人血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性HPLC测定法

 目的：建立血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性高效液相色谱测定法。方法：血浆标本经碱化以正己烷 异戊醇(99:1)提取、吹干后与GITC柱前衍生化，形成非对映体。以乙晴-水-冰醋酸(60∶40∶0.01)为流动相，经C₁₈ODS柱分离后在紫外λ208nm处检测。结果：对映体曲线范围25μg·L^-1～800μg·L^-1；最低检出限<20μg·L^-1；批内、批间平均RSD均<6%；平均回收率：102.2%；临床大多数常用药物对本法无干扰。结论：本法为普罗帕酮临床药动 药效学研究提供了一种简便、可行的检测方法。     

柱前衍生化HPLC测定人血浆中的普萘洛尔对映体

 用高效液相色谱法分离人血浆中s(-)和R(+)－普萘洛尔并测定其含量，选用二苯胺为内标，R(+)-苯乙基异氰酸酯为手性衍生化试剂，ODS为固定相，荧光检测器测定，以甲醇－异丙醇－二氯甲烷－水（70∶5∶1．25∶35）为流动相，流速1．0ml／min，内标、S（－）和R（＋）－普萘洛尔的保留时间分别为7．5，13和14．7min。血浆样品经碱化后，在抽提液乙醚中加入0．2％三乙胺能显著提高萃取回收率，并能促进衍生化反应，减少杂质峰。S（－）和R（＋）－普萘洛尔的最低检测浓度分别为0．8μg／L和1μg／．此法已用于普蔡洛尔对映体的药代动力学研究。     

蛋白质及纤维素衍生物手性固定相分离盐酸坦洛新对映体

 目的研究盐酸坦洛新对映体在纤维素衍生物及蛋白质固定相上的保留行为,优化色谱条件。方法采用Chiralcel OJ,Chiral- cel OD-RH和Chiral AGP为固定相,流动相分别为正己烷-乙醇-二乙胺(70：30：0.1)、50 mmol·L^-1六氟磷酸钾溶液(pH 5.8)-乙腈(65：35)和10 mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 5.8)-乙腈(93：7)；检测波长均为225 nm,并考察了影响分离的因素。结果盐酸坦洛新对映体在上述3种手性固定相均达到基线分离(R_s＞1.5)。结论采用上述3种固定相均可方便地分离盐酸坦洛新对映体。     

立体选择性高效液相色谱法测定血浆中华法林对映体浓度

 目的：建立血浆中华法林对映体浓度的立体选择性高效液相色谱法。方法：血浆标本经碱洗、酸化和乙醚提后，与碳苄氧基-L-脯氨酸进行柱前衍生化为差向体。以正己烷-乙酸乙酯-乙酸-甲醇为流动相，经普通硅胶柱分离对映体和在紫外λ313 nm处检测。结果：对映体标准曲线范围0～4.0 mg/L,最低检出限＜0.1 mg/L,批内，批间平均RSD均＜7%,平均回收率100.22%，临床上常用药物对本法没有干扰。结论：本法简便可靠，可用于临床华法林对映体的药动学和药效学研究。     

柱前衍生化RP-HPLC测定人血清白蛋白中美西律对映体

 目的建立美西律对映体在人血清白蛋白中的测定方法。方法采用手性衍生化试剂2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)对美西律进行柱前手性衍生化。衍生产物以乙腈-0.01mol·L^-1磷酸二氢钾(pH4.5)缓冲液(1∶1)为流动相,用C₁₈色谱柱分离,以R-艾司洛尔为内标,流速为1.0mL·min^-1,检测波长为250nm。结果实验表明,R-美西律与S-美西律的分离度良好。日内、日间RSD均小于15%。美西律对映体在0.1～40.0mg·L^-1内呈线性关系,r=0.9995。结论该方法结果准确,重现性好,灵敏度高,可用于美西律对映体的蛋白结合研究。     

左氧氟羧酸对映体的手性分离和纯度检查

 《中国药典》2010年版二部新收载了左氧氟沙星的质量标准,其中有关物质检查要求采用外标法测定左氧氟羧酸的含量[1]。左氧氟羧酸结构中与甲基相连的为手性碳原子,存在一对光学异构体。查阅国内外文献,笔者目前尚未见与左氧氟羧酸手性拆分相关的研究报道。本实验建立了左氧氟羧酸对映体的手性分离方法,为左氧氟羧酸手性判断以及光学异构体检查提供了简便、高效的方法。     

注射用甲磺酸左氧氟沙星HPLC法含量测定研究

目的:对高效液相色谱法测定注射用甲磺酸左氧氟沙星含量的方法进行研究。方法:色谱条件:C18柱,流动相为醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈(85:15),检测波长为294nm。结果:该方法的回收率为99.88%(RSD=0.05%,n=9)。结论:该方法操作简便,快捷,重现性好,可作为注射用甲磺酸左氧氟沙星的含量测定方法。     

手性固定相高效液相色谱法测定皮肤渗透液中普萘洛尔对映体的研究

 目的 建立普萘洛尔(PL)对映体分离的手性固定相RP-HPLC方法,用于普萘洛尔经皮渗透的对映体选择性研究。方法 采用直链淀粉衍生物手性固定相Chiralpak AD-RH (4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以10 mmol·L^-1硼砂缓冲液(0.1%三乙胺,pH 9.0)-乙腈-乙醇(50∶25∶25)为流动相分离普萘洛尔对映体,流速0.5 mL·min^-1,柱温25 ℃,紫外波长为229 nm。另以硼砂缓冲液为皮肤渗透供给液,研究普萘洛尔对映体及其外消旋体经离体大鼠皮肤渗透的对映体选择性。结果 普萘洛尔对映体在21 min内完全分离(分离度Rf=2.2),在3~200 μg·mL^-1内线性关系良好 ,R-普萘洛尔和S-普萘洛尔的平均回收率分别为100.84%和103.24%。另皮肤渗透实验结果表明,普萘洛尔外消旋体与对映体、及对映体之间经离体大鼠皮肤的渗透速率无显著差异。结论 所建立的手性固定相RP-HPLC法准确、灵敏、高效,成功应用于普萘洛尔经皮渗透的对映体选择性研究。     

HPLC测定磷酸二甲啡烷原料药中的三个异构体杂质

目的 建立磷酸二甲啡烷原料药中3个异构体杂质的定量分析方法。方法 流动相为正己烷-异丙醇-甲醇-三氟乙酸-二乙胺(850∶100∶50∶1∶0.5),流速为1.0 mL·min^-1,采用CHIRALCEL^® OZ-H(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,检测波长为215 nm,柱温35 ℃,进样量20 μL,以主成分自身对照法计算异构体含量。结果 磷酸二甲啡烷主峰与对映异构体杂质M分离度大于1.5、杂质G与杂质I之间分离度大于1.0杂质,M、G、I分别在(0.518 0~1.554 0) (0.508 0~1.524 0) (0.507 5~1.522 5) μg·mL^-1内线性关系良好(相关系数r分别为0.995 0、0.999 5、0.999 5);相对主成分的校正因子分别为1.19、0.99、1.03;加样回收率分别为112.3%、88.3%、102.9%(n=9);定量限为0.508 5、0.526 0、0.507 5 μg·mL^-1;检测限为0.152 6、0.157 8、0.169 2 μg·mL^-1。3批样品结果异构体杂质M最大值为0.017%,杂质G、I均小于检测限。结论 该方法简便,准确度,重复性良好,可用于检测磷酸二甲啡烷合成工艺中产生的3个异构体杂质。     

血浆中比索洛尔对映体的拆分及含量测定方法

目的　探索血浆中比索洛尔 (BSP)两个对映体的拆分及含量测定方法。方法　采用乙酰葡萄糖异硫氰酸酯 (GITC)为柱前衍生化试剂 ,以RP HPLC测定血浆中各对映体的含量。结果　流动相为乙腈 水 (3∶2 ) ,紫外检测波长为 2 70nm ,两个对映体分离度好 ,各对映体血药浓度在 2 5～ 50 0ng·mL- 1 范围内呈良好线性关系 ,BSP最低检测浓度为 1 0ng·mL- 1 (S/N >3) ,低、中、高 3种浓度的 (S) BSP或 (R) BSP的日内、日间RSD均小于 1 0 % ,方法回收率 >95 % ,萃取回收率 >80 %。结论　本方法可用于分离测定血浆中比索洛尔对映体以及对映体药动学立体选择性差异的研究。     

HPLC手性流动相添加剂法拆分药典收载三种含N手性药物及其机制探讨

 目的 采用磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）作为手性流动相添加剂,以反相高效液相色谱技术(RP-HPLC),建立了磷酸氯喹、马来酸氯苯那敏、盐酸维拉帕米3个含N碱性药典品种对映体在RP-HPLC系统中的拆分方法并探讨其机制。方法 色谱柱为Alltima C₁₈（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（含磺丁基醚-β-环糊精、磷酸二氢钠,用磷酸调pH值至2.5）;检测波长：332、264、278 nm;流速：0.8 mL·min^-1;柱温：25 ℃。结果 磷酸氯喹、马来酸氯苯那敏、盐酸维拉帕米可在上述色谱条件下分别与其对映体得到分离,同时考察手性流动相添加剂的种类和浓度、pH、缓冲盐的种类和浓度、有机相的种类和比例、柱温对药物对映体拆分效果的影响,选择了最佳的手性分离条件并对其分离机制作了探讨。结论 SBE-β-CD作为一种手性添加剂,用于手性流动相RP-HPLC,可拆分含N碱性的手性药物,其手性分离效果明显优于天然环糊精（β-CD）及衍生化的中性环糊精（HP-β-CD）。     

高效液相色谱法同时测定复方氧氟沙星滴耳液中3种组分的含量

 目的：建立HPLC法同时测定复方氧氟沙星滴耳液中氧氟沙星、替硝唑和地塞米松磷酸钠的含量。方法：以氯霉素为内标，ODS为固定相，0.2%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至2.70)-乙腈(68∶32)为流动相，检测波长为240 nm。结果：平均回收率及RSD分别为氧氟沙星99.5%，0.8%；替硝唑101.0%，1.2%；地塞米松磷酸钠98.2%，1.5%。结论：本法简便、快速，结果准确，适用于该制剂的质量分析检验。     

柱前手性衍生化-正相高效液相色谱法拆分甲基麻黄碱对映异构体

目的 建立一种用柱前手性衍生化－正相高效相色谱法分析甲基麻黄碱对映异构体的方法。方法 以（－）－氯甲酸薄荷醇酯作为手性衍生化试剂，（－）－甲基麻黄碱与（＋）－甲基麻碱生化后生成一对非对映异构体。选用LichrosorbSi60柱，以正已烷－异丙醇－三乙胺（体积比为94：6：0．02）为流动相，在220nm下检测。结果 非对映异构体色谱峰的保留时间分别为3．6min和4．3min。经电喷雾离子阱多级质谱分析验证了衍生物结构。结论 本方法操作简单、重现性好，可用于甲基麻黄碱对映体的质量控制。     

手性萃取分离普萘洛尔对映体的研究

 目的以S,S-酒石酸酯为手性选择剂,研究普萘洛尔对映体在水相和有机相中的萃取分配行为,建立实验中优化的手 性萃取条件。方法考察水相pH值、选择剂浓度和对映体浓度的化学计量关系、有机溶剂以及不同烷基链酒石酸酯对萃取 性能的影响;对萃取过程进行量热分析;使用中空纤维膜研究其多级萃取分离应用效果。结果 S,S-酒石酸十二酯为手性选 择剂,氯仿为有机溶剂,水相pH值约为4．4,对映体浓度约为5 mmol·L^-1。使用量热分析从热力学角度证明该手性萃取过程 同时为焓控和熵控过程。通过多级手性萃取,出口水相普萘洛尔对映体浓度比值约为1．46。结论合适的萃取条件下能够 实现普萘洛尔对映体的手性分离。     

盐酸左旋沙丁胺醇的HPLC测定

 目的 建立了HPLC测定盐酸左旋沙丁胺醇含量及有关物质的方法。方法 采用Chirex(S)-ICA and?NEA New Column手性柱,以正已烷-二氯甲烷-甲醇-三氟乙酸(240:140:20:1)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为278 nm。结果 盐酸左旋沙丁胺醇与杂质分离良好,在0.004～0.8 nag·mL^-1范围内峰面积与进样浓度呈良好线性关系(r=0.9998),日内、日间RSD均小于1.5％,最低检测量为0.8 ng,最低定量限为2.5 ng。结论该法精密、准确,可用于盐酸左旋沙丁胺醇含量及有关物质的测定。     

HPLC测定心宁胶囊中葛根素含量

 目的:采用HPLC测定心宁胶囊中葛根素含量,以控制该制剂的质量。方法:用十八烷基键合硅胶柱分离葛根素,以甲醇-水-磷酸(280∶720∶0.15)为流动相,检测波长250nm。结果:葛根素峰与其它组分峰的分离度大于1,理论塔板数以葛根素峰计算为8310;线性范围0.2～2μg(r=0.9999);平均回收率99.4%,RSD=2.47%(n=5)。结论:本法简便、快速,适用于该产品质量分析检验。     

氯诺昔康的HPLC分析

目的　考察不同试验条件下氯诺昔康及杂质的液相色谱行为 ,建立氯诺昔康有关物质及含量的HPLC测定方法。方法　以C18为色谱柱 ,0 .0 5mol·L-1磷酸二氢钾溶液 (含 0 .0 5 %三乙胺 ,用氢氧化钾调节 pH值至 6 .8) 乙腈 甲醇 (6 3∶2 8∶9)为流动相 ,检测波长为 2 6 4nm。结果　线性关系r =0 .9999,重复性实验RSD为 1.1%(n =5 )。结论　此法简单、准确 ,可用于氯诺昔康的质量控制。     

盐酸雷莫司琼中有关物质测定方法的建立

 目的建立使用HPLC测定盐酸雷莫司琼原料中有关物质和右旋体的检测和控制方法。方法采用Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH5.2)(30∶70)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为210 nm,测定盐酸雷莫司琼原料中有关物质;采用CHIRAL NEA-R(4.6 mm×250 mm,5μm)手性柱,以乙腈-0.05mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(pH5.2)(50∶50)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为306 nm,检查样品中右旋体的含量。结果盐酸雷莫司琼与合成反应中的4个重要中间体,能够得到有效分离,控制总杂质不超过1.0%。S-(+)和R-(-)盐酸雷莫司琼的保留时间分别为10.2和8.9 min,分离度大于2.5。结论上述方法准确、简便、专属,适用于盐酸雷莫司琼中有关物质及右旋体检查。     

RP-HPLC同时测定复方替硝唑栓中替硝唑和氧氟沙星的含量

 目的:测定复方替硝唑栓中替硝唑和氧氟沙星的含量。方法:采用RP-HPLC用Phenomenex ODS柱,以乙腈-0.2%三乙胺水溶液(40∶60)用磷酸调节pH为2.70为流动相,氯霉素为内标,检测波长为296nm。结果:替硝唑和氧氟沙星分别在20～90μg·ml^-1(r=0.9999,n=7),4～20μg·ml^-1(r=0.9998,n=7),浓度范围内呈线性关系。替硝唑和氧氟沙星平均回收率(n=4)分别为101.04%,99.20%;RSD分别为1.7%,1.5%。结论:此方法简便、快速、准确。     

高效液相色谱法测定清心平肝口服液中芍药苷的含量

目的采用高效液相色谱法测定清心平肝口服液中芍药苷的含量。方法用Diamonsi C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以乙腈-0.1%磷酸(17∶83)为流动相,检测波长230 nm。结果芍药苷在0.18~3.6μg范围内线性关系良好,r=0.999 6,其平均加样回收率为98.80%,RSD=0.36%(n=6)。结论此方法简便、快速、可行,可用于清心平肝口服液的质量控制。