人脑脊液中利多卡因的高效液相色谱法测定

目的建立检测人脑脊液中利多卡因的方法。方法采用RP-HPLC法测定人脑脊液中药物浓度,色谱柱为Lichrospher C18（4.6×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（62∶38∶0.3∶0.6）,流速1 mL.min-1,检测波长220 nm。结果在0.1-8 mg·L^-1范围内利多卡因峰面积与内标峰面积之比与浓度线性关系良好,最低检测浓度为0.03 mg·L^-1,回收率利多卡因为93.77-95.64%,日内、日间RSD均小于10%。结论本测定方法灵敏、准确、简便,适合于对利多卡因的临床使用监测及药代动力学研究。     

HPLC—UV法检测人血浆中双氢可待因的浓度

目的建立人血浆双氢可待因检测的高效液相色谱方法。方法血浆经乙酸乙酯、正己烷萃取,以ZORBAX XDB-C18为色谱柱;流动相为乙腈-水-0．1％三氟乙酸（trifluoroacetic acid,TFA）,流速为1．0mL·min^-1;检测波长为230nm（0—5．0min）和210nm（5．0～6．2min）。结果双氢可待因浓度在2．5～100．0μg·L^-1范围内线性关系良好（r=0．9998）;定量下限为2．5μg·L^-1;高中低三个浓度的相对回收率分别为（101．48±5．87）％、（103．75±4．48）％和（100．06±2．51）％;日内相对标准偏差（Relative standard deviation,RSD）分别为5．79％、4．32％和2．51％,日间RSD分别为6．64％、4．05％和3．95％。结论本高效液相色谱紫外法准确可靠、简便快速,适用于人血浆双氢可待因浓度的测定及其药物代谢动力学研究。     

高效液相色谱法检测血浆格列吡嗪及其在人体药动学研究中的应用

目的建立人血浆格列吡嗪检测的高效液相色谱方法,用于研究格列吡嗪片的人体药代动力学。方法血浆经乙醚革取,以TC-C18为色谱柱;流动相为乙腈-0．1％三氛乙酸-水体系,流速为1．0mL·min^-1;检测波长274nm。测定12名健康志愿者单剂量口服10mg格列吡嗪片后的血药浓度经时过程。由DAS2．0程序处理计算药动学参数。结果格列吡唪浓度在25～1600μg·L^-1范围内线性关系良好;定量下限为25μg·L^-1;高中低三个浓度的相对回收率分别为（100．75±7．23）％,（102．08±4．29）％和（101．01±1．82）％;日内RSD分别为6．94％,4．68％和1．86％,日同RSD分别为8．05％．5．07％和2．16％。结论本方法简便,快速,准确可靠,适用于人血浆格列吡嗪浓度的测定及其药代动力学研究。     

HPLC法测定帕米膦酸二钠注射液的含量

目的建立离子交换高效液相色谱法测定帕米膦酸二钠的方法。方法采用IC—Paktm Anion HR色谱柱，以2mmol·L^-1硝酸溶液（用5mol·L^-1硝酸溶液调节pH值至2．70）为流动相，检测波长230nm流速1．0m L·min^-1，进样量30止。结果帕米膦酸进样量在3．82—45．85ug范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9988，n=7），回收率为100．0％（RSD=1．08％，n=9）。结论建立方法操作简便，结果准确，可应用日常实验的检测。     

血清CYFRA21-1在食管鳞状细胞癌诊断中的价值

目的：探讨细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）在食管鳞状细胞癌诊断中的应用价值。方法：采用电化学发光法分别检测健康对照组（45例）和初次诊断食管鳞状细胞癌患者（90例）血清中CYFRA21—1和癌胚抗原（CEA）质量浓度,并对患者进行随访,出现淋巴结转移和（或）远处转移者再次检测血清中CYFRA21-1和CEA质量的浓度。结果：食管磷状细胞癌组CYFRA21-1和CEA质量浓度明显高于对照组[分别为（3．81±1．7）μg·L^-1比（1．15±0．68）μg·L^-1,（7．36±3．5）μg·L^-1比（1．34±0．65）μg·L^-1,均P〈0．05]。食管磷状细胞癌组出现淋巴结转移和（或）远处转移者CYFRA21-1和CEA质量浓度高于初次诊断时[分别为（4．93±0．83）μg·L^-1比（2．04±0．29）μg·L^-1,（16±2．96）μg·L^-1。比（7．55±1．23）μg·L^-1,差异具有统计学意义（均P〈0．05）。初次诊断食管鳞癌患者CYFRA21-1阳性率（56．7％,51／90）高于CEA（20．0％,18／90）,差异有统计学意义（X^2=25．59,P〈0．01）;出现淋巴结转移和远处转移的患者CYFRA21-1阳性率（71．1％,32／45）高于CEA（26．7％,12／45）,差异有统计学意义（X^2=17．79,P〈0．01）。结论：血清CYFRA21—1对食管鳞状细胞癌诊断和判断预后方面比CEA更优。     

RP—HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度

目的：建立测定人血浆中氯氮平浓度的反相高效液相色谱法。方法：以Agilent Herpesil ODS C18柱（250mmx4mm,5μm）为色谱柱,流动相为甲醇：水（70：30）,每250ml水中加入0．55ml三乙胺;流速：1．2ml·min-1;柱温：40℃;检测波长：254nm。以乙酸乙酯为提取剂。结果：氯氮平在20～1000ng·ml。浓度范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系;氯氮平的高、中、低浓度相对平均回收率分别为101．55％、98．25％、103．57％;日内、日间RSD均〈9％（n=5）。分析方法的检测限10ng·ml-1 ;氯氮平的标准曲线回归方程为Y=0．32132509X＋1．2727281,r=0．99725（n=8）。结论：该方法灵敏、准确、简单、快捷,可用于临床氯氮平的血浆药物浓度监测和药物动力学研究。     

环孢菌素A、汉防己甲素及两者联合逆转K562／A02细胞的多药耐药

目的：探讨环孢菌素A（CsA）、汉防己甲素（Tet）及两者联合应用对人白血病耐药细胞系K562／A02多药耐药的逆转作用。方法：采用M1Tr法测定柔红霉素（DNR）对细胞的半数抑制量（IC50），流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内DNR浓度。结果：DNR对K562细胞和K562／A02细胞IC50分别为0．27和21．22mg·L^-1；CsA（1mg·L^-1）及Tet（0．1mg·L^-1）单独和联合处理K562／A02后，DNR的IC50分别为7．83、5．32和2．32mg·L^-1；CsA和Tet对DNR作用K562的IC50无明显影响；K562／A02细胞48h凋亡率为2．19％，DNR（1mg·L^-1）作用K562／A02细胞凋亡率为2．70％，CsA和Tet单独及联合处理后凋亡率分别为10．27％、17．64％和52．79％；两药处理后细胞内化疗药物DNR浓度亦明显增加。结论：CsA及Tet均可逆转耐药，且联合作用逆转效果更强。     

反相高效液相色谱法测定血浆中利福喷丁的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中利福喷丁的浓度。方法以Kromasil 1850mm×4．6mm,5μm）为分析柱,甲醇：0．02mol／L,KH2P02（磷酸调pH5．2,65：35v／v）为流动相,流速为1．0ml／min,检测波长为335nm,利福平为内标,测定血浆中利福喷丁的浓度。结果在0．316～20．2μg/ml浓度范围内,利福喷丁和内标峰的面积比值与浓度呈良好的线性关系（r=0．9991）。利福喷丁高、中、低3个浓度的平均回收率分别为：103．80％,98．53％,102．65％;日内、日间RSD均小于10％。结论该方法简便、快速准确、重现性好,可用于药代动力学以及生物等效性研究。     

封闭群五指山小型猪主要脏器重量与体重的相关性分析

目的对盐酸多西环素（DOX）进行了药物动力学及残留研究,为临床合理用药提供理论依据。并阐明盐酸多西环素在猪的组织中消除规律,为休药期的制定提供参考。方法建立DOX在猪血浆及组织中的提取方法及反向高效液相色谱（RP—HPLC）检测法。猪单次口灌5mg／kg体重剂量给药后,于不同时间采血样和组织样,用反相高效液相色谱法测定血浆及组织中DOX的浓度;用3P97药物动力学软件处理血浆药物浓度-时间数据。结果所建立的标准曲线相关性好,相关系数均达0．9990以上,血浆、肌肉、皮脂、肝脏和肾脏中最低检测限分别为0．075μg／ml、0．010μg／g、0．010μg／g、0．020μg／g、0．0120μg／g;血浆及各组织中的平均回收率均在69％以上;目内变异系数小于10％,日间变异系数小于15％。房室模型分析表明,其药物时间曲线符合有吸收二室模型,动力学方程为：C=5．37e^-0.15t6．02e^-0.115t-11．39e^0.25t。主要药物动力学参数为：吸收速率常数Ka0．25±0．02／h;消除半衰期t1/2β6．02±0．83h;药时曲线下面积AUC17．07±2．80μg·ml^-1h·^-1;表观分布容积Vd／F2．26±0．48L／kg;清除率CLb0．29±0．05L·h^-1kg·^-1;达峰时间Tp5．42±0．25h;峰浓度Cmax1．09±0．26μg／ml。通过药物动力学试验得知,以5mg／kg体重的剂量单次口灌给药后,药物在体内吸收速度快,分布广,可以达到明显的抑菌效果;通过药物残留试验得知,药物在组织中消除速度较快。     

高效液相色谱法测定头孢克肟咀嚼片的含量

目的建立头孢克肟咀嚼片高效液相色谱法含量测定方法。方法色谱柱为Eclipse XDB—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）;流动相为四丁基氢氧化胺（取10％四丁基氢氧化铵溶液10mL,加水690mL,摇匀,用1．5mol·L^-1磷酸调节pH至7．0）．乙腈（70：30）;流速为08mL·min^-1;检测波长为288nm。结果头孢克肟咀嚼片的浓度在0．025mg·mL^-1-1．6mg·mL^-1范围内线性关系良好,回归方程Y=66902X＋1926．6,相关系数r=0．9993;精密度试验RSD％=0．1％;平均回收率为100．9％,RSD％=0．56％。结论本方法简便、准确、重复性好,适用于头孢克肟咀嚼片的含量测定。     

反相高效液相色谱法同时检测人血浆利多卡因和罗哌卡因

目的：建立人血浆利多卡因和罗哌卡因的高效液相色谱分析方法。方法：高效液相色谱仪为Agilent 1100系列;血浆碱化后经乙酸乙酯萃取浓缩,以ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm,Agilent,USA）为色谱柱;以乙腈∶0.02 mol·L^-1 KH2PO4（16∶84,V/V）为流动相,流速为1.0 ml·min^-1;检测波长为210 nm;内标为布比卡因。结果：利多卡因和罗哌卡因浓度在0.05～10 mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0.999）;最低检测限为0.05 mg·L^-1;两种药物高、中、低3个浓度的平均相对回收率分别为（99.79±2.94）%和（100.32±2.95）%;平均绝对回收率分别为（68.36±4.63）%和（70.87±4.88）%;日内精密度变异系数分别为（0.86±0.43）%和（1.36±0.77）%,日间精密度变异系数分别为（2.07±1.45）%和（1.43±0.23）%.结论：本方法快速、简便、灵敏、准确可靠,适用于血浆利多卡因和罗哌卡因的同时测定及其临床药代动力学研究。     

HPLC法测定大鼠体内尼莫地平脂肪乳中尼莫地平的含量

目的 建立尼莫地平脂肪乳注射液的高效液相色谱分析方法,并应用于大鼠体内的药动学研究.方法 血浆样品以乙醚-正己烷（体积比1∶1）萃取,采用HPLC法进行测定分析.色谱柱为安捷伦XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为甲醇-水（体积比为65∶35）;流速为1.0 mL·min^-1;检测波长为360 nm.结果 尼莫地平在0.1～40μg·mL-1呈现良好的线性关系（r^2=0.999 9）,方法的日内、日间精密度RSD值分别在0.62％～8.8％和1.6％ ～ 8.4％之间,相对回收率为85.5％～ 103.2％,绝对回收率为78.5％～91.6％,定量下限为0.1·m^L-1.大鼠注射给予尼莫地平脂肪乳注射液（2.5 mg·kg^-1）后,t1/2（β）为（19.91±4.11） min,AUC0-120为（138.63±35.70） mg·min·L-1.结论 本方法准确、简便、灵敏,可用于尼莫地平脂肪乳注射液在大鼠体内的药动学测定.     

ICU患者万古霉素血药浓度的监测

目的：建立高效液相色谱（HPLC）法快速测定人血浆中万古霉素浓度的方法,监测ICU患者治疗药物的浓度。方法：色谱柱为Waters的Xbridge柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相为25 mmol·L^-1磷酸二氢钾-甲醇（86：14,p H=2.4）,流速为1.0 m L·min^-1,紫外检测波长为236 nm,进样量为20L,柱温为40℃。结果：万古霉素浓度在1～100 mg·L^-1内线性关系良好（r=0.9992）,定量下限为1.0 mg·L^-1,日内、日间精密度相对标准偏差（RSD）分别为5.83%和6.06%,提取回收率为79.71%。所监测的28例患者血样中,有12例患者首次万古霉素谷浓度在10～20 mg·L^-1之间,有17例治疗结果为有效,总有效率为60.7%。结论：HPLC法简便、灵敏、准确、快速、重复性好,可用于ICU患者万古霉素的血药浓度监测。万古霉素用药后血药浓度个体差异较大,临床需要监测结果,为ICU患者制定合理的个体化给药方案。     

RP-HPLC内标法测定大鼠血浆中甘草次酸的浓度

目的 建立大鼠血浆中甘草次酸浓度的测定方法.方法 采用RP-HPLC内标法,色谱柱为DiamonsilC18柱(4.6mm×25cm,5μm),流动相为甲醇-水-乙酸(体积比86:13.6:0.4),流速为1.0mL·min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量20μL,内标为丙酸睾酮.结果 甘草次酸质量浓...     

兔血浆利福平的反相高效液相色谱分析及药代动力学研究

目的建立兔血浆利福平（rifampicin,RFP）反相高效液相色谱分析方法（reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC）。研究其静脉给药后兔体内血浆药代动力学参数。方法以Agilent ZORBAX XDB-C18柱（5μm,4.6mm×150mm）为分析柱,流动相为0.02mol·L^-1磷酸二氢钠缓冲液（PH7.0）∶甲醇=30∶70;流速1.0mL·min^-1;柱温：35℃,检测波长330nm。8只新西兰大白兔分别按RFP12mg·kg^-1静滴,RP-HPLC法检测血浆药物浓度。所得血药浓度数据经DAS软件拟合分析。结果 RFP在0.5～72μg·mL^-1血浆浓度范围内线性关系良好（r=0.99969）,平均提取回收率为99.72%,日内、日间变异系数（RSD=5）分别为2.6%～4.4%和2.2%～2.9%。静脉滴注RFP在兔体内药代动力学过程符合双隔室模型（权重系数为1/cc）,T1/2=（2.87±0.78）h,Cmax=（12.49±1.57）mg·L^-1,AUC（0-∞）=（50.05±14.50）mg·（h·L）^-1。结论本研究建立的兔血浆利福平RP-HPLC方法简便、准确、重现性好,可用于兔体内利福平血药浓度的测定,兔体内利福平药代动力学过程符合双隔室模型,体内药代谢动力学参数为利福平其它剂型的研究提供参考。     

替米沙坦血药浓度高效液相—荧光检测方法的研究

目的建立测定血浆中替米沙坦浓度的高效液相—荧光色谱分析方法。方法血浆样品以乙醚为提取溶剂处理,分析柱为KromsailKR100-5C18色谱柱（5μm,150 mm×4.6 mm）。流动相为0.01 mol/L KH2PO4水溶液（pH3.5）：乙腈=54：46（V/V）,激发波长Ex=305nm,发射波长Em=365 nm,流速1.0 ml/min,柱温为室温,进样量20μl。结果替米沙坦在5.0～500 ng/ml范围内线性良好（r=0.999 8）,最低检测浓度为2.5 ng/ml（S/N〉3）。该方法的相对回收率为（100.7±4.2）%（n=5）,绝对回收率为（88.4±3.9）%（n=5）,日内RSD为（3.1±1.0）%（n=5）,日间RSD为（4.0±1.5）%（n=5）。结论本方法准确、灵敏、特异性强、重显性好,适用于血浆中替米沙坦浓度测定和体内药代动力学研究。     

骨疼静胶囊中三七皂苷的含量测定

目的：建立骨疼静胶囊中三七皂苷的高效液相含量测定方法。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,使用梯度洗脱系统,流动相为乙腈-水系统,流速为1.0 mL·min^-1。柱温为室温,检测波长为203 nm。结果：三七皂苷R1的线性范围为0.034-0.288 g·L^-1（r=0.9996）,平均回收率为99.70%（RSD为1.00%）;人参皂苷Rg1的线性范围为0.125-1.125 g·L^-1（r=0.999 8）,平均回收率为100.02%（RSD为1.31%）;人参皂苷Rb1的线性范围为0.107-0.963 g·L^-1（r=0.999 6）,平均回收率为100.35%（RSD为1.16%）。结论：该法测定骨疼静胶囊中三七皂苷的含量,操作简单、重复性好,可作为骨疼静胶囊的质量控制方法。     

人血浆百草枯浓度的高效液相色谱测定法

目的建立高效、灵敏的百草枯血浆浓度高效液相色谱检测法。方法流动相为乙腈-水(8:92),水相中含3.0 mmol.L-1辛烷磺酸钠、0.1 mol.L-1磷酸,二乙胺调pH值为3.0,流速为1.0 mL.min-1;检测波长258 nm;柱温28℃;内标物为Ethyl Viologen Dibromide。血浆沉淀蛋白处理后,进行高效液相色谱分析。结果色谱图基质干扰少,峰形好,线性范围0.1~10μg.mL-1,最低检测线0.01μg.mL-1,方法回收率96.65%~99.42%。结论高效液相色谱内标检测法适用于百草枯中毒患者的血药浓度检测。