药物抑制兔耳病理性瘢痕中结缔组织生长因子的实验

目的探讨能有效抑制结缔组织生长因子（CTGF）的药物,以便为治疗病理性瘢痕提供依据。方法选择24只大耳白兔建立兔耳病理性瘢痕模型,随机分为4组：A组注射CTGF反义寡核苷酸,B组注射复方倍他米松,C组注射醋酸曲安奈得,D组为对照组,仅注射生理盐水。通过原位杂交法分别检测瘢痕组织中不同治疗组不同时段的CTGF表达,并通过苏木精-伊红（HE）染色法检测瘢痕组织中不同治疗组不同时段的成纤维细胞数。结果A、B、C3组在同一时段其CTGF表达均比D组低,差异有统计学意义（P〈0．05）,A组较B、C两组CTGF表达低,差异也具有统计学意义（P〈0．05）。B、C两组之间CTGF表达差异无统计学意义（P〉0．05）。成纤维细胞计数结果与以上结果基本一致。结论CTGF反义寡核苷酸、复方倍他米松、醋酸曲安奈得均可抑制病理性瘢痕中CTGF的表达,CTGF反义寡核苷酸抑制效果最明显。     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子基因的表达

目的　探讨结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩发病机制中的作用。　方法　分别留取正常皮肤 5例、增生性瘢痕 15例和瘢痕疙瘩 7例组织标本 ,测定组织中羟脯氨酸含量 ,通过逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)和图像定量分析 ,检测组织中结缔组织生长因子基因表达水平。　结果　正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中羟脯氨酸含量分别为 (2 6 .5 2± 4 .10 )、(84 .10± 1.76 )和 (92 .38± 2 .0 4 )μg/ mg,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1) ;正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中结缔组织生长因子 m RNA指数分别为 0 .0 9± 0 .2 5、0 .78± 0 .6 3和0 .84± 0 .0 4 ,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。　结论　结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩纤维化进程中可能起着促进作用。     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子的免疫电镜观察

目的：研究结缔组织生长因子（CTGF）在病理性瘢痕组织中的表达定位，以探讨其在病理性瘢痕中的作用及与病理性瘢痕形成的关系。方法：分别留取正常皮肤2例、浅表性瘢痕3例、增生性瘢痕、增生性瘢痕边缘正常皮肤、瘢痕疙瘩及瘢痕疙瘩边缘正常皮肤各5例组织标本，用特异性抗体作为标记物，用胶体金作示踪物进行免疫电镜观察，观察标记物所在位置，以了解在不同组织中表达水平的差异性。结果：CTGF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、瘢痕疙瘩边缘正常皮肤中的表达均明显高于正常皮肤、浅表性瘢痕及增生性瘢痕边缘正常皮肤。免疫电镜标记显示成纤维细胞细胞超微结构清晰，金颗粒呈团状、点灶状分布，特异性强，CTGF蛋白阳性标记主要位于粗面内质网，粗面内质网核糖体、胶原纤维、细胞外基质、桥粒连接、常染色质等部位也有表达。结论：CTGF与病理性瘢痕的形成有相关性，在其发病过程中可能发挥重要作用。     

结缔组织生长因子与病理性瘢痕

病理性瘢痕是以成纤维细胞为主的细胞成分过度增殖和以胶原为主的细胞外基质过度沉积的皮肤纤维化疾病。近年来，越来越多的研究发现病理性瘢痕的纤维化过程与多种生长因子有关。目前普遍认为转化生长因子β1（Transforming Growth Factor，TGF-β1）是促进纤维化发展的最重要的生长因子之一，在随后的研究中，     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子的表达及其意义

目的:观测结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)在瘢痕组织中的表达,以探讨其与病理性瘢痕形成的关系。方法:分别取正常皮肤20例、成熟瘢痕20例、增生性瘢痕20例和瘢痕疙瘩20例标本,经HE染色、原位杂交(SABC法)染色,用图象分析系统定量分析CTGF在不同组织中表达的差异性。结果:CTGF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、瘢痕疙瘩边缘正常皮肤中呈强阳性表达,明显高于其在正常皮肤中的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);其在成熟瘢痕、增生瘢痕边缘正常皮肤呈弱阳性表达,与正常皮肤相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CTGF在病理性瘢痕的发生发展中起重要作用。     

CTGF与病理性瘢痕关系研究进展

病理性瘢痕主要包括增生性瘢痕(HS)和瘢痕疙瘩(K),它是皮肤对创伤、炎症、烧伤、外科治疗或自发的一种过度的皮肤纤维增生性疾病,目前其形成机制尚未明了。研究发现,许多生长因子与病理性瘢痕的形成有密切关系[1]。随着研究的深入,人们逐渐认识到结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)与病理性瘢痕密切相关,本文就CTGF与病理性瘢痕的最新研究进展作一综述。1CTGF的特点1.1CTGF的概况:1991年Bradham等[2]在用多克隆的抗PDGF抗体筛选人脐静脉血管内皮细胞cDNA文库时,从培养的人脐静脉血管内皮细胞中分离得到相应…     

TGF-β1和CTGF在病理性瘢痕中的表达及意义

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）及结缔组织生长因子（CTGF）在病理性瘢痕组织中的表达，并探讨其在病理性瘢痕发病机制中的作用。方法应用免疫组化技术检测19例瘢痕疙瘩患者（为A组）、32例增生性瘢痕患者（为B组）及15例正常皮肤组织（为C组）中，TGF-β1和CTGF两种因子的表达，并进行统计学分析。结果在A、B组中TGF-β1和CTGF均呈高表达，与C组比较，其差异有统计学意义（P〈0．01），但A、B两组之间比较，其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TGF-β1和CTGF对病理性瘢痕的形成可能起到促进作用。     

反义结缔组织生长因子对增生性瘢痕动物模型的抑制作用

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对兔耳增生性瘢痕模型的作用,探讨增生性瘢痕的基因治疗。方法:建立兔耳增生性瘢痕动物模型,分别将生理盐水、转化生长因子β(1TGF-β1)、TGF-β1 CTGF、CTGF、ASODN作用于动物模型。7、14、20天后观察瘢痕体积的变化,采用WesternBlot方法检测CTGF蛋白表达情况,应用免疫组织化学染色方法检测增生性瘢痕组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达、原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡。结果:注射TGF-β1、CTGF后瘢痕体积、CTGF蛋白表达、PCNA阳性表达均增高,TUNEL阳性细胞减少,其中以联合注射TGF-β1 CTGF最为显著;ASODN作用后瘢痕体积、CTGF蛋白表达、PCNA阳性表达降低,TUNEL阳性细胞增加。结论:CTGFASODN能够有效抑制CTGF蛋白的表达和细胞增殖,并且加快了细胞的凋亡,从而抑制瘢痕增生。     

TGF-β与病理性瘢痕

病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩 ,主要表现为明显的瘤样增生和功能障碍。其组织学特点表现为细胞外基质成分过量沉积 ,胶原排列紊乱[1] 。近年来 ,随着细胞生物学和分子生物学在瘢痕形成机理方面研究的深入 ,人们逐渐发现细胞因子在病理性瘢痕的形成中起重要作用 ,其中 ,转化生长因子β(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ ,ＴＧＦ β)的作用较为肯定。我们就ＴＧＦ β与病理性瘢痕的关系介绍如下。1　ＴＧＦ β的结构和功能ＴＧＦ β主要有ＴＧＦ β1、ＴＧＦ β2 、ＴＧＦ β3、ＴＧＦ β4 、ＴＧＦ β5共 5种异构…     

反义结缔组织生长因子对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的作用

目的：研究结缔组织生长因子（CTGF）反义寡核苷酸（ASODN）对人瘢痕疙瘩成纤维细胞CTGFmRNA的表达和细胞增殖及胶原合成的影响,探讨瘢痕疙瘩的基因治疗。方法：体外分离、培养人正常皮肤成纤维细胞（NSF）和瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）,以脂质体介导方法将CTGFASODN转染KF中,用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测细胞中CTGFmRNA的表达;采用MTT方法测细胞增殖3;H-脯氨酸掺入法检测细胞的胶原合成量。结果：CTGFmRNA在NSF中几乎无表达,在KF中表达增高,CTGFASODN可以抑制其增殖和胶原合成（P〈0.05）。结论：CTGFASODN能够抑制成纤维细胞CTGFmRNA表达和细胞增殖及胶原合成,表明阻断CTGF可能是延缓瘢痕纤维化的有效手段。     

CTGF在病理性瘢痕中的表达及意义

目的：了解细胞生长因子（connective tis sue growth factor，CTGF）在病理性瘢痕中的表达及意义，探讨它在病理性瘢痕发病机制中所起的作用.方法：对11例增生性瘢痕、10例瘢痕疙瘩及10例正常皮肤组织进行免疫组化（SP法）染色，观察CTGF在正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩中的表达，以了解它们在不同组织中表达的差异性.结果：正常皮肤中CTGF的表达为阴性;增生性瘢痕、瘢痕疙瘩成纤维细胞中CTGF的表达与正常皮肤相比均有显著性差异（P＜0.01）;CTGF在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达较增生性瘢痕为高，但两者之间没有统计学差异.结论：CTGF在增生性瘢痕的发病机制中发挥重要作用。     

反义结缔组织生长因子抑制兔耳增生性瘢痕的作用

目的探讨反义结缔组织生长因子（connective tissue grouth factro,CTGF）对兔耳增生性瘢痕的抑制作用。方法选择20只大耳白兔建立增生性瘢痕动物模型,随机分成5组,对照组为A组,注射转化生长因子β1（TGF-β1）为B组,注射CTGF为C组,先后注射TGF-β1和CTGF为D组,注射反义CTGF为E组,每个治疗组又分为治疗7、14、20d3组;通过逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测增生性瘢痕中CTGF mRNA的表达,免疫组织化学检测CTGF蛋白表达,HE、Masson染色观察切片内成纤维细胞数密度,计算机辅助图像分析测算切片内胶原纤维面密度。结果E组中CTGF mRNA、蛋白表达、成纤维细胞数密度和胶原纤维面密度均降低,与A、B组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论反义CTGF可以抑制兔耳增生性瘢痕的增殖过程,使瘢痕组织纤维化程度明显减轻。     

结缔组织生长因子诱导瘢痕成纤维细胞增殖的信号转导机制研究

目的：探讨结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）诱导增生性瘢痕（hypertrophics car,HS）成纤维细胞增殖的信号转导通路。方法：采用3H一胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法观察不同浓度CTGF促Hs成纤维细胞增殖的效应,以Western Blot法检测CTGF刺激HS成纤维细胞0、5、10、15、30、60min后磷酸化及总细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated kinase,ERK1／2）的表达,以二者的比值AI衡量信号通路活化程度;应用特异性阻断剂PD98059阻断ERK通路,MTT法检测CTGF诱导细胞增殖的变化。结果：CTGF在一定浓度范围内呈浓度依赖性促HS成纤维细胞增殖,ERK1／2在无CTGF刺激时AI为0．0131±0．00361,CTGF刺激HS成纤维细胞5、10、15、30、60min后的AI值分别为0．0221±0．00329,0．131±0．0361,0．209±0．0201,0．171±0．0379,0．0413±0．00361,在15min达高峰;采用P098059选择性阻断ERK1／2通路后（OD值=0．42±0．046）与CTGF刺激纽比较（OD=0．66±O．035）,细胞增殖显著受抑（P〈0．01）。结论：ERK1／2是CTGF诱导Hs戍纤维细胞增殖的主要信号通路。     

ATF3和CTGF基因在尿道下裂患者包皮中的表达及雌激素调控研究

目的:雌激素与尿道下裂的发生关系密切,本研究旨在比较尿道下裂患儿包皮和同龄正常儿童包皮中转录激活因子3(ATF3)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达,明确二者与尿道下裂的关系,探寻雌激素引起尿道下裂的分子机制。方法:从包皮中分离成纤维细胞并原代培养,用不同浓度(1.0μmol/L、0.1μmol/L、10.0nmol/L、1.0nmol/L、0.1nmol/L)的17-β乙炔雌二醇(17-EE)处理2h,或选择0.1μmol/L的17-EE处理不同时间(0.5、1、2、4、8、16、24h),观察17-EE对ATF3和CTGF表达的影响。MTT法检测17-EE对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察成纤维细胞ATF3和CTGF表达情况。结果:尿道下裂患者包皮中ATF3和CTGF的表达显著高于正常人包皮组织(P<0.05);高浓度的17-EE干预对包皮成纤维细胞有抑制作用;在17-EE干预早期(1～2h)ATF3的表达呈现一过性增加;CTGF的表达在24h内17-EE干预未见明显变化。结论:ATF3和CTGF是与尿道下裂密切相关基因,雌激素可能通过上调ATF3和CTGF的表达参与调节生殖结节的异常发育,导致尿道下裂。     

Laser-induced thermotherapy (LITT) elevates mRNA expression of connective tissue growth factor (CTGF) associated with reduced tumor growth of liver metastases compared to hepatic resection

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Proliferation and synthesis of hepatocellular tissue after tissue damage are promoted by specific growth factors such as hepatic tissue growth factor (HGF) and connective growth factor (CTGF). Laser-induced thermotherapy (LITT) for the treatment of liver metastases is deemed to be a parenchyma-saving procedure compared to hepatic resection. The aim of this study was to compare the impact of LITT and hepatic resection on intrahepatic residual tumor tissue and expression levels of mRNA HGF/CTGF within liver and tumor tissue. STUDY DESIGN/MATERIALS AND METHODS: Two independent adenocarcinomas (CC531) were implanted into 75 WAG rats, one in the right (untreated tumor) and one in the left liver lobe (treated tumor). The left lobe tumor was treated either by LITT or partial hepatectomy. The control tumor was submitted to in-situ hybridization of HGF and CTGF 24-96 hours and 14 days after intervention. RESULTS: Volumes of the untreated tumors prior to intervention were 38+/-8 mm(3) in group I (laser), 39 +/- 7 mm(3) in group II (resection), and 42 +/- 12 mm(3) in group III (control) and did not differ significantly (P > 0.05). Fourteen days after the intervention the mean tumor+/-SEM volume of untreated tumor in group I (laser) [223 +/- 36] was smaller than in group II (resection) [1233.28 +/- 181.52; P < 0.001], and in group III (control) [978.92 +/- 87.57; P < 0.003]. Forty-eight hours after the intervention intrahepatic mRNA expression level of HGF in group II (resection) was almost twofold higher than in group I (laser) [7.2 +/- 1.0 c/mf vs. 3.9 +/- 0.4 c/mf; P<0.01]. Fourteen days after the intervention intrahepatic mRNA expression level of CTGF in group I (laser) was higher than in group II (resection) [13.89 +/- 0.77 c/mf vs. 9.09 +/- 0.78 c/mf; P < 0.003]. CONCLUSIONS: LITT leads to a decrease of residual tumor growth in comparison to hepatic resection. Accelerated tumor growth after hepatic resection is associated with higher mRNA level of HGF and reduced tumor growth after LITT with higher mRNA level of CTGF. The increased CTGF-mediated regulation of ECM may cause reduced residual tumor growth after LITT.     

肾衰2号方抑制残余肾TGF-β1与CTGF mRNA的过度表达

目的：探讨肾衰2号方通过抑制转化生长因子-β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）mRNA的过度表达而减轻肾脏纤维化的作用机制。方法：制作大鼠5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠肾纤维化模型,分别给予肾衰2号方及主要单味药党参、桃仁灌胃,并设科素亚对照组。治疗2个月后用RT-PCR的方法检测CTGF和TGF-β1 mRNA的表达。结果：在5/6肾切除慢性肾衰竭肾纤维化模型组中表现为TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达（P〈0.01）,经肾衰2号方治疗后TGF-β1、CTGF mRNA的表达降低（P〈0.01）,科素亚也有一定的作用,而党参、桃仁的作用不明显。结论：肾衰2号方减轻肾纤维化的机制在于抑制细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达。