肿瘤组织的MVD(P＜0.05).免疫组织化学染色结果 显示,VEGF在MT1-MMP组呈强阳性表达.结论 MT1-MMP能够通过上调肿瘤细胞VEGF表达水平而有效诱导肿瘤血管新生.MT1-MMP的这一作用途径可能为临床抗肿瘤研究及抗肿瘤药物开发提供新思路.     

榄香烯对裸鼠胃癌原位移植瘤血管生成的抑制作用

 目的 观察榄香烯对裸鼠胃癌原位移植瘤生长和血管生成的抑制作用。 方法 采用裸小鼠胃癌原位移植模型,随机分为0.9%氯化钠溶液(NS)组、5-Fu组、榄香烯组和联合组 ,腹腔注射给药。比较各组移植瘤瘤重的差异;免疫组织化学法检测肿瘤微血管密度 (Microvessel Density,MVD) 和VEGF、p53蛋白表达,RT-PCR法检测VEGF mRNA表达。 结果 联合组裸鼠胃癌移植瘤的瘤重显著低于NS组(P＜0.05);榄香烯组、联合组瘤组织MVD、VEGF蛋 白、p53蛋白及VEGF mRNA表达亦明显低于NS组(P＜0.05);各组移植瘤的瘤重与瘤组织MVD呈正 相关(r=0.669,P＜0.01)。 结论 榄香烯能抑制裸鼠胃癌原位移植瘤生长和血管生成,其机制可能与抑制裸鼠胃癌组织VEGF和突 变型p53的表达有关。     

MASPIN、HPA在卵巢癌血管生成中的作用

[目的]研究丝氨酸蛋白酶抑制剂(MASPIN)、乙酰肝素酶(HPA)在卵巢癌的表达和血管生成的作用.[方法]采用免疫组化法对31例正常卵巢组织、35例上皮性卵巢癌标本进行MASPIN、HPA表达检测,CD34抗体标记血管内皮细胞计数微血管密度(MVD).MASPIN真核表达质粒体外转染卵巢癌SKOV3细胞,用细胞免疫化学及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测转染后卵巢癌细胞中HPA蛋白和HPA mRNA表达变化.[结果]MASPIN在正常卵巢生发上皮细胞和卵巢癌细胞的阳性表达率分别为16.1％(5/31)和57.1％(20/35)(P＜0.05).HPA蛋白在正常卵巢生发上皮细胞未见表达,在卵巢癌细胞的阳性表达率为85.7％(30/35)(P＜0.05);MVD在卵巢癌中增高(P＜0.05).MASPIN蛋白表达与卵巢癌病理类型、临床分期和腹水相关(P＜0.05).HPA蛋白表达与卵巢癌淋巴结转移和腹水相关(P＜0.05).细胞免疫组化及RT-PCR方法均证实转染MASPIN cDNA的SKOV3细胞中HPA表达在各组间差异无统计学意义(P＞0.05).[结论] MASPIN在卵巢癌的发展过程中可能发挥着肿瘤抑制作用,并具有抑制血管生成作用.HPA表达与卵巢癌的恶性生物学行为密切相关.     

组织因子途径抑制物-2对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的影响

目的:探讨组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)对人肝癌Hep3B细胞株裸鼠皮下移植瘤生长以及肿瘤血管生成的作用.方法:将TFPI-2稳定表达的Hep3B细胞(Hep3B-TFPI-2组)、转染空载体PCDNA3.1的Hep3B细胞(Hep3B-V组)及未进行转染的Hep3B细胞(Hep3B-P组)分别接种于裸鼠皮下,待皮下成瘤后,每隔3d测量1次肿瘤大小,并绘制出肿瘤体内生长曲线.3周后处死裸鼠,测定肿瘤体积,提取组织中总RNA和蛋白,实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测肿瘤组织中TFPI-2和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测肿瘤组织中TFPI-2和VEGF蛋白表达水平;免疫组织化学法检测肿瘤组织中TFPI-2蛋白表达水平和肿瘤微血管密度(micro vessel density,MVD).结果:Hep3B-TFPI-2组最终肿瘤体积明显小于Hep3B-V组和Hep3B-P组(P＜0.05).Hep3B-TFPI-2组肿瘤组织的TFPI-2 mRNA表达丰度和蛋白水平明显高于其余2组(P＜0.05);而Hep3B-TFPI-2组VEGF mRNA表达丰度和蛋白水平明显低于其余2组,与2个对照组相比,VEGF蛋白表达抑制率分别为19.8％和23.5％ (P＜0.05).Hep3B-TFPI-2组MVD计数明显低于其余2组(P＜0.05).结论:TFPI-2能抑制人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长和肿瘤血管生成.     

人乳腺癌裸鼠移植瘤MTD间歇期给予CTX节律化疗的实验观察

目的:研究最大耐受剂量(MTD)化疗间歇期给予节律低剂量CTX对人乳腺癌裸鼠移植瘤的作用.方法:建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为小剂量节律(LDM)组、最大耐受剂量(MTD)组、最大耐受剂量联合节律(MTD+LDM)组和生理盐水对照组,治疗21 d为1个周期.测量瘤体积、裸鼠体质量及外周血白细胞计数.处死裸鼠后测量瘤质量,应用免疫组化方法检测瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:各治疗组均抑制了肿瘤生长;联合组瘤质量及21d时肿瘤体积与其他各组相比均显著降低,P＜0.05.联合组抑瘤率为69.15％,与对照组及MTD组相比,联合组和LDM组肿瘤组织的VEGF水平及MVD值显著降低,P＜0.05;与LDM组和对照组相比,联合组和MTD组肿瘤组织PCNA表达水平均显著降低,P＜0.05.各治疗组裸鼠体质量及白细胞计数差异无统计学意义,P＞0.05.结论:最大耐受剂量间歇期给予节律低剂量CTX通过同时抑制肿瘤细胞增殖活性和肿瘤血管生成,在未增加毒副反应的前提下抑瘤效果更好,为可行有效的方案.     

纳米金阻断VEGF165信号传导并抑制裸鼠肝癌血管生成

目的:探讨纳米金如何阻断VEGF165的信号传导,抑制裸鼠移植肝癌血管生成.方法:无血清培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),加入血管内皮生长因子165(VEGF165),再加入不同浓度纳米金,作用5min,采用Western blot方法测定磷酸化PLC-γ1蛋白.6周龄Balb/c裸鼠20只,从裸鼠右腋皮下注入H22细胞.第5天,肿瘤形成约8mm大小,随机分为两组:实验组从肿瘤周围及瘤内注入纳米金,每天1次,连续8天;对照组用生理盐水处理.处死裸鼠时测量肿瘤体积及重量,免疫组化染色并计算肿瘤组织微血管密度.结果:VEGF165浓度不变(10μg/L),随着纳米金溶液浓度的增加(125、250、500nmol/L),纳米金抑制PLC-γ1磷酸化越来越明显.肝癌组织内微血管密度分别为,实验组14.27±1.08,对照组23.52±1.36,说明纳米金明显抑制了肝癌血管生成(P＜0.01).结论:纳米金阻断VEGF165的信号传导,明显抑制裸鼠肝癌血管生成.     

白桦酯醇对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中MMP-2和MMP-9表达的影响及意义

目的 探讨白桦酯醇对卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响和意义。方法 建立卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,将30只裸鼠随机分为白桦酯醇高剂量组（80mg／kg）、中剂量组（40mg／kg）、低剂量组（20mg／kg）以及对照组（生理盐水）和紫杉醇组（135mg／m2）,每组6只,腹腔给药02ml/只,隔日1次,连续21d。停药后第2d处死裸鼠,测量其移植瘤体积和瘤重;用免疫组织化学法检测移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达并计算表达率。结果 白桦酯醇处理组和紫杉醇组的移植瘤体积和瘤重均小于对照组（P＜0.05）;白桦酯醇中、高剂量组的抑瘤率分别为44.5％和51.4％,均高于其低剂量组的17.5%（P＜0.05）。与对照组比较,白桦酯醇处理组和紫杉醇组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均减弱;白桦酯醇低、中、高剂量组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达率（％）分别为47.13±8.67和53.82±7.41、38.29±4.37和48.79±4.63、26.88±5.12和38.93±2.82,均低于对照组的56.78±6.42和69.35±5.03,且白桦酯醇3组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 白桦酯醇对卵巢癌SKOV3细胞皮下移植瘤的生长有抑制作用,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

罗非昔布对胰腺癌 BXPC-3细胞裸鼠移植瘤血管形成的影响

背景与目的:肿瘤血管形成在肿瘤细胞浸润性生长中起了重要作用,增加表达的环氧合酶-2与快速生长肿瘤中的血管形成有关.本研究目的是观察选择性环氧合酶-2抑制剂-罗非昔布抑制胰腺癌生长的体内效应,以及对胰腺癌移植瘤相关血管形成的影响.方法:将表达有环氧合酶-2的人胰腺癌细胞 BXPC-3种植入裸鼠皮下,形成移植瘤.经口灌入罗非昔布 30 mg· (kg· d)- 1,共 8周,记录肿瘤大小,采用Ⅷ因子免疫组化显示血管密度, BXPC-3细胞上的血管内皮生长因子 (VEGF)检测亦用免疫细胞化学染色.采用 RT-PCR和明胶酶法检测胰腺癌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达及酶活性的变化.结果:罗非昔布对裸鼠胰腺癌移植瘤的肿瘤重量抑瘤率为 73.64%,肿瘤体积抑瘤率为 87.74%.实验组胰腺癌组织微血管密度 [(1.5± 0.2)个 /200倍放大视野 ]明显低于对照组 [(4.7± 1.5)个 /200倍放大视野 ].与对照组比较,罗非昔布显著降低了胰腺癌 BXPC-3细胞中 VEGF、 MMP-2 mRNA的表达以及酶活性.结论:减少胰腺癌相关的血管形成是罗非昔布阻止胰腺癌生长的机制之一.     

Contributions of stromal metalloproteinase-9 to angiogenesis and growth of human ovarian carcinoma in mice

BACKGROUND: The expression level of several matrix metalloproteinases (MMPs), including MMP-2 and MMP-9, in ovarian cancer cells is directly associated with their invasive and metastatic potentials. MMP-9 is also expressed in stromal cells adjacent to the tumor. To investigate the contribution of MMP-9 expression in stromal cells to ovarian tumor growth, we examined angiogenesis and progressive growth of human ovarian cancer cells implanted into mice with and without the MMP-9 gene. METHODS: Human ovarian cancer cells SKOV3.ip1 and HEY-A8 were implanted into the peritoneal cavities of nude mice that lacked the gene for MMP-9 (MMP-9(-/-)) or were wild type for MMP-9 (MMP-9(+/+)) (10 mice of each genotype per cell line). Tumor incidence, tumor size, and volume of ascites fluid were recorded for each mouse at 30 and 45 days after HEY-A8 and SKOV3.ip1 cell injections, respectively. Blood vessel density and macrophage infiltration into the lesions were analyzed in excised tumors by immunohistochemistry and double immunofluorescence. Tumor growth was also studied in MMP-9(-/-) nude mice that had been reconstituted with spleen cells collected from either MMP-9(+/+) or MMP-9(-/-) nude mice. All statistical tests were two-sided. RESULTS: HEY-A8 cells expressed high levels of MMP-9, and SKOV3.ip1 cells expressed low levels. Nevertheless, tumor incidence and growth were statistically significantly lower in MMP-9(-/-) mice than in MMP-9(+/+) mice injected with cells from either line (for tumor size, P =.006 and.042 for HEY-A8 and SKOV3.ip1 cells, respectively). Compared with MMP-9(+/+) mice injected with human ovarian cancer cells, MMP-9(-/-) mice injected with human ovarian cancer cells displayed decreased microvessel density and decreased macrophage infiltration into the lesions. Compared with MMP-9(-/-) mice that received spleen cells (a rich source of macrophages) from MMP-9(-/-) mice, those that received spleen cells from MMP-9(+/+) mice before cancer cell injections displayed increased angiogenesis and tumorigenicity of the cancer cells. The growing tumors contained MMP-9-expressing macrophages. CONCLUSION: Host-derived MMP-9 expression, most likely in tumor-infiltrating macrophages, appears to play a critical role in angiogenesis and progressive growth of human ovarian tumors in mice.     

基质金属蛋白酶及其组织抑制物在卵巢肿瘤中的表达

背景与目的：有研究表明,基质金属蛋白酶（metalloproteinases,MMPs）与肿瘤的发生发展,尤其是肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。本研究探讨基质金属蛋白酶MMP－2、MMP－9及其组织抑制物（tissue inbibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2）与卵巢癌侵袭及卵巢癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化S－P法对128例卵巢肿瘤组织MMP－2、MMP－9及TIMP－2蛋白表达进行检测,并用Χ^2检验进行统计学分析。结果：免疫组化结果表明,MMP－2、MMP－9及TIMP－2在卵巢癌组织中阳性表达率明显高于卵巢囊腺瘤（P＜0．01）。MMP－2及MMP－9在卵巢癌临床分期Ⅲ-Ⅳ期病例中的阳性表达率明显高于I－Ⅱ期者,病理学分级3级病例中的表达率明显高于1－2级者（P＜0．01）,有淋巴结转移病例中的表达率明显高于无淋巴结转移者（P＜0．01）。而TIMP－2的阳性表达与MMP－2及MMP－9相反。结论：MMP－2、MMP－9及TIMP－2的表达与卵巢癌的临床分期、病理分级及淋巴结转移有关,MMP－2及MMP－9蛋白的高表达可作为判断卵巢部具有转移倾向的临床参考指标。     

人COX-2基因反义真核表达载体对胃癌转移的影响

目的：在成功构建人COX-2基因反义真核表达载体的基础上,研究COX-2基因对人胃癌细胞株SGC-7901转移能力的影响。方法：实验分为COX-2基因反义真核表达载体转染的人胃癌细胞株SGC-7901转染组、COX-2抑制剂SC236处理组（SGC-7901细胞培养基内含100μmol/L SC236）和对照组（SGC-7901细胞）,并分别采用细胞体外侵袭实验,内皮细胞体外迁移实验,观察各组细胞体外转移的情况。采用裸鼠皮下移植瘤抑制实验,用转染和未转染的SGC-7901细胞按每毫升5×10~7个的细胞悬液分别注射于BALB/C-nu/nu无胸腺裸鼠背部皮下,SC236处理组按3mg/（kg·d）剂量于接种SCC-7901细胞10min后,由尾静脉注射,隔日1次。各组6周后处死动物,观察皮下移植瘤的生长情况。并用Western blot法检测各组细胞VEGF及MMP-2蛋白的表达。结果：体外侵袭实验、促内皮细胞体外迁移实验结果显示,与对照组相比,转染组和SC236处理组迁移的肿瘤细胞和内皮细胞均减少（P〈0.01）;裸鼠皮下移植抑制实验结果显示,转染组和SC236处理组荷瘤鼠移植瘤的生长受到抑制;Western blot结果显示,转染组和SC236处理组细胞VEGF及MMP-2蛋白的表达下降。结论：反义COX-2基因能抑制SCG-7901细胞的转移能力,其机制可能与其抑制肿瘤的血管生成、减少MMP-2的表达有关。     

脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸转染对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用研究

目的　探讨经脂质体—硫代磷酸化修饰的c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )作用后的卵巢上皮癌细胞株SKOV3 在裸鼠皮下的成瘤能力。方法　利用脂质体将经硫代磷酸化修饰的寡核苷酸导入SKOV3 细胞内 ,然后将这种被转染的细胞接种于裸鼠皮下 ,观察肿瘤体积的变化 ,并计算抑瘤率。结果　经脂质体 c erbB 2ASODN作用后的卵巢上皮癌细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低 ,最大抑瘤率达 4 0 .0 %(P <0 .0 5 )。首次出现目检可见肿瘤的平均时间延长为 9.6天 (P <0 .0 5 )。结论　c erbB 2癌基因的反义调控能降低卵巢上皮癌细胞的成瘤能力 ,抑制肿瘤生长 ,在卵巢上皮癌的基因治疗中有一定价值。     

CXCR4单克隆抗体抑制乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的实验研究

目的 研究CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)单克隆抗体(CXCR4 mAb)对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并初步探讨CXCR4 mAb抗肿瘤的作用机制.方法 采用8周龄Balb/c雌性裸鼠,建立乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤模型.运用CXCR4 mAb进行干预,从整体水平观察CXCR4 mAb对肿瘤生长的影响,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况.结果 CXCR4 mAb可明显抑制移植瘤的生长,瘤体抑制率达到71.4%;CXCR4 mAb治疗后的肿瘤组织中PCNA和VEGF表达明显下降,而Caspase-3表达上升.结论 CXCR4 mAb可能是通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管形成而发挥抗肿瘤生长的作用.     

不同化疗方案对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对PCNA表达的影响

Objective: To investigate the antitumor activity of different combination regimens to human breast cancer xenograft (MCF-7) transplanted in nude mice and the effects on the expression of PCNA, and to evaluate the value of PCNA as predictive factor for the response of chemotherapy and individualized treatment. Methods: (1) 88 nude mice models of human breast cancer xenograft (MCF-7) were established, and then were randomly divided into control group and 10 chemotherapy groups (each group, n = 8). Among them, the mice of 5 chemotherapy groups were treated intraperitoneally/orally by 5 combination chemotherapy regimens (CMF, CAF, NP, TP, Xeloda) respectively at 1/3 LD10 dosage schedule (dose lethal to 10%of the mice), and that in another 5 chemotherapy groups were treated at 2/3 LD10 dosage schedule. Control animals were administered intraperitoneally with normal saline. (2) The body weight of nude mice and transplanted tumor growth were observed and recorded, then inhibition rate of tumor growth was calculated. (3) The pathological features of transplanted tumor were studied under microscope. The expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) was comparatively studied in chemotherapy group and control group by SP immunohistochemical method and flow cytometry analysis. Results: (1) Body weight, tumor weight and inhibition rate of tumor growth of athymic mice bearing cancer: Body weights and tumor weights of nude mice in every 2/3 LD10 chemotherapy group were significantly lower than those of the control group (P ＜ 0.05), and the inhibition rates of tumor growth were 83.1%, 75.5%, 84.6%, 87.9% and 91.0%, respectively. Body weights of athymic mice in every 1/3 LD10 chemotherapy group were lower than that of the control (P ＜ 0.05). The results showed that the 2/3 LD10chemotherapy groups could reflect the effect of combination chemotherapy on the nude mice and the clinical dependability was better. So the data of 2/3 LD10 chemotherapy groups were appropriated for successive study. (2) Immunohistochemical studies: The expressions of PCNA in every chemotherapy group were significantly lower than that of the control (P ＜ 0.05).Moreover, the expression of PCNA in NP group was significantly lower than those of CMF, CAF, TP and Xeloda groups (P ＜0.05), while the expressions of TP and Xeloda groups were significantly lower than those of CMF and CAF groups (P ＜ 0.05).(3) FCM analysis: FI values of PCNA in every chemotherapy group were significantly lower than that of the control (P ＜ 0.05).FI values of PCNA in TP and Xeloda groups were significantly lower than those of CMF and CAF groups (P ＜ 0.05), while the value of NP group was significantly lower than that of CMF group (P ＜ 0.05). (4) Relationship between PCNA expression and pathologic response: The expression of PCNA was significantly correlated with pathological therapeutic response of transplanted breast carcinoma (P = 0.001). Conclusion: In vivo chemosensitivity testing with 2/3 LD10 dosage combinations in nude mice bearing cancer can reflect the effects of chemotherapeutics and affects of organism exactly. Various chemotherapy regimens all can decrease the expression of PCNA in breast cancer. The PCNA can be regarded as the factor to judge the response to chemotherapy, and it become possibly one of the prospective factors in the selection of chemotherapy regimen and play a rule in individualized therapy in the clinic.     

人参皂苷Rg3与顺铂对荷卵巢癌裸鼠免疫功能及肿瘤相关蛋白的影响

[目的]观察人参皂苷Rg3联合顺铂对荷高转移人卵巢癌细胞系HO．8910PM转移瘤裸鼠白细胞介素．2（IL-2）、干扰素-γ（INF-γ）及nm23、血管内皮生长因子（VEGF）及增殖细胞核抗原（PCNA）的影响。[方法]移植瘤裸鼠随机分成6组腹腔给药：荷瘤空白对照组fA组）;不同Rg3浓度药物组：2．5mg／kg（B组）、5mg／kg（C组）和lOmg／kg（D组）;Rg3和顺铂联用组（E组）以及顺铂阳性对照组（F组）。分别测定各组裸鼠转移瘤体积变化、IL-2、INF-γ、nm23、VEGF及PCNA的变化情况。[结果]与A组比较,E组（P〈0．05）和F组（P〈0．01）小鼠血清中IL-2、INF-γ含量均能显著降低;B（P〈0．05）、C、D和E（P〈0．01）组小鼠移植瘤组织nm23的表达均增强。Rg3给药后,小鼠移植瘤组织VEGF、PCNA表达均呈下降趋势。[结论]人参皂苷Rg3和顺铂联用具有协同抗肿瘤及减毒的作用。Rg3可能通过增强mm23的表达．使VEGF及PCNA表达呈下降趋势等多途径产生抗肿瘤作用。     

MAP2K6-FP和紫杉醇对上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:研究靶向融合肽MAP2K6-FP（mitogen-activated protein kinase kinase 6-fusion protein)、紫杉醇单独和两者联合对上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:建立卵巢癌HO8910细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,分为空白对照组（予生理盐水 5 ml/kg腹腔注射治疗）、MAP2K6-FP组（予0.25 mg/kg MAP2K6-FP腹腔注射治疗）、紫杉醇组（予15 mg/kg 紫杉醇腹腔注射治疗）、联合用药组（予0.25 mg/kg MAP2K6-FP+15 mg/kg 紫杉醇腹腔注射治疗）,比较4组裸鼠的移植瘤生长速度、体积、裸鼠体质量;TUNEL法、免疫组织化学法和蛋白印迹法分别检测移植瘤中细胞凋亡情况、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达以及Bcl-2、Beclin 1蛋白的表达。结果:联合用药组裸鼠移植瘤体积（90 mm3）,小于MAP2K6-FP组（324 mm3）、紫杉醇组（215 mm3）和空白对照组（804 mm3）（P<0.05）。联合用药组肿瘤细胞的凋亡指数（apoptosis index,AI）(28.88±2.03)%,高于MAP2K6-FP组(14.36±0.56)%、紫杉醇组(15.78±0.87)%以及空白对照组(4.78±0.87)%（P<0.05）。联合用药组VEGF蛋白表达水平(0.14±0.06),低于MAP2K6-FP组(0.32±0.10)、紫杉醇组(0.29±0.08)及空白对照组(0.78±0.14）（P<0.01);联合用药组PCNA表达水平(18.4%),低于MAP2K6-FP组(32.3%)、紫杉醇组(29.8%)及空白对照组(81.4%）（P<0.05）。联合用药组Beclin 1/Bcl-2比例较单一用药组高(P<0.05)。结论:MAP2K6-FP联合紫杉醇能够显著抑制卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与促进细胞凋亡有关。