外周血间充质干细胞复合富血小板血浆对腱骨界面愈合的影响

探讨兔外周血间充质干细胞(PB-MSCs)复合富血小板血浆(PRP)对腱骨愈合的作用效果.48只新西兰兔分成4组,行前交叉韧带重建术,分别向各组股骨道内注入凝胶、PRP凝胶、PB-MSCs凝胶及PRP+PB-MSCs凝胶.术后4、8、12周各组随机处死4只实验兔,对标本行HE染色,观察腱骨界面组织形态学特点.与对照组相比,PRP组、PB-MSCs组及PRP+PB-MSCs组3个时间点组织形态学评分更高,其中PRP+PB-MSCs组评分最高,差异有统计学意义(P<0.01). 说明PRP、PB-MSCs均能促进腱骨愈合,并且PB-MSCs与PRP具有协同作用.     

自体骨软骨移植联合富血小板血浆对兔膝关节骨软骨缺损的修复作用及机制

目的:探讨自体骨软骨移植联合富血小板血浆(PRP)修复兔膝关节骨软骨缺损的效果及其机制。方法:40只SPF级新西兰大白兔随机分为对照组、模型组、移植组、PRP组和联合组,每组8只。对照组不进行任何干预,另外4组构建关节软骨缺损模型,分别为空白模型、自体骨软骨移植模型、PRP植入模型和自体骨软骨移植联合PRP植入模型。干预8周后,使用国际软骨修复学会(ICRS)组织学分级对软骨修复情况进行评价,并运用酶联免疫吸附法检测膝关节液中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平。结果:ICRS组织学分级显示,移植组、PRP组和联合组的骨表面、软骨矿化、基质和细胞分布评分均高于模型组(P <0. 05),且联合组的软骨矿化、基质和细胞分布评分亦均高于移植组和PRP组(P <0. 05)。与对照组比,模型组关节液中GSH和SOD水平明显降低,而MDA和8-OHdG明显升高(P <0. 05)。移植8周后,移植组上述指标均未见明显改善(P> 0. 05),而PRP组和联合组各指标均明显改善(P <0. 05)。PRP组关节液中GSH和SOD水平明显高于移植组,而MDA和8-OHdG水平低于移植组(P <0. 05)。联合组MDA水平明显低于PRP组(P <0. 05)。结论:PRP能够明显改善关节氧化应激损伤,可有效促进关节软骨修复,有助于提高自体骨软骨移植的疗效。     

脂肪干细胞联合富血小板血浆修复关节软骨研究进展

关节软骨容易受到损伤,而且缺乏自我修复的能力,传统治疗方法效果并不理想。随着再生医学和组织工程学的发展,越来越多的研究表明,自体脂肪干细胞联合富血小板血浆(PRP)修复关节软骨疗效显著。干细胞是尚未分化的原始细胞,在一定条件下可以向骨、软骨和脂肪等细胞分化;PRP是高度浓缩的血小板提取物,含有多种细胞生长因子。将干细胞与PRP联合应用,双重强化了关节软骨的修复作用,且来源自体,安全可靠。     

富血小板血浆在自体骨修复山羊颅骨缺损中的作用

目的 观察富血小板血浆（PRP）在自体骨修复山羊颅骨缺损中的作用,验证自体骨与富血小板血浆混合物的修复效果.方法 制作山羊颅骨缺损模型,设空白对照组,分别用自体骨渣、自体骨渣与富血小板血浆混合物修复颅骨缺损,12周后行病理学检查,16周后行生物力学检查.结果 颅骨修复后12周的标本组织学检查示实验组成骨较对照组有明显增加.自体骨/PRP组缺损完全修复.生物力学测试最大载荷、最大负荷对应挠度实验组与对照组无显著差异.自身最大载荷比有显著性差异（P=0.015）.结论 PRP对骨形成有促进作用,PRP/自体骨渣混合物是一种优良的骨缺损修复材料.     

富血小板血浆复合自体浓缩红骨髓促进骨缺损愈合的实验研究

目的 观察富血小板血浆(PRP)与自体浓缩红骨髓(RBM)复合应用于修复兔桡骨骨缺损的疗效.方法 将24只新西兰大白兔随机分为A、B、C、D四组,每组6只,建立双侧桡骨骨缺损模型.A组置入PRP+RBM+纤维蛋白胶(FG),B组置入PRP+FG,C组置入RBM+FG,D组置入FG.分别于术后第4、8、12周通过大体观察、X线检查、组织学观察及影像学评分等方法观察骨缺损修复情况.结果 A组动物骨痂形成量、骨缺损愈合程度及影像学评分于第4、8、12周均优于B、C、D组(P＜0.05).结论 PRP复合RBM具有明显促进兔桡骨缺损愈合的作用.     

围手术期自体血回收分离机制备富血小板血浆和自体凝血酶的研究

目的验证围手术期使用自体血回收分离机制备富血小板血浆(PRP)的可行性及有效性,探索制备自体凝血酶并用以制备富血小板凝胶(PRG)的方法。方法选取2018年10月至2019年1月在北京积水潭医院行单侧全髋关节置换术的30例患者,按照随机数字法分为观察组和对照组,每组15例。所有患者均在手术前30 min使用自体血回收分离机制备PRP,采血前后检测患者血红蛋白、血小板(PLT)及白细胞(WBC),并检测PRP中的PLT及WBC水平及富集程度。其中,观察组取PRP 1. 5 m L加入10%葡萄糖酸钙,经水浴、离心制备自体凝血酶,使用自体凝血酶激活PRP制备PRG;对照组使用10%葡萄糖酸钙激活PRP,30 min内观察并记录两组PRP被激活形成凝胶的时间。结果 30例患者PRP制备均完成,血流动力学无明显波动。两组患者的PRP生成量、PLT基础值、PRP中PLT含量及富集度,WBC基础值、PRP中WBC含量及富集度比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。激活物与PRP混合后,观察组12例2 min时凝集成凝胶,3例3 min时凝集;对照组15例30 min时均未凝集。结论围手术期可利用自体血回收分离机制备自体PRP,其所得产物PLT及WBC可达到治疗水平,且使用PRP水浴离心制备自体凝血酶,作为激活剂制备PRG方法可行。     

不同比例激活剂对富血小板凝胶的生物学影响

目的比较不同比例激活剂对富血小板凝胶的生物学影响,研究其用于角膜基质再生的可行性。方法抽取兔全血,经二次离心法制备富血小板血浆（PRP）,将PRP 与激活剂按不同比例激活,制备PRP 凝胶。实验分为3 个实验组,分别为9：1 组（PRP：激活剂=9：1）、11：1 组（PRP：激活剂=11：1）及5：1 组（PRP：激活剂=5：1）。将兔角膜基质细胞与PRP凝胶共同培养,进行组织形态学观察用细胞增殖- 毒性检测试剂盒法,分别检测3个实验组PRP凝胶释放的复合生长因子促角膜基质细胞的增殖作用。对不同实验组制备的PRP凝胶与双层猪角膜基质进行黏附性观察。结果9：1 组制备的PRP 凝胶促进兔角膜基质细胞的增殖和活化作用强于其他实验组。3 个实验组中,只有9：1 组制备的PRP 凝胶苏木精-伊红染色法染色结果显示,呈有序的网状支架结构,能紧密黏附并固定双层猪角膜基质。结论PRP与激活剂以9：1比例制备的PRP凝胶促角膜基质细胞增殖作用最强,同时具有有序网状结构和良好的组织黏附性及相容性,是一种可以用于角膜基质再生的良好支架。     

富血小板血浆在骨科领域的应用与前景

富血小板血浆(PRP)是自体血小板的浓缩体,含有丰富的血小板,其所含的多种生长因子,其比例与体内正常比例相似,有助于促进骨、软骨的缺损修复,引导软组织再生及预防感染等。现就相关文献回顾探讨富血小板血浆的分离和制备、成分和作用,以及在骨科领域中的应用、作用机制和展望等,为PRP在骨科领域中的应用提供依据。     

富血小板血浆诱导骨髓基质干细胞联合软骨支架治疗兔激素性股骨头坏死

目的 观察自体富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)诱导骨髓基质干细胞联合同种骨软骨支架治疗早期兔激素性股骨头坏死的疗效,探索早期股骨头坏死治疗的新方法.方法 采用含有抗凝剂的真空采血管从实验兔的耳中央动脉采取动脉血5 mL,再通过离心方法获取PRP,用16号骨髓穿刺针从实验兔自体股骨髓腔抽取骨髓5 mL,把抽取的骨髓进行密度梯度离心,获取兔骨髓基质干细胞,并进行细胞原代培养和成骨诱导.对已获取PRP和骨髓基质干细胞的实验兔进行激素性股骨头坏死造模,取同种股骨髁部骨软骨制作软骨支架,最后以制备的软骨支架为载体,将经过成骨诱导的骨髓基质干细胞移植到软骨支架上,形成细胞-支架复合物,用16号骨髓穿刺针对坏死的股骨头进行髓芯减压术,术中将细胞-支架复合物植入坏死的股骨头下.实验动物共分为4组,每组20只,A组为空白对照;B组仅进行髓芯减压;C组髓芯减压后植入经过成骨诱导培养的细胞;D组髓芯减压后植入细胞-支架复合物.实验后在第2、4、8周各组分别处死6、6、8只,每只实验兔的股骨头行大体标本及组织学检查.结果 D组治疗效果最显著,通过空骨陷窝计数发现D组与其他各组的差异有统计学意义(P<0.05).结论 骨髓基质干细胞通过PRP的诱导向成骨细胞分化;软骨支架材料为骨髓基质干细胞向成骨细胞分化提供良好的空间结构,有利于其向成骨细胞分化;PRP和软骨支架材料联合应用可促进早期兔激素性股骨头坏死的修复.     

不同抗凝剂和激活剂组合在自体富血小板血浆凝胶支架促进脂肪干细胞增殖的影响

目的 探讨不同抗凝剂和激活剂组合在自体富血小板血浆(PRP) 凝胶支架对脂肪干细胞(ADSCs) 增殖的影响.方法 在制作自体富血小板血浆支架并植入ADSCs 过程中,使用不同抗凝剂(肝素、EDTA) 和激活剂(凝血酶、Ⅰ型胶原),分为EDTA 与凝血酶组,EDTA 与Ⅰ型胶原组,肝素与凝血酶组,肝素与Ⅰ型胶原组,并设置空白对照组.每日计数细胞并绘制细胞生长曲线,第2、3、4、6 天用MTT 比色法分析各组脂肪干细胞的存活和增殖能力,以ELISA 定量检测生长因子TGF-β1 及细胞的Ⅱ胶原.通过RT-PCR 测定sox-9 基因的表达.结果 与空白对照组相比,各组均保持较高的增殖活性(P<0.05),EDTA 与凝血酶组脂肪干细胞增殖计数最高.各组富血小板血浆均能明显促进生长因子TGF-β1 的释放和Ⅱ型胶原合成以及sox-9 基因的表达,其中EDTA 与凝血酶组生长因子TGF-β1 和Ⅱ胶原量以及sox-9 基因的表达最高.结论 EDTA 与凝血酶组自体富血小板血浆(PRP) 对促进脂肪干细胞增殖效果最好.     

自体富血小板血浆联合骨髓基质干细胞复合改建脱细胞真皮基质修复兔关节软骨的可行性研究

目的:研究自体富血小板血浆（PRP）联合骨髓基质干细胞（BMSCs）复合改建脱细胞真皮基质（ADM）修复兔关节软骨的修复效果及临床价值。方法:选择60只股骨髁关节损伤的青紫蓝兔作为研究对象,随机分为研究组、对照组和空白组,各20只。首先制备PRP,再分离BMSCs,并进行体外培养,接种于ADM支架上。研究组培养基添加10% PRP,其他条件同对照组,空白组兔不做任何处理。将BMSCs-ADM复合物植入兔关节缺损处,在1、2、3个月末对构建的软骨组织进行免疫力学、组织学、生物力学检测,比较PRP-BMSCs-ADM联合修复关节缺损的效果。结果:随着培养时间延长,BMSCs的细胞数目显著增多,呈现S形生长曲线,第3天后进入对数期,第9天后进入平台期;从第3天开始,细胞数目OD值研究组均明显高于对照组（P<0.01）;随着时间的延长,各组标本软骨样细胞数目增多,软骨陷窝逐渐成熟,软骨表面逐渐光滑,IRCS宏观评分和组织学评分均呈现增长趋势（P<0.01）,标本压力弹性模量有上升趋势（P<0.05）;同时期研究组标本评分与压力弹性模量均显著高于对照组和空白组（P<0.01）;3个月后,研究组软骨缺损修复状况明显优于对照组和空白组。结论:自体PRP联合BMSCs复合改建ADM修复兔关节软骨的修复效果良好,具有可行性。     

血塞通联合自体富血小板凝胶对糖尿病足患者血糖、AT-Ⅲ、TNF-α、24 h尿蛋白等的影响分析

目的 探讨不同剂量血塞通联合自体富血小板凝胶对糖尿病足患者的临床疗效.方法 将纳入研究的90例糖尿病足患者分为研究A组(低剂量血塞通联合自体富血小板凝胶组),研究B组(高剂量血塞通联合自体富血小板凝胶组),对照C组(仅自体富血小板凝胶组),检测3组患者相关指标变化情况.结果 1)与治疗前相比,治疗后三组空腹血糖、餐后2...     

富血小板血浆（PRP）对软骨修复的影响

目的：探讨大白兔富血小板血浆（PRP）对软骨修复的影响。方法：构建大白兔关节软骨和耳廓软骨损伤模型,每只大白兔本身分左（L）右（R）组,以L组为对照组、R组为治疗组,用大白兔自体的PRP局部注射,2、4、8周后分别取材,通过大体观察、组织学病理切片、图像分析观察软骨损伤修复情况。结果：各期治疗组（R组）软骨损伤的修复明显好于对照组（L组）。结论：PRP对软骨修复有着积极的促进作用,应用PRP可以提高软骨损伤的修复效果。为此提示：临床上可使用PRP治疗膝关节半月板损伤、骨性关节病方面的观察和研究。为临床软骨损伤类疾病探索新的治疗方法和手段。     

复合富血小板血浆的可注射型组织工程骨体外培养观察

目的 以纤维蛋白胶(FG)、富血小板血浆(PRP)及骨髓基质干细胞(BMSCs)构建一种可注射型组织工程骨,体外培养并研究其体外生物学特性及超微结构.方法 从兔髂骨处抽取骨髓体外培养BMSCs并诱导向成骨细胞分化,抽取兔自体动脉血提取PRP,以FG、BMSCs、PRP共同构建可注射型组织工程骨并体外培养.观察其生物学特性如凝胶形成时间,组织学特点、细胞存活情况及其超微结构特征等.结果 构建的可注射型组织工程骨可在短时间内形成凝胶,体外培养1周时其中细胞生长良好,电镜下见纤维蛋白网格结构致密,种子细胞及血小板颗粒分布广泛.结论 以FG、BMSCs、PRP构建可注射型组织工程骨操作简单,其生物活性良好,可塑形性好,种子细胞在其中生长增殖较佳,具有较好的临床实用价值.     

基于肌腱重塑途径探讨富血小板血浆对兔肩损伤模型修复的机制

目的:基于腱性组织修复与细胞机制重塑不可分理论,采用兔肩损伤模型探讨富血小板血浆(PRP)调控基质重塑对肩袖损伤模型肌腱修复的可能效果,为PRP治疗肩袖损伤非手术治疗及肌腱修复机制进一步奠定基础.方法:对照组造模成功大白兔6只不予处理(空白组);PRP组取造模成功大白兔6只给予1 ml PRP关节腔注射,8周后检查;P...     

两种方法制备自体富血小板血浆的质量及安全性比较分析

目的 比较血袋法与单采法制备富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的质量及安全性.方法 回顾性分析2019年7月至2021年8月在陆军军医大学第一附属医院输血科自体PRP采集的患者66例,根据制备方式分为血袋组和单采组,其中血袋组30例制备47次,单采组36例制备36次.比较2组PRP产品中红...     

补肾活血方与PRP对Ⅰ型胶原活性和表达的影响

目的:观察补肾活血方与富血小板血浆(PRP)对共培养体系中Ⅰ型胶原活性和表达的影响。方法:取腰椎间盘退变行髓核摘除手术患者的皮下脂肪组织及退变髓核组织,运用多次酶消化法原代分离、培养,建立ADSCs/NPCs共培养体系。纳入腰椎间盘退变患者,连续服用补肾活血方2周,分别于初次服药前和末次服药后1 h抽取静脉血各50 mL,采用二次离心法制备富血小板血浆,以不同血浆干预培养。实验共分为5组:富血小板血浆组(PRP)、贫血小板血浆组(PPP)、含药富血小板血浆组(M-PRP)和含药贫血小板血浆组(M-PPP)、胎牛血清组(FBS)。倒置显微镜下观察各组细胞的形态变化;采用细胞免疫荧光法检测Ⅰ型胶原活性变化;干预培养2周后采用RT-PCR法检测细胞COL1A1基因表达水平。结果:本研究发现经过补肾活血方和PRP分组干预后的结果显示,与其余组别相比,M-PRP组及PRP组细胞轮廓更为清晰、折光度更好,两组之间无明显差异。细胞免疫荧光染色结果显示,PRP组和M-PRP组细胞数量较多,但单个细胞的染色强度明显低于FBS组。RT-PCR结果显示,PPP组、PRP组、M-PRP组和M-PPP组COL1A1 mRNA表达均显著下调(P<0.05)。结论:补肾活血方联合富血小板血浆组可在一定程度上降低Ⅰ型胶原活性,抑制其表达功能。     

富血小板血浆对MRSA的体外抑菌实验研究

目的:通过体外抑菌实验探究富血小板血浆(PRP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有无抗菌效应。方法:获取MRSA临床菌株,活化,增菌,采集健康志愿者新鲜全血,手工二次离心法获取富血小板血浆,采用打孔法抑菌实验,以PRP和富血小板凝胶(PRG)为实验组,庆大霉素溶液为阳性对照组,以灭菌纯水为阴性对照组,观察各组有无抑菌圈并测量其直径。结果:庆大霉素组可见到明显抑菌圈出现,平均抑菌圈直径(17.15±0.96)mm,PRP组及PRG组均未出现明显抑菌圈。结论:健康志愿者全血制备的PRP及PRG对本实验中MRSA临床菌株无抗菌效应,尽管有研究认为PRP可以抑制某些细菌的生长,但部分研究中使用的时间抑菌曲线法存在着不足之处,在临床实际中,不能夸大了PRP的抗感染效应。     

补肾活血方联合富血小板血浆对脂肪间充质干细胞增殖活性和功能表达的影响

目的:探讨补肾活血方联合富血小板血浆对共培养体系中脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖活性和功能表达的影响。方法:取手术患者皮下脂肪组织及退变髓核组织,采用多次酶消化法原代分离、培养ADSCs及NPCs,建立细胞共培养体系。纳入腰椎间盘退变患者,连续服用补肾活血方2周,分别于初次服药前和末次服药后1 h抽取静脉血,采用二次离心法制备富血小板血浆,以不同血浆干预培养,实验共分为5组:富血小板血浆组(PRP)、贫血小板血浆组(PPP)、含药富血小板血浆组(M-PRP)和含药贫血小板血浆组(M-PPP)、胎牛血清组(FBS)。倒置显微镜下观察共培养体系中细胞的形态变化;采用MTT法分别在干预24、48 h及72 h检测细胞增殖率;一周后采用甲苯胺蓝染色检测蛋白聚糖表达情况;两周后采用RT-PCR法检测细胞COL2A1、ACAN、SOX9基因表达水平。结果:本研究经原代消化分离、共培养体系中获得的细胞胞质体积略增大,形态由长梭形逐渐转变为短梭形或多角形为主,折光性较好。采用MTT法检测发现,与FBS组相比,PRP组及M-PRP组细胞增殖率显著提高(P<0.05)。甲苯胺蓝染色结果显示,M-PRP组、M-PPP组及PRP组细胞的数量及阳性染色率均明显高于PPP组和FBS组,其中M-PRP组的作用最显著。RT-PCR结果显示,与FBS组相比,PRP组和M-PRP组COL2A1 mRNA表达显著上调(P<0.05),其余组无明显变化(P>0.05);PRP组ACAN mRNA表达显著上调(P<0.05);PRP组和M-PRP组SOX9 mRNA表达量维持不变(P>0.05)。结论:补肾活血方联合富血小板血浆可以提高共培养体系中ADSCs细胞增殖活性,上调COL2A1、ACAN、SOX9的mRNA表达,促进成软骨分化,为椎间盘退变的治疗提供了新方向。     

富血小板血浆治疗足踝外科相关疾病的研究进展

富血小板血浆（PRP）是一种新兴的生物型制剂,是含高浓度血小板及生长因子的自体血液制品。近年来,大量临床试验证明PRP能有效促进和加速组织修复,逐渐被用于治疗肌腱、韧带、软骨及肌肉等损伤,同样也使其在足踝外科领域备受关注。本文通过对PRP制备过程及其在足踝外科的临床应用进行系统复习,探讨其在足踝外科领域的研究进展及应用前景。