SLE患者外周血单个核细胞中IL-6 IL-10表达研究

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中Ｔｈ２型细胞因子ｍＲＮＡ的表达。方法 用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０例正常人和１５例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素６（ＩＬ－６）和白介素１０（ＩＬ－１０）ｍＲＮＡ表达的水平。结果 与正常相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－６和ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达水平均增高（均Ｐ〈０．０１）。结论 ＳＬＥ患者中Ｔｈ２型细胞因子Ｉ     

SLE患者外周血单个核细胞中IL—10与γ干扰素的表达

为了探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中ＴＨ２／ＴＨ１型细胞因子自然表达的趋势,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０名正常人和１５例活动期ＳＬＥ患外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素１０（ＩＬ－１０）和γ干扰素（ＩＦＮγ）ｍＲＮＡ表达的水平。结果,与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达水平增高,而ＩＦＮγｍＲＮＡ的表达水平降低（均Ｐ〈０．０１）,表明活动性ＳＬＥ     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-6与TNF-α的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）中某些具炎症介质作用细胞因子的自然表达。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０例正常人和１５例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达的水平。结果：与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－６和ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达水平均增高（均Ｐ〈０．０１）。结论：ＳＬＥ患者中ＩＬ－６与ＴＮＦ－α的表达上调,可能在发病机制中起一定作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞中Th1型细胞因子的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中Ｔｈ１型细胞因子表达的情况。方法 用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ表达（４１例）和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）ｍＲＮＡ表达（３１例）的水平。结果 与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者中ＩＬ－２表达水平降低者占７８．０％,ＩＦＮ－γ表达水平降低者占８３．９％。活动期ＳＬＥ组ＰＢＭＣ中ＩＬ－２和     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD23的表达

为了揭示Ｂ细胞中ＣＤ２３的表达与ＳＬＥ发生发展的关系及在ＳＬＥ发病机理中可能的作用，我们应用ＡＢＣ免疫组化法和斑点核酸杂交技术对ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ＣＤ２３蛋白和ｍＲＮＡ表达进行了检测。结果显示：３０例ＳＬＥ患者ＰＢＭＣＣＤ２３蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１），且与疾病活动呈正相关关系（ｒｓ＝０．３８１４，Ｐ＜０．０５）；具有不同ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体水平，有无伴肾损、脑损的ＳＬＥ患者，ＰＢＭＣＣＤ２３表达均无显著性差异（Ｐ均＞０．０５）；单纯使用皮质类固醇激素治疗或和其它免疫抑制剂联合治疗的ＳＬＥ患者，ＰＢＭＣＣＤ２３表达亦无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。２０例ＳＬＥ患者ＰＢＭＣＣＤ２３ｍＲＮＡ表达较正常人显著增高（Ｐ＜０．０１）。经治疗病情稳定后，ＣＤ２３蛋白和ｍＲＮＡ表达均降至正常（Ｐ均＞０．０５）。提示在ＳＬＥ活动期Ｂ细胞高度激活、增殖并大量表达ＣＤ２３，且该种表达与ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体产生水平无直接关系     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞bcl-2的表达及临床意义

目的 为了探讨ｂｃｌ－２基因在系统红斑狼疮（ＳＬＥ）发病机制中的作用及临床意义。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３１例ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平和流式细胞仪双标记法分析其Ｔ、Ｂ细胞ｂｃｌ－２蛋白表达。结果 活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平明显升高,占５５．６％,且活动期ＳＬＥ患者ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞亚群Ｐ     

卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞mIL－2R表达及sIL－2R水平的影响

采用ＩＩＦ和ＥＬＩＳＡ法分别检测了２２例尖锐湿疣（ＣＡ）患者和１６例正常对照者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）上膜白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达水平及其培养上清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的含量，同时观察了卡介菌多糖核酸（ＢＣＧ－ＰＳＮ）在体外对这两项指标的影响。结果发现，患者ＰＢＬ上ｍＩＬ－２Ｒ表达下降，而培养上清中ｓＩＬ－２Ｒ含量明显增高；一定浓度的ＢＣＧ－ＰＳＮ能在体外使患者淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ表达增强，以及降低培养上清中ｓＩＬ－２Ｒ的含量。这表明ＣＡ患者存在细胞免疫缺陷，ＢＣＧ－ＰＳＮ能在体外调节患者细胞免疫功能。     

卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞mILI—2R表达及sIL—2…

采用ＩＩＦ和ＥＬＩＳＡ法分别检测了２２例尖锐湿疣（ＣＡ）患者和１６例正常对照者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）上膜白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达水平及其培养上清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的含量，同时观察了卡介菌多糖核酸（ＢＣＧ－ＰＳＮ）在体外对这两项指标的影响。结果发现，患者ＰＢＬ上ｍＩＬ－２Ｒ表达下降，而培养上清中ｓＩＬ－２Ｒ含量明显增高；一定的浓度的ＢＣＧ－ＰＳＮ能在体外使患者淋巴     

结缔组织病

２００１１０４０ 　ＳＬＥ病人外周血白细胞Ｂｃｌ－２和Ｂｃｌ－ＸｍＲＮＡ表达研究／孙保东（上海二医大仁济医院风湿科）… ／／上海免疫学杂志．－２０００， ２０（ ４）．－２３９～ ２４０，２４７ 采用高度敏感和特异性的荧光标记ＰＴ－ＰＣＲ方法对 ５０例 ＳＬＥ、２４例 ＲＡ和 ２４例健康者的外用血白细胞凋亡相关基因 Ｂｃｌ－２、Ｂｃｌ－ＸＩ和 Ｂｃｌ－Ｘｓ　 ｍＲＮＡ表达进行了半定量研究。结果显示，ＳＬＥ病人Ｂｃｌ－２表达低于健康者（Ｐ＜０．０１），Ｂｃｌ－Ｘｓ表达明显高于健康者（Ｐ＜０．０００１），亦高于…     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞产生白细胞介素2活性测定

我们检测了５０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生白细胞介素２（ＩＬ－２）的活性，发现活动期ＳＬＥ患者产生ＩＬ－２活性低于正常对照（Ｐ＜０．０５），而缓解期患者与正常对照比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５），同时还观察了离体环境对ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２活性的影响，并对结果进行了分析。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞白介素6受体水平的研究

目的 探讨白介素6(IL-6)及其受体(IL-6R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法 应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中IL-6RmRNA的表达水平,用ELISA法检测血清中IL-6水平。结果 ①活动期SLE患者和非活动期SLE患者及正常人IL-6R阳性表达率为100%。②PBMC中,IL-6RmRNA表达水平:活动期SLE患者为0.902±0.273,非活动期SLE患者为0.519±0.11,正常人为0.573±0.24。活动期组和非活动期组和对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.00),非活动期组和对照组比较差异无统计学意义(P=0.289)。③血清中IL-6水平:活动期组为71.89±20.02pg/mL,非活动期组为17.96±6.93pg/mL,对照组为0.035±0.035pg/mL。活动组显著高于非活动组和对照组(P=0.00),非活动组显著高于对照组(P=0.00)。活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-6水平与PBMC上的IL-6R的表达水平呈正相关(r=0.887和r=0.615,P<0.05)。结论 IL-6及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。检测SLE患者PBMC中IL-6受体的表达水平可作为评估疾病活动性的参考指标之一。     

SLE患者T淋巴细胞IL-13受体α1基因表达及其调节序列甲基化状态的研究

目的 研究SLE患者外周血T淋巴细胞IL-13受体α1（IL-13Rα1）基因mRNA的表达及IL-13Rα1基因调节序列甲基化状态。方法 免疫磁珠法（MACS）分离10例SLE患者和6例正常人外周血CD4+和CD8+ T细胞，采用实时荧光定量PCR检测T细胞中IL-13Rα1 mRNA的表达，并用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测IL-13Rα1基因调节序列的甲基化水平。结果 活动期SLE患者CD4+ T细胞中IL-13Rα1 mRNA表达水平为2.224 ± 0.251，非活动期SLE患者为1.712 ± 0.132，正常人组为1.104 ± 0.044，三组间比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）；CD8+ T细胞中IL-13Rα1 mRNA表达水平活动期、非活动期及正常人组分别为1.672 ± 0.142，1.410 ± 0.154，1.238 ± 0.106，活动期组与正常人组比较差异有统计学意义（P < 0.05），而非活动期组与正常人组、活动期组与非活动期组比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。CD4+ T细胞中IL-13Rα1基因甲基化指数活动期SLE患者为0.454 ± 0.023，非活动期为0.635 ± 0.065，正常人为0.844 ± 0.097，三组间比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）；CD8+ T细胞中IL-13Rα1基因甲基化指数三组间比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。SLE患者外周血CD4+，CD8+ T细胞IL-13Rα1 mRNA的表达与疾病活动度（SLEDAI评分）呈正相关（r = 0.79，P < 0.01；r = 0.76，P < 0.05）；CD4+ T细胞的IL-13Rα1基因的甲基化水平与疾病活动度（SLEDAI评分）呈负相关（r = -0.89，P < 0.01）；CD4+ T细胞IL-13Rα1 mRNA表达与其调节序列的甲基化水平呈负相关（r = -0.84，P < 0.01）。结论 SLE的发生发展可能与DNA低甲基化导致SLE患者T细胞过度表达IL-13Rα1有关。     

SLE患者外周血单个核细胞IL—13mRNA的表达

探讨IL-13在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及其意义,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PGR)检测了34例活动期SLE患者和30名正常人外周血单个核细胞(PBMC)中IL-13mRNA的表达水平.结果表明,活动期SLE患者IL-13的阳性表达率与正常人对照组相比无明显差异(P＞0.05);活动期SLE患者PBMC中IL-13mRNA的平均表达水平(0.8983±0.1153)明显高于正常人对照组(0.6085±0.0903),差异非常显著(P＜0.001).提示高水平的IL-13表达可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关,其通过刺激B细胞活化、分化与增殖或激活B细胞旁路,参与SLE的发病过程.     

系统性红斑狼疮患者外周血IL-18的表达

目的　探讨白细胞介素 18(IL 18)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病中的作用。方法　采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)及酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 40例SLE患者及 2 0例正常对照者血浆中IL 18分泌水平及外周血单一核细胞 (PBMC)IL 18mRNA表达量。结果　SLE患者血浆IL 18水平及PBMCIL 18mRNA的相对表达水平与SLEDAI呈正相关。活动期SLE患者血浆IL 18水平及PBMCIL 18mRNA表达水平显著高于非活动期SLE患者及正常对照 (P均 <0 .0 1)。结论　外周血IL 18可能并未参与SLE的早期发病过程 ,但当疾病发展到一定程度 ,IL 18分泌水平升高 ,可能在疾病的进一步发展中起一定的作用。     

Th17在SLE的组织定位和外周血单一核细胞中的比例

目的 探讨产生IL-17的CD4+T细胞(Th17)在SLE患者组织中的定位,以及与狼疮活动的关系.方法 共聚焦显微镜、免疫荧光双标技术、免疫组化和HE染色,分析Th17细胞业群在4例活动期SLE患者和2例正常人外周血单一核细胞中、皮损组织和肺组织中的定位.流式细胞仪检测50例SLE患者和15例正常人对照外周血Th17的比例,RT-PCR检测相关细胞因子基因表达,用ELISA检测血清中IL-17的分泌水平.结果 在活动期狼疮患者外周血单一核细胞中可见有Th17细胞,其IL-17的荧光强度为(127.6±20.5),明显高于正常人IL-17荧光强度,其值为(40.6±11.1),P＜0.001.在活动期SLE患者受损的皮肤组织和肺组织中可见有Th17细胞的浸润,而正常人皮肤未见有Th17细胞的浸润.活动期SLE患者外周血中Th17比例明显增加,且与SLE活动指数(SLEDAI)呈正相关.相关细胞因子IL-17A和IL-17F mRNA表达明显增加,血清中的不IL-17水平分泌增加,活动期SLE患者中Th17增加与血管炎的发病呈正相关,经过治疗后Th17随病情缓减而减少.结论 Th17细胞亚群在活动期SLE患者体内扩增,其扩增与SLE活动密切相关,可能参与SLE 血管炎的发生.     

SLE患者PBMC中IL-6mRNA和IL-10mRNA的表达

为了进一步了解TH2型细胞因子IL-6和IL-10在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达情况，对7例SLE患者和4例年龄相匹配对照PBMC中IL-6mRNA和IL-10MRNA表达进行了原位杂交检测，并对检测结果进行计算机图象灰度扫描分析、结果SLE患者PBMC中IL-6mRNA和IL-10mRNA均明显高表达，并与患者ANA滴度及抗（ISDNA抗体有一定的相关性尤以IL-6为著。提示IL-6和IL-10作为B细胞刺激因子在SLE发病中具有重要病理性作用，阻止或减少其分泌可能有助于SIE治疗。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞及白介素12、18及其受体mRNA的表达

目的 探讨未经药物治疗的初发系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞亚群分布,白介素12、白介素18及其受体的基因表达.方法 运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发SLE患者、10例正常人Th1/Th2细胞亚群分布;ABI7700Real-TimePCR法同时检测38例患者和28例正常人IL-12、IL-18及其受体mRNA表达水平.结果 ①初发狼疮患者Th1较正常人明显减低(P<0.05),但Th1/Th2无显着性改变.②与正常人组相比,SLE组患者IL-12、IL-18mRNA及其受体表达较正常人明显降低(P值均<0.05);③面部红斑组患者Th1/Th2、IL-12P35较正常人组降低(P均<0.05);④RNP阳性组患者IL-12P40较正常人组升高,IL-12P35、IL-18较正常人组降低(P均<0.05).结论 SLE是一种以Th1细胞下降,Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病,源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致.     

IFI 16及其信号转导途径在系统性红斑狼疮发病中的作用

目的 探讨干扰素诱导蛋白IFI 16及其Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK-STAT)信号转导途径在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测35例SLE患者和16例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中IFI 16的表达水平。体外培养PBMC,用JAK2抑制剂AG490抑制JAK-STAT信号转导途径,再用RT-PCR检测PBMC中IFI 16的表达水平。结果 与对照组比较,活动期、非活动期组IFI 16 mRNA的表达水平明显增高,差异均有统计学意义(P<0.001)。而活动期与非活动期组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在用AG490抑制JAK-STAT信号转导途径后,活动期与非活动期组PBMC中IFI 16 mRNA的表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.001),而正常组用药前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IFI 16在SLE患者的异常高表达提示IFI 16基因可能为SLE的致病基因之一。     

SLE患者雌激素受体-α与相关细胞因子的表达及临床相关性研究

目的 探讨SLE患者雌激素受体(ER)对T、B淋巴细胞的作用机制以及T、B淋巴细胞在SLE发病中的协同作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测40例SLE患者与40例正常人外周血单核细胞(PBMC)ER-α、IL-10、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)mRNA表达水平;分析ER-α、IL-10和BLyS mRNA表达与临床及实验室指标的相关性.结果 SLE组ER-α、IL-10、BLyS mRNA相对表达量显著高于正常人对照组(P＜0.05或P＜0.01),SLE活动期较静止期明显增高(P＜0.05或P＜0.01),且其表达水平与肾损害、蛋白尿、关节炎等临床及实验室指标有相关性.男女SLE组以及男女正常对照组的表达比较差异无统计学意义.结论 IL-10和BLyS与SLE的病情活动性和严重程度相关,ER-α可能在SLE T、B淋巴细胞的作用机制中有重要作用.

Abstract：

Objective To study the mechanism of effects of estrogen receptor (ER) on T and B lymphocytes in patients with SLE and synergistic effect of T and B lymphocytes in the pathogenesis of SLE.Methods Real-time fluorescence quantitative PCR was performed to detect the mRNA expressions of ER-α,interleukin 10 (IL-10) and B lymphocyte stimulator (BLyS) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)from 40 SLE patients and 40 normal human controls. The clinical and laboratory correlation with the levels of these parameters was analyzed. Results A significant increase was observed in the relative expression levels of ER-α, IL-10 and BLyS mRNA in SLE patients compared with the normal human controls (P ＜ 0.05 or 0.01 ), in active SLE patients compared with inactive SLE patients (P ＜ 0.05 or 0.01 ). Additionally, the mRNA expression levels of the 3 parameters were significantly correlated with the presence of renal damage, proteinuria, arthritis, etc. No statistical difference was observed in the mRNA expression levels of these parameters between female and male patients or between female and male normal controls. Conclusions IL-10 and BLyS appear to be correlated with the disease activity and severity of SLE, and ER-α may play an important role in the action mechanism of T and B lymphocytes in SLE.     

催乳素与促生长素对体外培养系统性红斑狼疮患者单一核细胞产生细胞因子的影响

目的 研究催乳素、促生长素对系统性红斑狼疮(SLE)患者Th1/Th2型细胞因子的影响。方法 对SLE患者和正常人对照的淋巴细胞进行体外培养,并测定细胞因子。结果 在自分泌情况下,SLE活动期患者白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)的分泌量显著增高,而干扰素γ(IFN-γ)的分泌量低于静止期和正常人,但差异无统计学意义。经促生长素和催乳素干预后,活动期SLE患者IL-6、IL-10分泌量显著高于自分泌量和正常人对照组。IFN-γ分泌量经促生长素和催乳素干预后,与自分泌量相比,活动期患者无显著升高。促生长素对SLE患者IL-6、IL-10、IFN-γ分泌量的影响与催乳素的影响差异无统计学意义。结论 SLE患者不但存在Th2型细胞因子增高,而且促生长素和催乳素均能刺激Th2型细胞因子进一步增高,且刺激能力相当,并呈正相关。