82例 HCV RNA 阳性血清聚合酶链反应产物的酶切分析

为了探讨广州地区ＨＣＶ感染的基因型，作者对广州地区不同人群中１０５例抗－ＨＣＶ阳性血清用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）进行了ＨＣＶＲＮＡ的检测，对其中８２例ＨＣＶＲＮＡ阳性患者血清做了ＰＣＲ产物的限制性内切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，结果显示：ＨＣＶⅡ型感染７８例（９２．１％），ＨＣＶⅢ型１例，ＨＣＶⅡ／Ⅲ型混合感染３例，４例ＨＣＶⅢ型感染均是肝病患者，初步表明广州地区ＨＣＶ感染大多数属Ⅱ型。     

丙型肝炎病毒基因分型及其临床意义

为了探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的基因型及其临床意义，本文对沈阳地区６１例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性血清的聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物，用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析进行基因分型，结果为：ＨＣＶⅡ型感染占７０．５％（４３／６１），ＨＣＶⅢ型感染占２７．９％（１７／６１），ＨＣＶⅡ／Ⅲ型混合感染占１．６％（１／６１）。初步证明沈阳地区ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主。对９１例肝癌病人中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的２７例血清基因分型，Ⅱ型占７４％（２０／２７），其余为Ⅲ型。可见ＨＣＶⅡ型感染与肝癌发生有密切关系。     

丙型肝炎病毒基因分型研究

采用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）法检测了泰安地区４６例输血后丙型肝炎（ＰＴＨ－Ｃ）患者的血清ＨＣＶ－ＲＮＡ〉对其中３４例生进物ＰＣＲ产物用限制性长度多生分析泊（ＲＦＬＰ）进行了ＨＣＶ基因分型。结果ＨＣＶ－Ⅱ型检出率为７３．５％，ＨＣＶ－Ⅲ型检出率为１１．８％；ＨＣＶⅡ／ＨＣＶⅢ型混合感染率为１４．７％，未发现Ⅰ、Ⅳ和Ⅴ型感染。     

山东地区输血后丙肝患者HGV感染状况及HGV部分核酸序列测定

应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测庚肝病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ,并对阳性扩增的产物采用ＰＣＲ片段直接克隆法测定。结果从８６例输血后丙型肝炎（ＰＴＨ－Ｃ）患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性者３１例（３６．０％）,其中１例ＨＧＶＮＳ５区部分核苷酸序列与美国原始株和另１例日本株核苷酸同源性比较分别为８６．０％和８４．０％。证实山东地区ＰＴＨ－Ｃ２存在着ＨＧＶ感染和ＨＧＶ／ＨＣＶ混合感染,但是否存在不同亚型或ＨＧＶＲＮＡ阳性     

HGV-RNA阳性与阴性慢性乙型肝炎患者的对比研究

目的 研究慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的意义。方法 ＲＴ＿ＰＣＲ法对１４６例ＣＨＢ患者血清进行了ＨＧＶ－ＲＮＡ检测,并将ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性患者进行临床与病理学对比。结果 ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性２３例（１５．７５％）。ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性２肝功能等生化指标水平,肝脏病理损害程度、ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率均无显著性差异。５例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性、１６例ＨＧＶ－ＲＮＡ阴性ＣＨＢ患     

HCV RNA链扩增反应（PCR）检测及其基因分型方法的建立

我们用选自ＨＣＶ５’ＮＣＲ和Ｃ区引物建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ及其基因型的ＲＴ／ＰＣＲ方法，可以敏感而特异地检出血清中ＨＣＶＲＮＡ及其４种基因型。５０例抗ＨＣＶ阳性献血员ＨＣＶＲＮＡ检出率为８４％（４２／５０），４２例ＨＣＶＲＮＡ阳性者中ＨＣＶⅡ型占５９．５％（２５／４２），Ｉ型和混合型（包括Ⅰ／Ⅱ、Ⅱ／Ⅲ、Ⅰ／Ⅲ和Ⅰ／Ⅱ／Ⅲ各２例）分别占１１．９％和１９％，另有４例Ｃ区分型结果阴性，为未定型，占９．５％，没有发现Ⅳ型。上述结果说明我国献血员中存在无症状ＨＣＶ携带者，ＨＣＶ基因型则以Ⅱ型为主，Ⅰ型次之，Ⅲ型较少。     

丙型病毒性肝炎患者外周血单核细胞中HCV—RNA的存在及其意义

作者用套式ＰＣＲ检测２５例丙型病毒性肝炎（丙肝）患者血清和外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ，结果显示血清阳性２１例，ＰＢＭＣ阳性１８例，表现在大部分丙肝患者ＰＢＭＣ中有ＨＣＶ－ＲＮＡ的存在。且急性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率明显低于慢性丙肝患者，提示ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ的存在可能与感染ＨＣＶ后的慢性化有关。     

逆转录—套式—聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞…

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５′－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清，癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链，用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ，结果发现，５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清，癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性，１例三者均阴性，１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性     

地高辛标记探针原位杂交检测肝组织中丙型肝炎病毒RNA

用地高辛标记ＨＣＶ５′－ＮＣ区ｃＤＮＡ探针原位杂交检测了２４例ＨＣＶ感染的慢性肝病患者肝组织中ＨＣＶＲＮＡ。结果：１７例同时血清抗ＨＣＶ（ⅡＥＬＩＳＡ法）和ＨＶＣＲＮＡ（套式ＰＣＲ法）均阳性病人中，１４例（８２．３％），肝组织检出了ＨＣＶＲＮＡ。７例仅有抗ＨＣＶ阳性病人，肝组织中没有检出ＨＣＶＲＮＡ。ＨＣＶＲＮＡ特异性信号主要位于肝细胞浆。感染ＨＣＶ的肝细胞呈散在，灶状或弥漫形式分布，与ＡＬＴ水平     

丙型肝炎病毒抗体检测的诊断价值

用国产第二代丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）检测试剂盒检测了２９６例临床血清标本以及２８例供血者血清标本。并用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了这些标本的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，以了解抗－ＨＣＶ检测对ＨＣＶ感染的诊断价值。同时探讨其在供血员筛选中的应用价值。结果在临床标本中，抗－ＨＣＶ阳性者有８１．１％ＨＣＶＲＮＡ阳性。抗－ＨＣＶ阴性者有２１．７％ＨＣＶＲＮＡ阳性。但是２８例抗－ＨＣＶ阴性的供血者ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。提示：抗－ＨＣＶ阳性对于ＨＣＶ感染的诊断价值很高。临床怀疑为ＨＣＶ感染而进行检测的血清标本即使抗－ＨＣＶ阴性，也不能除外ＨＣＶ感染。用抗－ＨＣＶ筛选供血者可能使供血中ＨＣＶＲＮＡ阳性率大大降低。     

肾移植患者丙型肝炎病毒感染的临床研究

目的：了解肾移植患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染情况及ＨＣＶ感染后的临床影响。 方法：对６７例肾移植患者进行至少１年的随访，用第二代ＥＬＩＳＡ法和Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ测定血清中抗ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ。 结果：抗ＨＣＶ的阳性率５０．７％（３４例），ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为４７．８％（３２例）。ＨＣＶ ＲＮＡ阳性组术前血透时间和输血量及丙氨酸转移酶（ＡＬＴ）水平明显高于ＨＣＶ ＲＮＡ阴性组，ＨＣＶ ＲＮ     

逆转录－套式－聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞癌的关系

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链；用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ。结果发现：５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性；１例三者均阴性；１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性的癌组织和癌旁组织均检出了ＨＣＶＲＮＡ负链，但血清中未检出负链。在２２例ＨＣＣ中１３例血清、８例癌组织和１５例癌旁组织中检出ＨＢＶＤＮＡ。５例有ＨＣＶＲＮＡ和／或抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者血清、和／或癌组织、和／或癌旁组织中均伴随ＨＢＶＤＮＡ和／或ＨＢ－ＶＭ阳性。提示ＨＣＶ可在癌旁肝细胞或肝癌细胞中感染并复制；ＨＢＶ感染与肝癌发生的关系比ＨＣＶ感染更密切。     

丙型肝炎病毒感染及其性传播途径的研究

目的 探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）经性传播的可能性和ＨＣＶ感染的危险因素。方法 采用ＥＩＡ－Ⅱ检测抗－ＨＣＶ阳性者及其配偶、性病门诊就医者、暗娼及嫖客及嫖客、ＨＩＶ『／ＡＤＩＳ患者的血清抗－ＨＣＶ,并用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测 述血标本的ＨＣＶ ＲＮＡ。另设抗－ＨＣＶ及ＨＣＶ ＲＮＡ阴性的健康者及其配偶（２０对）作为对照。结果 （１）８４例ＨＣＶ感染者及丙肝患者中ＨＣＦ ＲＮＡ阳     

三种提取丙型肝炎病毒RNA方法的定量比较

目前用ＲＴ—ＰＣＲ检测ＨＣＶ尚缺乏稳定理想的ＲＮＡ提取方祛,不同方法效果相差极大。我们利用荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ技术准确定量、易于判断ＲＮＡ提取效率的优点,建立了一种快速高效的血清ＲＮＡ提取方祛。 １．资料与方法：（１）血清：高病毒滴度的阳性血清由广州市血站购回,ＨＣＶ抗体阳性,并经荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测证实。阴性血清为健康人血清,ＨＣＶ抗体和ＨＣＶ荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ均为阴性。（２）检测ＨＣＶ的荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法：检测ＨＣＶ的荧光定量ＲＴ—ＰＣＲ试剂盒为我们中心生产的同一批号试剂,荧光定…     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

原发性肝癌患者血清中庚型肝炎病毒核酸的检测分析

为了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在原发性肝癌患者中的感染状况，本文对１４５例原发性肝癌患者血清进行了分析。应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术扩增庚型肝炎病毒基因，采用蛋白酶Ｋ裂解法提取血清中ＨＧＶ－ＲＮＡ，逆转录为ｃＤＮＡ后进行巢式扩增，获得２３８ｂｐ的特异性片段。用此方法对１４５例原发性肝癌（ＨＣＣ）患者血清标本进行检测，结果发现２１例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性（１４．５％），均为男性患者。     

Fc受体介导HCV跨膜研究系列报告:——丙型肝炎病毒感染孕妇羊水中HCVRNA定量检测及意义

检测丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)感染孕妇羊水中ＨＣＶＲＮＡ ,探讨ＨＣＶ母婴传播途径。应用荧光定量ＰＣＲ和逆转录套式ＰＣＲ(ＲＴ ｎＰＣＲ)技术检测孕妇血清和羊水标本。对ＨＣＶＲＮＡ阳性标本采用酶切分型检测 ,依据限制性片段长度多态 (ＲＦＬＰ)图谱判断ＨＣＶ基因型。结果表明 ,在 34例ＨＣＶ感染孕妇羊水中仅有 2例 ( 5.9% )检测出ＨＣＶＲＮＡ ,病毒滴度分别为 10 5、10 6拷贝 /ｍｌ;对照组 4 0例孕妇血清和羊水标本中均未检测出ＨＣＶＲＮＡ。 34例血清中ＨＣＶＲＮＡ阳性标本ＨＣＶ基因分型以Ⅱ型居多 (占 79.4 % )。羊水中ＨＣＶ…     

丙型肝炎病毒母婴传播的研究

目的研究丙型肝炎病毒母婴传播的可能性与机率。方法采用前瞻性研究方法，使用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ，用二代ＥＩＡ试剂检测抗－ＨＣＶ。结果１３例输血后丙型肝炎母亲和她们所生的１５例婴儿，婴儿ＨＣＶ感染率为８６．７％，其中临床型１例（７．７％），亚临床型ＨＣ３例（２３．１％），ＨＣＶ隐性感染９例（６９．２％）。抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性率均随年龄增长而降低，至３岁时分别为７．７％和１５．４％。结论感染ＨＣＶ母亲所生婴儿，ＨＣＶ感染率高，但转归较好。观察引产胎儿肝脏和血液发现，孕妇抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性所引产的胎儿血清和／或肝脏中抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＨＣＶ的母婴传播，主要发生于子宫内。     

多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感     

不同临床型HCV感染的基因分型与血清学分型研究

采用酶免疫（ＥＩＡ）和反转录聚合酶链反应９ＲＴ－ＰＣＲ）技术对不同临床型ＨＣＶ感染的血清标本进行ＨＣＶ分型，结果显示，各临床型ＨＣＶ感染的的型别构成无明显差异。主要为基因Ⅱ型（９３．７％）、少量基因Ⅲ型（２．７％）和Ⅱ＋Ⅲ混合型（３．６％）未见基因Ⅰ、Ⅳ、菲分型一血清学分型总符合率为９７．９６％，血清学分型率与ＨＣＶ抗－ＣＳ／Ｃ 正相关；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者９３．７５％可基因分型，但仅有５２．０８