［Ca2+］i对大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钙激活氯离子通道的调节作用

目的： 探讨细胞浆内游离钙离子浓度（［Ca²⁺］_i）在常氧、急性和慢性低氧条件下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜钙激活氯离子通道（Cl_Ca）的调节作用。 方法: 常规离体血管灌流法检测急性低氧时肺动脉环张力变化；钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养PASMCs，观察常氧和慢性低氧条件下［Ca²⁺］_i的变化并由此对Cl_Ca的影响；同时用四唑盐(MTT)比色法观察当［Ca²⁺］_i变化时Cl_Ca对PASMCs增殖的影响。 结果: (1) Cl_Ca阻断剂尼氟灭酸（NFA）和indaryloxyacetic acid (IAA-94)可以舒张急性低氧引起的肺动脉环收缩。(2) 慢性低氧时［Ca²⁺］_i升高：常氧状态下, PASMCs ［Ca²⁺］_i为(123.63±18.98)nmol/L，低氧时为(281.75±16.48)nmol/L (P<0.01)。(3) 常氧时，NFA和IAA-94对［Ca²⁺］_i 无明显影响(P>0.05)。(4) 慢性低氧时, NFA和IAA-94使PASMCs ［Ca²⁺］_i由(281.75±16.48)nmol/L降低到(117.66±15.36)nmol/L (P<0.01)。(5)MTT比色法中，慢性低氧状态下NFA和IAA-94引起升高的吸光度(A)值降低，由0.459±0.058到0.224±0.025 (P<0.01)。 结论: 低氧引起［Ca²⁺］_i升高，这可能激活Cl_Ca，对［Ca²⁺］_i起正反馈作用，Cl_Ca可能在低氧肺动脉高压中起作用；慢性低氧条件下Cl_Ca可能参与促进大鼠PASMCs的增殖。     

溶血磷脂酸通过蛋白激酶C-α/钙离子途径促进大鼠星形胶质细胞增殖

目的：了解溶血磷脂酸（LPA）对星形胶质细胞（AS）活化增殖的影响及其作用机制。方法:原代培养的新生SD大鼠前脑星形胶质细胞分为对照组、PKC-α激动剂（PMA）组、LPA组、PKC-α抑制剂（Ro31-8220）组、Ro31-8220＋PMA组和Ro31-8220＋LPA组，用二苯基四氮唑溴盐（MTT）比色法以及流式细胞仪（FCM）检测AS增殖。以Fura－2/AM标记细胞内钙离子，紫外分光光度计检测其浓度。用蛋白印迹法检测细胞内PKC-α表达。结果:LPA和PMA能明显促进AS的增殖，并增加细胞内PKC-α的表达以及细胞内钙离子（［Ca2+］i）浓度（P<0.01）；Ro31-8220预处理后，显著缓解LPA促AS增殖程度和［Ca2+］i浓度的增加（P<0.01），［Ca2+］i浓度的变化与PKC-α表达量的变化呈正相关。结论:LPA通过PKC-α/Ca2+途径促进AS的增殖活化。     

β2肾上腺素受体拮抗剂对大鼠心肌梗死后心肌细胞胞浆游离Ca2+浓度的影响

目的：观察β2肾上腺素受体拮抗剂对心肌梗死后心肌细胞胞浆游离Ca2+浓度(［Ca2+］i)的影响。 方法： 结扎冠状动脉，复制大鼠心肌梗死模型。随机分为心肌梗死后2、4、8周组，正常对照组作假手术。分离大鼠心肌细胞，每组大鼠制备20份样品，再随机分为4小组，分别给予β2受体拮抗剂ICI118,551、β1受体拮抗剂阿替洛尔、非选择性β受体拮抗剂普萘洛尔后，用Fura-2荧光技术测定心肌细胞［Ca2+］i。 结果： 心肌梗死后4、8周，ICI118,551组心肌细胞［Ca2+］i增幅显著低于异丙肾上腺素组(24.5%±5.7% vs 57.8%±13.2%, P<0.01; 12.2%±7.9% vs 44.6%±11.3%,P<0.01)；正常对照组和心肌梗死后2周，上述两组心肌细胞［Ca2+］i增幅无显著差异(P>0.05)。正常对照组和心肌梗死后2周，阿替洛尔组心肌细胞［Ca2+］i增幅显著低于异丙肾上腺素组(P<0.05)；正常对照组及心肌梗死后2、4、8周,普萘洛尔组心肌细胞［Ca2+］i增幅均显著低于异丙肾上腺素组（P<0.05）。 结论： β2受体拮抗剂对于有效抑制心肌梗死后交感神经激动引起的心肌细胞内钙超载可能起重要作用。     

耳蜗外毛细胞两种胞内钙库的初步探讨

为探讨毛细胞胞内钙库的种类 ,本文观察了在无钠、无钙和含镧液体中 ,在不受胞外 Ca2 +内流和质膜上 Ca2 +转运机制影响的条件下 ,和在三磷酸肌醇敏感钙库的工具药 thapsigargin和 ryanodine敏感钙库的工具药 caffeine作用下 ,毛细胞胞内游离钙([Ca2 + ] i)的变化过程。分离的豚鼠耳蜗外毛细胞经钙敏荧光染料 5μmol/L fluo-3染色后 ,用激光扫描共聚焦显微镜监测 ,以 fluo-3荧光相对值指示毛细胞 [Ca2 + ] i的高低。 3 0 nmol/L thapsigargin使外毛细胞 [Ca2 + ] i由静态值 1.0增至 1.64± 0 .76,再加入 10mmol/L caffeine后更增至 2 .45± 1.5 9(x± s,n=11,F=7.90 ,P<0 .0 1)。Q值检验示两种试剂引起外毛细胞 [Ca2 + ] i增高程度的差别有极显著意义 (P<0 .0 1) ,表明毛细胞内有对三磷酸肌醇敏感和对 ryanodine敏感的两种钙库参与了胞内 Ca2 + 释放机制     

胆盐对大鼠胰腺腺泡细胞功能状态的影响

目的: 研究脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate, SDOC）刺激时大鼠胰腺腺泡细胞功能状态的变化并探讨其可能的信号转导途径。〖HTH〗方法：胶原酶法分离大鼠胰腺腺泡细胞，经不同浓度的SDOC或正常培养液处理，在不同的时点（30 min、1 h、 4 h、 10 h）采用MTT 法检测不同时点胰腺腺泡细胞的活性；采集上清液检测其中丙二醛含量以及超氧化物歧化酶的活性；另外细胞经Fluo-3/AM负载后，在无钙或含生理钙离子浓度的培养液中以灌流的方式加入不同浓度SDOC，采用激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞 ［Ca2+］i。〖HTH〗结果: SDOC导致胰腺腺泡细胞的存活率降低、且呈时间及浓度依赖性(P<0.05)，1 mmol/L依他酸（egtazic acid，EGTA）使SDOC诱发的腺泡细胞损伤程度明显减轻(P<0.05)；在无钙且含1 mmol/L EGTA的培养液中SDOC未见引起胞浆［Ca2+］i的变化，再次恢复培养液中的钙离子浓度至生理水平，SDOC引发胞浆［Ca2+］i迅速升高；腺泡细胞内［Ca2+］i的变化明显先于细胞培养上清中的生化改变和腺泡细胞的损伤；与对照组相比，SDOC组胰腺腺泡细胞上清液中丙二醛含量增加 (P<0.05)，超氧化物歧化酶活性明显降低(P<0.05)。〖HTH〗结论： SDOC可致胰腺腺泡损伤，且对刺激时间、刺激剂浓度及胞浆钙离子具有依赖性；SDOC通过促进胞外Ca2+的内流导致胰腺腺泡胞浆内钙超载。钙超载作为早期的病理事件通过过氧化反应参与腺泡细胞损伤的发生，钙稳态失衡是SDOC致胰腺细胞损伤的主要因素之一。     

血管疾病治疗新靶标：STIM1和Orai1

钙离子(Ca2+)是常见的第二信使,不同于其它第二信使,其主要位于细胞外或存储于内质网(endoplasmic reticulum,ER)等细胞器内.静息状态下细胞内游离Ca2+浓度(intracellular Ca2+ concentration,[Ca2+]i)约为细胞外的1/20000,受体激活或生物信号刺激可通过改变[Ca2+]i进一步发挥生物放大效应.[Ca2+]i的升高主要通过胞内Ca2+释放和胞外Ca2+内流两大途径.随着胞内钙库的排空,位于质膜上的Ca2+内流通道被激活,使Ca2+由胞外进入胞质内,这个过程称为钙库操纵的钙内流(store-operated calcium entry,SOCE),其通道称为钙库操纵的钙通道(store-operated calcium channel,SOCC).近来研究证实组成SOCC的主要蛋白是:Ca2+感受蛋白基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)[1-2]和Ca2+通道蛋白Orai1[3-4].     

慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞胞内钙的影响及其机制研究

目的:研究慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)胞内钙浓度(［Ca²⁺］_i)的影响及L-型钙通道和胞内钙库的作用,为缺氧性肺动脉高压(HPH)发病机制的进一步研究提供理论依据。 方法:复制大鼠缺氧性肺动脉高压动物模型，利用Fura－2/AM钙离子成像方法测定PASMCs在不同钙离子浓度细胞外液及L-型钙通道阻滞剂nifedipine和IP3R钙通道抑制剂肝素干预前后 ［Ca²⁺］_i变化。 结果:(1)缺氧＋含钙外液组PASMCs ［Ca²⁺］_i 显著高于对照＋含钙外液组（P<0.05）。缺氧＋含钙外液组PASMCs ［Ca²⁺］_i显著高于缺氧＋无钙外液组（P<0.05）。(2)缺氧nifedipine组PASMCs［Ca²⁺］_i在加药前后无显著差异（P>0.05）。（3）缺氧未干预组与缺氧肝素组PASMCs ［Ca²⁺］_i无明显差异（P>0.05）。 结论:慢性缺氧可使PASMCs的［Ca²⁺］_i增加。慢性缺氧引起［Ca²⁺］_i增加可能与细胞外钙内流有关，L-型钙通道和IP3R钙通道在调节［Ca²⁺］_i的过程中可能不独立发挥作用。     

人红细胞抗高血压因子对人脐静脉VSMC胞浆及核内Ca2+水平的影响

采实验用Fluo-3／AM染色在激光扫描共聚焦显微镜下观察了红细胞抗高血压因子（antihypertensivefactor,AHF）对人脐静脉VSMC胞浆（［Ca2＋］i）及核内（［Ca2＋］n）游离钙离子水平的影响,结果表明：AHF（10-4g／mL）明显抑制Bayk8644（10-6mol／L）,KCl（60mmol／L）,AngⅡ（10-6mol／L）,CPA（10-5mol／L）及IP3（10-5mol／L）引起的人脐静脉VSMC［Ca2＋］i与［Ca2＋］n升高。结果提示：1．AHF通过抑制Ca2＋内流、胞内钙库、放等机制阻断［Ca2＋］i的升高：2．AHF有益于核内钙稳态的维持。     

阿魏酸钠抑制纤维粘连蛋白和纤维蛋白原诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移和粘附

目的：探讨阿魏酸钠（SF）对纤维粘连蛋白(FN)和纤维蛋白原(Fg)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移和粘附的影响。 方法： VSMCs源于8周龄自发性高血压大鼠(SHR)的胸主动脉，组织块外生法体外培养VSMCs，在96孔聚苯乙烯平底培养板上进行细胞粘附实验；采用改良的Boyden微孔膜双槽法进行细胞迁移实验，荧光染料Fura-2/AM法测定细胞内游离钙离子(［Ca2+］i)浓度。 结果： (1) FN和Fg可诱导VSMCs的粘附，SF(10-7-10-3mol/L)呈浓度依赖性抑制上述物质诱导的细胞粘附，最大抑制率分别为67.12％和70.23％(P<0.01)。(2) FN和Fg可诱导VSMCs迁移，作用峰值浓度分别为40-60 mg/L和1-5 g/L。SF(10-7-10-3mol/L)呈浓度依赖性抑制上述物质诱导的细胞迁移，10-3mol/L SF对FN和Fg诱导的细胞迁移的抑制率达69.79%和87.06％。(3)Fg和FN显著促进［Ca2+］i升高(P<0.05)，SF明显抑制Fg和FN诱发的［Ca2+］i升高，峰抑制率分别为74.85％和71.57％。 结论： Fg和FN可诱导VSMCs粘附、迁移和［Ca2+］i浓度升高，SF可直接抑制VSMCs的粘附、迁移和［Ca2+］i浓度升高，抑制［Ca2+］i 浓度升高可能是它抑制上述物质诱导的VSMCs迁移的机制之一。     

维拉帕米减轻脂多糖导致的大鼠胰腺腺泡细胞损伤机制的研究

目的：研究维拉帕米（Vera）对脂多糖（LPS）导致的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的拮抗作用及其机制。 方法：胶原酶法分离大鼠胰腺腺泡细胞，预先经Vera (50 mg/L、100 mg/L) 处理15min后, 再经LPS (10 mg/L)或正常培养液处理，在不同的时点（30 min、1 h、4 h、10 h）采集上清液,检测其中丙二醛含量、超氧化物歧化酶、磷脂酶A2的活性；采用MTT 法检测胰腺腺泡细胞的活性；部分胰腺腺泡细胞经Fluo-3/AM负载后，于相应的时点采用灌流方式给予药物或刺激剂，激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞［Ca2+］i的变化。 结果: Vera可减轻LPS所致的细胞损伤（P<0.05）；抑制LPS诱发的胰腺腺泡细胞 ［Ca2+］i 升高（P<0.05）；降低细胞培养上清液中丙二醛含量和磷脂酶A2的活性、增强超氧化物歧化酶的活性。 结论：Vera可能通过抑制钙超载、增强抗氧化能力以及减少胰酶活化的机制，减少LPS所致的胰腺腺泡细胞损伤，从而发挥对胰腺腺泡细胞的保护作用。     

心肌肌浆网Ca2+-ATP酶基因转导改善慢性心力衰竭犬心功能的研究

目的： 探讨以重组腺相关病毒(rAAV)为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬心功能的影响。方法: 选取成年比格犬17只，随机分为对照组4只和心力衰竭组11只。快速右心室起搏建立慢性心力衰竭犬模型并随机分为心力衰竭组4只、心力衰竭＋绿色荧光蛋白（EGFP）组4只、心力衰竭＋SERCA2a组5只(其中1只在开胸后死亡)。接受基因导入的心力衰竭犬行开胸术，分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体。于基因转导30d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查。结果: 基因转导30 d时，心力衰竭＋SERCA2a 组犬的症状及超声心动图指标与心力衰竭＋EGFP组相比有显著好转（P<0.05）；与对照组相比无显著差别。血流动力学监测发现，转导SERCA2a的犬LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高，平均值较EGFP组分别增加54.12％［(214.72±31.74)mmHg vs (139.32±36.79)mmHg］、146.81％［(6 779.43±217.58)mmHg/s vs (2 746.85±931.23)mmHg/s］和71.52％［(-4 341.42±322.02)mmHg/s vs (-2 531.14±616.15 mmHg/s)］，LVEDP则降低了63.43％［(21.86±6.95)mmHg vs (59.78±6.92)mmHg］，所有参数与对照组相比无显著差异。心力衰竭＋EGFP组犬心肌冰冻切片在激光共聚焦显微镜下可见弥漫绿色荧光。结论: 以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善慢性心力衰竭犬心脏的收缩和舒张功能，是1种有前景的治疗慢性心力衰竭的方法。     

Effects of thapsigargin and cyclopiazonic acid on sarcoplasmic reticulum Ca2+ uptake,spontaneous force oscillations and myofilament Ca2+ sensitivity in skinned rat ventricular trabeculae

Thapsigargin (TG) and cyclopiazonic acid (CPA) have been reported to be potent inhibitors of the sarcoplasmic reticulum (SR) Ca²⁺ uptake in isolated SR vesicles and cells. We have examined the effect of TG and CPA on (1) the Ca²⁺ uptake by the SR in saponin-skinned rat ventricular trabeculae, using the amplitude of the caffeine-induced contraction to estimate the Ca²⁺ content loaded into the SR, (2) the spontaneous Ca²⁺ oscillations at pCa 6.6 using force oscillation as the indicator, and (3) the myofilament Ca²⁺ sensitivity in Triton X-100-treated preparations. Inhibition of Ca²⁺ loading by TG and CPA increased with time of exposure to the inhibitor over 18–24 min. TG and CPA produced half inhibition of Ca²⁺ loading at 34.9 and 35.7 μM respectively, when 18–24 min were allowed for diffusion. The spontaneous force oscillations were more sensitive to the inhibitors: 10 μM TG and 30 μM CPA both abolished the oscillations in this time. The myofilament Ca²⁺ sensitivity was not affected by 10 and 300 μM TG or CPA. The results show that the concentrations of TG and CPA necessary to inhibit the SR Ca²⁺ uptake of skinned ventricular trabeculae are much higher than the reported values for single intact myocytes. One reason for this may be slow diffusion of the inhibitors into the multicellular trabecula preparation. Received: 28 July 1995/Received after revision: 11 December 1995/Accepted: 18 December 1995     

白细胞介素-2对心肌β-肾上腺素受体作用的调制

目的：研究生理浓度白细胞介素-2（IL-2）对β-肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素（ISO）心肌细胞效应的调制作用及其信号途径。方法： 采用酶解分离的成鼠心室肌细胞模型，用视频跟踪系统测定单个心室肌细胞的收缩幅度、最大收缩速度和最大舒张速度（±dL/dtmax）；以Fura-2/AM为钙探针，用细胞内双波长钙荧光系统检测心肌［Ca2+］i的变化。结果： ① ISO显著增加心肌细胞的收缩幅度和±dL/dtmax，2×103 U/L的IL-2预处理15 min对心肌细胞的收缩没有影响，但是使心肌细胞对ISO的反应明显降低；② ISO浓度依赖性地增加心肌细胞的钙瞬态值，EC50为（0.12±0.01）μmol/L。2×103U/L的IL-2预处理15 min对心肌细胞的钙瞬态值没有影响，但是使心肌细胞对ISO的反应曲线显著降低，EC50为（0.44±0.06）μmol/L；③ 20 mg/L CTX预处理12 h可显著增加心肌细胞的钙瞬态值，2×103 U/L 的IL-2处理5 min可显著降低钙瞬态值；④ Forskolin显著增加单个心肌细胞的钙瞬态值，IL-2 2×103 U/L预处理15 min后，forskolin增加钙瞬态值的最大效应降低。结论： 生理浓度的IL-2 (2×103 U/L)能够显著抑制ISO对单个分离心肌细胞的正性肌力作用和钙瞬态值增高作用。IL-2的调制作用可能是通过抑制Gs蛋白，降低AC的活性来实现的。     

BQ123对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道活性的影响

目的：探讨内皮素-1受体（ETA）拮抗剂BQ123对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs) 电压门控钾通道（KV）活性的影响。方法： 将12只Wistar大鼠随机分为对照组和慢性缺氧组，每组6只。用急性酶分离法（胶原酶+木瓜酶）获得单个PASMCs，用全细胞膜片钳记录方法，观察BQ123对2组大鼠PASMCs电压门控钾电流（IKV）的影响。结果：(1)在2组大鼠，ET-1（10-8 mol·L-1）对PASMCs IKV都可产生抑制作用，+50 mV时的抑制率分别是（60.21±5.32）%和 (71.04±6.58)%。(2)对照组大鼠，单独使用BQ123对PASMCs IKV无影响（P>0.05，n=5），在此基础上使用ET-1， ET-1对IKV的抑制作用依然存在。(3)慢性缺氧组大鼠，单独使用BQ123可增加PASMCs IKV，+50mV从（98.36±12.04）pA/pF至（105.76±12.13）pA/pF，但差异无显著（P>0.05，n=6），同时使用ET-1后发现BQ123可部分抵消ET-1对IKV的抑制作用，+50 mV从（28.49±6.69） pA/pF升至（74.19±9.74）pA/pF（P<0.01，n=6）。结论：常氧时，ET-1对IKV的抑制作用不是通过ETA介导的。但在缺氧条件下，ETA拮抗剂BQ123可部分拮抗ET-1对IKV的抑制作用，说明缺氧时ETA受体介导了ET-1对IKV抑制作用。     

卡托普利对缺氧/复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响及其离子通道机制

目的：观察卡托普利晚期预处理对缺氧/复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响及其离子通道机制。方法:建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。设正常对照组、缺氧/复氧组、缺氧预适应组和卡托普利组。经Flou-3/AM负载染色后，采用流式细胞分析技术，测定细胞内钙离子浓度(［Ca²⁺］i)；利用膜片钳技术，观察L-型钙通道和钠钙交换电流的变化。结果:（1）缺氧/复氧时，［Ca²⁺］i和Na⁺/Ca²⁺交换电流高于正常对照组（P<0.01），L-型钙电流（I_Ca-L）峰值下降，I-V曲线上移，半数失活电压(V_0.5)减小，ICa-L失活曲线左移。（2）晚期预处理和卡托普利使缺氧/复氧时［Ca²⁺］i低于缺氧/复氧组（P<0.01）；I_Ca-L增加，I-V曲线下移，V_0.5增大及稳态失活曲线右移；Na⁺/Ca²⁺ 交换电流减少；但［Ca²⁺］i和Na⁺/Ca²⁺交换电流高于对照组（P<0.05）。（3）卡托普利组与缺氧预适应组比较上述指标均无显著差异 。结论：心肌细胞缺氧/复氧，通过Na⁺/Ca²⁺交换电流的异常增加可引起［Ca²⁺］i的异常升高及其钙超载；卡托普利通过轻度增加Na⁺/Ca²⁺交换电流及其［Ca²⁺］i而触发晚期预处理，抑制后续缺氧/复氧引起的Na⁺/Ca²⁺交换电流及其［Ca²⁺］i的异常增加。     

Cyclopiazonic acid and thapsigargin reduce Ca2+ influx in frog skeletal muscle fibres as a result of Ca2+ store depletion

We have investigated the influence of the sarcoplasmic reticulum (SR) Ca2+ content on the retrograde control of skeletal muscle L-type Ca2+ channels activity by ryanodine receptors (RyR). The effects of cyclopiazonic acid (CPA) and thapsigargin (TG), two structurally unrelated inhibitors of SR Ca(2+)-adenosine triphosphatase (ATPase), were examined on the SR Ca2+ content, the calcium current and contraction in single frog semitendinosus fibres using the double mannitol-gap technique. At moderate concentrations that only partially inhibited Ca2+ sequestration by the SR, CPA (2-4 microM) induces a concentration dependent depression of contraction and Ca2+ current amplitudes. When Ba2+ is the charge carrier, the inward current is not changed by CPA suggesting that this Ca(2+)-pump inhibitor does not directly affect dihydropyridine Ca2+ channels. Similar effects were obtained with TG (1-5 microM). Changes in Ca2+ currents and contraction were accompanied by a reduced Ca2+ loading of the SR. We attribute the modulation of the Ca2+ current to the selective inhibition of the SR Ca2+ ATPase, resulting in a decreased Ca2+ release and thereby a reduced activation of calcium inward currents. This is therefore taken to represent a calcium release-dependent modulation of skeletal muscle L-type Ca2+ channels.     

重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞内钙离子稳态的影响

目的 观察重组人内抑素(rhEndestatin)对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(AA FLSs)内钙离子(Ca2+)稳态的影响,探讨rhEndomafin促进AA FLSs凋亡的离子机制,为RA药物治疗及寻找其治疗新靶点提供实验依据.方法雄性SD大鼠12只,体质量140～160 g,分为正常组(n=3)和从模型组(n=9).模型组大鼠制备从模型,体外培养AA FLSs,应用Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM孵育培养的细胞,激光扫描共焦显微镜检测有、无细胞外Ca2+,而rhEndestatin作用所致AA FLSs胞内Ca2+荧光强度发生动态变化,可以判断rhEndostatin对AA FLSs胞内Ca2+浓度([Ca2+]I)的影响.结果在胞外有Ca2+的情况下,rhEndostatin可引起静态AA FLS[Ca2+];快速增加,rhEndostatin作用10s后,[Ca2+];急剧增加达峰值,继之随时间缓慢下降,停止加药50 s后,[Ca2+]I尚未回复到加药前基础水平;而在无细胞外钙环境中,rhEndostatin未引起AA FLSs[Ca2+]I变化.结论 rhEndestafin可促进AA FLSs胞外Ca2+内流,引起胞内Ca2+超载,从而促进从FLSs凋亡.