HPLC法测定万古霉素血药浓度

目的 利用高效液相色谱法(HPLC),旨在建立一种快速、方便、准确的人血浆中万古霉素的浓度测定方法 .方法内标物:去甲万古霉素;色谱柱:Axxlaim?PolarAdvantageⅡ-C18(4.6×250mm,5μm);流动相为甲醇:磷酸二氢钾(pH 3.1)=19:81;检测波长:281nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:30℃;进样量:10μL;血浆样品采用10%(w/v)的硫酸锌直接沉淀蛋白后进样检测.结果 万古霉素在1.5~150μg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.0136X-0.009(R2=0.9989).日内精密度在0.08%~1.29%之间,日间精密度在1.28%~3.56%之间,样品稳定性符合方法学要求.结论 本方法操作简便、线性范围广、结果准确,可用于临床监测万古霉素血药浓度.     

HPLC法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的 建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法,便于指导临床血药浓度的监测.方法 色谱柱为symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈(85∶10∶5);流速为1.0mL·min-1;检测波长为236nm,柱温为35℃,采用乙腈-6%高氯酸=1∶6的沉淀剂处理后进样,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为6.065min和4.958min;标准曲线回归方程分别为Y=28.34X+0.33,r=0.9998(n=3),Y=91.41X-0.24,r=0.9992(n=3),线性关系良好;方法回收率均＞95%,绝对回收率均＞95%,日内RSD均＜4.0%.结论 本测定方法快速、准确、简便,为万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度监测提供依据.     

HPLC法测定人血清中去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中去甲万古霉素浓度的高效液相色谱测定方法及临床应用。方法以万古霉素为内标,采用10%高氯酸溶液直接沉淀蛋白后进样。色谱柱为SHIMADZUVP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(92∶8),流速1 mL.min-1,柱温40℃,检测波长236 nm。结果去甲万古霉素血清浓度Y与内标峰面积比X进行线性回归,回归方程为Y=32.544 56X-3.147 39,r=0.999 3;线性范围2.5-80.0μg.mL-1;日内RSD小于3.0%;日间RSD小于5.7%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为97.36%、99.51%、101.17%;平均提取回收率分别为86.82%、89.84%、92.68%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度监测及人体药动学研究,尤其适于ICU或NICU患者接受去甲万古霉素治疗时的血药浓度监测。     

HPLC法测定脑脊液中去甲万古霉素的浓度

目的 :建立HPLC法测定人脑脊液中去甲万古霉素浓度。方法 :采用ODS hypersilC1 8柱 ,甲醇 0 0 5mol/L KH2PO4(1 6∶84,pH =5 0 )为流动相 ,检测波长 2 80nm ,以替硝唑为内标对去甲万古霉素进行定量测定。结果 :脑脊液中去甲万古霉素在 1～ 6 0mg/ml范围内浓度与峰面积具良好线性 (r =0 9993) ,平均回收率为 98 70 %± 2 6 5 % ,日内及日间RSD分别为 1 73%～ 1 95 %和 3 6 2～ 6 78%。     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

HPLC法测定人血清中万古霉素及去甲万古霉素浓度及临床应用

目的建立同时测定血清中万古霉素及去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法.方法：采用Diamonsil C18 色谱柱（250mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈-磷酸二氢钾缓冲液（pH = 3.2）（7.5∶92.5）;流速：1 mL·min-1;检测波长：236 nm;柱温：30 ℃;进样量：25 μL;二极管阵列检测.内标法定量,万古霉素与去甲万古霉素互为内标.结果：去甲万古霉素低、中、高3 个浓度（3.125、25.000、50.000 μg·mL-1）的方法回收率分别为98.5%、102.2%、103.1%,万古霉素低、中、高3 个浓度（3.125、25.000、50.000 μg·mL-1）的方法回收率分别为96.2%、100.8%、103.5%,日内精密度RSD 小于3.24%,日间精密度RSD 小于6.12%.结论：本方法准确度高,灵敏度好,操作简便,符合万古霉素及去甲万古霉素血药浓度监测和药代动力学研究的要求.     

HPLC和微生物法测定万古霉素的血药浓度

目的比较HPLC和微生物法测定万古霉素血药浓度的差异。方法30名病人静脉滴注万古霉素1.0 g,1次·d-1,分别用HPLC和微生物法测定用药前后的血药浓度。结果HPLC法在5.0～80 μg·mL-1浓度内线性关系良好,回收率97.3%～101.6%,日内、日间RSD分别为1.74%～4.06%和1.22%～4.21%;微生物法线性范围在5.0～60 μg·mL-1,回收率：98.2%～100.8%,日内、日间RSD分别为4.22%～5.51%和4.59%～6.49%。结论2种测定方法回收率和精密度均符合要求,测得的血药浓度无显著性差异。     

HPLC和微生物法测定万古霉素的血药浓度

目的 比较HPLC和微生物法测定万古霉素血药浓度的差异。方法 30名病人静脉滴注万古霉素1.0 g,1次·d^-1,分别用HPLC和微生物法测定用药前后的血药浓度。结果 HPLC法在5.0～80 μg·mL^-1浓度内线性关系良好,回收率97.3%～101.6%,日内、日间RSD分别为1.74%～4.06%和1.22%～4.21%;微生物法线性范围在5.0～60 μg·mL^-1,回收率：98.2%～100.8%,日内、日间RSD分别为4.22%～5.51%和4.59%～6.49%。结论 2种测定方法回收率和精密度均符合要求,测得的血药浓度无显著性差异。     

柱切换HPLC法测定血清中的万古霉素

万古霉素具有很强的抗菌活性，但不良反应比较严重，包括肾毒性和耳毒性。因此检测血清中万古霉素的浓度对于保证疗效，减少不良反应具有十分重要的意义。目前采用的检测方法多数比较繁琐或昂贵，本文报道一种往切换HPLC法，迅速、专一性好。材料与方法万古霉素及其内标物头抱隆院ling·mL‘用甲醇配制，－20t可保存数月。用蒸馏水稀释10借得工作液，头孢噻陡用0．ofmol·L－‘乙酸镀缓冲液（pHS）稀释至10pg·mL－‘在测定中作为内标。取血清100PL，内标物500yL加至1．5mL锥形离心管，涡旋振荡15S，8700g离心3min，取30pL进样。色谱…     

用HFCF-UF联合HPLC法测定血浆中万古霉素游离浓度

目的 建立人血浆中万古霉素游离浓度的测定方法,并用于临床治疗药物监测(TDM)。方法 采用中空纤维离心超滤(HFCF-UF)分离血浆中的游离万古霉素,HPLC法进行浓度测定。色谱柱：Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm, 5μm);柱温：30℃;流动相：甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)=17∶83(v∶v);流速：1.0 mL·min^-1;检测波长：236 nm;进样量：20μL;内标：去甲万古霉素。考察方法的专属性、线性关系、精密度、回收率、稳定性,并对患者的血浆样本进行测定。结果 人血浆中万古霉素游离浓度在0.25～50μg·mL^-1呈线性关系,标准曲线方程Y=2.77×10^-2X-8.00×10^-3(R²=0.994 9);日内和日间精密度的RSD值均小于10%,万古霉素的相对回收率和绝对回收率分别为95.10%～101.00%和88.41%～101.20%,内标绝对回收率96.51%;血浆样本反复冻...     

HPLC法测定人血清中去甲万古霉素浓度及临床应用

目的：建立人血清中去甲万古霉素浓度的HPLC测定方法及临床应用。方法：色谱柱为Waters C18柱（150mm&#215;4．6mm,5μm）;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈（86：10：4）;流速1mL&#183;min^-1;检测波长236nm;以万古霉素为内标,采用硫酸锌直接沉淀蛋白后进样．结果：去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,Y=0．0348C-0．0418,r=0．9998;线性范围2．0～100．0mg&#183;L^-1;日内RSD小于5．6％;日间RSD小于6．3％;去甲万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为101．36％、97．63％、99．57％;平均提取回收率分别为89．84％、88．82％、88．68％。该方法适于ICU患者接受治疗时去甲万古霉素的血药浓度监测。结论：方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度监测及人体药动晕研究。     

HPLC法测定血浆中万古霉素浓度的不确定度评定

目的：对人血浆万古霉素浓度高效液相色谱法（HPLC）测定的不确定度进行评定。方法：对HPLC法测定血浆中万古霉素浓度的全过程进行分析,对于分析过程中称量过程、溶液配制、萃取过程、仪器及标准曲线拟合等因素带来的不确定度进行逐一分析,用A类评定程序评定了分析过程中随机效应引起的不确定度．用B类评定程序评定了分析过程中其他因素引起的不确定度,根据合成不确定度的公式计算出合成不确定度并进行了扩展。结果：置信概率P为95％时．血浆中低（8．44μg／mL）、中（54．22μg／mL）、高（171．63μg／mL）浓度万古霉素的扩展不确定度分别是2．57μg／mL,7．66μg／mL．24．03μg／mL。结论：线性拟合过程是本实验中低浓度时不确定度的主要来源．而中、高浓度时标准曲线配制是不确定度的主要来源。本方法可用于HPLC法测定血浆中万古霉素浓度的不确定度评定．为药物分析过程中的不确定度评定提供了参考。     

HPLC法测定血中甲硝唑浓度的改进

本文以甲醇：水（２３：７７）为流动相，以β－羟基茶碱为内标物测定轿浆中甲硝唑浓度其三种浓度（４０，１０，２．５μｇ／ｍｌ）的平均回收率分别为９７．６４％，９９．２１％，１０１．２９％；其日内，日间的ＲＳＤ％分别为０．７４％，０．４３％和０．８０％和２．１４％，１．８７％，１．３６％，本法灵敏，准确，简单，可用于甲硝唑药动学研究和药物浓度监测。     

HPLC法测定中毒病人体液中甲基对硫磷浓度

采用高效液相色谱(HPLC)法,以对二甲氨基苯甲醛为内标,测定中毒病人血清中甲基对硫磷浓度。其线性范围3.80～46.00umol/L;相关系数r=0.9999;最低检测浓度1.9umol/L;最小检测量0.04nmol。平均回收率99.82±1.92％,日内RSD％<4.00,日间RSD％<4.00。     

HPLC法测定人血浆中万古霉素浓度及其药动学研究

目的建立HPLC法测定人血浆中万古霉素浓度的方法,并研究其在健康人体内的药动学。方法以万古霉素作为外标进行定量,血浆样品经10%高氯酸沉淀后,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-磷酸二氢钾缓冲溶液(30 mM)(10∶90,v/v),流速:1.0 mL/min,进样量:20μL,紫外检测波长:236 nm,柱温:20℃。结果本法在万古霉素浓度为5～200μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.998 2,n=6),血浆最低检测浓度为5μg/mL,提取回收率在68%～81%;日内、日间RSD<5%,稳定性考察RSD<10%。结论本方法快速简便,灵敏度和准确度高,适用于万古霉素的人体药动学研究。     

HPLC法测定血舒通合剂中阿魏酸的含量

目的:建立血舒通合剂中阿魏酸的含量测定方法。方法:采用HPLC法对阿魏酸进行定量分析,用Phenomenex-C18柱(5μm,4.6×250mm),以甲醇-1%冰醋酸(30:70)为流动相,检测波长为320nm,流速为1.0mL·min-1。结果:阿魏酸在0.06～0.75μg范围内具有良好的线性关系,平均加样回收率为101.68%(RSD=0.73%)。结论:本法准确,重现性好,可用于血舒通合剂的质量控制。     

HPLC法测定血中氨甲酰血红蛋白的浓度

氨甲酰血红蛋白(carbamylated hemoglobin,CarHb)是血浆尿素及其代谢产物氰酸盐与血红蛋白的末端氨基通过非酶促反应的产物[1].血中CarHb与肾功能损害的程度和时间长短有关,是鉴别急、慢性肾衰的生化指标[2,3].本研究建立了一种简便、快速的测定血中CarHb含量的HPLC法,为临床诊断该疾病提供方法学基础.     

HPLC法测定小细胞肺癌病人血中的鬼臼乙义甙

以甲醇：水（５５：４５）为流动相，在ＤＵＰＯＮＴＺＯＲＢＡＸ－ＯＤＳ反相柱上，以苯妥英钠为内标，建立了测定人血浆中鬼臼乙义甙的ＨＰＬＣ方法学。鬼臼乙义甙的平均回收率为８１．６８％，最低检出量为０．３μｇ／ｍｌ。方法简便，灵敏度高，专一性好。并进行了临床病人的血浓监测。方法可靠。     

一种改进的HPLC法测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度

目的采用改进的离子对高效液相色谱方法测定人血浆中二甲双胍的浓度.方法乙腈作为蛋白沉淀剂,除去酸化血浆样品中的蛋白,二氯甲烷进一步去杂质后,取上清液进样.流动相为甲醇(56%),0.35 mmol·L-1的十二烷基硫酸钠和5mmol·L-1的磷酸盐缓冲液(44%,pH 6.6),流速为1.2mL·min-1,紫外检测波长234 nm.结果二甲双胍和内标(哌仑西平)的保留时间分别为7.1和4.8 min,标准曲线在20～4 000mg·L-1浓度范围内线性关系良好,绝对回收率＞95%,检测限和定量限分别为4和10 mg·L-1.天内和天间RSD＜6.4%.结论该方法适用于盐酸二甲双胍的治疗药物监测及临床药学研究.