CIK体内外抗宫颈癌HeLa细胞的作用及其荷瘤小鼠体内分布特点

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)对荧光素酶标记的人宫颈癌HeLa-luc细胞的体内外抗肿瘤作用,了解CIK回输荷瘤小鼠后在不同器官的分布特点。方法:由健康志愿者外周血单个核细胞体外诱导培养CIK,流式细胞术检测CIK表面分子的表达,RT-PCR法检测IFN-γmRNA的表达,MTT法和瑞氏-姬姆萨染色测定CIK对HeLa-luc细胞的杀伤作用。建立荷HeLa-luc瘤BALB/c裸鼠模型,体内成像系统观察荷瘤小鼠肿瘤大小变化及CIK治疗效果,共聚焦显微镜观察不同器官中CIK的分布情况。结果:CIK在体外诱导培养14～21 d,其生长达到高峰,此时CD3+CD56+T细胞的比例增加50倍以上,IFN-γmRNA表达水平也达到高峰。在效靶比为20∶1、40∶1时,CIK对HeLa-luc细胞的杀伤率分别为(51.16±2.64)%、(72.14±4.21)%,明显高于对照组的(16.33±3.09)%、(21.26±2.71)%(P<0.05)。CIK治疗5周和8周后,对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为47.18%、64.38%。CIK治疗组荷瘤小鼠外周血中IFN-γ水平为(61.92±6.49)pg/ml,明显高于对照组的(34.30±1.78)pg/ml(P<0.05)。CFSE标记的CIK经腹腔和瘤旁注射入荷瘤小鼠3 h,在肺、肝、脾、外周血、肿瘤中均可观察到绿色荧光;腹腔途径注射24 h时,肿瘤组织中CIK浓度达到高峰(20.56±1.72)%;瘤旁途径注射3 h时,肿瘤组织中CIK达到高峰(25.75±3.45)%。结论:CIK在体内外对宫颈癌HeLa-luc细胞均有较强的杀伤作用,CIK经不同途径注射荷瘤小鼠后可以广泛分布于全身器官,其到达各脏器的浓度与输注途径及时间密切相关。     

二乙基二硫氨基甲酸钠对平阳霉素在荷瘤昆明鼠体内分布的影响

应用荷瘤昆明鼠动物模型，将平阳霉素（ＰＹＭ）用＾９９ｍＴＣ标记，观察二乙基二硫氨基甲酸钠（ＤＤＣ）对ＰＹＭ在昆明鼠体内分摘要应用荷瘤昆明鼠动物模型，将平阳霉素（ＰＹＭ）用＾９９ｍＴＣ标记，观察二乙基二硫氨基甲酸钠（ＤＤＣ）对ＰＹＭ在昆明鼠体内分布的影响。发现ＤＤＣ不能增加瘤内ＰＹＭ的绝对浓度，但可加快ＰＹＭ从尿中排泄，降低非瘤组织的ＰＹＭ浓度，因而ＰＹＭ化疗时加用ＤＤＣ对减轻正常组织的损害将是有意     

二乙基二硫氨基甲酸纳对平阳霉素在荷瘤昆明鼠体内分布的影响

应用荷瘤昆明鼠动物模型，将平阳霉素（ＰＹＭ）用￣￣（９９ｍ）ＴＣ标记，观察二乙基二硫氨基甲酸钠（ＤＤＣ）对ＰＹＭ在昆明鼠体内分摘要应用荷瘤昆明鼠动物模型，将平阳霉素（ＰＹＭ）用￣（９９ｍ）ＴＣ标记，观察二乙基二硫氨基甲酸钠（ＤＤＣ）对ＰＹＭ在昆明鼠体内分布的影响。发现ＤＤＣ不能增加瘤内ＰＹＭ的绝对浓度，但可加快ＰＹＭ从尿中排泄，降低非瘤组织的ＰＹＭ浓度，因而ＰＹＭ化疗时加用ＤＤＣ对减轻正常组织的损害将是有意义的。     

5-氟脲嘧啶在荷瘤鼠血液及瘤体中的代谢分布

目的为临床上使用放射增敏剂5-氟脲嘧啶(5-Fu)时如何与放疗相结合,从而获得肿瘤放疗的最佳临床疗效,提供实验基础.方法本实验用接种Lewis肺癌细胞的C57BL/6纯系小鼠40只,随机分成8组,分8个时间点用高效液相色谱仪测定在血液及瘤体中的药物浓度,以观察5-Fu经腹腔给药后在血液及瘤体中的代谢分布情况.结果 5-Fu的血液药代动力学参数T1/2α为8.82min,T1/β为92.03min,AUC为2.285kg@min/L,CI为0.00875ml/min@g,在血中消除较快,90、120分钟时几乎测不出,其药代动力学模型符合二室模型.5-Fu在瘤体中代谢缓慢,90、120min药物浓度仍保持在25.45μg/ml和29.21μg/nml.5-Fu在60、90、120min三个时间点浓度之间无显著差异.结论5-Fu在血中半衰期短,对瘤组织有亲和力,在瘤组织中蓄积,并可维持一定时间.在瘤组织中的浓度明显高于血药浓度(P＜0.05,45、60、90、120min),这正好符合临床的需要,对5-Fu作为放射增敏剂使用时最佳放疗时间的选择具有重要意义.     

抗人肺腺癌单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及肿瘤放射免疫显象

Biodistribution and radioimmunoimaging of monoclonal antibody, 5F11, against human lung adenocarcinoma (LTEP-a2) in tumor-bearing nude mice were studied. The binding rate of radioiodinated 5F11 with LTEP-a2, as determined by in vitro binding assay, was 27.64 +/- 5.01%, while the control was less than 5.0%, suggesting that 5F11 reacted specifically with LTEP-a2. Seventy-two, 96 and 120 hr after injection of 125I-5F11, the percentage of dose taken per gram tumor tissue was 4.84%, 6.29% and 6.60%, higher than those of all normal organs. From 48 to 120 hr on, the ratio of tumor to normal tissue (T/NT) in the liver, spleen, kidney, stomach and intestine was more than 2; T/NT in the lung was 3.1-4.7; T/NT in the blood increased gradually and was 1.87 at 96 after injection. Tumor location index was 4.16, while that of the normal tissue was only 1.21. These results showed that human lung adenocarcinoma xenografts in nude mice were specifically located by radioiodinated 5F11. Radioimmunoimaging was performed in tumor-bearing nude mice. The tumors were clearly visualized 72 hr after injection of 131I-5F11. Radioactivity was higher in tumor region than in other regions. The optimal imaging time was 72-96 hr after injection of radioiodinated 5F11.     

Ad-KDR-CDglyTK双自杀基因系统对荷瘤鼠胃癌体内抑制实验

目的:探讨KDR启动子驱动双自杀基因体系对荷瘤鼠胃癌的体内抑瘤作用.方法:建立胃癌移植瘤动物模型,当肿瘤直径达0.5 cm时,随机分为A组:空白对照,不施加任何处理;B组:注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTK与前药5-FC和GCV;C组:仅注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTK;D组:仅注射前药5-FC和GCV.治疗过程中绘制肿瘤生长曲线,观察该治疗体系的体内抑瘤效应;通过RT-PCR检测肿瘤组织内融合基因的表达;采用免疫组化行微血管密度检查.结果:接种肿瘤细胞后13d,裸鼠出现右臀区皮下瘤结节.治疗结束后A、B、C、D组间瘤质量差异有统计学意义(F=12 727.42,P=0.000),B组明显缩小.重组腺病毒转基因荷瘤鼠胃癌组织内可检测到CDglyTK融合基因产物的表达.肿瘤组织的MVD值在A、B、C、D组之间差异有统计学意义,F=27.04,P=0.000.结论:KDR启动子驱动双自杀基因体系对裸鼠皮下移植瘤有明显的抑瘤作用,表现为肿瘤的生长抑制和瘤体微血管密度减少等.     

LAK细胞在动物体内分布及影响因素初探

多项研究提示LAK细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用可能是其抗肿瘤的主要机制,深入研究其体内分布规律及影响因素具重要的临床意义.本研究采用全身(照相技术研究~(99m)Tc标记的LAK细胞经不同途径输注的体内分布规律,结果显示经肝动脉、门静脉输注后细胞浓集于肝脏并在2小时     

抗前列腺特异膜抗原单克隆抗体的标记及在荷瘤裸鼠体内的分布研究

目的:研究125I标记的抗前列腺特异膜抗原(PSMA)单克隆抗体(125Ⅰ-Ed-5)及正常小鼠IgG(125Ⅰ-NMIgG)在荷人前列腺癌瘤裸鼠体内的分布,探讨应用125Ⅰ-Ed-5进行放射免疫显像诊断和放射免疫治疗实验性人前列腺癌的可行性.方法:建立荷人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,用125Ⅰ标记抗PSMA单克隆抗体Ed-5和NMIgG,125Ⅰ-Ed-5和125Ⅰ-NMIgG经尾静脉注入荷瘤裸鼠体内,于注射后24、48、72、120小时分批处死,测定肿瘤和血液、肝、肺等重要脏器的单位重量放射性比值(T/NT)、各组织摄取百分比(%ID/g),研究其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布情况.结果:125Ⅰ-Ed-5的标记率为72.3%,放射性比活度为55.2MBq/mg,放射性化学纯度是90.2%,免疫活性分数为63%.在注射125Ⅰ-Ed-5后24～120小时内,裸鼠体内肿瘤部位出现选择性放射性浓聚:各组织的T/NT比值在72h达到最高,其中肿瘤/肌肉高达6.36.而在注射125Ⅰ-NMlgG的对照组中,裸鼠体内未见放射性浓聚,呈全身均匀性分布.结论:标记后的125Ⅰ-Ed-5免疫活性没有改变,在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有靶向定位作用,为进一步应用125Ⅰ-Ed-5进行前列腺癌放射免疫显像和放射免疫治疗的实验研究奠定基础.     

EGF偶联白蛋白靶向纳米载体在荷瘤裸鼠体内分布的研究

目的: 本研究旨在探讨125I-EGF-BSA靶向纳米载体在荷人乳腺癌SK-BR3裸鼠体内的分布。 方法: 采用超声乳化-化学交联方法制备牛血清白蛋白纳米载体,经过羧和反应将与白蛋白纳米载体表面的活性氨基与EGF进行偶联反应,制备EGF偶联白蛋白纳米载体。在裸鼠体内进行荷人乳腺癌实验,将荷瘤裸鼠随机分为3个实验组,¹²⁵I-BSA非纳米载体组(直接在BSA上标记¹²⁵I),125I-EGF-BSA靶向纳米载体组和¹²⁵I-BSA纳米载体组,检测不同时间点各组织的放射分布。 结果: 125I-EGF-BSA靶向纳米载体的瘤/血比值和瘤/肌肉比值明显高于其它两个给药组,差异有统计学意义(P<0.05)。125I-EGF-BSA靶向纳米载体在荷瘤裸鼠体内的放射性瘤/血比值和瘤/肌肉比值随时间逐渐升高,在2h达峰值,后略有下降。做方差分析,同一时间点¹²⁵I-EGF-BSA靶向纳米载体的放射性瘤/血比值和瘤/肌肉比值均高于其他两个给药组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。²⁵I-EGF-BSA靶向纳米载体在肝、脾、肺等器官分布明显低于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: ¹²⁵I-EGF-BSA靶向纳米载体对裸鼠体内的人乳腺癌SK-BR3肿瘤具有明显的靶向性,而肝、脾、肺等器官的分布少。     

碘标记单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内分布和放免显像的实验研究

碘标记单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内分布和放免显像的实验研究浙江省医学科学院同位素室（３１００１３）孙性善，郑根香，李洸，丁占初，缪云萍，俞淑清近年来，放射性核素标记抗肿瘤单克隆抗体（单抗）用于肿瘤定位诊断已取得良好进展［１］。我们在研制成抗大肠癌单抗ＨＣ...     

依立替康致小细胞肺癌荷瘤鼠腹泻模型的建立

目的建立依立替康（irinotecan,CPT-11）致小细胞肺癌（small-cell lung cancer,SCLC）荷瘤鼠腹泻模型。方法培养LTEP/P人SCLC细胞株,传代3-4代后收集细胞,接种于BALB/C SPF裸鼠,接种成功后用瘤块继续接种于其它裸鼠。荷瘤鼠按高、中、低3个剂量分别静注CPT-11,连续4天,观察腹泻情况。结果高剂量组荷瘤鼠腹泻最严重,中剂量组次之,低剂量组不明显。结论以30-40 mg/（kg.d）剂量连续4天静注CPT-11,可建立稳定可靠的小细胞肺癌荷瘤鼠腹泻模型。     

共培养的树突细胞和CIK细胞对肺癌的体内外抑癌作用

背景与目的:细胞因子诱导的杀伤(cytokine-inducedkiller,CIK)细胞是高效的肿瘤杀伤细胞。树突细胞(dendriticcells,DCs)是体内最强的抗原递呈细胞,并且能够提高效应细胞的抗瘤活性。本实验将DCs和CIK细胞共培养观察DCs对CIK细胞的细胞表型、增殖活性及体内外的抗肺癌作用的影响。方法:从健康人外周血单个核细胞中常规诱导出DCs、CIK细胞后,将DCs和CIK细胞按1∶10比例共培养5天获得DC-CIK细胞。流式细胞仪测DC-CIK细胞表型变化,3H-TdR掺入法测定其体外的细胞毒活性,并用肺腺癌细胞株A549建立裸鼠模型观察DC-CIK体内的抗肿瘤效果。结果:在培养第14天,DC-CIK细胞与单独CIK细胞培养组相比,增殖速率提高[(17.0±1.8)倍vs.(10.9±2.0)倍,P<0.05],CD3 CD56 表达水平明显上调[(36.0±4.2)%vs.(25.7±2.9)%,P<0.05],同时对A549细胞的细胞毒活性明显增强(P<0.05)。裸鼠体内实验表明,接种肺癌细胞51天后DC-CIK组、CIK组的抑瘤率分别为62.9%、41.5%,与对照组相比DC-CIK组及CIK组均抑制裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01),且DC-CIK组与CIK组抑瘤效应差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DCs与CIK细胞共培养可使CIK细胞获得更高的增殖活性和更强的抑癌作用。     

RNAi抑制Layilin表达对肺腺癌A549细胞体外侵袭和荷瘤鼠体内淋巴转移的影响

背景与目的：透明质酸参与了多种肿瘤细胞的侵袭行为，Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体。本研究在发现Layilin表达于人肺腺癌A549细胞株的前期工作基础上，观察用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术抑制Layilin表达后，对人肺腺癌A549细胞体外侵袭和体内淋巴道转移的影响。方法：构建能表达针对Layilin的小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）的RNAi质粒（Layilin siRNA plasmid）和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNAi质粒（control siRNA plasmid），分别转染A549细胞，新霉素抗性筛选得到Layilin表达受抑制的A549-siLayilin细胞和Layilin表达未受影响的A549-siControl细胞。针对非转染（A549-nontransfection）、A549-siLayilin、A549-siControl3组细胞，分别采用RT—Realtime PCR和Western blot技术检测Layilin表达，用Boyden小室实验检测细胞体外侵袭能力，用爪垫皮下种植淋巴结转移模型检测淋巴转移能力。结果：与A549-nontransfection组和A549-siControl组相比，A549-siLayilin组细胞Layilin表达减少，体外侵袭能力降低，体内淋巴转移率下降。结论：通过RNAi抑制Layilin表达后，能有效抑制透明质酸所诱导的A549细胞体外侵袭和裸鼠移植瘤淋巴转移。本研究为通过RNAi手段抑制Layilin表达，进而抑制肺腺癌淋巴转移提供了有益的思路．     

齐留通对CT-26结肠癌细胞及荷瘤鼠肿瘤生长影响的观察

目的:探讨齐留通对小鼠CT-26结肠癌细胞和荷瘤小鼠肿瘤生长的影响.方法:将100和200 μmol/L的齐留通作用于CT-26细胞后,通过倒置相差显微镜观察齐留通应用后细胞形态变化,用MTT法检测各组细胞的生长抑制率;建立小鼠结肠癌移植瘤模型,随机分为3组,对照组给予100 mg/(kg·d)三蒸水,干预组于移植当天给予齐留通100 mg/(kg·d)灌胃,治疗组于移植第14天给予齐留通100m/(kg·d)灌胃,每组各10只,移植28 d后,检测各组移植瘤生长情况和血清CEA的浓度,HE染色观察各组移植瘤组织的病理改变.结果:MTT结果显示,以时间和剂量浓度依赖方式抑制CT-26细胞增殖,100和200μmol/L的齐留通组在24、48和72 h的抑制率分别为23.44％和37.92％、33.64％和63.74％、50.85％和75.14％.干预组和治疗组的体积抑瘤率分别为(42.3±2.9)％和(20.1±3.9)％,瘤重抑瘤率分别为(39.0±2.5)％和(24.9±0.6)％.病理观察见干预组和治疗组移植瘤组织大片状坏死,其中干预组最为明显.干预组、治疗组和对照组的癌胚抗原(CEA)含量分别为(72.07±19.90)、(94.20±21.71)和(142.30±18.83) ng/mL,P=0.000.CEA含量与移植瘤的体积和质量呈正相关,r值分别为0.794和0.785,P值均为0.000.结论:齐留通可以抑制结肠癌CT-26细胞增殖,并对荷瘤小鼠的肿瘤生长有明显的抑制作用,且在结肠癌的早期应用能达到更好的效果.     

小鼠卵巢癌荷瘤动物模型的构建及其细胞系生物学特性分析

背景与目的:目前缺少可靠特异性早期发现卵巢癌,并防止复发和预防耐药的方法。良好的实验模型不仅可以很好地理解影响此疾病表型特征的生物遗传因素,还可以为干预策略的发展提供理论基础。本研究旨在构建小鼠的卵巢癌模型,建立卵巢癌细胞系,分析其生物学特性。方法:对8周龄的C57BL/6N×C3H/He杂交一代(F1)雌性小鼠,用剂量2.7Gy的252Cf的中子放射源给予全身放射线照射,诱导成卵巢癌后进行鼠间传代11次,取瘤组织体外分离培养瘤细胞并传代和建立肿瘤细胞系,应用细胞、分子生物学实验手段对建立的细胞系进行生物学特性检测。结果:经放射线照射成瘤的细胞在鼠间历时23个月传至第11代,皮下移植瘤存活率为100%,体外建立的细胞系OV99与阳性对照卵巢癌细胞系OVHM一样,在体外生长性能稳定。OV99细胞形态学和超微结构符合卵巢癌上皮组织基本特征;细胞含有76条染色体,呈端着丝粒,为鼠肿瘤细胞异常染色体;OV-99的细胞生长状态、细胞周期分布、癌基因p21、p185和抑癌基因p53的蛋白表达定量以及细胞周期蛋白PCNA和CyclinD,MHC表达量,和MAGE-1,MAGE-3mRNA表达等细胞生物学行为和OVHM的结果差异无显著性,但与鼠的正常卵巢组织中癌基因p21、p185和抑癌基因p53的蛋白表达定量以及细胞周期蛋白PCNA和CyclinD以及MHC表达量相比明显升高,MAGE-1、MAGE-3mRNA表达增强。结论:小鼠卵巢癌荷瘤模型及其细胞系OV99的建立为卵巢癌的研究提供了良好的实验材料。通过对OV99细胞的病理形态学、超微结构、染色体分布、细胞周期分布及不同肿瘤特征性基因等生物学行为分析,OV99符合卵巢癌细胞系的特征。     

CIK细胞生物学特性及抗肿瘤作用的研究进展

CIK细胞是人外周血或脐血单个核细胞在体外经多种细胞因子刺激后获得的一群异质细胞,它增殖能力强、杀瘤活性高、不良反应少,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀瘤效应细胞。在临床上已经用于治疗多种恶性肿瘤,并且疗效确切,本文CIK细胞的生物学特性及抗肿瘤作用的研究情况做一综述。     

NK细胞的生物学特性及临床应用研究进展

 目前NK细胞的临床治疗主要通过利用细胞因子体内扩增、激活NK细胞和体外产生LAK、CIK细胞杀伤自体肿瘤细胞,但并未取得实质性进展。随着自然杀伤细胞抑制性受体（KIR）及其他NK细胞受体（NKR）的发现,对NK细胞受体在识别和裂解肿瘤细胞的重要作用的不断了解,为肿瘤的免疫治疗提供了新的治疗策略。由KIR独特型不相容引发的NK细胞异源反应性在异基因造血干细胞移植中促进移植物植入,预防GVHD发生以及增强GVL作用,已经成为国内外学者研究的热点。就目前关于NK细胞的生物学特性及临床应用研究进展予以综述。     

IL—2对MAb在荷瘤小鼠肿瘤组织及正常组织中生物学分布的影响

白细胞介素2(IL—2)和单克隆抗体(MAb)联合应用是治疗人类肿瘤的一个有前途的方法。IL—2诱导的淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)是体外抗体介导的细胞毒作用的强有力的效应细胞,并在体内可以增强抗体介导的杀灭肿瘤的作用。用放射性同位素标记的 MAbs 目的在于使肿瘤组织比正常组织释放较高的放射     

131I标记抗CD20单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内动态分布的实验研究

目的:探讨131I-anti-CD20 McAb经瘤内注射后在荷人Burkitts淋巴瘤细胞系Raji细胞移植瘤裸鼠体内的动态分布。方法:131I标记物的标记采用IODO-GEN碘化标记;注射标记物后第1、3、7、15天将荷瘤裸鼠活杀,定标器测量并计算瘤组织、血液等12种器官或组织的瘤/非瘤(T/NT)比值以及%ID/g值(每克组织摄入注入量的百分数)。结果:131I-anti-CD20 McAb瘤内注射组血液及其他组织器官T/NT比值在给药后第1、3和7天均显著高于腹腔注射组和131I-IgG瘤内注射组(P<0.05);该组肿瘤%ID/g值在给药后第1、3和7天分别为后两组的1.4~17倍和1.7~3.7倍;各非瘤组织和器官的%ID/g值低于后两组。结论:131I-anti-CD20 McAb经瘤内途径给药可以使肿瘤获得最高的放射性药物摄取率和最高的瘤/非瘤组织放射性药物摄取比,为下一步运用该途径进行放射免疫治疗提供了实验依据。     

鼠抗人肝癌单抗Hab18—葡聚糖—阿霉素结合物在荷瘤裸鼠体内的…

本实验制备了鼠抗人肝癌单克隆Ｈａｂ１８－葡聚糖－阿霉素导向结合物，放免显像证实该结合物在荷人肝癌裸鼠体内能选择性地定位于人肝癌局部；对荷瘤鼠的毒理学实验中相同剂量的阿霉素组荷瘤鼠全部死亡，而导向物组全部存活；荷人肝癌裸鼠导向治疗结果表明：该结合物能有效地抑制人肝癌的生长，导向治疗组肿块较治疗前缩小，实验结果提示：Ｈａｂ１８－ＤＥＸ－ＡＤＭ结合物对人肝癌有较好的导向治疗作用，其抗癌效果优于单纯ＡＤＭ