去卵巢大鼠骨质疏松症中Sost对Wnt信号通路的影响

目的观察去卵巢大鼠骨质疏松时股骨中Sost、lrp5和β-catenin的表达水平的变化,探讨Sost在去卵巢骨质疏松发生中的作用。方法 20只雌性SD大鼠随机分为去卵巢组和假手术组（对照组）,去卵巢组切除大鼠双侧卵巢诱发骨质疏松,假手术组开腹后仅切除少量脂肪即缝合。确定造模成功后自腹主动脉取血测定E2水平,利用骨骼强度检测仪对一侧股骨进行生物力学检测并用双能X线骨密度仪进行骨密度测定;提取另一侧股骨总RNA,行RT-PCR检测Sost、lrp5和β-catenin mRNA水平;提取总蛋白,利用Western blot检测Sost表达产物sclerosteosis、Lrp5和β-catenin的蛋白含量。结果与假手术组相比,去卵巢组大鼠血清E2浓度显著降低;股骨组织中Sost表达明显上调,lrp5的mRNA水平及蛋白水平检测变化不大,β-catenin mRNA变化不大,但蛋白含量显著减少;股骨抗弯曲力和抗压碎力明显减弱,骨密度降低。结论卵巢摘除术可导致SD大鼠E2分泌明显减少,进而诱发骨质疏松在此过程中伴有Sost基因表达水平增高,β-catenin降解增多,提示去卵巢后E2分泌减少导致大鼠骨质疏松发生其机制可能和Sclerosteosis竞争性结合LRP5,抑制Wnt通路,从而下调β-catenin有关。     

壮骨止痛方对去势大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察壮骨止痛方对去势大鼠骨组织Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨其治疗骨质疏松的机制。方法:60只3月龄SD雌性大鼠,按体重随机分为假手术组、空白组、模型组、壮骨止痛方组,15只/组。模型组、壮骨止痛方组采用双侧去卵巢建立绝经后骨质疏松大鼠模型,假手术组切除卵巢周围相应质量脂肪。术后5 d开始药物干预,连续13 w。取股骨,观察病理形态及Wnt7b、TCF3、GSK3β蛋白的表达。结果:与模型组相比,壮骨止痛方组骨小梁密度及梁髓比均提高。与模型组相比,壮骨止痛方组骨组织中Wnt7b、TCF3蛋白表达增高,GSK3β蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论:壮骨止痛方可通过上调去势大鼠骨组织中Wnt7b、TCF3蛋白表达,下调GSK3β蛋白表达来调控Wnt/β-catenin信号通路。     

形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：构建形觉剥夺性近视（FDM）大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达及其与Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的关系。方法：40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1（DDK1）组（加入DDK1培养）,采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶（DCL3）、结肠腺瘤样息肉蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果：与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加（P<0.05）,巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）,TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义（P<0.01）;与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）;与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）。结论：FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。     

固本活血壮骨颗粒对糖尿病大鼠成骨细胞Wnt/β-catenin信号传导通路的影响

目的观察固本活血壮骨颗粒对糖尿病大鼠模型成骨细胞Wnt/β-catenin信号传导通路的影响。方法 6月龄SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、固本活血壮骨颗粒大、中、小剂量组。除正常对照组外,其余各组均采用左下腹腔内注射新鲜配制1%链脲佐菌素STZ(柠檬酸缓冲液,p H值4.4)65 mg/kg体重造模。各组予相应药物及生理盐水灌胃12周。结果固本活血壮骨颗粒可提高糖尿病模型成骨细胞Wnt1、LRP-5以及β-catenin蛋白的表达。结论固本活血壮骨颗粒可以通过促进成骨细胞Wnt1、LRP-5以及β-catenin蛋白的表达,调节Wnt/β-catenin信号传导通路的失调状态,促进骨形成,减少骨吸收,提高骨质量,从而达到防治糖尿病性骨质疏松症的效果。     

乌司他丁通过抑制Wnt/β-Catenin信号通路活性减轻糖尿病大鼠神经病变性疼痛

目的 探讨乌司他丁减轻糖尿病大鼠神经病变性疼痛（DNP）的效应及相关信号通路。方法 将36只SD大鼠随机分为对照组（Con组）、DNP模型组（DNP组）、乌司他丁治疗组（ULI组）,分别采取不同的干预措施。对大鼠进行机械缩足反射阈值（MWT）测试和热缩足反射潜伏期（TWL）测试。分批处死大鼠,解剖分离L3～5脊髓,采用Western Blot检测Wnt 10a蛋白、β-catenin蛋白的表达水平。采用ELISA法检测瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)等炎性因子的表达水平。结果 (1)DNP组各时间点的MWT和TWL值均显著低于Con组。与Con组相比,ULI组的WMT值及TWL值更高（P <0.05）。Western Blot检测显示,与Con组相比,DNP组大鼠脊髓Wnt 10a蛋白和β-catenin蛋白的表达水平增加（P <0.05）,ULI组Wnt 10a和β-catenin蛋白表达水平显著降低（P <0.05）。(2)与Con组相比,DNP组脊髓星形胶质细胞明显激活,Wnt 10a和β-catenin表达增强。ULI组星形胶质细胞的激活受到抑制,Wnt 10a和β-catenin的表达也受到抑制。(3)ELISA检测显示,在注射链脲佐菌素后第39、42、45天,由Wnt 10a/β-catenin信号通路激活的TNF-α和IL-1β水平显著升高,经乌司他丁干预后,显著降低了TNF-α和IL-1β水平。结论 乌司他丁可通过抑制炎症和星形胶质细胞的激活减轻大鼠DNP症状,这可能是通过Wnt 10a/β-catenin信号通路实现的。     

补骨脂提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢水平的影响*

目的 探讨补骨脂提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢指标的影响。方法 将60只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、补骨脂提取物组和西药组，每组15只。除对照组外，各组通过切除大鼠两侧卵巢组织进行造模，对照组大鼠仅暴露卵巢而不行切除术。造模成功后，补骨脂提取物组给予补骨脂素（88 mg/kg）灌胃，西药组给予阿仑膦酸钠（7 mg/kg）灌胃，对照组和模型组则灌胃等体积生理盐水;连续12周。采用酶联免疫吸附实验检测各组大鼠血清骨钙素（osteocalcin，OCN）、骨特异性碱性磷酸酶（bone specific alkaline phosphatase，BAP）、Ⅰ型胶原交联C-末端肽（C-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen，CTX）水平;采用RT-PCR法检测大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a和β-catenin的mRNA表达;采用双能X线骨密度仪检测大鼠腰椎和股骨的骨密度（bone mineral density，BMD）。结果 与对照组比较，模型组大鼠血清CTX水平显著升高（P＜0.05），OCN、BAP含量明显降低（P均＜0.05）;与模型组比较，各用药组大鼠血清CTX水平显著降低（P均＜0.05），OCN、BAP含量明显升高（P均＜0.05），但各用药组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。与对照组比较，模型组大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a、β-catenin的mRNA表达明显降低（P均＜0.05），第4腰椎及左、右股骨BMD明显降低（P均＜0.05）;与模型组比较，各用药组大鼠股骨和胫骨骨髓中Wnt3a、β-catenin的mRNA表达水平，第4腰椎及左、右股骨BMD均升高（P均＜0.05），但各用药组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 补骨脂提取物能提高去卵巢骨质疏松大鼠骨密度，改善骨代谢指标，其作用可能与活化Wnt/β-catenin有关。     

老鹳草素对骨质疏松大鼠BMSCWnt3a表达的影响

［摘要］目的　研究老鹳草素对骨质疏松（OP）大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）信号分子Wnt3a表达的影响．方法　摘除大鼠双侧卵巢,复制骨质疏松症模型,分离、培养BMSC．将源于假手术大鼠第3代BMSCs常规培养作为正常对照组,将骨质疏松模型大鼠的BMSCs分别设以下组别:模型对照组、1 μmol/L的辛伐他汀阳性对照组、0.01、0.1、1、10、100 μmol/L的老鹳草素组．分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测mRNA及蛋白的表达．结果　与正常对照组比较,OP模型对照组Wnt3a蛋白及其mRNA的表达明显降低,且有统计学意义（P＜0.01）;与模型组比较,1 μmol /L辛伐他汀、0.1、1、10、100 μmol/L的老鹳草素明显升高Wnt3a蛋白及其mRNA的表达,且均有统计学意义,而0.01 μmol/L老鹳草素对Wnt3a表达无明显影响．结论　老鹳草素可能通过增加BMSC中Wnt/β-catenin信号通路的信号蛋白Wnt3a的表达,进一步激活Wnt/β-catenin信号通路,这有利于BMSC的成骨分化及骨形成．     

TIM-3 基因在上皮性卵巢癌中高表达并促进癌细胞的增殖和迁移

目的 通过挖掘GEPIA数据库中的基因信息,分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（TIM-3）基因在上皮性卵巢癌（EOC）中的表达及作用机制。方法 采用GEPIA数据库在线分析TIM-3基因在EOC组织和正常卵巢组织中的表达水平。收集2018年6月~2019年12月在我院实施卵巢手术治疗的82例EOC癌变组织标本和18例正常卵巢组织标本,免疫组织化学法检测标本组织中TIM-3的表达水平,分析TIM-3表达与EOC临床病理参数的相关性;采用Kaplan-Meier Plotter分析TIM-3表达水平与EOC患者生存之间的关系。qRT-PCR法检测卵巢癌组织和正常组织标本TIM-3和Wnt1 mRNA表达水平及相关性。采用pMAGic 4.0质粒转染构建TIM-3沉默卵巢癌SKOV3细胞系,将细胞分为SKOV3组（未转染的SKOV3细胞系）、沉默阴性对照组（SKOV3+NC siRNA组：转染pMAGic 4.0 NC siRNA质粒的SKOV3细胞系）和沉默TIM-3组（SKOV3+TIM-3 siRNA组：转染pMAGic 4.0 TIM-3 siRNA质粒的SKOV3细胞系）;采用pcDNA3.1质粒转染构建TIM-3过表达卵巢癌SKOV3细胞系,将细胞分为SKOV3组、过表达阴性对照组（pcDNA NC组：转染pcDNA3.1质粒的SKOV3细胞系）和过表达TIM-3组（pcDNA TIM-3组：转染pcDNA3.1 TIM-3质粒的SKOV3细胞系）。MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,TOPflash/FOPflash双荧光素酶报告基因实验检测Wnt/β-catenin通路活性,qPCR检测Wnt/β-catenin信号通路中转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平,Western blot检测SKOV3细胞中MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin及E-cad蛋白表达。结果 TIM-3在正常卵巢组织中呈阴性表达,在EOC组织中呈阳性表达,EOC组织中TIM-3阳性表达率（84.14%）显著高于正常卵巢组织（16.67%,P<0.05）。TIM-3表达与FIGO分期、组织分化程度及淋巴结是否转移有关（P<0.05）,与年龄、病理类型无关（P>0.05）。且TIM-3与Wnt1水平呈正相关（P<0.05）。沉默TIM-3基因后,Wnt/β-catenin通路活性受到抑制,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低（P<0.05）,凋亡能力显著升高（P<0.05）,转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平显著下调,细胞MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin蛋白水平均显著下调,EMT相关蛋白E-cad水平显著上调（P<0.05）。过表达TIM-3基因后,Wnt/β-catenin通路活性被激活,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高（P<0.05）,凋亡能力显著降低（P<0.05）,转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平显著上调,细胞MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin蛋白水平均显著上调,EMT相关蛋白E-cad水平显著下调（P<0.05）。结论 TIM-3在EOC组织中高表达,可促进卵巢癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

TGF-β/Smad与Wnt/β-catenin在博莱霉素致大鼠肺纤维化中的表达及相互作用

【摘要】目的 观察TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达,探讨两条通路对肺纤维化的影响及其相互作用。方法 取Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,每组18只。采用气管内注入BLM建立Wistar大鼠肺纤维化模型,每组分别于第14天、21天和28天处死大鼠各6只;取肺组织称重,测定肺组织中HYP、IL-1β水平,观察肺组织Col-Ⅰ、IL-1β、TGF-β1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-catenin、LEF-1mRNA的表达,并进行HE染色和Masson胶原染色。结果 （1）与正常对照组比,造模后14~28天大鼠肺指数均明显升高（P<0.01）;肺组织HE染色呈现明显的肺纤维化病理改变,Masson染色结果可见造模后14~28天肺间质蓝色胶原呈渐进性增加。（2）造模后第14天,肺组织IL-1β含量、IL-1β mRNA相对含量均显著升高（P<0.01）,随后逐渐降低,至造模后第28天IL-1β表达量接近正常水平（P>0.05）。（3）造模后14~28天大鼠肺组织HYP含量、Col-ⅠmRNA相对表达量均明显升高（P<0.01）。（4）与正常组相比,模型组中TGFβ1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-Catenin、LEF-1 mRNA表达显著增加（P<0.01）,且TGFβ1、Smad3 mRNA分别与Wnt1、LEF-1、β-catenin mRNA的表达呈显著正相关。结论 TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在博来霉素致大鼠肺纤维化中表达上调,两条通路对肺纤维化均有促进作用且它们间可能存在一定联系。     

阿托伐他汀对激素性股骨头坏死大鼠的作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探究阿托伐他汀对激素性股骨头坏死大鼠的作用及对果蝇无翅基因/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路的影响。方法 30只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组及阿托伐他汀组，每组10只。模型组和阿托伐他汀组复制激素性股骨头坏死模型并对每只大鼠腹腔注射醋酸泼尼松龙（24.5 mg/kg）和青霉素钠（8万u），2次/周，连续给药6周，共18只大鼠模型复制成功。模型复制的同时，阿托伐他汀组腹腔注射阿托伐他汀1 mg/（kg·d），对照组与模型组给予等量的生理盐水，连续治疗6周后，检测各组大鼠血清钙（S-Ca）、血清磷（S-P）水平，以及血清碱性磷酸酶（ALP）、转化生长因子β₁（TGF-β₁）水平；比较大鼠骨组织ALP、TGF-β₁ mRNA相对表达量；比较大鼠骨组织Wnt1、β-catenin蛋白的表达。结果 与对照组比较，模型组大鼠血清S-Ca、S-P及TGF-β1水平降低（P <0.05），ALP水平升高（P <0.05），ALP mRNA相对表达量升高（P <0.05），TGF-β₁ mRNA相对表达量降低（P <0.05），Wnt1水平和β-catenin蛋白相对表达量下降（P <0.05）；与模型组比较，阿托伐他汀组大鼠血清S-Ca、S-P及TGF-β₁水平升高（P <0.05），ALP水平降低（P <0.05），ALP mRNA相对表达量下降（P <0.05），TGF-β₁ mRNA相对表达量升高（P <0.05），Wnt1水平和β-catenin蛋白相对表达量升高（P <0.05）。结论 阿托伐他汀能够改善激素性股骨头坏死大鼠骨代谢指标，其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。     

益气活血方和补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3表达的影响

目的 探讨益气活血方和补肾生髓方对脑缺血大鼠海马Wnt/β-catenin信号通路Wnt3a、卷曲蛋白9(Frizzled9)和T细胞因子3(TCF3)蛋白表达的影响.方法 采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组,脑缺血2h后持续灌注7d.采用Western-Blot法检测缺血侧海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达,用免疫组化Envision两步法检测缺血侧海马CA1区Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达.结果 在缺血侧海马区,与假.手术组比较,模型组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著增加(P＜0.01);与模型组比较,益气活血方组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01),补肾生髓方组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01或P＜0.05).在缺血侧海马CA1区,与假手术组比较,模型组Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,益气活血方组与补肾生髓方组能显著降低CA1区Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达(P＜0.01).结论 2种中药复方能通过抑制缺血侧海马Wnt3a、Frizzled9和TCF3蛋白表达,调节Wnt/β-catenin信号通路,促进局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织修复.     

雌激素对去卵巢大鼠骨组织Wnt16、β-catenin、OPG、RANKL表达的影响

目的研究雌激素对去卵巢大鼠骨组织中Wnt16、β-catenin、OPG、RANKL表达的影响,探讨雌激素对骨组织的保护作用。方法选取3月龄Wistar雌性大鼠40只,随机分为假手术组、去势组、实验组1和实验组2。两组实验组分别给予17β-雌二醇皮下注射4周和16周,其余两组给予等量0.9%氯化钠溶液。16周后测定骨组织中Wnt16、OPG、RANKL、β-catenin表达量,HE染色分析大鼠胫骨平台处骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数目（Tb.N）和骨小梁间距（Tb.SP）变化,ELISA法测定血清雌二醇（E2）水平。结果假手术组、实验组2与去势组比较,OPG、β-catenin、Wnt16mRNA、血清E2水平、Tb.Th和Tb.N明显升高,RANKL水平和Tb.SP明显下降,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。实验组1与去势组相比,β-catenin、血清E2水平、Tb.Th和Tb.N明显升高,RANKL水平和Tb.SP明显下降,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论雌激素可能通过上调Wnt16、β-catenin、OPG表达,下调RANKL表达,来预防骨质疏松。     

骨形态发生蛋白-7调节肾病鼠Wnt1/β-catenin信号通路

目的观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对嘌呤霉素氨基核苷酸肾病(PAN)鼠肾小球Wnt/β-catenin表达的影响,探讨BMP-7的肾保护作用及可能机制。方法 20只嘌呤霉素氨基核苷酸诱导的大鼠随机分为PAN组和PAN+BMP-7组(BMP-7组),每组各10只。BMP-7组每周2次腹腔注射人重组BMP-7 30微克/(千克.次)。另设正常对照组(NC,n=10)。第12周检测尿液红细胞(UE)、24h尿蛋白(24h UP),血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cys C)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)。处死大鼠,反转录-聚合酶链反应检测Wnt1和β-catenin mRNA表达水平。Western blotting检测Wnt1和β-catenin蛋白表达水平。结果与NC组相比,PAN组UE、24h UP、Cys C、MIC、肾小球Wnt1和β-catenin mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高,差异具有显著的统计学意义(P均<0.01)。BMP-6组UE、24h UP、Cys C、MIF、肾小球Wnt1和β-catenin mRNA和蛋白质的表达较PAN组降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 BMP-7减轻尿液红细胞及尿蛋白的排泄,降低血清CysC、MIC水平,下调肾小球Wnt1/β-catenin信号通路的表达,减轻肾损伤。     

二至丸干预去卵巢骨质疏松大鼠骨重建的效应及机制

目的?明确二至丸对去卵巢骨质疏松大鼠骨重建的干预作用,并探究其作用机制。方法?采用卵巢切除术制备绝经后骨质疏松症动物模型,确认造模成功后,将60只模型大鼠随机分为模型组、阿仑磷酸钠组、氟化钠组、二至丸组、女贞子组、墨旱莲组等6组,另设假手术组10只。各组分别予:生理盐水（5?mL/kg）、阿仑磷酸钠（1?mg/kg）、氟化钠（5?mg/kg）、二至丸（2?g/kg）、女贞子（1?g/kg）、墨旱莲（1?g/kg）灌胃,1次/日,连续8周,假手术组给药与模型组相同。采用Micro-CT扫描大鼠股骨;双能Ｘ线吸收法测定模型股骨颈部位的骨密度（BMD）;椎体压缩法检测骨最大载荷量;ELISA法检测血清骨碱性磷酸酶（BALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、骨保护素（OPG）、β链蛋白（β-catenin）及趋化素（chemerin）;qPCR检测骨组织RANKL、OPG、β-catenin及chemerin基因表达。结果?二至丸、女贞子和墨旱莲可显著增加骨量,提升骨最大载荷量,并修复骨微结构。血清中,二至丸、女贞子和墨旱莲可明显降低TRACP-5b、RANKL、chemerin表达水平,并提升BALP、OPG、β-catenin表达水平。骨组织中,二至丸、女贞子和墨旱莲组明显抑制RANKL、chemerin mRNA表达,并促进OPG、β-catenin mRNA表达增加。结论?二至丸可有效改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨代谢异常,其作用机制与调控chemerin密切相关。      

针刺肾俞、足三里抑制大鼠绝经后骨质疏松症的机制研究*

目的探讨针刺肾俞足三里调节wnt/β-catenin通路抑制大鼠绝经后骨质疏松症（PMOP）的作用机制。方法将50只雌性SD大鼠随机分为空白组、假模型组、模型组、穴位组和非经非穴组。治疗组、非经非穴组每天针刺1次,留针30 min,10次为1个疗程,疗程间休息5 d,共针刺6个疗程后,X线检测股骨颈、股骨骨密度,比色法检测大鼠血清碱性磷酸酶（ALP）活性及RT-PCR法检测腰椎Wnt1,β-catenin,GSK-3β,Dsh,mRNA表达。结果与模型组、非经非穴组比较,实验组大鼠股骨颈骨密度明显升高,血清ALP活性明显降低,Wnt1、GSK-3β、Dsh的mRNA表达差异均有统计学意义（P<0.05）。结论针刺肾俞、足三里穴对绝经后骨质疏松症有明显抑制作用,其作用机制可能与调节Wnt/β-Catenin通路中信号分子表达有关。     

杜仲叶颗粒抗骨质疏松作用及其机制

目的：评价杜仲叶颗粒对去除卵巢致骨质疏松大鼠的作用,并初步探讨其作用机制。方法：SD大鼠行双侧卵巢切除术进行骨质疏松模型构建。手术一周后,以雌二醇片和杜仲叶颗粒连续灌胃给药12周,然后取大鼠股骨进行骨密度检测;取血清测定ALP活力和CTX-1含量;HE染色观察骨组织形态和骨丢失情况;采用定量PCR法测定胫骨组织中Wnt3a、β-catenin、DKK1的mRNA表达水平。结果：杜仲叶颗粒能显著升高骨密度,显著降低血清ALP和CTX-1含量,且能显著增加Wnt3a、β-catenin的mRNA表达水平,降低DKK1的mRNA表达水平。结论：杜仲叶颗粒具有明显的抗骨质疏松作用,其机制可能是通过激活wnt/β-catenin信号通路实现的。     

雌马酚对去卵巢后大鼠骨质疏松症的影响

目的观察雌马酚对去卵巢后大鼠骨质疏松症的作用。方法雌性SD大鼠去卵巢以建立骨质疏松症模型。健康3月龄雌性SD大鼠分为5组:假手术组(sham)、去卵巢组(ovarietomized,OVX)、OVX+雌马酚高剂量组[equol,Eq,0.5 mg/(kg·d)]、OVX+雌马酚低剂量组[equol,Eq,0.25 mg/(kg·d)]、OVX+雌二醇阳性对照组(estradiol,E2)。去卵巢8周后,按以上分组继续给药8周后取右侧股骨检测骨密度(bone mineral density,BMD),眼部取血检测血钙、血磷和骨钙素(bone gla protein,BGP)含量;ELISA检测血清雌激素(estrogen,ES)、成骨细胞护骨素(osteoprotegerin,OPG),破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)水平;qRT-PCR法检测OPG和RANKL mRNA的表达。结果 OVX组与sham组比较,ES值、BMD和血钙水平显著下降(P<0.05),分别为sham组的78.1%、84.4%和83.2%。同时,OVX组大鼠血磷和BGP含量明显升高(P<0.05),表明去卵巢后骨质疏松症模型造模成功;OVX组大鼠与sham组比较,OPG蛋白和OPG mRNA表达量显著下降,RANKL蛋白和RANKL mRNA表达量明显升高(P<0.05),而Eq和E2组处理后能显著增加OPG蛋白和OPG mRNA表达,下调RANKL蛋白和RANKL mRNA表达,同时提高OVX大鼠的BMD和血钙水平,降低血磷和BGP含量(P<0.05)。结论雌马酚能有效改善去卵巢后大鼠骨质疏松症,可能与其能上调OPG而抑制RANKL分泌有关。     

急性髓系白血病CDX2和β-catenin基因表达的相关性

目的研究急性髓系白血病（AML）患者CDX2与β-catenin基因表达的相关性。方法实时定量PCR方法检测92例初诊
AML、30例非恶性血液病患者（对照）CDX2及β-catenin mRNA表达,Western blot检测其中的26例AML、8例非恶性血液病患
者CDX2、β-catenin蛋白表达。结果AML组CDX2 mRNA和蛋白表达阳性率分别为84.78%和76.92%,对照组未检测到表达
（P<0.01）;β-catenin mRNA和蛋白在两组均表达,但AML组显著高于对照组（P<0.01）。CDX2、β-catenin mRNA表达均与初诊
时白细胞数、LDH水平呈正相关（P<0.01）。AML患者获得完全缓解时,CDX2 mRNA转阴、β-catenin mRNA表达显著下降,复
发时两者均增高。AML患者CDX2与β-catenin无论在mRNA和蛋白水平表达均呈显著正相关（P<0.01）。结论AML患者存
在CDX2基因过表达及Wnt/β-catenin信号通路激活,且CDX2与β-catenin表达呈显著正相关。
     

TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义

目的:探讨TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义。方法:采用免疫组织化学染色法(SP)检测卵巢良性组织、卵巢交界性肿瘤组织及卵巢癌组织中TCF4、β-catenin和E-cadherin分子的表达情况。结果:与卵巢良性组织比较,卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中TCF4、β-catenin阳性表达率和表达评分显著升高(P<0.05),而E-cadherin阳性表达和表达评分显著降低(P<0.05),与卵巢交界性肿瘤组织比较,卵巢癌组织TCF4、β-catenin阳性表达率和表达评分显著升高(P<0.05),而E-cadherin阳性表达和表达评分显著降低(P<0.05)。结论:TCF4、β-catenin和E-cadherin异常表达可能参与卵巢癌的发生、发展过程,对三者联合检测能够提高患者早期诊断及判断预后的重要指标。     

盘龙七片调节Wnt/β-catenin通路对大鼠胫骨骨折愈合的影响

目的 探讨盘龙七片对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及可能作用机制。方法 选用58只8周龄、SPF级SD雄性大鼠为实验大鼠,分为造模大鼠（n=48）与Sham组大鼠（n=10）。建立胫骨骨折模型大鼠,并将模型大鼠分为 Model组、盘龙七片组（Treat组）、β-catenin抑制剂组（XAV-939）及盘龙七片+β-catenin抑制剂组（Treat+XAV 939组）4组,每组10只。X光片观察大鼠胫骨骨折愈合状况;骨密度测定仪检测胫骨骨矿物质密度值（BMD）;HE染色观察大鼠骨折部位结构变化;酶联免疫吸附法检测血清中ALP、bFGF、TNF α、IL 1β;免疫印迹法检测骨组织中p 糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、Wnt3、β 链蛋白（β=Catenin）及淋巴增强因子1(LEF1)蛋白表达。结果 与Sham组相比,Model组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达降低,TNF α、IL 1β水平升高;与Model组相比,Treat组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β Catenin、LEF1蛋白表达升高,TNF α、IL 1β水平降低;Treat+XAV 939组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达高于XAV 939组,TNF α、IL 1β水平低于XAV 939组,差异有统计学意义（均P＜0.05）。 结论 盘龙七片可促进大鼠胫骨骨折愈合,其机制与抑制Wnt/β-catenin通路、缓解骨折大鼠机体炎症反应有关。