大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的观察转化生长因子-β(TGFβ-1)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义。方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2~0.3m l,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGFβ-1的水平变化。结果观察组TGFβ-1水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01)。TGFβ-1在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 TGFβ-1在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用。     

罗格列酮对大鼠肺纤维化的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为4组,即生理盐水对照组、罗格列酮对照组、博莱霉素组、罗格列酮干预组,经气管内注射博莱霉素建立肺纤维化模型。HE染色及Masson染色观察肺组织形态学变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数及乳酸脱氢酶(LDH)浓度;测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果博莱霉素气管内注入后大鼠肺Ash-croft评分,胶原沉积、羟脯氨酸含量及BALF中LDH水平与生理盐水对照组比较明显增加(P均<0.05);给予罗格列酮干预后,上述指标均下降(P均<0.05)。生理盐水对照组和罗格列酮对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化过程中,罗格列酮可减少胶原沉积,抑制肺纤维化。     

大黄素对大鼠肺间质纤维化的治疗作用

目的 研究大黄素对博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化的治疗作用.方法 利用博莱霉素气管内注射制作大鼠肺纤维化模型.60只健康雄性SD大鼠被随机分为正常组、模型组、强的松组和小、中、大剂量大黄素组.在同样条件下,药物灌胃饲养28d后,断颈处死.取双肺标本进行病理切片、测定转化生长因子(TGF-β1)表达和羟脯氨酸含量.结果 从病理切片、肺组织中TGF-β1表达和肺组织匀浆中羟脯氨酸的含量方面来看,药物治疗各组的肺纤维化均比模型组轻.结论 大黄素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有一定的治疗作用,其作用机制可能通过抑制TGF-β1生成和肺成纤维细胞增殖来实现.     

灯盏花素对实验性肺纤维化大鼠的干预作用

目的探讨灯盏花素对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织细胞凋亡、Fas/FasL表达以及氧自由基的影响。方法48只大鼠随机分为对照组(16只)、模型组(16只)以及灯盏花素组(16只),气管内注入博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,次日灯盏花素组每日腹腔内注射灯盏花素注射液10mg.kg-1,于d7及d28每组分别处死8只大鼠,运用流式细胞仪测定肺纤维化大鼠肺组织细胞凋亡率、Fas/FasL表达,用TAB法测定肺组织匀浆丙二醛含量以及肺组织匀浆羟脯氨酸含量。结果炎症期和纤维化期大鼠肺组织细胞凋亡率增加,Fas/FasL表达增多,丙二醛及羟脯氨酸含量增高(P<0.01),而灯盏花素能明显降低肺组织的凋亡率,降低丙二醛及羟脯氨酸含量,下调Fas/Fasl的阳性表达。结论灯盏花素能减慢肺间质纤维化的进程,对肺间质纤维化有一定的保护作用。     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的 观察转化生长因子-β(TGF-β<,1>)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义.方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2～0.3ml,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGF-<,1>的水平变化.结果 观察组TGF-β<,1>水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01).TGF-β<,1>在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 TGF-β<,1>在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用.     

来氟米特对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响

目的本实验采用BLM诱导的大鼠肺纤维化模型,研究LEF对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响作用,并与其他治疗类风湿性关节炎的药物进行比较。方法首先采用BLM制备大鼠肺纤维化模型,1次/d,经口灌胃给予LEF和地塞米松(Dexamethasone,DEX),同时设CMC溶剂对照组,连续给药4周。分别于给药后1、2和4周解剖大鼠,采集出肺血液,检测MDA和NO2-/NO3-的含量;采集肺组织,制备切片,分别采用HE、Masson三重染色和天狼猩红染色方法检查大鼠肺组织出现肺炎和肺纤维化的病理变化程度,采用组织芯片技术结合免疫组织化学方法检查TGF-β1在肺组织中不同部位的表达情况。结果在给药后1、2和4周,与CMC组相比,LEF、DEX组大鼠出现肺血液中MDA和NO2-/NO3-的含量明显降低,LEF、DEX组大鼠出现肺炎和肺纤维化程度明显降低;与CMC组相比,LEF、DEX组大鼠肺组织中TGF-β1表达阳性程度明显降低。结论研究结果提示,国内生产的来氟米特对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的早期炎症反应具有一定抑制作用。     

S100A8基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达

目的 探讨S100A8基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达.方法 SD大鼠20只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,模型组气管内注射博莱霉素5 mg/kg诱导肺纤维化,对照组气管内注射等量生理盐水.28 d后处死两组大鼠,HE染色观察肺纤维化情况,RT-PCR检查两组S100A8 mRNA的表达情况.结果 与对照组相比,S100A8 mRNA在肺纤维化大鼠肺组织中表达增强.结论 S100A8 mRNA在肺纤维化大鼠模型肺组织中表达增强,提示S100A8可能参与肺纤维化的病理过程.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对实验性大鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法大鼠随机分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松组和EGCG大、中、小剂量组。通过气管内注入博莱霉素(BLM)复制大鼠肺纤维化模型,于造模后d 2各治疗组开始给药,给药后d7、14、28处死大鼠,取肺组织,观察形态学变化,并测定生化指标。结果EGCG能减少实验性肺纤维化大鼠肺组织中胶原沉积及降低肺系数(P<0.05,P<0.01),提高T-AOC、SOD水平(P<0.05,P<0.01),减轻肺部的病理损害。结论EGCG对BLM诱导产生的大鼠肺纤维化有一定的抑制作用。     

Pyrin重组蛋白对肺纤维化大鼠VEGF/VEGFR2/MMP-9信号通路的影响

目的探讨Pyrin重组蛋白对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的影响及其机制是否与VEGF/VEGFR2/MMP-9信号通路有关。方法 60只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=20)、Pvrin重组蛋白组(n=20)、SU5416阳性对照组(n=10),除对照组外,其余3组均经气道注入博莱霉素5 mg·kg~(-1)建立大鼠肺间质纤维化模型;造模d 2各组予以相应药物进行干预。于d 14及d 28分两批进行取材,用HE染色观察肺泡炎程度、用Masson染色观察肺纤维化程度,免疫组化及RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、基质金属蛋白酶-9(MMPN)蛋白和mRNA表达。结果d 14及d 28模型组大鼠肺组织,肺泡炎和纤维化程度以及VEGF、VEGFR2、MMP-9蛋白及mRNA表达较对照组明显增强(P<0.05);d 14Pyrin重组蛋白组肺泡炎和纤维化程度以及VEGF、VEGFR2、MMP-9蛋白及mRNA表达较d 14模型组减弱(P<0.05),d 28 Pyrin重组蛋白组肺泡炎和纤维化程度以及VEGF、VEGFR2、MMP-9蛋白及mRNA表达较d 28模型组减弱(P<0.05)。结论Pyrin重组蛋白可能通过下调VEGF/VEGFR2/MMP-9信号通路而发挥抗肺纤维化作用。     

结缔组织生长因子在肺间质纤维化发病机制中的地位和作用

为了解结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠肺纤维化模型中的表达状况及其在肺纤维化发病机制中的作用 ,将 42只 Wistar大鼠随机分为模型组 (M组 )和对照组 (C组 ) ,M组气管内灌注博莱霉素 ,C组气管内灌注生理盐水。于灌注后第 7、14、2 8天每组分别处死大鼠 7只 ,制备大鼠肺组织切片。用免疫组化 SABC法分别检测两组大鼠肺组织中 CTGF及转化生长因子β1 (TGF-β1 )、 型胶原纤维 (Collagen )的蛋白在肺内的表达水平。结果显示 ,CTGF作为 TGF -β1 的下游因子 ,可能通过促进细胞外基质 (ECM)如胶原蛋白等合成而在博莱霉素诱导的肺纤维化形成过程中起重要作用     

沙利度胺通过下调转化生长因子-β_1肿瘤坏死因子-α抑制大鼠肺纤维化

目的观察沙利度胺对博来霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其可能作用机制。方法选择健康雄性Wistar大鼠45只,随机分为正常对照组(N组)、肺纤维化模型组(M组)和沙利度胺治疗组(T组)3组,每组各15只。M组于气管内滴注博来霉素(BLM)5mg/kg生理盐水诱导肺纤维化,造模次日起每日腹腔内注射二甲基亚砜(DMSO)液;T组同样方法造模,次日起每日腹腔内注射沙利度胺(4mg/只)DMSO溶液;N组气管内滴注生理盐水,次日起每日腹腔内注射DMSO液。各组动物均于制模后的第7、14、28天分别随机处死5只动物,取肺组织行病理切片行苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化程度;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量;双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。结果 M组纤维化程度逐渐加重,于第28天形成明显的肺纤维化;其肺泡炎、纤维化评分,Hyp、TGF-β1、TNF-α的含量与N组比较均明显升高(P<0.05)。T组各时间点肺泡炎程度显著低于M组(P<0.05)。第14、28天,T组肺纤维化程度及肺组织Hyp含量较M组均明显降低(P<0.05)。此外,T组BALF中TGF-β1、TNF-α的含量亦低于M组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沙利度胺可减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,其作用机制可能是通过下调TGF-β1及TNF-α在肺内的表达而实现的。     

褪黑素对实验性肺纤维化p38MAPK表达的影响

目的观察褪黑素对博来霉素致大鼠肺纤维化p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）表达的影响,从而探讨其防治肺间质纤维化的机制。方法雌性SD大鼠45只随机分为3组,每组15只,分别为模型组,干预组及对照组。模型组和干预组均一次性气管内注入博来霉素（5mg/kg）,对照组气管注入同体积生理盐水。干预组于造模前2d腹腔注射褪黑素[4mg/（kg.d）],而模型组和对照组给予同体积生理盐水。每组分别于7、14、28d各随机处死5只大鼠。采用HE染色和M asson染色了解肺泡炎和肺纤维化的情况,用免疫组织化学方法检测肺组织p38MAPK和FN蛋白的表达;RT-PCR方法检测肺组织p38MAPK的水平。结果成功建立肺纤维化模型。肺组织中p38MAPK（蛋白和mRNA）和FN（蛋白）在对照组表达较弱,模型组在7d表达增强,14d明显增强,28d较14d开始减弱,干预组各期上升幅度均低于模型组,但仍强于正常组（P〈0.05）。结论褪黑素可能通过抑制p38MAPK的表达而减少FN的分泌和沉积,延缓肺间质损害的进程。     

丹红注射液治疗特发性肺纤维化的疗效观察

目的：探讨丹红注射液治疗特发性肺纤维化的临床疗效。方法84例特发性肺纤维化患者,按数字表法随机将其分为对照组（泼尼松治疗）和观察组（泼尼松治疗基础上,加用丹红注射液）,每组各42例,治疗6周后,对两组临床疗效、血氧分压及CO弥散量、血清转化生长因子（ TGF）-β1及肺通气量、不良反应,进行观察和比较。结果与对照组相比,观察组治疗的总有效率明显提高（92．9％比71．4％,P＜0.05）,观察组治疗后血氧分压[（67．57±9．93） mmHg比（51．74±9．21） mmHg]及CO弥散量[（18．98±3.44）mL· min^-1·mmHg^-1比（15．83±3．06）mL·min^-1·mmHg^-1]均明显升高（均P＜0．05）,观察组治疗后血清TGF-β1水平明显降低[（1．15±0．13）μg/L比（3．02±0．28）μg/L],而肺通气量显著提高[（1．85±0.36）L比（1．69±0．30）L]（均P＜0．05）;与对照组相比,观察组不良反应发生率显著降低（4．8％比19．0％, P＜0．05）。结论丹红注射液治疗特发性肺纤维化具有疗效显著、安全性高等特点,能够有效纠正低氧血症,明显改善肺功能,值得临床推广。     

波生坦对肺纤维化大鼠内皮素-1水平的影响

目的 观察波生坦对博来霉素诱导的肺纤维化（PF）大鼠内皮素-1（ET-1）的影响.方法 雄性Wist-ar大鼠48只随机分为对照2、4周组（C2、C4）、PF模型2、4周组（F2、F4）和波生坦治疗组（D1、D2）,每组8只.2、4周末测定各组大鼠血浆ET-1水平,光镜下观察肺泡炎、纤维化程度.结果 ET-1水平随造模时间升高（0.10＆#177;0.05）,（0.11＆#177;0.04）,（0.28＆#177;0.08）,（0.41＆#177;0.13） ng/ml,D1组（0.27＆#177;0.04） ng/ml较F4下降,D2组（0.38＆#177;0.05） ng/ml与F4无统计学差异.ET-1与肺泡炎、肺纤维化评分呈线性正相关（r1=0.675,r2=0.837,P1＜0.001,P2＜0.001）.D1组肺泡结构较F4、C4组完整,炎细胞和成纤维细胞浸润、胶原纤维增生程度减轻;D2与F4组比较未见显著差异.结论 早期波生坦治疗能降低ET-1水平,延缓肺纤维化的进展;ET-1有望成为临床较理想的评估指标.     

硬肝复康防治肝硬化的初步实验研究

目的 :研究复方中药硬肝复康对小鼠实验性肝纤维化的防治作用。方法 :单次或多次给予实验小鼠CCl4 油剂 ,分别造成急性肝损伤和肝纤维化 ;给小鼠静脉注射BCG和LPS造成免疫性肝损伤。检测各组实验小鼠血清ALT、AST、ALP ,并取肝纤维化小鼠肝脏做病理学检查。结果 :CCl4 急性肝损伤实验中 ,硬肝复康 (2g/(kg·d) )组小鼠ALT、ALP( (6153±3491)IU/L、(202±24)IU/L)低于对照组 ( (9275±2744)IU/L、(421±67)IU/L) (P<0 05) ;免疫性肝损伤实验中 ,硬肝复康组ALT、AST( (36 3±13 0)IU/L、(164 4±17 2)IU/L)显著低于对照组 ( (83 2±52 6)IU/L、(235 5±73 4)IU/L) (P<0 01) ;实验性肝纤维化实验中 ,硬肝复康组ALT、ALP( (1100±342)IU/L、(166±54)IU/L)显著低于对照组 ( (1638±336)IU/L、(328±128)IU/L) (P<0 01)。病理检查显示 ,硬肝复康组肝脏纤维化程度明显较轻。结论 :硬肝复康对慢性肝损伤和肝纤维化具有较好防治作用。     

沙利度胺对肺纤维化大鼠肺组织中c-jun氨基末端激酶及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响及意义

目的观察沙利度胺在大鼠肺纤维化中的干预作用及对磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,进一步分析沙利度胺在肺纤维化过程中可能的作用机制。方法将54只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、沙利度胺组,每组各18只,于气管内滴注博莱霉素注射液制备肺纤维化模型,对照组给予气管内滴注0.9%氯化钠注射液。沙利度胺组于造模当日起给予沙利度胺(100mg/kg)灌胃,对照组和模型组给予等量0.9%氯化钠注射液,每日1次。各组分别于第7、14、28天随机处死6只大鼠,取肺组织行苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色,碱水解法测大鼠肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组织化学法测肺组织中p-JNK蛋白及α-SMA的表达。结果模型组第7天时肺泡炎症明显,第28天时可见明显纤维化改变;随着时间的推移,羟脯氨酸含量呈逐渐上升趋势,第28天时含量最高;p-JNK蛋白及α-SMA的表达较对照组明显增加。沙利度胺组与模型组比较,肺泡炎症及纤维化程度均有所减轻;第14、28天时Hyp含量有所降低,p-JNK蛋白及α-SMA的表达有所减少(P<0.05);模型组α-SMA与p-JNK蛋白含量呈正相关。结论沙利度胺可减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化的程度,其机制可能是通过抑制p-JNK蛋白的活化及α-SMA的表达实现的。     

ADAMTS-1对博莱霉素所致肺成纤维细胞纤维化的影响

目的：探讨Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）对博莱霉素诱导的大鼠肺成纤维细胞纤维化的影响及其机制。方法实验分为六组,博莱霉素组（Ⅱ组）在大鼠肺成纤维细胞中加入博莱霉素建立肺纤维化模型,在加入博莱霉素的同时分别加1、2、4μg ADAMTS-1（Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组）,并与只加4μg ADAMTS-1（Ⅵ组）和正常大鼠肺成纤维细胞（Ⅰ组）进行对照。加入博莱霉素及ADAMTS-1处理24 h后,运用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅰ型胶原（COLⅠ）mRNA表达量,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中CTGF、COLⅠ质量浓度。结果Ⅱ组CTGF、COLⅠmRNA表达量及细胞培养上清液中质量浓度明显高于其他各组,而Ⅲ~Ⅵ组与Ⅱ组比较,不但CTGF、COLⅠmRNA表达降低,而且细胞培养上清液中质量浓度也明显下降,以Ⅵ组最低,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论 ADAMTS-1在一定程度上呈剂量依赖性抑制博莱霉素诱导的大鼠成纤维细胞纤维化。     

血红素氧合酶-1/一氧化碳系统在肺纤维化大鼠中的表达及药物干预

目的研究血红素氧合酶-1（HO-1）/一氧化碳（CO）系统在肺纤维化大鼠中的表达及药物干预影响,为肺纤维化的诊治提供一种新方法。方法应用健康Wistar大鼠60只,随机分为4组,分别为对照组、肺纤维化组（纤维化组）、肺纤维化加HO-1特异激动剂组（加强组）、肺维化加HO-1特异抑制剂组（抑制组）。检测各个模型组中大鼠肺组织与血清中HO-1/CO体系表达情况,分析HO-1/CO体系在大鼠肺纤维化中的作用,以及药物对肺纤维化程度的影响。结果在对照组中,HO-1与COHb在大鼠肺组织和血清中低表达,且两者差异无统计学意义（P〉0.05）,在单纯组、加强组、抑制组中,与对照组相比,HO-1与COHb在大鼠肺组织和血清中均高表达,以加强组为重,抑制组最低,两者差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论HO-1/CO系统参与了大鼠肺纤维化形成过程,通过对其的干预,可以改变大鼠肺纤维化的程度,为肺纤维化的诊断与治疗的提供新途径。     

川芎嗪对鼠肺纤维化组织钙含量及钙调素活性的影响

目的：观察川芎嗪对博莱霉素所致鼠肺纤维化组织钙含量及钙调素活性的影响，探讨川芎嗪防治肺纤维化的机制。方法：将32只SD大鼠一次性气管内注入博莱霉素A5制备肺纤维经模型，随机分为2组：模型组(n=16)及川芎嗪组（n=16)，分析测定各组给药后d14,d28肺组织钙含量及钙调素活性，并与正常对照组（n=8)比较。结果：模型组肺组织钙含量及钙调素活性较正常组明显增高（P＜0．01），川芎嗪组各期钙含量及钙调素活性均低于模型组（P＜0．05）同时组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组明显减轻。结论：川芎嗪防治鼠肺纤维化的机制可能与降低肺组织钙含量及钙调素活性有关。