HER2低表达乳腺癌的研究进展

近年随着乳腺癌发病率逐年升高，HER2靶向药物的研究也逐渐深入。有研究证实部分HER2低表达乳腺癌患者在新型抗体-药物偶联物(antibody-drug conjugate, ADC)中获益，由此提出了HER2低表达乳腺癌的新概念。HER2低表达乳腺癌的临床病理学特征、预后与其他HER2分型乳腺癌存在差异，但多项研究结果相互矛盾，并不一致。依据最新ASCO/CAP乳腺癌HER2检测指南，HER2低表达乳腺癌作为临床治疗亚组，HER2检测的规范化与标准化尤为重要。该文现对HER2低表达乳腺癌相关临床研究现状、其治疗药物的最新进展及HER2的标准化检测进行综述。     

人源抗HER2单链抗体/鱼精蛋白截短体融合蛋白的表达、纯化及鉴定

在人类乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体2 (HER2)和受体趋化因子4(CXCR4)的表达成正相关,由于HER2与CXCR4/CXCL-12轴在乳腺癌骨转移中的重要作用,使其成为可供选择的肿瘤治疗靶点.本研究将HER2单链抗体(ScFv)与鱼精蛋白截短体(tP)融合,以期获得同时具有抗原与核酸结合活性的ScFv-tP融合蛋白,核酸与该融合蛋白结合后,有望实现小分子干扰RNA( siRNA)的靶向递送,对HER2与CXCR4/CXCL-12轴进行RNA干扰(RNAi),为新型抗肿瘤药物应用于临床提供资料.     

乳腺癌HER2基因遗传异质性与其临床病理特征的相关性研究

目的 介绍乳腺癌患者HER2基因扩增的瘤内遗传异质性(genetic heterogeneity,GH)现象,并探讨HER2基因GH与临床病理学参数间的相关性,寻找与HER2基因GH现象密切相关的病理学因素.方法 整理100例浸润性乳腺癌患者分期、组织学分型、分子分型等临床数据,应用免疫组化技术(immunohistochemistry,IHC)检测HER2、雌激素受体α(estrogen peceptor α,ERα)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白表达,用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测HER2基因扩增情况,并分析HER2基因异质性与临床病理参数间的关系.结果 100例乳腺癌患者中有20%的病例(20/100)存在HER2基因GH现象.在瘤内异质性样本中,扩增细胞所占比例≥25%的样本组其FISH结果阳性率明显高于扩增细胞＜25%的样本组(P=0.012).HER2蛋白的表达程度(P=0.004)和ER蛋白表达(P=0.002)与HER2基因GH现象显著相关.结论 HER2基因GH现象最易出现于HER2蛋白轻到中度表达、ER蛋白表达的乳腺癌组织,故而对于具有上述病理学特征的患者进行FISH检测时应特别注意GH现象,以免遗漏阳性细胞或者只计数阳性细胞,而给出不准确的FISH结果.     

乳腺癌17号染色体多体的临床病理意义

目的 探讨乳腺癌17号染色体多体异常的临床病理学意义.方法 回顾性分析200例乳腺癌荧光原位杂交结果,并分析17号染色体多体与年龄、核异型性、淋巴结转移以及HER2基因扩增、HER2蛋白表达的关系.结果 200例乳腺癌患者中表现为17号染色体多体异常的52例(26.0%),均为浸润性导管癌;占180例浸润性导管癌的52.8%.17号染色体多体与HER2基因扩增和HER2蛋白表达有关(均P=0.000),并且多体伴HER2基因扩增时也与HER2蛋白表达有关(P=0.001).多体和(或)多体伴HER2基因扩增都与乳腺癌癌细胞的高度异型性(P=0.010或P=0.012)及淋巴结转移有关(P=0.009或P=0.002).17号染色体多体或多体伴HER2基因扩增与乳腺癌患者的年龄无关(P=0.415或P=1.000).结论 17号染色体多体可能与乳腺癌患者的预后不良有关.     

HER2的免疫组织化学诊断和ASCO/CAP指南中的几个问题

HER2基因在15%～20%的乳腺癌扩增到正常的2～20倍,导致HER2蛋白在肿瘤细胞膜上的表达大量增加.这使HER2成为理想的靶向治疗靶点[1-2].曲妥珠单抗(商品名为赫塞汀)是一个针对HER2的单克隆抗体,它对HER2阳性的乳腺癌具有明显的抗癌效应,特别是当它与其他细胞毒性抗癌药物联用时,能减少早期HER2阳性乳腺癌的复发率至50%[3-5].     

乳腺癌原发灶与复发/转移灶HER2低表达状态变化

目的探讨乳腺癌原发灶与复发/转移灶HER2阴性患者中HER2低表达状态的变化及临床意义。方法收集河北医科大学第四医院2015年1月至2022年1月出现复发/转移且原发灶肿瘤HER2阴性的259例乳腺癌患者资料及存档切片, 以免疫组织化学(IHC)染色法确定原发灶及复发/转移灶HER2状态, 其中IHC 2+患者均行荧光原位杂交(FISH)法进一步明确HER2状态, 将HER2 IHC 0判定为HER2-0组, IHC 1+及IHC 2+且FISH无扩增患者判定为HER2低表达组, IHC 3+及IHC 2+且FISH扩增为HER2阳性组, 并对患者进行随访。对比乳腺癌原发灶与复发/转移灶中HER2低表达患者HER2状态的变化, 并分析其临床病理特征及预后。结果乳腺癌原发灶与复发/转移灶HER2状态总体一致率60.6%(157/259, κ=0.178), 共102例(102/259, 39.4%)患者原发灶和复发/转移灶HER2状态不一致, 其中56例(56/259, 21.6%)患者原发灶HER2低表达, 复发/转移灶为HER2-0, 37例(37/259, 14.3%)患者原发灶H...     

HER2阳性乳腺癌靶向治疗新药帕妥珠单抗的研究进展

人类表皮生长因子受体(HER)成为乳腺癌治疗中的一个重要的靶点,HER2阳性乳腺癌患者与HER2阴性患者相比往往预后不良,抗HER2靶向治疗彻底改变了HER2阳性乳腺癌患者的命运,HER2阳性乳腺癌患者的预后有了明显改善。帕妥珠单抗是不同于曲妥珠单抗的一类针对HER2的人源性单克隆抗体,这种新分子靶向药物进一步提高了HER2阳性乳腺癌治疗的疗效,延长了HER2阳性乳腺癌患者的生存期。本文主要综述了帕妥珠单抗的研究进展,着重介绍了帕妥珠单抗的临床疗效、安全性和耐受性。     

基于微滴式数字PCR技术的HER2基因扩增用于乳腺癌TNM分期的研究

目的 分析微滴式数字PCR(dd PCR)技术用于人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增的价值及在评估乳腺癌TNM分期中的应用。方法 选取临床资料及随访资料完整的100例乳腺癌患者,其组织标本作为观察组,其中TNMⅠ～Ⅱ期71例,Ⅲ～Ⅳ期29例;另选择80例乳腺增生患者的组织标本作为对照组。构建HER2基因扩增dd PCR方法,分析2组HER2基因相对扩增倍数;采用Spearman相关性分析HER2基因相对扩增倍数与TNM分期的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析dd PCR技术用于HER2基因扩增在评估乳腺癌TNM分期的价值。结果 观察组HER2基因相对扩增倍数显著高于对照组(P 0. 05);且观察组TNMⅢ～Ⅳ期乳腺癌患者HER2基因相对扩增倍数高于TNMⅠ～Ⅱ期乳腺癌患者(P 0. 05)。Spearman相关性分析结果显示,HER2基因相对扩增倍数与TNM分期呈正相关(r=0. 632,P 0. 05);使用dd PCR技术检测乳腺癌患者HER2基因分析TNM分期的敏感度和特异度均大于90%,曲线下面积(AUC) 0. 95。结论 dd PCR技术检测的HER2基因相对扩增倍数与乳腺癌TNM分期呈正相关,该方法敏感度和特异度均较高,可用于预测TNM的分期。     

HER2、Ki67表达水平与乳腺癌临床特征及预后的关系分析

目的 探讨HER2、Ki67表达水平与乳腺癌临床特征及预后的关系。方法 回顾性分析我院2016年6月至2019年5月121例乳腺癌患者临床资料,分别使用免疫组织化学（IHC）方法对患者癌组织、癌旁组织及正常组织中HER2、Ki67表达水平进行检测,采用SPSS软件对HER2、Ki67表达水平与乳腺癌病理特征的关系进行分析,并对其与患者预后的关系进行评估。结果 乳腺癌组织HER2(57.85%)、Ki67(61.98%)阳性率明显高于癌旁组织（37.19%、33.88%）与正常组织（4.96%、4.13%）。高表达HER2、Ki67患者淋巴结转移、TNM分期明显高于低表达者。Spearman相关性分析显示,HER2、Ki67表达水平与患者淋巴结转移个数及TNM分期呈正相关,HER2与Ki67表达呈正相关。121例患者随访时间24～48个月,2年内有83例患者生存,生存率为68.60%,中位生存时间为52个月（6～48个月）。高表达HER2(25个月)、Ki67(19个月)中位生存时间明显低于低表达患者（42,44个月）。癌症基因组图谱（TCGA）数据乳腺癌肿瘤组织HER2、Ki67表达量...     

雄激素受体在乳腺癌中的表达及其与雌、孕激素受体和HER2的关系

目的 研究雄激素受体(AR)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER2状态的关系,探讨其作为乳腺癌治疗靶点的可行性.方法 采用免疫组织化学EnVision法检测AR、ER、PR、HER2在175例乳腺浸润性导管癌中的表达,依据结果分为腺腔A型、腺腔B型、HER2过表达型和三阴性型(ER-/PR-/HER2-)组.结果 175例中AR阳性88例(50.3%),AR表达与ER、PR、HER2均呈正相关(P＜0.01).腺腔A型53例(30.3%),腺腔B型33例(18.9%),HER2过表达型23例(13.1%),三阴性型66例(37.7%),AR阳性率分别为56.6%(30/53),75.8%(25/33)、47.8%(11/23)和33.3%(22/66),组间AR阳性率差异显著(x2=17.054,P=0.001).三阴性型组AR阳性者核分裂象较少(x2=5.140,P=0.023),腺腔A型组AR阳性者多为年轻患者(x2=4.567,P=0.033),差异有统计学意义.其他组内AR表达与否和临床病理学特征比较无统计学意义.结论 AR在乳腺癌中有较高的阳性率,可作为乳腺癌,特别是三阴性型乳腺癌的治疗靶点.     

雄激素受体在乳腺癌中的表达及其与雌、孕激素受体和HER2的关系

目的 研究雄激素受体(AR)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER2状态的关系,探讨其作为乳腺癌治疗靶点的可行性.方法 采用免疫组织化学EnVision法检测AR、ER、PR、HER2在175例乳腺浸润性导管癌中的表达,依据结果分为腺腔A型、腺腔B型、HER2过表达型和三阴性型(ER-/PR-/HER2-)组.结果 175例中AR阳性88例(50.3%),AR表达与ER、PR、HER2均呈正相关(P＜0.01).腺腔A型53例(30.3%),腺腔B型33例(18.9%),HER2过表达型23例(13.1%),三阴性型66例(37.7%),AR阳性率分别为56.6%(30/53),75.8%(25/33)、47.8%(11/23)和33.3%(22/66),组间AR阳性率差异显著(x2=17.054,P=0.001).三阴性型组AR阳性者核分裂象较少(x2=5.140,P=0.023),腺腔A型组AR阳性者多为年轻患者(x2=4.567,P=0.033),差异有统计学意义.其他组内AR表达与否和临床病理学特征比较无统计学意义.结论 AR在乳腺癌中有较高的阳性率,可作为乳腺癌,特别是三阴性型乳腺癌的治疗靶点.     

HER2介导乳腺癌细胞多药耐药的作用及机制

目的筛选HER2高表达乳腺癌细胞化疗耐受的药物种类,探讨HER2介导的乳腺癌多药耐药的机制。方法构建HER2稳定高表达的乳腺癌细胞MCF-7/HER2模型;MTT法检测该细胞对多种临床常用的抗乳腺癌药物的敏感性;Hochest33258染色观察药物诱导的MCF-7/HER2的凋亡率,并采用聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞中bcl-2和survivin基因的mRNA表达。结果MCF-7/HER2细胞对Taxol,MMC,5-FU,VP-16及TSPA的耐药指数分别为对照细胞的74,22,2.5,3.5和2.8倍,出现了明显的药物抗性(P<0.05);而对CDDP,ADM,VBL,VCR,NBV和MTX等的耐药指数与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);由Taxol,MMC,5-FU,VP-16诱导的MCF-7/HER2细胞凋亡率明显低于对照细胞;MCF-7/HER2细胞survivin基因表达明显高于对照组,而bcl-2基因表达与对照组比较,差异无统计学意义。结论HER2可介导乳腺癌细胞对Taxol,MMC,5-FU,VP-16和TSPA等的多药抗性,这种多药抗性的产生可能与HER2上调survivin表达所致的凋亡抗性有关。     

单探针和双探针显色原位杂交法检测乳腺癌HER2基因状态的比较分析

目的 通过对比分析单探针和双探针显色原位杂交(CISH)检测乳腺癌HER2基因状态,评估双探针显色原位杂交试剂盒的临床应用价值.方法 收集129例常规石蜡包埋的乳腺癌组织标本,分别使用单探针和双探针CISH技术,对肿瘤标本的HER2基因状态进行检测,并按照2007年美国临床肿瘤协会及美国病理家协会(ASCO/CAP)标准,计数HER2基因拷贝数或HER2/17号染色体的比值;同时运用免疫组织化学法(IHC)检测了HER2蛋白水平,与经CISH基因检测的结果进行了对比分析.结果 在129例切片中,单探针CISH结果显示有7例(5%)为临界状态,而双探针CISH结果则无一例结果为临界.在其余122例标本中,单探针和双探针CISH的结果同为50例(41%)阴性和72例(59%)阳性,其中双探针CISH对单探针CISH的阴性和阳性结果的吻合率分别为88%(44/50)和92%(66/72),统计分析显示两种方法的结果基本一致(κ=0.80,P<0.05).在两种方法检测结果一致和不一致的标本中,出现17号染色体异倍体的比例分别为38%(42/110)和53%(10/19).在109例IHC检测的HER2结果中,分别有34例(31%)被判读为(阳性),18例(17%)被判读为0～+(阴性)和57例(52%)被判读为(临界).结论 双探针CISH相对单探针而言,是检测乳腺癌HER2基因状态的可靠方法.双探针CISH能进一步明确判断单探针CISH结果判断不明确(临界状态)的HER2基因状态的标本,并提示17号染色体的异倍性可能会对个别乳腺癌HER2状态的解读产生一定的影响.     

双探针显色和荧光原位杂交法检测乳腺癌HER2基因状态和17号染色体的分析

目的 通过与荧光原位杂交(FISH)比较,评估双探针显色原位杂交(双探针CISH)法在诊断女性乳腺浸润性导管癌HER2基因状态中应用的可靠性,同时探讨17号染色体多倍体对原位杂交诊断HER2基因状态时可能产生的影响.方法 收集146例乳腺癌组织的常规石蜡包埋标本,分别用欧盟(CE)认证的FISH(146例)及CISH(73例)HER2/17号染色体着丝粒(CENl7)双探针试剂盒技术,对肿瘤标本的HER2基因状态进行检测,并按照2007年美国临床肿瘤协会及美国病理家协会(ASCO/CAP)标准分别用计算HER2基因拷贝数和(或)计算HER2/CENl7比值的方法对结果进行分析.结果 在同时进行FISH和双探针CISH检测的73例标本中发现,两种技术对HER2阴性和阳性的诊断符合率分别为91.7%(33/36)和97.4%(37/38),两者的总体符合率为95.9%(70/73);在对146例FISH结果的计数分析中,计数HER2基因拷贝数得出不确定诊断的病例量是计数HER2/CENl7得出不确定诊断病例量的1.6倍(13/8);此外,在FISH和CISH结果中按拷贝数计数为阳性的病例与在按比值计数时却为阴性病例的不吻合率分别为4.8%(3/63)和3.O%(1/33);同时在FISH HER2阳性病例(HER2/CENl7)中多倍体发生率为63.5%(40/63,P=0.002),高于阴性者中多倍体的发生率(37.3%,28/75).结论 双探针CISH技术检测乳腺癌HER2基因状态的结果和FISH技术检测的结果非常一致,提示两种技术临床诊断价值相近,并且同步检测并计数HER2和17号染色体有助于明确HER2基因状态.     

HER2阳性乳腺癌新辅助治疗疗效临床病理学分析

目的探讨与HER2阳性乳腺癌新辅助治疗疗效相关的临床病理学特征。方法收集复旦大学附属肿瘤医院病理科2015—2020年诊断的接受新辅助治疗的HER2阳性乳腺癌480例, 分析临床病理参数如年龄、肿瘤大小、分子分型、靶向治疗类型、Ki-67阳性指数、雌激素受体(ER)表达水平、HER2免疫组织化学表达水平及HER2扩增情况等与患者新辅助治疗疗效的相关性。结果 480例HER2阳性乳腺癌患者中209例在新辅助治疗后达到病理完全缓解(pathology complete response, pCR), pCR率达43.5%。所有病例中457例患者接受化疗加单靶(曲妥珠单抗)治疗, 23例患者接受化疗加双靶(曲妥珠单抗+帕妥珠单抗)治疗。化疗加单靶治疗中198例(43.3%)获得pCR, 而化疗加双靶治疗中11例(47.8%)达到pCR。后者的pCR率相对较高, 但两者差异无统计学意义。结果显示免疫组织化学HER2 3+(49.0%)患者的pCR率显著高于HER2 2+患者(26.1%, P<0.001)。荧光原位杂交(FISH)检测中HER2平均拷贝数越高, pCR率也越高。ER的表达...     

重组HER2真核表达载体的构建及其稳定转染EMT6细胞株的筛选

目的:构建人表皮生长因子受体(HER2)胞外区(1 896 bp)基因的真核表达质粒(pcDNA6/v5-his-HER2),转染小鼠乳腺癌细胞(EMT6),获得其稳定表达细胞株(EMT6/ HER2).方法:用PCR方法从含HER2全长基因的pcDNA3.1-HER2质粒上扩增HER2胞外区基因序列;经酶切、连接构建pcDNA6/v5-his-HER2;转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,对其进行酶切及测序鉴定;以PEI法将pcDNA6/v5-his-HER2导入EMT6小鼠乳腺癌细胞,经杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选1～2周,获得抗性克隆EMT6/HER2;用RT-PCR检测EMT6/HER2中HER2 mRNA,免疫组化法检测其HER2蛋白的表达.结果:PCR产物与预期片段大小一致;pcDNA6/v5-his-HER2经酶切、琼脂糖凝胶电泳后,可见与PCR产物大小相同的片段;DNA测序结果显示,pcDNA6/v5-his-HER2 中HER2 基因序列无误,读码框正确;用RT-PCR可在EMT6/HER2中检测到HER2 mRNA,免疫组化法证实,EMT6/HER2中有HER2的阳性信号.结论:成功地构建了HER2胞外区真核表达载体,获得稳定表达HER2基因的小鼠乳腺癌EMT6细胞株,为进一步研究HER2基因过表达与乳腺癌发生的关系及其基因治疗奠定基础.     

乳腺癌分子亚型中BRCA1的表达及其与雌激素受体的关系

目的 研究BRCA1在乳腺癌分子亚型中表达特点及其与雌激素受体的关系.方法 1 452例乳腺癌标本制作组织芯片,免疫组织化学MaxVision快捷法检测ER、PR、HER2、CK5/6、EGFR的表达,按照Nielsen标准进行分子分型.免疫组织化学MaxVision快捷法检测BRCA1的表达水平.结果 腺腔A型,腺腔B型,基底样型,HER2过表达型和裸表达型分别为428例、56例、223例、188例、416例.BRCA1在腺腔A型,腺腔B型,基底样型,HER2过表达型,裸表达型中的表达率分别86.9%(358/412), 87.5%(49/56), 63.0%(136/216), 70.4%(131/186), 60.4%(246/407).BRCA1在基底样型乳腺癌、HER2过表达型和裸表达型中的表达率低于ER阳性乳腺癌腺腔A型(P<0.001)和腺腔B型(P<0.001),BRCA1的阳性表达与ER的阳性表达相关(P<0.001).结论 BRCA1在基底样型乳腺癌和其他ER阴性乳腺癌亚型中的表达下调,其功能异常可能参与ER阴性乳腺癌分子亚型的发生.     

HER2低表达乳腺癌的临床病理特征及HER2表达状态评估研究进展

人表皮生长因子受体2(HER2)既是乳腺癌的独立预后因子,也是其精准治疗的重要靶点。随着新型抗HER2抗体药物耦联物的面世,HER2蛋白表达状态的评估由二分类进入三分类(即阴性、阳性和低表达)时代。该文较为全面地总结了HER2低表达乳腺癌的现状、治疗进展、分子和临床病理学特征及检测判读,为乳腺癌的诊断和预后提供参考。     

乳腺癌HER2荧光原位杂交基因扩增与HER2免疫组织化学膜完整性表达模式的相关性

目的探讨乳腺癌HER2荧光原位杂交(FISH)基因扩增的病例与免疫组织化学(IHC)HER2完整膜表达模式的相关性, 以提高HER2 IHC判读的准确性和可重复性。方法收集湖南省岳阳市中心医院2019年12月至2022年7月140例按照《乳腺癌HER2检测指南(2014版)》IHC判读为HER2 2+的浸润性乳腺癌病例, 对其按照《乳腺癌HER2检测指南(2019版)》IHC判读标准(是否存在膜完整表达模式)进行重新分组, 分析FISH检测结果与IHC中HER2膜表达完整程度之间的相关性。结果 140例病例中HER2 IHC具有连续膜完整性且FISH检测阳性41例;具有连续膜完整性但FISH检测阴性20例;不具有连续膜完整性而FISH检测阳性2例;不具有连续膜完整性且FISH检测阴性77例。HER2 FISH阳性病例与HER2 IHC连续膜完整表达模式具有相关性(κ=0.669, P<0.001)。HER2 IHC具有异质性且FISH阳性病例10例, 此10例中IHC肿瘤细胞膜完整表达区HER2均扩增, 而肿瘤细胞膜无完整表达区仅有1例HER2扩增。细胞膜完整表达区HER2平均拷...     

HER2驱动非小细胞肺癌(NSCLC):潜在的治疗路径

非小细胞肺癌(NSCLC)中致癌驱动突变的发现促进了能够干扰与肿瘤发生相关的细胞内信号通路的药物的研发.酪氨酸激酶抑制剂,比如厄洛替尼或者吉非替尼,已在EGFR突变的晚期NSCLC患者中显示出可喜的结果.人表皮生长因子2(HER2/ERBB2/neu)是酪氨酸激酶受体ERBB家族中的一员,通过与其他ERBB受体形成同源或异源二聚体而被激活.过表达和/或基因扩增所介导的HER2基因表达异常在乳腺癌和胃癌中具有重要意义,能够提高患者对包括曲妥珠单抗在内的特异性抗HER2治疗的应答.在肺癌发生中,与HER2过表达或者是基因扩增相比,HER2突变被认为具有更多的临床相关性.在NSCLC中,HER2突变仅见于腺癌,约有4%的肺腺癌患者表现为HER2突变阳性,这提示每年可有数以千计的患者可能从相应的靶向治疗中获益.因此我们得出结论,在NSCLC患者的腺癌患者亚组中所开展的系统性的基因型检测应该包括对HER2基因突变的检测.此外,标准抗HER2制剂、新兴的干预治疗的临床试验均正在进行中,这些领域尽管还需展开进一步的研究,但正如本文中所述,已经取得了可喜的初步结果.