应用SELDI-TOF-MS技术筛选肝癌血清蛋白标记物

目的 运用表面增强激光解吸附/离子化时间飞行质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测肝癌患者血清蛋白质的特异性生物标志,建立筛选血清蛋白质图谱模型并初步验证.方法 选择肝癌患者30例,HBV阳性携带者20例及正常人20例,应用SELDI-TOF-MS技术及相应的计算机软件进行比较分析,检测肝癌血清蛋白质的特异性生物标志,建立肝癌的筛选模型,并对其进行了双盲法验证.结果 肝癌组与对照组共有25个蛋白质差异有显著性,以其中5个蛋白标志物(6 888、13 764、6 487、3 450和6 814 Da)建立的筛选模型检测灵敏度为96.7％( 29/30),特异性为90.0％(36/40),盲法验证,灵敏度为95.5％(21/22),特异性为90％(27/30).结论 SELDI-TOF-MS技术具有高灵敏度和特异性,在肝癌的诊断及肿瘤特异性生物标志的筛选等方面具有一定价值.     

应用SELDI-TOF-MS技术建立鼻咽癌诊断中的血清蛋白质指纹图谱模型

目的:检测鼻咽癌、耳鼻部良性疾病和正常人血清中蛋白质指纹图谱,筛选特异的蛋白质标志物,构建用于鼻咽癌诊断的分类树模型.方法:采用CM10芯片及SELDI-TOF-MS技术对30例鼻咽癌患者及24例对照组血清样本进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析并建立用于鼻咽癌诊断的分类树模型,并用其余10例鼻咽癌患者和12例对照组标本进行双盲验证.同时用酶联免疫法(ELISA)检测两组的血清EB病毒VCA-IgA抗体,将诊断模型的判定结果通过与血清EB病毒VCA-IgA抗体检测结果相对比验证其对于临床的应用价值.结果:从两组血清中筛选出Mr为8559,15 115,15 836,15 937,16 089的5个差别有统计学意义(P<0.05)的标志蛋白,所建立的诊断模型对鼻咽癌诊断的准确率、灵敏度和特异度分别为98.1%(53/54),96.7%(29/30)和100%(24/24).双盲验证后的准确率、灵敏度和特异度分别86.4%(19/22),80.0%(8/10),和91.7%(11/12).灵敏度优于血清EB病毒VC...     

血清蛋白指纹图谱技术筛查前列腺癌患者特异性血清标志物的应用价值

目的 应用蛋白指纹图谱技术筛查前列腺癌患者血清蛋白质表达谱,寻找血清中的特异性标志物.方法 选择前列腺癌患者22例和前列腺增生患者26例以及同期正常对照者25例,用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术检测各血清样本的血清蛋白指纹图谱,比较血清蛋白指纹图谱的差异.结果 前列腺癌组的血清蛋白质谱图中质荷比为3 165、3 982、4 291的蛋白质相对含量(9.794±4.449、3.968±2.247、11.020±6.069)高于正常对照组(5.062±2.245、1.823±1.432、6.525±5.270),而质荷比为2 747、10 268的蛋白质相对含量(22.390±12.179、0.953±0.338)低于正常对照组(42.231±16.970、1.932±0.864);质荷比为10 268的蛋白质的相对含量前列腺癌组(0.953±0.338)低于前列腺增生组(1.314±0.493),差异均有统计学意义(均P<0.05).但前列腺增生组与正常对照组差异均无统计学意义(均P >0.05).PSA阳性的前列腺癌组质荷比为3 960的蛋白质相对含量(3.447±1.434)高于PSA阳性的前列腺增生组(1.473±0.971),而PSA阳性的前列腺癌组质荷比为10 268的蛋白质相对含量(0.847±0.408)低于PSA阳性的前列腺增生组(1.538±0.182),差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 血清蛋白质谱图存在差异的6个不同质荷比蛋白质组成的蛋白质组有可能成为前列腺癌筛查的血清标志物.质荷比为10268Da的蛋白指纹峰有助于区分前列腺癌患者与前列腺增生患者和正常人群.     

SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术建立胃癌血清特异性标志物诊断分类树研究

目的:观察胃癌手术前后血清蛋白质谱的变化,筛选能够快速诊断胃癌的特异性标志物。方法:采用IMAC#3蛋白质芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术,对46例胃癌患者和40例正常人的血清蛋白质谱进行分析。结果:胃癌术前血清与正常人血清蛋白质谱有14个蛋白质表达量有明显差异。以热休克蛋白27、葡萄糖调节蛋白、抑制素、蛋白质二硫化物异构酶A 3这4个蛋白质所组成的模板,可将胃癌与正常人正确分组,利用该模板建立胃癌诊断的分类树模型用于诊断胃癌的灵敏度95.7%,特异性92.5%,术后血清蛋白质谱中,原表达上调的蛋白质明显下调。结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术为建立蛋白质模板用以诊断胃癌提供了可靠的技术平台。     

表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术筛选蕈样肉芽肿血清生物标志物

目的 应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛选蕈样肉芽肿患者血清中的生物标志物.方法 采用CM10蛋白质芯片捕获14例蕈样肉芽肿患者(研究组)和17例对照者(对照组)血清中的蛋白质,结合BiomarkerWizard软件进行分析.结果 所有标本在相对分子质量0～50000范围内均能检测出131个左右的蛋白峰.两组血清样本的蛋白质指纹图谱存在14个差异表达蛋白质峰,其中相对分子质量为7670的蛋白质峰与C-C基序趋化因子22相符.结论 SELDI-TOF-MS可用于蕈样肉芽肿患者血清生物标志物的筛选.     

SELDI-TOF-MS技术在筛选肝癌患者血清标记物中的应用

目的:筛选肝癌患者血清中特异标记物.方法:利用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及其配套蛋白质芯片,对33例肝癌患者、33例正常人和17例慢性肝病患者的血清蛋白质图谱进行检测,结合Biomarker Patterns Software(BPS)建立诊断模型.结果:肝癌患者与正常人和慢性肝病患者血清蛋白质图谱在相对分子质量为2 000～50 000范围内,有73个蛋白质峰差异有统计学意义(P＜0.05).经软件分析,建立由相对分子质量为4 177和7 789的标记蛋白组成的肝癌诊断模型,其诊断肝癌灵敏度为81.8%(27/33),特异度为80%(40/50).结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便易行、用量少和高通量分析方法,不仅能直接筛选出肝癌患者血清中相对特异的潜在标记物,而且具有较好的临床应用价值.     

SELDI-TOF质谱技术分析乳腺癌血清蛋白质谱的变化

目的 研究乳腺癌患者血清蛋白质的变化,建立灵敏度和特异度高的乳腺癌诊断模型.方法 利用SELDI-TOFMS技术对194例乳腺癌患者和60例正常人血清蛋白质分别进行检测,IMAC30芯片结合蛋白质后,用蛋白芯片仪读取数据,分析得到区分乳腺癌患者和正常人的树状分类规则,并构建诊断模型.结果 M11368、M7768、M2943等3个蛋白质组成的模型1可将2组准确分组,灵敏度和特异度分别为94.8%(184/194)和96.7%(58/60);以M11368蛋白质单独组成诊断模型2进行区分,灵敏度和特异度分别为89.69%(174/194)和93.33%(56/60).结论 SELDI-TOFMS技术可以应用于乳腺癌的诊断.     

两种蛋白芯片筛选血清蛋白标志物的对比分析

目的从CM10、IMAC3-Cu这两种芯片中选择适合应用于血清蛋白质指纹图谱研究的芯片种类。方法选择慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康人血清各13例,采用CM10、IMAC3-Cu两种蛋白芯片,经SELDI-TOF-MS技术对样本进行检测比较。结果在2000-50000Da范围内,CM10和I-MAC3-Cu芯片在各实验组捕获的有效蛋白峰数的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论CM10能得到更多慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康人的有意义的蛋白峰值,能更好的应用于血清蛋白组学的实验研究。     

血清蛋白指纹图谱筛选食管鳞癌特异相关性蛋白与临床病理因素关系分析

目的应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测食管鳞状细胞癌患者血清蛋白指纹图谱,分析特异相关性蛋白与临床病理因素的关系。方法 144例经手术后病理证实的食管鳞状细胞癌患者,用弱阳离子交换芯片(WCX2)检测各血清标本获得血清蛋白指纹图谱,用Biomarker Wizard筛选差异峰;比较不同年龄、临床分期、淋巴结转移及食管外膜侵犯各组差异有统计学意义的蛋白峰。结果年龄40～60岁(77例)和>60岁(67例)患者表达的蛋白差异峰差异无统计学意义(>0.05)。28例I期与51例III期患者比较发现10个差异峰差异有统计学意义(<0.05);28例I期与6例IV期患者比较发现1个差异峰差异有统计学意义(<0.05)。而28例I期与59例II期患者比较,未发现差异峰差异有统计学意义(>0.05)。69例淋巴结转移和75例无淋巴结转移患者比较,发现5个差异峰差异有统计学意义(<0.05)。53例无外膜浸润和91例有外膜浸润患者比较,发现有9个差异峰差异有统计学意义(<0.05)。结论应用SELDI-TOF-MS技术检测分析食管鳞状细胞癌患者血清蛋白指纹图谱,对个体化治疗、预后判断有一定的预测提示作用。     

应用SELDI-TOF-MS技术研究急性胰腺炎特异性血清标志物

目的 应用蛋白芯片表面加强激光解析电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）术揭示胰腺炎患者血清蛋白指纹特征,查找病情特异性血清标志物,探讨急性重症胰腺炎的早期诊断及评估的新方法.方法 收集急性胰腺炎患者血清标本52份,其中急性重症胰腺炎患者24份（SAP组）,急性轻型胰腺炎28份（MAP组）,同期健康人群血清52份（正常对照组）,应用SELDI检测急性胰腺炎患者及健康人群的蛋白质谱,按照临床胰腺炎分级,获得不同临床级别胰腺炎和健康人群的血清蛋白指纹图谱,应用计算机软件分析处理所有峰谱.结果 在质荷比（M/Z）1 000~20 000检出到127个蛋白峰,其中MAP组与正常对照组比较5个峰差异有明显统计学意义（P＜0.05）,MAP组与SAP组比较3个峰值差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 用SELDI-TOF-MS蛋白指纹图谱技术可筛选出有意义的生物标记差异蛋白,这对急性胰腺炎的诊断以及病情轻重的评估提供了新的路径.     

SARS并发肺纤维化和骨缺血性坏死患者血清生物标志物的检测

【目的】检测SARS并发肺纤维化和骨缺血性坏死患者血清生物标志物。【方法】利用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(Surface Enhanced Laser Desorption Ionization-Time Of Flight-Mass Spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术研究SARS康复人员的血清蛋白质组学变化,用Ciphergen ProteinChip软件和BioMarker Wizard软件分析蛋白质组数据。【结果】SARS并发肺纤维化和骨缺血性坏死的康复人员血清中有3个特异性分子稳定上调,质荷比(M/Z)分别为5 023、8 606和10 641。与正常人血清蛋白质谱相比,SARS人群3个差异性蛋白质相对含量较高(P=0.02)。【结论】SARS并发肺纤维化和骨缺血性坏死患者可能存在血清生物标志物。     

表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱在甲状腺癌诊断及临床分期中的应用

目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型.方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标本的蛋白质质谱,其中甲状腺癌 40 例(Ⅰ-Ⅱ期 26 例,Ⅲ-Ⅳ期14 例),正常人32例.应用支持向量机和判别分析的方法分析质谱数据,建立甲状腺癌诊断模型并留一法交叉验证.结果:区分甲状腺癌和正常人的诊断模型交叉检验敏感性为100%,特异性为86%,总的符合率为93%;区分Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型对Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌检出的敏感性为77%,特异性为86%,对Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌检出的敏感性为86%,特异性为77%,总的符合率为80%.结论:应用SELDI-TOF-MS技术平台和生物信息技术建立的诊断模型为甲状腺癌的早期诊断及临床分期提供了新的手段.     

细菌感染性疾病患者血清降钙素和C反应蛋白水平变化的观察

目的探讨细菌感染性疾病患者血清降钙素和C反应蛋白水平变化情况。方法选取细菌感染性疾病患者107例及同期非细菌感染性疾病患者104例分别作为观察组和对照组。对两组患者血清降钙素水平和C反应蛋白水平进行检测并分析。结果观察组PCT平均水平以及检测阳性率明显均高于对照组;观察组CRP平均水平明显高于对照组。组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。两组患者CRP检测阳性率差别不大,无统计学意义（P〉0.05）。CRP检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值以及诊断符合率均明显低于PCT,两种检查比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论通过监测患者的血清PCT水平观察患者细菌感染情况,具有较好的特异性,对临床诊治有一定意义。     

血浆C反应蛋白与颈动脉粥样硬化的相关性

目的:探讨血浆C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平变化与颈动脉粥样硬化病变程度之间的相互关系。方法:检测186例患者的血清CRP水平,同时行颈动脉超声多普勒检查,根据颈动脉检查的结果分6组,比较不同组间血清的CRP结果,进行统计学分析。结果:各组间血CRP水平分别为:颈动脉重度狭窄组(7.31±3.32)mg/L、颈动脉中度狭窄组(5.16±2.94)mg/L、颈动脉轻度狭窄组(3.78±2.47)mg/L、颈动脉内膜斑块形成组(2.67±2.06)mg/L、颈动脉内膜增厚组(2.03±1.85)mg/L和颈动脉内膜正常组(1.79±1.63)mg/L。颈动脉中度狭窄组和颈动脉重度狭窄组与其余各组比较,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.001),颈动脉轻度狭窄组和颈动脉内膜正常组及颈动脉内膜增厚组比较差异有显著性意义(P<0.001),余组间比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:血浆CRP水平与颈动脉粥样硬化病变程度关系密切,对预防心,脑血管等疾病有重要的临床价值。     

血清降钙素原和C-反应蛋白在评价老年肺炎病情严重程度及预后中的价值探讨

目的探讨血清降钙素原和C-反应蛋白在老年肺炎病情严重程度及预后的临床价值。方法收集2010年5月-2012年5月在新疆维吾尔自治区人民医院接受治疗的社区获得性老年肺炎患者60例,按其严重程度分为A、B、C、三组。同时随机选取同一时期在新疆维吾尔自治区人民医院体检健康者20例作为对照组。比较各组患者血清血清降钙素原和C-反应蛋白水平的变化。结果 A、B、C组患者血清降钙素原水平和血清C-反应蛋白水平明显高于正常组,且C组血清降钙素原、C-反应蛋白水平均高于A、B组,比较差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论肺炎病情越重的患者,其血清降钙素原和C-反应蛋白浓度越高,检测血清降钙素原、C-反应蛋白可有助于临床判断肺炎的严重程度。     

C反应蛋白和血清肌酸激酶水平对重度脓毒症患者预后评估的临床意义

目的:探讨C反应蛋白、血清肌酸激酶水平的变化对重度脓毒症患者病情的判断及预后的意义。方法:测定226例重度脓毒症患者确诊后第1天及第7天的C反应蛋白、血清肌酸激酶水平和A-PACHEⅡ评分,按照预后分死亡组和存活组,采用t检验分析比较两组上述指标的变化。并做A-PACHEⅡ评分和C反应蛋白、血清肌酸激酶的相关性分析。结果:死亡组C反应蛋白、血清肌酸激酶水平明显高于存活组(P<0.05);C反应蛋白、血清肌酸激酶与APACHEⅡ评分呈正相关。结论:C反应蛋白、血清肌酸激酶水平的监测对重度脓毒症患者预后的判断有指导意义。     

母血及脐血中血清蛋白指标水平与胎儿宫内生长受限的关系

目的探讨母血及脐血中血清蛋白指标水平与胎儿宫内生长受限的关系。方法选择门诊及病房收治的胎儿宫内生长受限产妇30例为观察组,胎儿体重正常的产妇30例为对照组,检测母血和脐血中血清蛋白指标水平,并分析其与胎儿宫内生长受限的关系。结果观察组母血、脐血中白蛋白(sALB)、视黄醇结合蛋白(RBP)、前白蛋白(PA)和转铁蛋白(TRF)水平均低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论母血及脐血中血清蛋白指标水平对预测母亲、胎儿营养状况有重要意义。     

舍曲林对抑郁症患者血清细胞因子及C反应蛋白水平的影响

目的 探讨抑郁症与血清细胞因子(CK)及C-反应蛋白的关系,了解舍曲林对血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)水平的影响.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测50例抑郁症患者(研究组)舍曲林治疗前后及25名正常人血清IL-2,IL-6,TNF-α水平,采用散射比浊法测定CRP水平,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评估抑郁症患者治疗前后的抑郁症状.结果 研究组患者治疗前血清IL-2,IL-6,TNF-α和CRP水平[分别为(41.4±15.7)pg/ml,(63.4±17.2)pg/ml,(81.4±19.3)pg/ml,(8.2±2.9)mg/L],高于正常对照组[分别为(13.2±4.6)pg/ml,(21.3±7.7)pg/ml,(35.1±7.8)pg/ml,(2.9±0.5)mg/L],差异具有显著性(P<0.01);治疗后IL-2,IL-6,TNF-α和CRP水平[分别为(20.1±9.1)pg/ml,(38.5±11.6)pg/ml,(49.5±12.6)pg/ml,(4.2±1.6)ms/L],低于治疗前,差异具有显著性(P<0.01).研究组血清IL-2,IL-6、TNF-α与抑郁症患者目前年龄、HAMD总分呈显著正相关(P<0.05,P<0.01),IL-2,IL-6、TNF-α变化率与HAMD减分率呈显著止相关(P<0.05,P<0.01).结论 抑郁症患者存在血清IL-2,IL-6,TNF-α,CRP水平的升高,舍曲林在改善抑郁症状的同时能降低抑郁症患者血清IL-2,IL-6,TNF-α,CRP水平.

Abstract：

Objective To investigate the association between serum cytokines and depression and understand the effect of sertraline on serum leveI of interleukin 2(IL-2),interleukin 6(IL-6),tumor necrosis factor-α(TNF-α)and C-reactive protein(CRP).Methods A total of 50 depressive patients(study group) and 25 healthy controls(control group)were included in this study.The levels of serum IL-2,IL-6 and TNF-α were measured by enzymatic-linked immunosorbent assay(ELISA)on baseline and after treatment,CRP were measured by scatter rate nephelometry.Depressive patients were assessed by Hamilton depression sere(HAMD)on baseline and after treatment.Results The levels of IL-2(41.4±15.7)pg/ml,IL-6(63.4±17.2)pg/ml,TNF-α(81.4±19.3)pg/ml and CRP(8.2±2.9)mg/L in study group were significantly higher than those in control group(13.2±4.6)pg/ml,(21.3±7.7)ps/ml,(35.1±7.8)ps/ml,(2.9±0.5)mg/L,(P<0.01).Compared with baseline,the levels of serum IL-2(20.1±9.1)ps/ml,IL-6(38.5±11.6)pg/ml,TNF-a(49.5±12.6)pg/ml and CRP(4.2±1.6)mg/L after treatment by sertraline decreased significantly(P<0.01).In study group,there were significant positive correlations between the serum level of IL-2,IL-6,TNF-α and present age,the total score of HAMD(P<0.05,P<0.01).There were significant positive correlations between variation rates of serum IL-2,IL-6,TNF-αand reduction rate of HAMD(P<0.05,P<0.01).Conclusion The serum levels of IL-2,IL-6,TNF-α and CRP increased in patients with depression.Sertraline may affect depressive patients'serum levels of IL-2,IL-6,TNF-αand CRP.