小檗碱、莲心碱和甲基莲心碱对HERG通道表达的影响

目的:利用免疫荧光化学染色法和Western blot法分别定性、定量地检测不同浓度的小檗碱、莲心碱和甲基莲心碱对稳定转染在HEK-293细胞中HERG钾通道表达的影响,以及不同浓度的小檗碱对大鼠心肌组织Ikr通道蛋白表达的影响,探讨小檗碱、莲心碱和甲基莲心碱的抗心律失常机制.方法:Western blot法检测HERG-HEK细胞上HERG通道蛋白的表达;免疫荧光化学染色法并利用共聚焦显微镜定性测定不同浓度的小檗碱、莲心碱和甲基莲心碱对HERG通道蛋白表达的影响;Western blot法定量检测不同浓度的小檗碱对大鼠心肌组织Ikr通道蛋白表达的影响以及小檗碱、莲心碱和甲基莲心碱对稳定转染在HEK-293细胞中HERG钾通道蛋白表达的影响.结果:Western blot法检测稳定转染有HERG基因的HEK293细胞能高水平的表达HERG通道蛋白.10,30μmol· L-1的小檗碱明显抑制HERG-HEK细胞中HERG通道蛋白的表达(P＜0.0l).10,20 mg·kg-1的小檗碱抑制大鼠心肌组织Ikr通道蛋白的表达(P＜0.05).3,10,30μmol·L-1的莲心碱促进HERG-HEK细胞中HERG通道蛋白的表达(P＜0.05).甲基莲心碱不影响HERG-HEK细胞中HERG通道蛋白的表达.结论:稳定转染的HERG-HEK细胞能高水平的表达HERG通道蛋白;小檗碱对体外HERG-HEK细胞和大鼠心肌组织Ikr通道的蛋白表达均有抑制作用;莲心碱促进HERG-HEK细胞中HERG通道蛋白的表达;甲基莲心碱对HERG通道蛋白表达无影响.     

HPLC测定不同产地莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱

目的建立高效液相色谱测定不同产地莲子心药材中3种生物碱的方法。方法采用高效液相色谱法,Polaris C18-A色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.1%三乙胺水溶液(62∶38)为流动相,检测波长为282nm,体积流量为1.0mL/min。结果 3种生物碱平均回收率为莲心碱96.99%,异莲心碱104.26%,甲基莲心碱100.71%;RSD值分别为0.47%、0.21%、0.16%。结论该方法简便、快速、准确、重现性好,可用于莲子心中3种生物碱的测定。     

甲基莲心碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的:研究甲基莲心碱对体外培养的HSC-T6增殖、活化的作用,并探讨有效剂量。方法:用5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、22.5和25μmol/L的甲基莲心碱分别处理HSC-T624、48、72、96h后,MTT法检测对细胞增殖的抑制作用。并以倒置纤维镜观察48h处理后的形态变化。结论:甲基莲心碱具有抑制HSC-T6增殖、活化的作用,药物作用48h后的IC50为22.53μmol/L。     

甲基莲心碱心血管药理作用的研究进展

甲基莲心碱是一种双苄基异喹啉类生物碱,具有抗心律失常、降血压、保护心肌缺血－再灌注损伤、抗血小板聚集等广泛的心血管药理作用。概述了甲基莲心碱对心血管系统的药理作用及作用机制。     

影响莲心总碱中甲基莲心碱稳定性因素的试验研究

莲心总碱是从中药莲子心中提取的总生物碱，主要为莲心碱(liensinine)、异莲心碱(isoliensinine)及甲基连心碱(neferine)，其中甲基莲心碱含量最高［1］，它们的主要药理作用有降血压、抗心律失常、抗心肌缺血、抗血小板聚集等［2-4］。近年来许多研究证实，甲基莲心碱具有逆转肿瘤细胞多药耐药的作用［5-8］，这使得对莲子心的研究成为热点。对莲子心有效成分的提取工艺、化学成分、含量测定、药理作用和结构测定与修饰等已有研究报道［9-10］，但未见有对甲基莲心碱稳定性的研究报道，本实验对可能影响甲基莲心碱稳定性的多种因素进行了考察。     

甲基莲心碱在体外对瘢痕成纤维细胞生长的影响

目的：研究甲基莲心碱（neferine,Nef）对瘢痕成纤维细胞增殖的影响，探讨Nef应用于临床治疗增生性瘢痕的可能性，方法：对人增生殖性瘢痕进行体外培养，观察其形态学和生长特征；采用MTT比色法测定Nef对细胞的增殖抑制率。结果：Nef浓度10－100μg/mL时，成纤维细胞的形态发生改变，增殖受到抑制，并呈现明显的剂量依赖性，结论：Nef是瘢痕成纤维细胞生长的负性调节因子，有望在增生性瘢痕的防治中发挥作用。     

莲心碱及莲心碱高氯酸盐初步稳定性考察及莲子心不同部位中莲心碱的含量测定

目的 考察了莲心碱及莲心碱高氯酸盐的稳定性；并测定了莲子心不同部位（幼叶和胚根）中莲心碱的含量。方法 采用反相离子对HPLC法，通过两种不同流动相，确证了莲心碱及莲心碱高氯酸盐的纯度并考察了莲心碱及莲心碱高氯酸盐的稳定性。采用甲醇-水-冰醋酸-辛烷磺酸钠-乙酸钠（55：45：0.6:10mmol/L:5mmol/L)为流动相，以莲心碱高氯酸盐为对照品测定了莲子心不同部位（幼叶和胚根）中莲心碱的含量。结果 莲心碱在各种条件下均不稳定，对光照尤其敏感，而莲心碱高氯酸盐除对光照稍显不稳定外，在其他各种条件下均较稳定，莲子心幼叶中莲心碱的含量约为胚根中莲心碱的含量的4-5倍。结论 在含量测定时应采用莲心碱高氯酸盐作对照品；莲子心幼叶中莲心碱的含量显著高于胚根中莲心碱的含量。     

莲心碱对高血压大鼠左室肥厚及心肌肌浆网钙泵活力的影响

目的:探讨莲心碱(Liensinine,Lie)对高血压大鼠左室肥厚及心肌肌浆网钙泵活力的影响.方法:将二肾一夹肾血管性高血压大鼠(RHR)模型,随机分为3组:正常对照组(SD-C)、肾血管性高血压大鼠对照组(RHR-C)和莲心碱治疗组(RHR-Lie).在RHR-Lie组持续给药10周后,分别测定各组大鼠的血压、左室重/体重比,以及左室心肌肌浆网钙泵(Sarco/Endoplasmic reticulum Ca2+-ATPase.SERCA)活力.结果:治疗后RHR-Lie组血压、左室重/体重比较RHR-C组显著降低(P＜0.01,P＜0.05),左室心肌SERCA活力较RHR-C组显著升高(P＜0.05),但仍较SD-C组为低(P＜0.05).结论:Lie能降低RHR的血压、左室重/体重比,对高血压左室肥厚具有一定的防治作用,其机制可能与Lie能升高RHR肥厚心肌肌浆网SERCA活力有关.     

甲基莲心碱对家兔离体肠系膜动脉环收缩性能的影响

目的:研究甲基莲心碱对家兔离体肠系膜动脉收缩性能的影响及其与血管内皮的关系。方法:分离家兔肠系膜动脉,采用组胺为兔肠系膜动脉环的预收缩剂,观察血管张力的改变,检测甲基莲心碱对肠系膜动脉收缩性能的影响;通过检测去血管内皮组和完整内皮组动脉的张力改变情况,观察甲基莲心碱对家兔肠系膜动脉收缩性能的影响是否依赖于血管内皮。结果:甲基莲心碱能舒张由组胺引起的兔肠系膜动脉环收缩;甲基莲心碱对于无论是内皮完整血管还是去内皮血管,都能使其由收缩状态转化为舒张状态,且两组间无统计学差异。结论:甲基莲心碱对收缩着的肠系膜动脉诱发的舒张作用不依赖于血管内皮。     

莲椹汤对肾性高血压大鼠血压的疗效观察

[目的]观察莲椹汤对肾性高血压大鼠(RHR)血压的影响,并初步探讨其降压机制,为传统验方新用提供实验依据。[方法]左肾动脉狭窄法建立两肾一夹高血压大鼠模型;无创尾套法测量清醒RHR尾动脉收缩压;用EILSA法检测血ALD及心肌组织AngⅡ浓度。[结果]与模型组比较,实验组(40mg·kg-1,80mg·kg-1,160mg·kg-1)及卡托普利组对RHR有明显的降压作用(P<0.01);实验组各剂量间降压作用无显著性差异(P>0.05);与卡托普利组降压作用也无显著性差异(P>0.05)。实验组还可降低血浆ALD和心肌AngⅡ浓度。[结论]莲椹汤有良好的抗高血压作用,其降压机制可能与拮抗RAS系统有关,可以用于高血压治疗。     

牛磺酸对肾性高血压大鼠肥厚心肌原癌基因c-fos表达的影响

 目的观察牛磺酸(taurine,Tau)对肾血管性高血压大鼠肥厚心肌原癌基因c-fos表达的影响。方法建立二肾一夹(2K1C)肾动脉狭窄性高血压大鼠模型。羟脯氨酸法测定大鼠心肌胶原含量(myocardial collagen concentration,MCC);放免法测定心肌血管紧张素Ⅱ含量(myocardial local AngⅡconcentration,MAC)及醛固酮含量(myocardial local aldosterone concentration,MDC); 免疫组化方法检测c-fos蛋白表达,原位杂交方法检测c-fos mRNA表达。结果2K1C组大鼠尾动脉收缩压(systolic blood pres sure,SBP)、左心室/体重比(left ventricular weight index,LVWI),MCC,MAC及MDC较sham组显著增加(P<0.01);MCC与心肌MAC,MDC显著正相关(r=0.832 3,0.901 9,P<0.01);c-fos蛋白及c-fos mRNA表达高于sham组(P<0.01);Tau(50 mg·kg^-1·d^-1,ig×8周)显著降低2K1C大鼠SBP,LVWI,MCC,MAC,MDC,心室肌c-fos mRNA及蛋白表达量亦明显下降(P<0.01)。结论Tau可通过降低心肌局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotension-aldosterone system,RAAS)活性及c-fos表达,从而抑制心肌细胞肥大及胶原纤维增生,有效防治肾血管性高血压心肌肥厚。     

黑加仑籽粉对肾性高血压大鼠血压的影响

目的：探讨黑加仑籽粉对肾性高血压大鼠血压和血浆内皮素-1（endothelin-1, ET-1）、血清一氧化氮（ nitric oxide, NO）、超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase, SOD）、丙二醛（ malonic di-aldehyde, MDA）的影响。方法将实验SD雄鼠随机分为假手术组、模型组、卡托普利组、黑加仑籽粉组,灌胃给药8周,假手术组、模型组给予等容量蒸馏水,于给药前及给药后定期对SD大鼠血压进行测量,并对给药8周后SD大鼠血浆中的ET-1含量,血清中的SOD活力、NO及MDA含量进行测定。结果给药8周后,与假手术组相比,模型组的血压、血浆中ET-1含量、血清中MDA的含量均明显升高（ P〈0．01）,且血清中NO含量及SOD活力明显降低（ P〈0．01或P〈0．05）;与模型组相比,卡托普利组、黑加仑籽粉组的血压明显下降（P〈0．01）,血浆中ET-1含量及血清中MDA的含量均明显降低（P〈0．01）,血清中 NO的含量明显升高（P〈0．01）,SOD活力无显著性差异（P〉0．05）。结论黑加仑籽粉对肾性高血压大鼠具有降压作用,推测其作用途径可能与通过抗氧化作用来保护血管内皮细胞,改善血管内皮功能有关。     

针刺对自发性高血压大鼠血压的影响及其抗氧化应激机制研究

[目的]观察针刺人迎穴对自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响以及体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的变化,探讨针刺降压的抗氧化应激机制。[方法]将SHR随机分为针刺组、模型组,以京都Wistar大鼠(WKY)作为血压正常的对照组。针刺组取双侧人迎穴,施以捻转手法,捻转频率为每分钟120~160次,行针1 min,每日针刺1次;模型组和正常组进行与针刺组相同时间、相同程度的捉抓。每天针刺前后测量收缩压和舒张压。针刺4周后,取胸主动脉,用酶联免疫法检测ROS含量,硝酸还原酶法检测NO含量,蛋白印迹法检测e NOS蛋白表达。[结果]针刺4周后SHR收缩压和舒张压均较针刺前降低,均低于模型组,其中以收缩压降低更为明显。SHR胸主动脉的ROS含量高于WKY,而NO含量和e NOS蛋白表达低于WKY(P0.05),针刺后ROS含量明显降低,而NO含量明显升高(P0.05),e NOS蛋白表达亦有升高趋势。[结论]针刺可降低SHR血压,其机制可能与降低ROS和提高NO/e NOS含量,从而提高机体抗氧化能力有关。     

天钩降压胶囊对肾血管性高血压大鼠血压的影响

目的:观察天钩降压胶囊对肾血管性高血压大鼠的血压的影响并初步探讨其作用机制.方法:将72只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组(0.03 g·kg-1)、天钩降压胶囊低、中、高剂量组(5.4,10.8,21.6g· kg-1).采用无创血压仪测量鼠尾动脉血压;采用放射免疫法测定大鼠血中PRA,AngⅡ,ALD,6-酮-前列腺F1α,ET和TXB2的含量;采用硝酸还原酶法测定大鼠血中NO的含量.结果:模型组收缩压、舒张压和平均压明显升高,大鼠血中PRA,AngⅡ,ALD明显降低,ET水平明显增高;天钩降压胶囊能明显降低模型大鼠的血压,提高大鼠血中肾素活性,降低大鼠血中ET含量,升高NO含量.结论:天钩降压胶囊具有降低肾性高血压模型大鼠血压的作用,其降低血压的机制可能与其调控模型大鼠RAAS系统的分泌以及改善血管内皮的功能有关.     

牛磺酸对染铅大鼠生长发育和贫血的改善作用

 目的探讨牛磺酸(taurine,Tau)对染铅大鼠生长发育和贫血的影响。方法Wistar大鼠随机分为2组,空白对照组和铅染毒组(60 mg·kg^-1·d^-1的醋酸铅灌胃),然后将已染铅大鼠随机分为4组,即铅对照组、Tau治疗组(200,400,800 mg·kg^-1·d^-1)。观察各组动物生长状况,测定血铅、血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)计数、全血ALAD(δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶)活性、尿液中ALA(δ-氨基-γ-酮戊酸)含量。结果①各Tau治疗组大鼠血铅水平均低于铅对照组(P<0.05或P<0.01)。②各治疗组大鼠脏器系数与铅对照组比较,Tau 400 mg组中心脏、肺、肾、胸腺、脾的脏器系数和Tau 800 mg组中肾和胸腺的脏器系数显著增加(P<0.05或P<0.01)。③与铅对照组比较,各Tau组Hb含量、RBC和ALAD活性显著升高(P<0.05或P<0.01);Tau 400,800 mg组尿中排出的ALA显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论Tau对染铅大鼠的生长发育和贫血有明显的改善作用。     

济脉通与硝苯地平合用对SHR血压的影响及其抗高血压机制的初步研究

目的:研究济脉通与硝苯地平合用对SHR血压的影响,并探讨其降压作用机制,阐述其联合用药的特点或优势。方法:采用自发性高血压大鼠(SHR)模型,设立模型组、济脉通组(450 mg.kg-1)、硝苯地平组(5 mg.kg-1)、济脉通与硝苯地平联合用药组(300 mg.kg-1+0.5 mg.kg-1),连续给药8周后,测定血压、心率、氧化、血脂及激素指标。结果:与模型组比较,3个给药组均有降低SHR收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)的作用;硝苯地平组使心率(HR)加快(P0.05),济脉通组和联合用药组对HR则无显著性影响。联合用药组明显降低尿素(URE)、丙二醛(MDA)、血浆内皮素(ET)及血浆血管紧张素II(AngⅡ)含量(P0.05,P0.05,P0.05,P0.01),明显提高一氧化氮(NO)、环磷酸腺苷(CAMP)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)含量(P0.05),是其可能的降血压机制。结论:济脉通与硝苯地平联合用药对自发性高血压大鼠有明显的协同降压作用,研究结果表明中西医联合用药对高血压病的治疗具有优势。     

薄层扫描法测定人体血液中牛磺酸的含量

目的：对人血中牛磺酸的含量测定研究,方法：用薄层扫描法,结果：方法简便、精密度高、重视性好,灵敏度可达40ng,平均回收率为98．97％,结论：适合大批量样品分析,可用作体内药代动力学研究中牛磺酸的检测。     

Effects of osthol on blood pressure and lipid metabolism in stroke-prone spontaneously hypertensive rats

Osthol, a coumarin compound, was isolated from the dried fruits of Cnidium monnieri (Umbelliferae) and the effect of dietary osthol on hypertension and lipid metabolism was examined in stroke-prone spontaneously hypertensive rats (SHRSP). Six-week-old male SHRSP were fed the experimental diet containing 0.05% osthol by weight for 4 weeks with free access to the diet and water. Elevation of systolic blood pressure was significantly suppressed on and after 3 weeks. In addition, significant decreases in cholesterol and triglyceride contents in the liver were recognized without any significant changes in serum lipids profiles. A comparative study on hepatic mRNA expression indicated that osthol induced a significant increase in 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzymeA (HMG-CoA) reductase mRNA expression, which may lead to decrease in hepatic cholesterol pool through inhibition of the enzyme activity. Moreover, osthol induced a significant increase in acyl-CoA oxidase mRNA expression associated with an increase in carnitine palmitoyl transferase 1a mRNA expression, which suggests the acceleration of beta-oxidation of hepatic fatty acids. This may be responsible, at least in part, for the reduction of hepatic triglyceride content in SHRSP. These beneficial effects of osthol could be useful for both prevention of atherosclerosis and suppression of hepatic lipid accumulation.