性病门诊单纯疱疹病毒2型特异性抗体血清学调查

目的了解性病门诊患者单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)感染情况。方法用ELISA法检测我院性病门诊1215例患者HSV-2型特异性抗体,并对不同性别和不同年龄组的HSV-2 Ig g G抗体阳性情况进行对比研究。结果 1215例患者中,HSV-2 Ig g G抗体阳性者共291例,阳性率为23.95%,男性阳性率为21.34%(197/923),女性阳性率为32.19%(94/292),女性阳性率高于男性,二者比较差异有统计学意义(P0.05)。年龄以31~40岁最多,为119例(男性81例,女性38例);其次为21~30岁,为85例(男性54例,女性31例)。结论 HSV-2型特异性抗体检测率存在男女差异,女性高于男性。生殖器疱疹易发于21~40岁性活跃人群。HSV-2型特异性抗体血清学检测具有快速、简便、灵敏度高等优点,适用于临床检测。     

汕头市部分人群单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体检测

人类单纯疮疹病毒Ⅱ型(HSV—Ⅱ)主要感染腰部以下部位,在性传播疾病(下简称性病)中占有重要地位。为了解汕头市人群中HSV—Ⅱ感染情况,收集了部分人群做了HSV—Ⅱ抗体检测,报告如下。     

性病门诊妇女宫颈糜烂与单纯疱疹病毒2型活动感染关系探讨及临床治疗初探

目的 探讨性病门诊妇女宫颈糜烂与单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的活动感染的关系，并初步探讨用干扰素栓治疗的临床效果。方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)对110例不同程度(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度)宫颈糜烂病人和29例正常对照检测血清HSV-2型特异性IgM抗体。同时用ELISA法对病例组和对照组宫颈糜烂面分泌物和宫颈表面分泌物检测HSV-2抗原。HSV-2抗原检测阳性的患者用干扰素栓治疗。结果 110例不同程度宫颈糜烂病人HSV-2型特异性IgM抗体阳性率为40．91％(45／110)，宫颈糜烂面分泌物HSV-2抗原阳性率为34．55％(38／110)，抗原抗体同时阳性的感染率为20．00％(22／110)，均显著或非常显著地高于对照组(P=0．012，0．0003，0．0076)。在病例组中，HSV-2抗原检出率随糜烂程度加重而增高。38例抗原阳性患者用干扰素栓治疗痊愈显效率为73．68％，病毒抗原转阴率为71．10％。结论 性病门诊妇女宫颈糜烂的产生与HSV-2的原发活动感染有关，用干扰素栓治疗有效。     

广东省1036家医疗机构性病实验室梅毒血清学检测能力验证结果

目的 调查评估广东省不同医疗机构性病实验室梅毒血清学检测能力,为提高全省性病实验室梅毒检测水平提供依据。方法 统一制备发放梅毒血清样本,包括梅毒非特异性血清和梅毒特异性血清,各级别性病实验室按要求分别进行梅毒非特异性血清学定性/定量和梅毒特异性血清学定性试验,通过省性病实验室管理信息系统上报结果,试验结果与靶值一致为正确。结果 2021年,全省1 036家实验室参加本次能力验证,1 031家回报结果,其中33家回报部分结果,平均94.55分,合格率97.39%(972/998)。3种梅毒血清学检测中,梅毒非特异性定性和定量试验平均分分别为93.98分和90.97分,梅毒特异性定性平均分为98.33分。总得分位于全省平均分以上实验室占73.35%(732/998),不合格占2.61%(26/998)。规范化性病实验室成绩平均分（96.52分）和合格率（99.07%）均显著高于普通实验室的92.25分和95.43%。结论 我省梅毒血清学检测能力处于较高水平,但不同医疗机构和实验室检测能力具有一定差异,普通实验室梅毒血清学检测能力有待加强,加强性病实验室规范化建设可促进梅毒实验室检测水平的提...     

126例生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒型别检测

生殖器疱疹 (Ｇｅｎｉｔａｌｈｅｒｐｅｓ ＧＨ)是由单纯疱疹病毒 (Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ ,ＨＳＶ)感染引起的性传播性疾病 (ＳＴＤ )。有研究表明 ,ＨＳＶ分为ＨＳＶ 1、ＨＳＶ 2两种血清型 ;ＨＳＶ 1主要感染三叉神经 ,引起颜面单纯疱疹 ;ＨＳＶ 2主要感染生殖器 ,引起ＧＨ。但随着ＳＴＤ发病率的不断上升和性行为方式的多样性 ,ＨＳＶ 1引起的ＧＨ达 10 %～ 2 0 %,部分人群达到4 0 %[1] ,采用间接免疫荧光法 (ＩＩＦ)对临床拟诊为ＧＨ的患者取皮损进行ＨＳＶ型别检测。现就 12 6例ＨＳＶ检测阳性患者的ＨＳＶ感染型别分…     

7种单纯疱疹病毒Ⅱ型IgG抗体检测试剂盒的比较

目的比较7种单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)特异性IgG抗体检测试剂盒的优劣。方法对来自体检和性病门诊的生殖器疱疹可疑者的189份血清,同时用3种进口试剂盒(A、B、C)和4种国产试剂盒(D、E、F、G)进行检测。结果以"扩大金标准"为判断标准,7种检测试剂盒的敏感性:A、B、C分别为94.6%、100%、100%,D、E、F、G分别为98.5%、93.9%、96.9%、30.8%;特异性:A～G分别为98.2%、96.4%、96.4%、9.1%、43.6%、18.2%、100%;受试者工作特性曲线(ROC)下面积:A～G分别为0.964(0.933～0.995)、0.982(0.953～1.011)、0.982(0.953～1.011)、0.529(0.434～0.623)、0.664(0.567～0.761)、0.517(0.416～0.618)、0.654(0.576～0.732)。结论三种进口试剂盒检测结果可信度高,可用于临床实验室的辅助诊断、流行病学调查等。     

环介导等温扩增技术检测单纯疱疹病毒Ⅰ型的应用

目的建立一种用于检测单纯疱疹病毒-Ⅰ型（HSV-1）的环介导等温扩增技术（LAMP）检测方法。方法用病毒DNA提取试剂盒提取HSV-1基因组DNA。设计4条扩增HSV-1糖蛋白gG基因的LAMP引物,对HSV-DNA进行LAMP,扩增产物进行琼脂糖电泳和酶切鉴定（试验设HSV-2、HPV-6、HPV-11、沙眼衣原体对照和阴性对照）;并对3例临床标本进行LAMP检测。结果 HSV-1 LAMP产物电泳后呈LAMP特征性条带,对照组无扩增条带;扩增产物AvaⅠ酶切片段大小分别为182、140和62 bp,与理论值相符。用HSV-1 LAMP引物扩增3例口唇疱疹标本,2例标本出现LAMP条带,1例标本未扩增出条带。结论建立的LAMP方法简便、高效、快速,可用于HSV-1感染检测。     

胃溃疡边缘组织内单纯疱疹病毒I型特异性抗原的检测

胃溃疡边缘组织内单纯疱疹病毒Ｉ型特异性抗原的检测令狐恩强汪鸿志谷志远淡代明宋海静郝好杰杜敏杰胃溃疡病因多而复杂，目前尚未完全被阐明。１９６１年Ｋｎｙｖｅｔｔ提出溃疡病可能与单纯疱疹病毒有关，但迄今为止，未发现与其有关的胃溃疡组织学方面的研究报道。我们...     

乙酰紫草素体外抗2型单纯疱疹病毒机理的研究

目的研究乙酰紫草素(acetylshikonin,AS)体外抗2型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 2,HSV-2)的活性及作用机理。方法以阿昔洛韦(acyclovir,ACV)为阳性对照药物,采用CCK-8法检测细胞活力,确定AS对成年非洲绿猴肾细胞(Vero)的最大无毒浓度;致细胞病变法和噬斑形成抑制实验测定AS对HSV-2的抗病毒活性;实时荧光定量PCR及半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50)法测定病毒载量以评估AS对HSV-2复制周期不同阶段的抑制作用;透射电镜观察AS对HSV-2病毒粒子结构的影响。结果AS对Vero细胞的最大无毒浓度(maximal atoxic concentration,TC0)为3.785μmol/L,浓度为1.678~3.785μmol/L时能有效抑制HSV-2复制,减少噬斑形成,半数有效浓度(50%effective concentration,EC50)为0.334μmol/L。在12和36 h,病毒释放期加入AS的实验组TCID50低于病毒感染对照组(13.43±10.04 vs.127.00±0.32;3.47±0.55 vs.5.80±0.12),差异均有统计学意义(t=8.359、4.161,P均<0.05);在12、24、36 h,AS直接灭活病毒组病毒载量低于病毒感染对照组(0.24±0.09 vs.1.35±0.07;4.46±0.06 vs.6.75±0.04;2.70±0.04 vs.5.27±0.10),差异均有统计学意义(t=9.920、33.360、24.020,P均<0.05)。此外,AS处理可导致HSV-2病毒粒子形态异常,随着AS浓度升高,作用后的HSV-2超微结构发生渐进改变。结论AS对HSV-2具有一定抗病毒效应,其机理可能为直接破坏病毒颗粒完整结构发挥抗病毒作用。     

人单纯疱疹病毒-2型感染致豚鼠输卵管上皮细胞凋亡的研究

目的 探讨人单纯疱疹病毒-2型感染导致输卵管妊娠的机制. 方法 培养豚鼠原代输卵管上皮细胞,用人单纯疱疹病毒-2型感染,显微镜下观察输卵管上皮细胞的形态学变化,并用Western blot法检测细胞凋亡关键蛋白caspase-3的变化. 结果 豚鼠原代输卵管上皮细胞被人单纯疱疹病毒-2型感染后,显微镜下观察到典型的细胞凋亡特征,Western blot检测发现细胞凋亡关键蛋白caspase-3活化成两个亚基. 结论 人单纯疱疹病毒-2型感染后引起豚鼠输卵管上皮细胞凋亡,人单纯疱疹病毒-2型感染引起输卵管上皮细胞凋亡是输卵管妊娠的机制之一.     

人单纯疱疹病毒2型感染致豚鼠输卵管妊娠的研究

目的探讨人单纯疱疹病毒2型感染引起输卵管妊娠的可能性。方法用人单纯疱疹病毒2型感染豚鼠阴道，实时荧光定量PCR技术检测豚鼠子宫颈，子宫内膜，输卵管粘膜细胞中人单纯疱疹病毒2型DNA，原位杂交法检测豚鼠子宫内膜及输卵管粘膜细胞中人单纯疱疹病毒2型DNA，免疫组化法检测子宫内膜和输卵管粘膜细胞人单纯疱疹病毒2型抗原，分别记录数据，计算感染率。结果实时荧光定量PCR法检测豚鼠人单纯疱疹病毒2型DNA，子宫颈阳性率46．67％，子宫内膜阳性率26．67％，输卵管粘膜细胞阳性率10．00％；原位杂交法子宫内膜阳性率23．33％，输卵管粘膜细胞阳性率10．00％；免疫组化法子宫内膜阳性率20．00％，输卵管粘膜细胞阳性率6．67％。结论人单纯疱疹病毒2型可沿豚鼠阴道感染子宫颈，上行感染子宫内膜，进而引起输卵管感染，是导致输卵管妊娠的重要原因之一。     

人乳头状瘤病毒16型、18型、单纯疱疹病毒2型和巨细胞病毒感染与宫颈癌的关系

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)-16、18型、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)和巨细胞病毒(CMV)感染与宫颈癌的关系。方法对66例宫颈癌、58例宫颈上皮内瘤样变(CIN)、20例慢性宫颈炎患者宫颈活检组织用聚合酶链反应方法检测HPV-16、18型、HSV-2和CMV感染情况。结果 HPV-16、18型、HSV-2、CMV阳性率从宫颈癌组到慢性宫颈炎组均有递减趋势;HPV-16型病毒的阳性例数中宫颈癌组分别与CIN组比较、慢性宫颈炎组比较差异有统计学意义(c2=28.714,c2=55.907,P<0.05),CIN组与慢性宫颈炎组比较差异有统计学意义(c2=11.507,P<0.05);HPV-18、HSV-2和CMV病毒的阳性例数中,宫颈癌组分别与CIN组、CIN组与慢性宫颈炎组比较差异无统计学意义(c2=1.758,c2=0.000,c2=0.937,P>0.05);在宫颈癌组中单独或合并HPV-16、HPV-18、HSV-2、CMV的感染率明显高于非宫颈癌组。结论HPV在引起宫颈癌的作用是主要的,HSV-2、CMV合并感染可能会增加患病的危险性,可将性传播疾病患者作为宫颈癌风险人群进行防癌筛查,以提高早期诊断和早期治疗率。     

单纯疱疹病毒1型糖蛋白gD的表达纯化及多克隆抗体的制备

目的表达及纯化单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)糖蛋白D(glycoprotein D,gD)并制备多克隆抗体。方法双酶切pcDNA 3.1-HSV1-gD和pFastBacTM I质粒,gD基因克隆到pFastBacTM I载体,连接产物转化E.coli DH10Bac感受态细胞并鉴定重组杆状病毒质粒Bacmid-gD。将构建正确的重组杆粒转染Sf9细胞包装杆状病毒。杆状病毒经传代扩增后,诱导重组gD蛋白的表达,使用Ni-NTA亲和层析及凝胶过滤层析纯化重组gD蛋白,进行15%SDS-PAGE电泳鉴定并采用肽指纹图谱分析纯化的gD蛋白。将纯化的gD蛋白进行热稳定性试验检测其在不同缓冲液条件下的稳定性。用重组gD蛋白免疫小鼠,利用ELISA法检测血清抗体滴度。结果成功构建重组质粒pFastBacTM I-gD,转化E.coli DH10Bac感受态细胞后,经蓝白斑筛选鉴定重组杆状病毒质粒Bacmid-gD,鉴定正确的重组质粒感染Sf9细胞,包装出重组杆状病毒,获得滴度为8×108 pfu/ml的P3代杆状病毒。重组杆状病毒再次感染Sf9细胞能够表达高纯度可溶性的重组gD蛋白。不同缓冲液条件下重组gD蛋白稳定性良好。用gD蛋白免疫小鼠,获得ELISA效价为1×105的多克隆抗体。结论成功构建重组杆状病毒质粒Bacmid-gD,表达的HSV-1 gD蛋白稳定及免疫原性良好,制备的抗gD蛋白多克隆抗体滴度高,为HSV-1的亚单位疫苗的制备鉴定了基础。     

人单纯疱疹病毒Ⅱ型gD抗原的原核表达及免疫效果测定

目的制备预防人单纯疱疹病毒感染的疫苗。方法扩增人单纯疱疹病毒Ⅱ型的gD基因，克隆人载体，导人大肠埃希菌表达系统，表达、分离、纯化抗原蛋白，然后进行小鼠动物免疫实验，测定小鼠的抗体水平；最后攻毒实验，观察小鼠的病理变化和死亡率。结果免疫后，gD抗原和IFN-γ联合免疫组小鼠体内产生抗体最高，其次gD抗原免疫组。生理盐水组小鼠病理变化出现最早也最重，且死亡最多；gD抗原免疫组小鼠病理变化出现较晚，症状也轻，死亡也少；gD抗原和IFN-γ联合免疫组小鼠无死亡。结论制备小鼠抗人单纯疱疹病毒的疫苗是可行的。此疫苗是否能刺激人体产生抗单纯疱疹病毒的抗体，是否对人有免疫效果，还有待于进一步研究。     

2009-2011年性病门诊单纯疱疹病毒Ⅱ型阳性者合并梅毒及泌尿生殖系统分泌物感染的调查

目的了解在性病门诊就诊的Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）患者,其梅毒苍白螺旋体（Treponema palli-dum,TP）感染及泌尿生殖道混合感染情况,证实对特殊人群进行安全性行为教育及干预的重要性。方法对性病门诊的性病患者进行筛查,检测其血液中HSV-2、TP的感染情况,同时观察其泌尿生殖道分泌物感染的情况。结果2009-2011年间HSV-2感染情况相似,差异无统计学意义（P〉0.05）;HSV2阳性的475例患者中,合并TP感染128例（26.9％）;HSV阴性的150例患者中,合并TP感染22例（14.7％）;两组比较差异有统计学意义（t=0.002,P〈O.05）。HSV-2感染者中泌尿生殖道分泌物的阳性检出率女性高于男性（t=0.000,P％0.05）。结论HSV-2普遍存在于性病患者中,且易并发梅毒及泌尿生殖系统分泌物感染,建议对性病门诊就诊的疑似生殖器疱疹的患者,均进行HSV2的排查,并对特殊人群进行安全性行为教育及干预。     

同时检测生殖器单纯疱疹1型和2型病毒的临床意义探讨

目的 分析疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒(HSV)基因分型检测的临床意义.方法 采用多重实时荧光聚合酶链式反应技术对1 672例疑似生殖器疱疹患者进行HSV-1型和2型DNA检测.结果 1 672例疑似生殖器疱疹患者中,单HSV-2DNA阳性率男女分别为40.00％,45.10％,男女性别间差异有统计学意义(P＜0.0...     

2021年湖南省血吸虫病监测点实验室检测能力评估结果分析

目的 评估湖南省血吸虫病监测点实验室的检测能力,为完善湖南省血吸虫病监测体系能力建设提供参考。方法 在湖南省41个血吸虫病流行县的57个监测点实验室中分层抽取12个诊断网络实验室,以标准质控品考核的方式进行检测能力评价。质控品包含血清、粪样加藤厚涂片和虫卵悬液,考核内容包括间接红细胞凝集试验对血清进行定性和效价测定、改良加藤厚涂片法对粪样进行虫卵鉴定并计数、尼龙绢集卵孵化法对虫卵悬液进行定性检测,将检测结果与标准质控品进行比对,计算定性检测的符合率和定量检测的合格率,并将评估结果量化。结果 间接红细胞凝集试验、改良加藤厚涂片法和尼龙绢集卵孵化法定性检测结果的总符合率分别为96.67% （58/60）、83.33%（50/60）和91.67%（33/36）。间接红细胞凝集试验阳性质控品效价检测总合格率为54.17%（13/24）,改良加藤厚涂片法血吸虫卵计数总合格率为30.00%（6/20）。12个诊断网络实验室有7个评估结果为优秀,2个为良好,3个为合格。结论 湖南省血吸虫病监测实验室检测能力基本满足监测工作需要,但在血清效价测定和虫卵计数等定量诊断方面仍需加强。     

HIV-2感染的实验室检测与诊断

本文综述了国内外2型艾滋病病毒(HIV-2)感染的实验室检测与诊断,简介了美国HIV-2核酸检测临床应用,表明HIV-2核酸检测不仅能有效排除临床上很多不确定结果,还能有效解决抗原抗体检测中的假反应性和漏检问题.HIV-2核酸定量检测不仅是检测与治疗监测的重要手段,同时能够为临床提供HIV-2感染诊断依据.国内目前尚缺...     

单纯疱疹病毒2型多表位复合DNA疫苗的构建与免疫原性

目的 构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白gD、gB、gC和早期表达蛋白ICP27的多表位复合DNA疫苗,探讨其诱导机体免疫应答的能力.方法 将HSV-2野生株经PCR鉴定后,利用PCR技术从其基因组扩增出HSV-2 ICP27 377-459、gD146-179、gD223-306、gB529-606、gC247-282和gD1-77等6个基因片段.采用多基冈片段一步酶切连接法获得构建的6个片段的复合DNA疫苗(HV)融合基冈片段,经pGEMT载体克隆后,定向插入真核表达质粒pcDNA3.1载体中,构建重组真核表达质粒HV-pcDNA3.1,并对其进行酶切分析及测序鉴定.10只C57/BL6小鼠均分为脂质体包裹pcDNA3.1空载体质粒对照组和脂质体包裹HV-pcDNA3.1质粒免疫组.ELISA检测小鼠血清HSV-2特异性IgG、IL-2和IFN-γ,乳酸脱氢酶法检测CTL功能.数据行t检验.结果 酶切重组质粒HV-pcDNA3.1,电泳可见两条带,分别为融合基因HV(1.3 kb)和线性质粒pcDNA3.1(5.4 kb).测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与基因库HSV-2相关序列同源性达99.9%.与pcDNA3.1空载体质粒组相比,HV-pcDNA3.1免疫组小鼠血清中HSV-2特异性IgG(0.29±0.14比0.11±0.04,P＜0.05)、IL-2(1 246.8±157.0比685.2±104.2,P＜0.05)和IFN-γ(1 340.3±108.5比547.7±189.3,P＜0.05)表达明显增加,CTL活性增强(31.82±10.12比8.30±2.91,P＜0.05).结论 成功构建了HSV-2糖蛋白gD、gB、gC和早期表达蛋白ICP27的多表位复合DNA疫苗,能有效引起小鼠机体特异性体液免疫和细胞免疫应答.     

酶联免疫斑点法检测抗1型单纯疱疹病毒IgM分泌细胞在单纯疱疹病毒性脑炎早期诊断中的作用

目的 观察酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测抗1型单纯疱疹病毒IgM(抗-HSV-1 IgM)分泌细胞在单纯疱疹病毒性脑炎(HSV-1脑炎)早期诊断中的作用并探讨其价值.方法 采用ELISPOT法和ELISA法分别检测患者脑脊液中的抗-HSV-1 IgM分泌细胞和抗-HSV-1 IgM,并对HSV-1腩炎23例、临床对照组40例进行回顾性分析,统计学处理采用Fisher精确检验法.结果 ELISPOT法检测HSV-1脑炎组9例患者2周内脑脊液中抗-HSV-1 IgM分泌细胞,8例阳性.敏感度为88.9%;临床对照组检测16例,15例阴性,特异度为93.8%.ELISA法榆测HSV-1脑炎组12例患者脑脊液2周内抗-HSV-1 IgM,2例阳件,敏感度为16.6%;临床对照组检测17例,15例阴性,特异度为88.2%.两种方法敏感度比较差异有统汁学意义(P<0.01).结论 应用ELISPOT法检测HSV-1脑炎患者脑脊液中抗-HSV-1 IgM分泌细胞优于 ELISA方法检测抗-HSV-1 IgM,具有更好的早期诊断意义.