核酸检测技术在结核病细菌学诊断中的应用与进展

结核病临床和流行病学调查要求结核病的实验室诊断具有高灵敏性、特异性和快速的特点,并能对分支杆菌进行种及种下单位和耐药基因型的鉴定,以便早期制定更为合理、有效的治疗方案或防治策略。而传统的细菌涂片镜检、培养及耐药试验已不能满足上述要求。近十余年来,分子生物学技术已被成功地引入了结核病的诊断。本文对其中的核酸检测技术的应用与进展综述如下。1　聚合酶链反应(ＰＣＲ)近年来,应用ＰＣＲ技术检测结核分支杆菌(ＭＴＢ)发展迅速。ＰＣＲ具有很高的灵敏度,对于因排菌量少、Ｌ型ＭＴＢ而被常规细菌学诊断为菌检阴性肺结核的早期…     

转基因小鼠（Tg）两种髓鞘蛋白（MBP）的T细胞受体（TCR）之间的差异

实验性脑脊髓炎 (ＥＡＥ)动物模型是用于了解人类脱髓鞘病多发性硬化症 (ＭＳ)发病机理重要手段。ＥＡＥ属于中枢神经系统Ｔ细胞介导的自身免疫性疾病。应用髓鞘成分 ,包括鞘碱性蛋白 (ＭＢＰ)、糖脂、髓鞘少树突糖蛋白或某些多肽类物质可诱发ＥＡＥ。ＣＤ4 + Ｔ细胞介导ＥＡＥ的发生 ,转基因小鼠两种Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ) :Ｖα2 3/Ｖβ8 2和Ｖα4 /Ｖβ8 2可分别识别ＭＢＰ的ＮＡｃ 1- 11免疫显性表位。口饲ＭＢＰ可使Ｖα2 3/Ｖβ8 2和Ｖα4 /Ｖβ8 2转基因小鼠 ,免遭ＥＡＥ的侵袭。作者发现这两株Ｔｇ小鼠对ＭＢＰ耐受诱导作用。…     

两种双向培养联合应用法在结核病快速诊断中的应用

[目的]应用两种快速双向培养基对正常结核分支杆菌和L型结核分支杆菌进行分离培养,探讨在结核病诊断中的应用价值。[方法]以经改进的快速双向培养和快速双向L型培养基,对临床结核病人痰标本250份进行分离正常和L型结核分支杆菌,比较2种联合培养法的快速诊断作用。[结果]快速双向培养基培养总阳性率35.2%(88/250);双向L型培养基分离L型结核分支杆菌总阳性率31.2%(78/250)。2种培养基联合应用,总阳性率62.8%(157/250),明显高于单一培养基的检出率(2=38.10、50.11,P值均0.01),亦显著高于传统改良罗氏培养基的检出率36.0%(90/250,2=35.92,P0.01)。[结论]2种双向培养基联合应用,能明显提高结核病检出率,对快速诊断与控制结核病有重要作用。     

丙型肝炎病毒西安株2a型包膜蛋白E区部分cDNA的分析

丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)包膜蛋白区 (Ｅ区 )基因是ＨＣＶ基因组中变异最大的部位 ,不同分离株的核苷酸差异可达40 %左右[1] 。作者对陕西省ＨＣＶ地方株的全部Ｅ1,部分Ｅ2 /ＮＳＩ区进行了序列测定 ,并与已发表的多个株做同源性比较。1 材料和方法 :ＨＣＶ血清取自西京医院丙型肝炎患者 ,血清经 5′非编码区通用引物ＲＴ ＰＣＲ确认ＨＣＶＲＮＡ阳性 ,引物参照ＨＣ Ｊ6设计[2 ] 。序列分别为 :Ｒ1( )ＧＴＧＧＧＴＡＡ ＧＧＴＣＡＴＣＧＡＴ(6 95～ 712 ) ,Ｒ2 ( )ＧＣＣＧＡＣＣＴＣＡＴＧＧＧＧＴＡＣ (731～ 748) ,Ｒ3(- )ＡＣＣＴＡＧＴ…     

BECKMAN COULTER CX9ALX大型生化分析仪故障六例

我院引进的美国ＢＥＣＫＭＡＮＣＯＵＬＴＥＲ公司的大型生化分析仪ＣＸ9ＡＬＸ ,测试速度快 ,80 0项目 /小时 ,准确性高 ,重复性好。工作过程中 ,实时检测 ,提供系统各部分的状态 ,有利于故障的快速排除。现将维修的几例故障整理如下 ,供大家在工作中参考。1 ＴＢＩＬ、ＤＢＩＬ (ＢａｒｃｏｄｅＭｏｄｅ)同时定标 ,系统提示“ＮｏＡｓｓｉｇｎｅｄＢａｒｃｏｄｅ” ,定标不能进行。查使用手册 ,在ＴＢＩＬ、ＤＢＩＬ同时定标时 ,ＢＩＬＩＲＵＢＩＮ1、 2都要安排条码。在ＭＡＸＴＥＲＳＣＲＥＥＮ下 ,按Ｆ3ＣＡＬ ,再按Ｆ6,选 7ＡＳＳＩＧ…     

血白病同种异体干细胞移植后复发的治疗

10名急性髓细胞白血病 (ＡＭＬ)慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ)和髓细胞发育不全综合征 (ＭＤＳ)病人 ,采用化疗 (Ｂｕ/Ｃｙ/Ｅｔｏ ,Ｂｕ/Ｆｌｕ ,ＴＢＴ/Ｃｙ/Ｅｔｏ)与放疗 (12Ｇｙ)治疗后 ,接受同种基因免疫疗法病情缓解。方法是从 3名亲属和 7名ＨＬＡ -Ｂ相同的非亲属供者获得外周干细胞移植 (ＰＢＳＣＴ) ,以增强移植抗白血病作用。病人通过无移植抗宿主疾病 (ＧＶＨＤ)预防而达到白血病髓细胞大大减少而缓解。其间 ,给予粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (ＧＭ -ＣＳＦ ,60 μｇ/ｍ2 ) ,输注。全部病人出现急性ＧＶＨＤ(Ⅰ～Ⅳ级 )。其中 8…     

6种结核病实验室检查技术的对比性研究

结核病的诊断依赖于Ｘ射线影像诊断和痰厚涂片抗酸染色镜检两种手段 ,由于Ｘ射线的低特异性和痰涂片镜检的低敏感性给结核病的早期诊断带来了很多困难。近年来日臻完善的ＥｌＩＳＡ技术的应用和ＢＡＣＴＥＣ系统的建立以及ＰＣＲ技术的飞速发展 ,给结核病的实验室诊断带来了新的前景 ,血沉降试验的异常为结核病的诊断和预后也有一定的帮助。我室对2 75例病人的临床标本分别进行 6种不同技术检测 ,同时对病人做ＯＴ实验 ,对比分析各种技术的优缺点和局限性 ,正确评价各种诊断技术 ,以便于为合理地推广和应用各种技术提供依据。对象和方法　 (…     

DNA修复酶6-氧-甲基嘌呤-DNA甲基转移酶研究进展

Ｆｏｏｔｅ与Ｏｌｓｓｏｎ等于 1980年发现Ｅ .ｃｏｌｉ 6 氧 甲基嘌呤 ＤＮＡ甲基转移酶 (ＭＧＭＴ或ＡＧＴ ,ＥＣ2 .1.1.6 3)与Ｏ6 甲基鸟嘌呤 (Ｏ6ｍＧ)的修复有关。Ｋａｕｔｉａｎｉｎｅｎ等又于 1986年发现肿瘤转化株细胞内的ＭＧＭＴ活力成倍增高。随后 ,人们发现2 0 %的人类肿瘤细胞系的ＭＧＭＴ活力下降 ,ＭＧＭＴ活力还与肿瘤的诱导及耐药性有关[1] 。一、ＭＧＭＴ基因与ＭＧＭＴ蛋白质1 基因结构 :人ＭＧＭＴ(ｈＭＧＭＴ)基因位于 10号染色体2 6ｑ上[2 ] ,含有 5个外显子、4个内含子[3 ] 。碱基组成比例为Ａ :174、Ｃ :2 31、Ｇ…     

噬菌体生物扩增法检测结核杆菌在糖尿病合并结核感染快速诊断中的应用

[目的]探讨噬菌体生物扩增法检测结核杆菌在糖尿病合并结核感染快速诊断中的应用价值。[方法]收集本院结核病区及门诊糖尿病患者的痰、支气管镜镜抽取液标本共89份,应用噬菌体生物扩增法检测结核分支杆菌,同时作抗酸染色、并用VersaTREKTM细菌培养仪做分支杆菌培养。噬菌体生物扩增法和/或培养阳性的菌株32株做分支杆菌菌种鉴定。[结果]噬菌体生物扩增法检测的阳性率31.4%(28/89)显著高于涂片法19.1%(17/89)(P﹤0.01),与VersaTREKTM培养法阳性率28.1%(25/89)相比,差异无统计学意义(P﹥0.05)。21株VersaTREKTM培养法与噬菌体生物扩增法同时阳性的菌株和7株噬菌体生物扩增法阳性菌株均鉴定为结核分支杆菌;4株VersaTREKTM培养法阳性菌株鉴定为非结核分支杆菌。[结论]噬菌体生物扩增法检测结核分支杆菌快速、特异、敏感,在糖尿病合并结核感染的快速诊断中有重要价值。     

西门子 MRI 运行中断故障的检修

1　故障现象　我院于 1992年引进德国西门子大型1 0Ｔ/ＭＰＡＣＴ超导ＭＲＩ机 1台 ,该机从 1998年 9月起经常出现运行中断故障 ,其故障现象为 (1)经常在对病人进行扫描时监视器某区的显示内容突然丢失 ,然后监视器由白变黑 ,这时扫描仍正常进行 ,但是在这个序列结束后 ,扫描得到的数据不运算 ,所以也没有数据重建。 (2 )机器在正常状态下会自动转到停机程序上 ,也就是在监视器上出现ＴＹＰＥ :Ｂ(ＢＯＯＴ) ,Ｃ(ＣＯＮＴＩＮＵＥ) ,ＯＲＮ(ＮＥＷＣＯＭＭＡＮＤＭＯＤＥ) ,这时必须重新 (ＢＯＯＴ)或关机重新启动机器 ,否则一切工作都要停…     

641份无偿献血报废血液原因分析

随着无偿献血工作的不断开展 ,无偿献血工作需经常下基层采血 ,检测条件受到限制 ,因而不可避免地出现较多不合格血液报废现象 ,造成血液浪费、环境污染和经济损失。为提高无偿献血的合格率 ,对 2 0 0 1年报废血液原因进行分析 ,现将结果报告如下。材料与方法1　标本　 2 0 0 1年 1～ 11月 9473名无偿献血参加者 ,年龄18～ 5 5周岁。2　检测仪器　全自动加样仪ＧＥＮＥＳＩＳＲＳＰ10 0 ,酶标仪ＴＥＣＡＥＳＰＥＣＴＲＡ ,洗板机ＭＯＤＥＬ15 75 ,梅毒旋转仪ＴＩＴＲＡＭＡＸ10 1。3　检测试剂　ＨＢｓＡｇ由上海科华生物技术有限公司和厦门…     

东芝TCT－80A CT数据系统故障分析及修理

东芝ＴＣＴ－８０ＡＣＴ数据系统故障分析及修理北京军区总医院放射科田元生我院东芝ＴＣＴ－８０Ａ第三代全身ＣＴ，当患者登录及扫描参数设定后，不能扫描，监视器显示ＥＲＲ７４ＡＢＮＯＲＭＡＬＥＮＤＯＦＣＯＬＬＥＣＴＩＯＮ和停机信号。虽经多次重新启动，故障不能...     

应用PCR-SSCP检测耐异烟肼结核分支杆菌Kat G基因突变

结核分支杆菌对抗结核药物产生耐受性，已成为全球结核防治工作面临的一个严重问题［１，２］。传统的药敏试验需１～２个月，难以满足临床诊治的需要。近年来发展的ＢＡＣＴＥＣ法测定耐药性也需要３～４周，仍为生长依赖性，且需昂贵仪器设备，因而限制其推广应用。因此对结核分支杆菌耐药机制深入了解，并依此建立准确的药敏检测新方法已成为结核病防治工作的一项重要而紧迫的课题。异烟肼（ＩＮＨ）是一线抗结核药物，最近的研究结果表明，结核分支杆菌耐ＩＮＨ的产生与过氧化氢一过氧化物酶编码基因（Ｋａｔ Ｇ）改变有关。聚合酶链反…     

快速判定西门子DR系列CT机BSP有否故障

在维修西门子ＤＲ系列ＣＴ机的实践中,常遇一些故障现象可能与ＢＳＰ有关,但又无法肯定。此时,如用ＴＳＯ中的ＭＡＣ５０对ＢＳＰ作详细检查,耗时太长,十分不便。这里介绍一种方法,利用机内的ＴＳＯ和ＭＳＯ程序,可以迅速判断ＢＳＰ是否有故障。　　对于ＤＲ３和ＤＲＧ型ＣＴ机,首先进入ＴＳＯ程序,键入如下指令：　　　　＊ＭＡＣ６３　　此宏指令为ＢＳＰ／ＦＵＮ：０,其功能是模拟ＧＡＮＴＲＹ的原始数据传送,由ＢＳＰ输出７２０投影至计算机,其中包括ＤＭＡ传送,在系统盘ＤＥＶ上产生原始数据文件ＣＴＤＡＴＥ－０００。然…     

西门子PLUS4螺旋CT E500111故障排除

故障现象:不管在扫描模式(ＳＣＡＮＭＯＤＥ)还是在预热模式(ＷＡＲＭＵＰ)方式下,主电源三相熔断器63Ａ都烧断,主机不能正常工作,查看ＬＯＯＫＢＯＯＫ,提示Ｅ500128及Ｅ500111故障代码,同时高压发生器柜上的Ｄ640板之一的ＵＴ>82ｋＶ红灯亮,做高压测试(ＨＶＣＴＥＳＴ)也通不过。故障分析:根据故障现象及故障代码,可能原因有以下几点。1高压发生器及高压变压器油箱(ＨＶ-ＴＡＮＫ)故障。2Ｘ线球管(Ｘ-ＲＡＹＴＵＢＥ)故障。3高压电缆(ＨＶ-ＣＡＢＬＥ)故障。4高压滑环(ＨＶ-ＳＬＩＰＲＩＮＧＳ)故障。5阻尼衰减器(ＤＡＭＰＩＮＧＲＥＳＩ…     

医学影像学新进展

医学放射学发展很快 ,特别是近二十多年来发展异常迅速 ,显像技术更加丰富多彩 ,应用及研究的范围也更加广泛 ,使临床放射学发生了质的变化 ,由过去单一的以Ｘ线诊断为主的临床放射学 (Ｃｌｉｎｉｃａｌｒａｄｉｏｌｏｇｙ)发展为包括Ｘ线、ＣＴ、超声成像 (ＵＳ)、ｒ闪烁成像 (ｒ -ｓｃｉｎｔｉｇｒａｐｈｙ)、ＭＲＩ、ＥＣＴ以及正电子发射体层摄影(ＰＥＴ)等显像技术 ,形成了一门崭新的医学学科—医学影像学。介入放射学的兴起 ,又使医学影像学不仅仅可以诊断疾病同时也可以治疗 ,使医学影像学成为临床学科之一。1　信息放射学[1～ 2 ]由…     

SPECTrCBF显像的临床应用研究

本文报告应用９９ｍＴｃ－ＨＭＰＡＯＳＰＥＣＴ对脑血管病和癫痫患者进行ｒＣＢＦ显像研究。对发病４８小时内的脑梗塞以及Ｔ１Ａ患者ｒＣＢＦ显像的阳性率明显高于ＣＴ，多数老年人眩晕患者ｒＣＢＦ异常，对癫痫病灶的定位探查为外科手术治疗提供重要的帮助。     

RT-PCR定量测定人类端粒酶相关基因

本文报告ＴａｑＭａｎＴＭ荧光检测系统用于逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ -ＰＣＲ)定量分析人类端粒酶催化亚基 (ｈＴＥＲＴ)ｍＲＮＡ和端粒酶相关蛋白 (ＴＥＰＩ)ｍＲＮＡ在人类胰腺癌细胞株 (ＡｓＰＣ - 1,ＰＡＮＣ - 1)内的表达。结果表明 ,在ＡｓＰＣ - 1细胞株ｈＴＥＲＴｍＲＮＡ和ＴＥＰＩｍＲＮＡ的表达分别高于在ＰＡＮＣ - 1细胞内表达的 1 5倍和 2 31倍。作者认为ＴａｑＭａｎＴＭ ＲＴ -ＰＣＲ检测可用于临床标本的ｈＴＥＲＴ与ＴＥＰＩｍＲＮＡ定量分析 ,也可测定重要的端粒酶亚基的表达与定量测定其它类型的ｍＲＮＡ ,故此技术的…     

MA—4210尿分析仪打印机传动齿轮修理方法

瑞士ＳＷＥＬＡＢ公司生产的全自动血球计数仪ＡＣ -９２０ ,在我院门诊检验科使用过程中 ,常见的故障及处理方法总结如下。故障显示１“ＥＲＲＯＲＩＮＰＡＲＡＭＥＴＥＲＲＡＭ” ,内部存储器有一个不良参数。解放方法①进入预先设置程序 ,按照说明书检查所有预先设置。②进入服务程序中“ＩＮＩＴＩＡＴＥＣＡＬＩＢＣＯＮＳＴＡＮＴＳ”启动校准常数 ,按“ＳＴＡＲＴ”键 ,删除校准值 ,再重新校准仪器。③关机后重新启动仪器。故障显示２ＲＢＣ、ＨＣＴ、ＭＣＶ、ＨＧＢ、ＰＬＴ、ＷＢＣ均为ＸＸＸ ,不计数。解决办法①重新放上样本再做…     

溴甲酚紫胨水等干燥培养基的质量研究

在压力蒸汽和环氧乙烷灭菌的效果检测中 ,使用的生物试剂———培养基 ,其质量优劣直接影响灭菌检测和灭菌效果的评价。我们应用分值计算法[1～ 8] 对溴甲酚紫胨水和酚红肉汤等干燥培养基的质量进行研究 ,现将结果报告如下 :1　方法1 1　芽胞悬液制备　试验菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞 (ＢａｃｉｌｌｕｓＳｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓＡＴＣＣ795 3　以下简称枯热芽胞 )和枯草杆菌黑色变种芽胞 (ＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｖａｒｎｉｇｅｒＡＴＣＣ93 72　以下简称枯黑芽胞 ) ,试验时将两菌株接种于营养肉汤中 ,分别在5 4℃和 3 …