色素上皮衍生因子与糖尿病视网膜病变的临床研究

目的研究糖尿病视网膜病变(DR)患者、孔源性视网膜脱离(RD)患者和眼球破裂伤患者玻璃体中色素上皮衍生因子(PEDF)水平的变化.方法我们采用ELISA(酶联免疫吸附测定)双抗体夹心法测量了35名患者(共36只眼)玻璃体中色素上皮衍生因子(PEDF)的含量.其中,收集了16名(17只眼)欲行玻璃体切割的糖尿病视网膜病变患者、11名孔源性视网膜脱离患者和8名急诊眼球破裂伤患者的玻璃体样本(作为正常对照组).结果糖尿病视网膜病变(DR)患者玻璃体中PEDF浓度为1.15±0.23 μg/ml;孔源性视网膜脱离(RD)组3.41±0.71 μg/ml;正常对照组(急诊眼球破裂伤患者的玻璃体样本)1.71±0.39 μg/ml.孔源性视网膜脱离(RD)组PEDF水平明显高于糖尿病视网膜病变(DR)组(P＜0.001)和眼球破裂伤组(正常对照组)(P＜0.05).糖尿病视网膜病变组增殖期病变(PDR)组PEDF水平为0.88±0.21 μg/ml,明显低于非增殖期病变(NPDR)组为2.43±0.37 μg/ml(P＜0.01).另外PEDF在活动期(active)糖尿病视网膜病变患者水平(0.70±0.22μg/ml)明显低于非活动期(inactive)糖尿病视网膜病变患者水平(1.79±0.35 μg/ml)(P＜0.05).结论PEDF可能是阻止新生血管生成因子之一,并且低水平的PEDF可能导致DR患者新生血管的产生进而进入活动期.此外RD患者较高水平的PEDF显示对于脱离的视网膜,PEDF可能起着一个神经元保护作用.PEDF对于血管增生性眼病具有潜在的治疗价值.     

色素上皮衍生因子对鼠视网膜新生血管形成的保护作用

目的本课题通过小鼠视网膜新生血管动物模型观察玻璃体内注入色素上皮衍生因子(PEDF)对视网膜新生血管形成的影响,并探讨其治疗作用。方法选取鼠龄为7天的健康昆明小鼠28只(56只眼),随机分为4组:正常组、高氧组、PEDF干预组和对照生理盐水组,每组7只。正常对照组鼠在正常空气环境中饲养,其余3组鼠置于氧箱中,建立高氧诱导的视网膜新生血管动物模型。正常组鼠不做任何处理,PEDF干预组幼鼠在出生后第12天向玻璃体腔内注射PEDF 1μl,而对照生理盐水组注射相同体积的生理盐水。各组小鼠均在出生后第17天处死,摘除眼球制作标本,进行组织病理学观察。在光学显微镜下观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞细胞核数目。采用CD31分子免疫组化方法鉴别视网膜内界膜与血管内皮细胞。结果正常对照组标本HE染色未见突破内界膜的内皮细胞核,高氧组和对照生理盐水组标本可见较多的突破内界膜的内皮细胞核,与正常组比较差异具有显著性(P<0.05),PEDF干预组的数目明显少于高氧组和对照生理盐水组,差异均具有显著性(P<0.05),且未见明显药物毒性反应。CD31分子免疫组化染色证实突破内界膜的细胞为血管内皮细胞。结论玻璃体内注入一定剂量的PEDF,能够有效抑制高氧诱导下的小鼠视网膜新生血管形成,PEDF有望成为防治血管增生性视网膜病变的一种有效的方法。     

代谢综合征(MS)与前列腺癌:分子机制及治疗方法研究进展

 代谢综合征(metabolic syndrome,MS)及其多种组分(肥胖、糖尿病、高血压、高脂血症等)与前列腺癌相关,两者间的分子生物学机制存在复杂的网络联系。本文就MS与前列腺癌发生与进展的流行病学及基础研究文献进行综述,重点阐述MS影响前列腺癌发生发展的分子生物学机制,包括细胞因子、胰岛素与胰岛素样生长因子(insulin like growth factor,IGF)、性激素、炎症与免疫系统、脂肪酸与氨基酸代谢等方面。随后从加强一级预防、拓展经典药物适应证、研发针对靶点的新型药物等角度对防治方法进行梳理和展望。     

腺相关病毒介导色素上皮衍生因子转染人虹膜色素上皮细胞的体外研究

目的探讨以腺相关病毒(AAV)为载体,对体外培养的人虹膜色素上皮(IPE)细胞进行色素上皮衍生因子(PEDF)转染,获得高效表达PEDF转基因细胞的可行性。方法构建携带PEDF基因的重组AAV载体AAV-PEDF,体外培养人IPE,用1×106pfu的AAV-PEDF按感染复数(MO I)为0、2、10和20分别感染体外培养的IPE细胞;荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白表达情况;流式细胞术检测细胞转染效率;RT-PCR和W estern b lotting法鉴定PEDF在IPE细胞中的表达。结果 AAV-PEDF转染后,IPE细胞生长正常,用荧光显微镜、RT-PCR和W estern b lotting均检测到PEDF表达。在MO I为20时,细胞感染阳性率达64.22%。结论 AAV-PEDF能有效地转染体外培养的IPE细胞并有效表达PEDF。     

多囊卵巢综合征患者血清色素上皮衍生因子水平变化及其意义研究

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清色素上皮衍生因子(PEDF)水平,并评价其激素水平和代谢指标之间的关系。方法:对本院近5年就诊的40例PCOS患者(PCOS组)与40例健康体检者(对照组)进行对比,评价两组患者的血清PEDF水平,并对两组有差异的指标与PEDF进行相关分析。结果:两组的BMI、糖代谢、脂代谢及激素水平比较差异均有统计学意义(P0.05),其余各项基础指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。PCOS组BMI低于24 kg/m2的患者PEDF水平及hs-CRP均明显高于对照组(P0.01)。PCOS组BMI≥24 kg/m2的患者HOMA指数及PEDF水平均明显高于对照组(P0.01),hs-CRP明显高于对照组(P=0.03)。PEDF与hs-CRP(r=0.68,P0.05)、HOMA指数(r=0.32,P0.05)、BMI(r=0.29,P0.05)、腰臀比(r=0.31,P0.05)、舒张压(r=0.24,P0.05)、总胆固醇(r=0.33,P0.05)、甘油三酯(r=0.39,P0.05)及LDL-C(r=0.44,P0.05)正相关,而与HDL成负相关关系(r=-0.36,P0.05)。结论:PCOS患者中血清PEDF水平高于正常,特别是超重的PCOS患者血清PEDF显著升高,且与炎症反应、胰岛素抵抗指数及脂代谢情况关系密切。     

色素上皮细胞衍生生长因子与糖尿病微血管病变

糖尿病的微血管并发症是导致糖尿病患者残废和死亡的重要原因。新生血管的形成是糖尿病微血管并发症尤其是糖尿病视网膜病变的病理特点之一，而抑制新生血管的形成已成为治疗糖尿病微血管并发症的一个新的靶点。色素上皮细胞衍生生长因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）是一种有效的、天然的血管增生抑制剂。近年来的研究显示，PEDF参与了糖尿病微血管病的发生、发展。现就其与糖尿病微血管并发症的关系做一综述。     

多囊卵巢综合征的肥胖妇女患有代谢综合征的流行性

目的分析多囊卵巢综合征的肥胖妇女患有代谢综合征的流行性扣相关特征。方法43例多囊卵巢综合征的肥胖妇女以及31例相匹配的健康肥胖妇女进行系列代谢综合征的检查。结果多囊卵巢综合征的肥胖妇女表现为卵巢体积增大、总睾酮水平和游离雄激素指数增高,血纤溶酶原激活物抑制因子水平升高和糖耐量水平的异常。但两组的腰围、空腹血糖、血压和血脂无显著性差异。26％的多囊卵巢综合征的肥胖妇女和29％的对照组肥胖妇女被诊断为代谢综合征。结论肥胖妇女更容易发生代谢综合症,伴有多囊卵巢综合征的肥胖妇女并不增加发生代谢综合症的发生率。多囊卵巢综合征（PCOS）患者的血纤溶酶原激活物抑制因子含量显著升高,糖耐量异常发生率上升。     

色素上皮细胞衍生因子在大鼠门静脉高压性胃病的表达

目的通过检测色素上皮细胞衍生因子（PEDF）在门静脉高压性胃病（PHG）大鼠胃黏膜中的表达探讨其对PHG作用。方法通过门静脉部分缩窄方法制备PHG大鼠模型,并设立假手术组（SO）作为对照,术后第14d测量门静脉压力;免疫组化法检测PEDF及CD34在大鼠胃黏膜中的表达,并对胃黏膜中CD34阳性血管进行微血管密度（MVD）计数。结果门静脉压力在PHG组明显高于SO组（P〈0.01）,PEDF在PHG组大鼠胃壁中的表达明显低于SO组（P〈0.01）,MVD在PHG组明显高于SO组（P〈0.01）。结论 PEDF的低度表达可能在PHG发病中起重要作用。     

代谢综合征(MS)对冠脉侧支形成的影响

 目的  研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)对冠脉侧支形成的影响,探讨其可能机制。方法  2010年1月至2014年1月间,460位患者符合入选条件,组成研究人群。根据诊断标准筛选MS病例进行分组,分析冠心病患者的MS流行病学特点,通过冠脉造影评估侧支血流及血管病变严重程度,测定胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)、脂连素(Adiponectin)等生物学参数。结果  血糖升高、高血压、HOMA-IR、循环PAI-1和脂连素浓度与冠脉侧支血管生成减少之间存在独立相关性;多变量分析证实MS与侧支循环生发程度之间存在负相关。结论  在冠脉血管闭塞的患者中,MS患者的冠脉侧支生成不及非MS患者,可能部分与空腹血糖、胰岛素抵抗相关的关键参数有关。     

色素上皮衍生因子的抗肿瘤作用及研究进展

色素上皮衍生因子(PEDF)是一种由SERPINF1表达的丝氨酸蛋白酶抑制剂,最初因能诱导视网膜母细胞瘤细胞分化被发现。PEDF具有强有力的抑制血管新生、肿瘤生长和转移的作用。PEDF通过与肿瘤细胞表面受体结合,进而引起一系列的细胞反应,包括调节细胞凋亡、分化、迁移、侵袭和干细胞维持,这使PEDF成为一种潜在的肿瘤靶向治疗药物。有关将PEDF用作肿瘤治疗的研究策略已经被提出,然而将其应用到临床仍需要大量研究进一步阐明PEDF的功能和作用机制。     

增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体液中PEDF与TAOC的关系研究

目的探讨增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者玻璃体液中色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)与总抗氧化能力(total anti-oxidant capacity,TAOC)的关系。方法选择行玻璃体切割术的增殖性糖尿病视网膜病变患者20例(20眼),其中PDR合并玻璃体出血组12眼,PDR无玻璃体出血组8眼。非糖尿病患者18例(18眼)作为对照组。采用ELISA方法测定玻璃体液中PEDF和TAOC的水平,并行统计学分析。结果与对照组比较,PDR患者玻璃体液中的TAOC明显降低(P<0.01)。玻璃体液中PEDF水平与TAOC呈正相关(r=0.35,P<0.05),和对照组呈正相关(r=0.39,P<0.05)。无玻璃体出血组PDR患者玻璃体液中PEDF水平与对照组和合并玻璃体出血组比较明显降低(P<0.05)。结论玻璃体液中PEDF水平与TAOC密切相关。PEDF可作为眼内源性抗氧化物并对PDR起到保护作用。     

代谢综合征与肾结石关系的研究进展

 肾结石是泌尿外科常见病，其患病率增长迅速。近些年的研究显示代谢综合征(metabolic syndrome，MS)与肾结石的形成和复发相关。代谢综合征包括高血压、糖尿病、肥胖等。24 h尿液分析是肾结石患者代谢评估的主要依据。近年来研究发现代谢综合征患者尿液中钙、枸橼酸盐、尿酸、草酸盐、磷酸盐以及蛋白等改变与肾结石形成和复发相关，而胰岛素抵抗在其中起重要作用。     

缺氧和高浓度葡萄糖对体外培养人视网膜色素上皮衍生因子表达的影响

目的　探讨缺氧和高糖对体外培养的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子 (PEDF)的影响。方法　我们通过实验性研究在氧正常或缺氧 (1%O2 )加或不加高浓度葡萄糖的条件下 ,培养的人RPE细胞 ,通过反转录PCR和实时定量分析检测PEDF和VEGF的表达 ,使用Western印迹分析检测PEDF和VEGF蛋白水平。结果　缺氧情况下 ,VEGF表达和蛋白水平增加 (P =0 .0 0 1) ;缺氧加 2 5mmol/L葡萄糖后增加更加明显 (P <0 .0 0 1)。缺氧情况下PEDF表达水平与正常氧环境比较无统计学意义 (P =0 .2 5 1) ;但加葡萄糖后PEDFmRNA表达水平低于正常对照。结论　体外培养的人RPE细胞在缺氧条件下PEDF表达降低不明显 ,这提示缺氧间接影响体外RPE细胞的PEDF下调 ,高葡萄糖直接下调PEDF的表达 ,同时增加VEGF的表达 ,这可能支持体内高血糖是糖尿病最危险的“糖毒性”观点。     

2型糖尿病肾病患者血清色素上皮源因子水平的变化及意义

目的探讨2型糖尿病（T2DM）肾病患者血清色素上皮源因子（PEDF）水平变化及其在糖尿病肾病发生发展中的意义。方法选取49例健康对照,132例T2DM患者,并根据24h尿微量白蛋白排泄率（UAER）将患者分为正常白蛋白尿组（NA）48例、微量白蛋白尿组（MA）50例、临床蛋白尿组（PR）34例。采用酶联免疫（ELISA）法检测血清PEDF水平,免疫比浊法检测尿微量白蛋白,同时检测糖化血红蛋白（HbAllc）、空腹血糖（FPG）、血脂和高敏C反应蛋白（hs-CRP）。结果T2DM患者血清PEDF水平显著高于健康对照组（2．7±1．3）mg／L,MA组患者血清PEDF（4．7±2．9）mg／L显著高于NA组（3．7±2．2）mg／L,（P〈0．01）;PR组（5．7±2．8）mg／L显著高于MA组（P〈0．05）。血清PEDF水平与HbAlc（r=0．198,P〈0．01）、FPG（r=0．231,P〈0．01）、甘油三酯（TG）（r=0．302,P〈0．01）、hs．CRP（r=0．214,P〈0．01）和UAER（r=0．169,P〈0．05）呈显著正相关,而与高密度脂蛋白胆固醇（r=-0．237,P〈0．01）呈显著负相关。多元回归分析发现TG（B=0．314,P〈0．01）、hs．CRP（B=0．260,P〈0．01）、UAER（B=0．148,P〈0．05）是血清PEDF的独立决定因子。结论PEDF在T2DM患者中显著升高,并随白蛋白尿严重程度而逐渐升高;TG、hs-CRP和UAER是血清PEDF的独立影响因子。血清PEDF水平的升高可能参于了糖尿病肾病的发生和发展。     

色素上皮衍生因子在慢性高眼压大鼠视网膜的表达

目的: 探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在大鼠视网膜的表达及其与慢性高眼压视神经损伤的关系.方法: 雌性SD大鼠102只,随机分为实验组G(包括G1 h,G12 h,G1 d,G3 d,G7 d,G14 d,G21 d,G28 d),对照组C(包括C1 h,C12 h,C1 d,C3 d,C7 d,C14 d,C21 d,C28 d) 和空白对照组D,各组均为6只,随机选一只眼为实验眼.应用巩膜浅层静脉烧烙法制作慢性高眼压(elevated intraocular pressure, EIOP)模型,用免疫组织化学染色法观察视网膜各层结构PEDF的表达和变化规律.结果: 免疫组化染色显示,G组术后1 d 大鼠视网膜PEDF染色阳性的细胞增多 (P﹤0.05),并且呈现递增趋势,到7 d 达到高峰(P﹤0.05),并持续至28 d 之后(P﹤0.05),而C和D组视网膜PEDF阳性细胞数量没有显著变化(P﹥0.05).C和D组PEDF阳性细胞主要分布在视网膜的色素上皮层(RPE)、视杆视锥细胞层(PRL)、外界膜(OLM)、外颗粒层(ONL)、内颗粒层(INL)、内网状层(IPL)、神经节细胞层(RGCL)、神经纤维层(RNFL).G组PEDF除了在上述的结构有相同的表达以外,在RGCL,RNFL显著增多.结论: 视网膜PEDF阳性细胞表达的变化与EIOP损伤有一定的时效和空间关系,视网膜PEDF阳性细胞表达的增强可能是EIOP损伤的应激反应.     

血清PEDF及PEDF基因启动子区多态性与2型糖尿病患者微量白蛋白尿的相关性

目的:探讨福建地区汉族2型糖尿病患者血清色素上皮衍生因子水平(pigment epithelium-derived factor,PEDF)及PEDF基因启动子区rs1294385单核苷酸多态性与微量白蛋白尿的关系?方法:471例2型糖尿病患者根据尿白蛋白/肌酐比值(urinary albumin to creatinine ratio,UACR)分为正常组(UACR<30 μg/mg,NAU组)246例?微量白蛋白尿组(30 μg/mg≤UACR<300 μg/mg,MAU组)225例,使用PCR-RFLP方法检测PEDF基因启动子区rs1294385的多态性,同时检测血清PEDF水平及空腹血糖?空腹胰岛素?糖化血红蛋白?血脂等指标?结果:MAU组的血清PEDF水平高于NAU组,差异有统计学意义(P < 0.05);偏相关分析显示血清PEDF水平与UACR呈正相关(P < 0.05);PEDF基因启动子区rs1294385的基因型(GG型?GA型和AA型)和等位基因(G/A)在NAU?MAU两组间的分布存在差异,且差异有统计学意义(P < 0.05);GA基因型出现微量白蛋白尿的风险是GG基因型的1.838倍,GA+AA基因型出现微量白蛋白尿的风险是GG基因型的1.862倍,差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:2型糖尿病患者血清PEDF水平随微量白蛋白尿的出现而增高;福建地区汉族2型糖尿病患者PEDF基因启动子区rs1294385多态性与微量白蛋白尿明显相关,携带A等位基因可能增加2型糖尿病患者发生微量白蛋白尿的机率?