富含血小板血浆法和白膜回浆法制备浓缩血小板比较

目前，浓缩血小板广泛应用于出血性疾病和肿瘤治疗及心脏外科病人，血小板浓缩液（PC）中的血小板质量对于临床治疗效果十分重要。1996～1997年，笔者采用了富含血小板血浆法（PRP－PC法）和白膜回浆法（BC－PC法）所制备的浓缩血小板分别是780u和850u，现就两种制作方法进行比较。1材料和方法1．1材料：大容量低温冷冻离心机（美国贝克曼J6－HC）、密闭采用连袋（由上海市血液中心生产）。1．2制备方法1．2．1PRP－PC法：（1）采用采集后4～6小时内的全血（内含ACD保养液）。全血采集要求一针见血，血流呈一直线，采4O0ml全血应…     

普通血袋常温保存分离后富含血小板血浆24 h再制备浓缩血小板的质量观察

目的探讨普通血袋常温分离富含血小板血浆(PRP)后保存24 h再制备的浓缩血小板(PC)质量。方法将采集的400 mL全血50袋,保存在20-24℃的恒温保存箱内,采集后4 h经1次轻离心分离出PRP,容量(200±10)mL/份,再每份均分成2袋存放于普通血袋中,分别标识为实验组:将PRP放置20-24℃的恒温保存箱内过夜,次日2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,24 h完成制备;对照组:将PRP立即2次重离心,分出上清血浆,制备成PC,从全血采集时间算起,6 h完成制备。采集后24和48 h,分别检测2组PC中血小板、红细胞含量和pH值。结果 2组PC中红细胞混入量和pH值差异甚小(P0.05),实验组与对照组血小板含量(×1010/袋)分别为1.36±0.33和2.63±0.46(P0.05);对照组3项指标均合格,实验组只有红细胞混入量与pH值合格。结论分离PRP后,在普通血袋常温保存24 h再制备浓缩血小板,质量达不到《全血与成分血质量要求》。     

用制备血小板的全血作细菌混合培养

背景 BacT／ALERT系统对机器单采血小板（PLTs）和全血血沉棕黄层法制备的PLTs的细菌检测效率很高。全血富含血小板血浆（PRP）制备的PLTs细菌污染的检测则存在一些问题，包括加拿大和美国的一些国家不容许在保存前汇集这些PLTs，单个单位培养不仅昂贵，而且会显著减少血小板的含量。     

以海藻糖为添加剂冷藏保存血小板悬液的研究

本研究探讨以海藻糖(trehalose)为添加剂的血小板悬液冷藏保存方法。采用核素标记法检测血小板生存时间,用比浊法测定血小板聚集率,诱导剂为终浓度11.2μmol/L的ADP。采集兔心脏血,按常规方法制备浓缩血小板悬液(PCs),在悬液中加入50mg/ml的海藻糖,37℃水浴4小时后,放于4-8℃冰箱保存,冷藏12天后,测定血小板聚集功能和输入自身体内后的生存时间。结果表明:常温和冷藏储存24小时后的PC血小板聚集率分别为(75.3±9.8)%和(80.5±12.5)%;输入兔体内24、48和72小时时的血小板存活率分别为(78.1±7.9)%、(65.4±6.7)%、(57.5±7.2)%和(5.1±2.5)%、(2.8±2.0)%、(0.9±0.8)%。加入海藻糖的PC冷藏保存12天后,血小板聚集率为(77.8±9.5)%;输入体内24、48和72小时时的血小板存活率分别为(75.7±11.0)%、(67.0±8.5)%、(56.8±8.0)%,与常温保存24小时对照相比,两者相近,P值均>0.05。结论:海藻糖能保护冷藏储存的兔血小板,延长冷藏血小板在体内的生存时间,经海藻糖冷藏储存的兔血小板功能完好。     

输血研究动态——全血制备的血小板混合保存的效果

背景保存前混合全血制备的血小板可简化细菌学检测。本研究用输注保存5天的混合血小板后，18h到24h的校正血小板计数增值（CCI）来评估血小板在体内的效果。研究设计与方法运用一随机区组设计，选人接受研究的患者有化疗诱导血小板减少症，可能需要至少输注6单位血小板的患者。每区组含两种输注方案，一是血小板分别保存，输注前混合；另一种是在保存前混合。用配对记分检验分析输注后18h到24h的CCI，将结果分为成功（〉4．5）或失败（≤4．5）。用混合效果的线性模型评价两种保存方法的均差。     

浓缩血小板的应用现状与进展

浓缩血小板（PC）的制备方法有富含血小板血浆（PRP）法、白膜层（BC）法和单采PC。我国临床应用的主要是单采PC，手工采集全血制备的PC在临床应用中占的比例很小。而国外尤其是欧美国家BC法制备的血小板添加液（PAS）汇集血小板（PAS汇集BC-PC）在临床应用中占有很大比例，而且还有增长趋势。我们就汇集BC-PC的起源及发展、国内外应用现状、具有的优势及发展前景介绍如下。     

急性血小板分离制备心脏手术患者富血小板血浆的质量分析

为评价心脏直视手术患者急性血小板分离制备的富血小板血浆（platelet—richplasma,PRP）的效率和效果,对PRP质量进行了分析。20例ASAⅡ—Ⅲ级择期心脏手术患者在麻醉诱导后进行全血采集和血小板分离。分别测定分离前（T1）的全血,分离后（T2）的PRP和回输前（T3）的PRP中的血小板数（Plt）、血小板平均体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、血浆内pH、血浆乳酸（IA）浓度和乳酸脱氢酶（LDH）浓度、细菌培养结果、血小板CD62p和PAC-1阳性率以及ADP激活后的CD62p和PAC-1阳性率。结果表明：与全血相比,分离后的PRP中的血小板计数为（783±184）×10^9／L,MPV、PDW和pH值显著降低（P〈0．01）,LA、LDH浓度及CD62p和PAc-1阳性率无明显变化;回输前PRP血小板计数为（765±167）×10^9／L,MPV、PDw和pH值与T1相比显著降低（P〈0．01）,而LDH浓度、CD62p和PAC-1阳性率与T1和T2比较显著增高（P〈0．05或P〈0．01）;ADP激活后的CD62p和PAC-1阳性率各阶段无明显差异。结论：本研究所采取的方法可在术前高效分离心脏手术患者的血小板,而且不引起血小板活化;PRP在术中振荡保存后有部分血小板出现活化,但血小板整体活化功能无明显改变。     

用CPD-ADSOL保养液采集全血放置8小时后制备的红细胞和血浆中FⅧ的体内外性质

全血在室温下放置时间从6小时延长到8小时,对于制备浓缩血小板来说可以有更多的机动性,本文通过一组配对试验评价用CPD-ADSOL采集全血放置不同时间后制备的保存红细胞和血浆的特性。采集每个供者1单位全血(450±45ml),分二种情况制备红细胞和血浆,一种是全血放置6小时后制备,另一种放置8小时,比较保存42天后自体红细胞还输24小时的存活率。试验分别由A、B两个实验室进行,A用~(99m)Tc-~(51)Cr技术,得出放置6小     

不同方法制备浓缩血小板保存过程中细胞因子含量的检测

目的 研究不同方法制备的浓缩血小板在保存过程中细胞因子含量的变化。方法 应用PRP法、BC法及SD法制备浓缩血小板，并于常规条件下保存，间隔取样检测保存期内细胞因子如IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等的含量。结果 浓缩血小板在保存期内随保存时间的延长，细胞因子含量升高，且浓缩血小板中细胞因子含量与其中混杂的白细胞数直接相关。结论 细胞因子在非溶血性发热输血反应发生中可能起协同作用。     

不同常规保存血小板冰冻保存效果研究

目的了解常规保存不同时间的机采血小板冰冻前后质量指标变化及输注疗效，探讨血小板冰冻处理前常规保存调控的最佳方案。方法对120袋机采血小板随机分成6组，在（22±2）℃平床振荡条件下，分别保存0、1、2、3、4、5d然后制备冰冻血小板，并对血小板冰冻前与复温后分别计数血小板，检测pH值，跟踪调查输注冰冻血小板的患者，计算回收率。结果有效期内（22±2）℃振荡保存的血小板产品中血小板计数无显著性差异，pH值下降明显；冰冻前后血小板计数有显著性差异，pH值无差异。保存3d内的血小板冰冻后血小板的输注回收率无差异，与保存4d、5d的血小板冰冻后的回收率有显著差异。结论（22±2）℃振荡保存3d内的血小板可以制备冰冻血小板，保存4-5d的血小板可以输注但不宜制备冰冻血小板。     

一种用国产设备和血袋制备血小板浓缩液的新方法

<正> 血小板输注在近10年来有了较大的发展,我国通常采用制备浓缩血小板(PC)的方法是先用全血制备富含血小板血浆(PRP),然后用PRP经重离心制备PC,这种PC制成时血小板沉积于袋底即压积血小板浓缩液(PPC),需静置1～2小时后方可混匀使用。曾有报道,PPC与PRP中的血小板比较,显示异常的聚集和分泌反应,提示离心后沉积的血小板可以引起血小板体外功能的降低。为此,近     

人富血小板血浆试管法人工制备及保存的研究进展

富血小板血浆(Platelet-rich Plasma,PRP)作为一种含高浓度血小板的浓缩物由来已久,其在促进细胞增殖、加快愈合等方面具有重要作用,近年来已在临床众多领域广泛应用。同时,PRP也作为一种面部年轻化的治疗手段,开始越来越多的应用到医疗美容领域。目前国内常用的PRP制备方法为试管手工法。但是在此法制备过程中多种因素影响其最终的质量和产量。同时,PRP在临床中多即采即用,目前缺少统一的储存标准,而组织修复通常需长期多次应用PRP。因此,本文就近年来PRP的试管手工制备法及保存进行综述,期望为其规范化制备及保存提供参考。     

富含血小板血浆制备过程中血小板CD62p表达

为了探讨大批量制备冰冻保存富含血小板血浆（Cryo-PRP)全过程中影响血小板质量变化的因素，以优化Cryo-PRP制作过程，提高Cryo-PRP质量，采用流式细胞术测定Cryo-PRP全过程中血小板膜表面CD62p表达。冰冻保存血小板全过程包括血液采集，离心制备，添加DMSO，－80℃冰箱保存和38℃水浴解冻，结果表明，在血液采集、离心制备，添加DMSO过程中血小板膜CD62p阳性率有一个突然的升高，其幅度约占整个过程的82％，对血小板的损害较大，结论：在Cryo-PRP的制备过程中，血小板的离心制备和DMSO的添加方式均可以得到良好的优化的优化，而对冰冻富含血小板血浆的质量影响也易于控制，但冰冻保存的损害较大，且不可避免，因此，迫切需要一种新型的血小板冰冻保护液和改进冰冻保存方法，以冰冻损害，进一步提高冰冻血小板质量。     

血小板保存对P—选择素的影响

我们对浓缩血小板保存过程对血小板膜表面 P选择素 ( P- selectin)分子数及血浆 P-选择素 ( SP-selectin)的含量进行动态观察 ,并对不同性别供血者的血小板激活差异进行比较。材料和方法一、浓缩血小板制备　采用富含血小板血浆( PRP)法 ,并将制备的浓缩血小板按供血者性别进行了分组。所选择的男女供血者在年龄及浓缩血小板中的血小板计数等均无统计学差异。浓缩血小板制备后于血小板保存箱内 2 2℃振荡保存 ,并分别于保存 0 ,1 ,3,5d后取样待检。二、血小板表面 P-选择素分子数测定　采用12 5I标记的单克隆抗体 SZ51 (苏州医学院血栓…     

手工汇集滤白浓缩血小板HSR变化情况

HSR是反映血小板功能的重要指标^[1-3],笔者采用分光光度计法测定HSR,采用富血小板血浆（PRP）法制备浓缩血小板（PC）,并汇集和过滤去除白细胞,在（22±2）℃震荡保存,分别在过滤前、过滤后和保存5d的不同时段进行了HSR测定,用以评价滤器及保存时间对血小板功能的影响程度。     

-80℃保存机采浓缩血小板的临床应用

血小板的体外保存始终是输血医学的一道难题。浓缩血小板在22℃恒温条件下,用振荡或旋转式保存的最长保存期不超过5天。另外血小板保存严格的温、湿度条件也是细菌繁殖的最适条件,易发生污染而导致严重输注事故的发生。因此,许多血站均采用临床需要时临时制备的方式,向临床提供血小板。然而血小板无论是手工分离还是机器采集,整个程序从预约献血员、体检、两次化验到采集制备,通常需要6～8小时。     

全血保存24小时对血浆凝集因子的影响

背景 目前需要在全血采集后8小时内制备新鲜冰冻血浆,这是为了保持凝集因子活性。然而,这使大型血液中心制备新鲜冰冻血浆受到限制。有关CPD全血保存24小时影响凝血因子活性的资料不多。研究设计与方法 10名自愿供者每人采集全血500ml。在采集后1小时,离心分离血浆,并将每单位血浆等分为2份,1份在4℃(范围,1～6℃)保存,另1份22℃(范围:20～24℃)保存8小时。16小时后全在4℃保存。在采血后8小时、24小时,从每份血浆中取标本。所有血浆标本均置-18℃冰冻保存。检测因子Ⅴ、因子Ⅶ、因子Ⅷ及因子Ⅹ、纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ、蛋白质C和蛋白S。结果 在保存的24小时,因子V、因子Ⅶ及因子Ⅹ、纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ、     

优化流式细胞术测定保存血小板CD62p表达

CD62p阳性率是保存血小板质量监测的重要指标之一。为在静脉全血内血小板CD62p测定方法的基础上优化建立流式细胞术(FCM)测定保存血小板表达CD62p的方法，在血小板检测标本内加入0．1mmol/L潘生丁稳定血小板；对TBS溶液进行了改良，添加了1．1mmol/L的EDTA和100μmol/L潘生丁，用以代替PBS；采用新鲜富含血小板血浆(FPRP)制备的阴、阳性对照；进行方法学评价。结果表明：加入0．1mmol/L潘生丁和1．1mmol/L的EDTA可以有效防止实验过程中的血小板人为激活；采用新鲜富含血小板血浆(FPRP)制备的阴、阳性对照既可优化FCM分析方法，还可用于检验所购荧光抗体的质量，保证实验结果的有效性。采用泛血小板特异性标志物CD61可灵敏特异地识别血小板，提高了实验抗干扰能力。制备保存血小板时采用的是专用大号采血针，抽血流畅，对血小板CD62p表达测定人为影响很小，明显优于用注射器采集患静脉全血的做法。CD62p测定灵敏度可达1％，制备的标本可稳定48小时。结论：利用该流式细胞术可以灵敏而特异地测定保存血小板的CD62P表达率；该方法简便易行，提高了结果的准确性，具有良好的稳定性和重复性。     

4℃保存过夜全血制备FFP的质量

背景此研究的目的是评估4℃保存过夜全血制备FFP的质量是否能满足预期的要求。研究设计与方法比较60份4℃保存过夜去白细胞（LD）全血制备的FFP（采血后18小时～24小时，1日FFP）与采血后8小时内LD全血制备的FFP（0日FFP，当前标准方法）的质量。结果95％以上的1日FFP单位中，FⅡ、FⅤ、FⅦ、FⅧ、FⅨ、FⅩ、FⅪ和FⅫ因子浓度高于0．50U／ml；92％和87％的FFP单位的VWF抗原和FⅧ因子含量高于0．50IU／ml。     

全血于22℃保存24h分离制备悬浮红细胞及浓缩血小板的质量评价

目的 评价全血于22℃保存24 h分离制备悬浮红细胞及浓缩血小板的质量.方法 采用简单随机抽样法选择2014年5月至2015年2月广东省茂名市中心血站招募的60例献血者为研究对象.研究对象纳入标准:所有献血者献血前体检及相关血液学检查结果符合《献血者健康检查要求》(GB18467-2011)的相关规定.将60例献血者随机分为2组,每组各30例.两组献血者均分别采用五联采血袋采集全血各400mL,共计60袋全血.研究组献血者全血置于22℃保存和运输,并于采血后24 h制备悬浮红细胞和浓缩血小板.对照组献血者全血于22℃保存和运输,并于采血后8h内制备悬浮红细胞和浓缩血小板.两组献血者全血均采用白膜法制备悬浮红细胞和浓缩血小板.悬浮红细胞4℃保存至储存期末(制备后35 d),采用Bact/ALERT全自动微生物检测系统对其进行无菌试验;并比较两组悬浮红细胞的红细胞计数、血细胞比容(HCT)、血红蛋白(Hb)水平、游离血红蛋白(FHb)水平、储存期末溶血率,以及K+、Na+、C1-浓度.浓缩血小板22℃保存至储存期末(制备后5 d),采用Bact/ALERT全自动微生物检测系统对其进行无菌试验;并比较两组浓缩血小板的血小板含量、红细胞混入量、FHb水平、储存期末pH值、黏附率、聚集率及K+、Na+、C1浓度.结果 ①研究组与对照组悬浮红细胞储存35 d后,均无细菌生长;两组浓缩血小板储存5d后,均无细菌生长;②研究组与对照组悬浮红细胞储存35 d后,其血细胞比容(HCT)、血红蛋白(Hb)水平、储存期末溶血率均符合《全血及成分血质量要求》(GB18469-2012)的相关规定;两组悬浮红细胞的红细胞计数、HCT、Hb水平、FHb水平、储存期末溶血率及K+、Na+、Cl-浓度比较,差异均无统计学意义(t=0.55、0.51、1.18、0.48、0.72、2.86、2.07、2.40,P＞0.05);③两组浓缩血小板储存5d后,其血小板含量、红细胞混入量、储存期末pH值均符合《全血及成分血质量要求》(GB18469-2012)的相关规定;两组浓缩血小板的血小板含量、红细胞混入量、FHb水平、血小板黏附率、血小板聚集率,储存期末pH值,以及K+、Na+、Cl-浓度比较,差异均无统计学意义(t=0.17、0.16、0.56、2.43、0.36、2.50、1.85、1.75、0.32,P＞0.05).结论 22℃保存24 h制备的悬浮红细胞、浓缩血小板的质量符合国家标准,全血22℃保存过夜分离制备悬浮红细胞、浓缩血小板的方法可行.