荣筋片影响SAMP6鼠血清成骨-成脂分化调控因子的实验研究

[目的]以SAMP6及SAMR1鼠为研究对象,观察荣筋片对骨形态发生蛋白(BMP-2)、过氧化酶活化增生受体-γ(PPAR-γ)和脂联素(ADP)血清含量的影响,探讨荣筋片防治骨质疏松症的作用机制。[方法]选取6月龄SAMP6鼠36只,雌雄各半,随机分为SAMP6空白对照组、荣筋片组、仙灵骨葆组。另取11只同月龄性SAMR1鼠,作为同源对,将荣筋片配制成溶液。空白对照组给予0.5 mL生理盐水灌胃,每日1次,连续12周后。摘眼球采血,ELISA法检测血清BMP-2、PPAR-γ和ADP的含量。[结果]空白对照组BMP-2血清含量明显低于SAMRl对照组、仙灵骨葆和荣筋片组(P0.01,P0.05),差异有显著性。SAMRl对照组相比BMP-2血清含量高于仙灵骨葆组和荣筋片组(P0.01,P0.05)。而荣筋片组高于仙灵骨葆组(P0.05)。空白对照组PPAR-γ血清含量明显高于SAMRl对照组(P0.01)。仙灵骨葆组、荣筋片组和空白对照组组间没有统计学差异(P0.05)。ADP血清含量空白对照组明显高于SAMRl对照组(P0.01)。仙灵骨葆组和荣筋片组明显低于空白对照组(P0.01),相比SAMRl对照组明显升高(P0.01)。[结论]荣筋片与仙灵骨葆能增加SAMP6鼠血清促成骨分化因子BMP-2含量,降低SAMP6鼠血清促成脂分化因子PPAR-γ、ADP含量。两种中药可能改善自发性骨质疏松动物骨髓基质干细胞成骨-成脂分化的异常。     

全杜仲胶囊对犬股骨头坏死骨组织病理变化及RUNX2、COL-1蛋白表达的影响

目的 观察全杜仲胶囊对犬股骨头骨组织中的变化及对转录因子(RUNX2)、1型胶原蛋白(COL-1)蛋白表达的影响,探讨其修复股骨头坏死的机制。方法 选取健康成年比格犬(雌雄各6只,共12只,分笼饲养),随机数字表法分为正常组、模型组、全杜仲胶囊组、仙灵骨葆胶囊组,每组3只。除正常组外,其余3组均采用液氮冷冻法制备双侧股骨头坏死模型。术后第2天开始药物干预,正常组等量生理盐水灌胃,连续12周。观察犬的一般情况,苏木精-伊红染色法(HE)观察犬股骨头组织形态学改变;实时逆转录PCR(Real time RT-PCR)检测RUNX2、COL-1mRNA表达;免疫组化法检测RUNX2、COL-1蛋白表达。结果 与模型组相比较,HE病理染色方面,全杜仲组及仙灵骨葆胶囊组骨小梁面积、骨小梁体积有所恢复;免疫组化方面,与模型组相比,全杜仲胶囊组、仙灵骨葆胶囊组RUNX2蛋白和COL-1蛋白表达上升(P<0.05);Real time RT-PCR检测结果显示RUNX2、COL-1mRNA表达上升(P<0.05)。结论 全杜仲胶囊可以改善犬股骨头坏死组织的变化,这可能是通过调节COL-1及...     

通络生骨胶囊促进兔激素性股骨头坏死修复的机制研究

目的研究通络生骨胶囊促进新西兰兔激素性股骨头坏死修复的机制。方法 20只新西兰兔随机分为3组:正常组6只,模型组和中药组(通络生骨胶囊组)各7只,采用内毒素(LPS)联合甲泼尼龙琥珀酸钠(MPS)的方法制备激素性股骨头坏死模型,最后一次肌肉注射MPS后24 h,中药组给予0.3 g·kg-1通络生骨胶囊混悬液灌胃,每天一次,正常组和模型组灌服等体积超纯水,连续16周。灌胃16周后进行髋关节MRI检测和组织病理学检测以评估建模效果,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-q PCR)检测兔股骨头ABCB1、RUNX2、OPN、PPARγ的m RNA表达水平,采用Western Blot检测兔股骨头ABCB1、RUNX2、OPN、PPARγ的蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组的ABCB1和RUNX2的m RNA表达下调(P0.05)、ABCB1的蛋白表达下调(P0.05)、PPARγ的m RNA表达上调(P0.05)。与模型组比较,中药组的ABCB1和RUNX2的m RNA和蛋白表达均上调(P0.05,P0.01),PPARγ的m RNA表达下调(P0.05)。结论通络生骨胶囊促进新西兰兔激素性股骨头坏死的修复可能与调节ABCB1、RUNX2、PPARγ基因的功能有关。     

髓芯减压联合生骨再造丸对兔激素性股骨头坏死骨组织BMP-2与VEGF mRNA的影响

目的:探讨髓芯减压联合生骨再造丸对激素性家兔坏死股骨头骨形成蛋白2(BMP-2)与血管内皮生长因子mRNA(VEGF mRNA)的影响。方法:将成年雄性青紫兰兔60只随机分为5组,正常对照组(N)8只,模型对照组(Y)、生骨再造丸组(M)、手术组(S)、综合治疗组(MS),每组13只。Y、M、S、MS组采用内毒素加激素联合造模,造模4周后每组随机处死1只兔子,检验造模是否成功。造模成功后N组和Y组灌服生理盐水20 mL/d,M组灌服生骨再造丸溶液4. 6 mL/(kg·d),S组采用髓芯减压术治疗,MS组在手术治疗基础上灌服同量生骨再造丸溶液,各组分别干预8周,处死动物所获股骨头行HE染色,采用RT-PCR观察骨组织中BMP-2与VEGFmRNA表达情况。结果:与Y组比较,各治疗组空陷窝率下降,BMP-2和VEGF mRNA表达水平均有不同程度升高,差异有统计学意义(P0. 05),其中以MS组空陷窝率降低最为显著(P0. 01)。结论:增强股骨头骨组织BMP-2和VEGF mRNA表达是髓芯减压术联合生骨再造丸治疗激素性兔股骨头坏死的作用机制之一。     

壮药生骨汤治疗激素性股骨头坏死的实验研究

目的:观察壮药生骨汤治疗激素性股骨头坏死的疗效。方法:36只新西兰白兔随机分成空白组(n=10)和造模组(n=26)。造模组肌注醋酸泼尼松龙注射液6周,在第7周分别随机处死两组动物各2只观察造模结果,将造模组动物随机分为三组:壮药生骨汤组(A组)、仙灵骨葆组(B组)及阳性对照组(C组),空白组剩余的动物为空白对照组(D组)。在第9周,A组给予壮药生骨汤煎液灌胃,B组给予仙灵骨葆混悬液灌胃,C组和D组分别给予生理盐水灌胃。治疗4周后,采血用酶联免疫法(ELISA)测定血清中骨钙素(BGP)和降钙素(CT)的水平,同时取实验动物股骨头进行病理观察。结果:治疗4周后,壮药生骨汤组和仙灵骨葆组的BGP高于阳性对照组而低于空白组对照组,差异均有统计学意义(P0.05),CT低于阳性对照组(P0.05)且与空白对照组相当(P0.05),空骨陷窝率低于阳性对照组(P0.05),而高于空白对照组(P0.05)。结论:壮药生骨汤可提高在股骨头坏死微环境中成骨细胞的活性并抑制破骨细胞,对兔实验性SONFH有治疗作用,甚至部分逆转SONFH的病理变化。     

骨蚀宁Ⅰ号胶囊对激素性股骨头缺血性坏死TGF—β1表达的影响

目的：探讨中药骨蚀宁Ⅰ号胶囊对实验性激素性股骨头缺血性坏死兔TGF—β1表达的影响。方法：将40只健康成年新西兰大白兔随机分成空白组、骨蚀宁胶囊组、模型组和仙灵骨葆对照组4组,观察治疗前后TGF-β1的表达。结果：各组TGF—β1值治疗前后有显著性差异。结论：骨蚀宁Ⅰ号胶囊能够促进坏死股骨头的修复。     

骨蚀宁Ⅰ号胶囊对激素性股骨头缺血性坏死TGF-β1表达的影响

目的:探讨中药骨蚀宁Ⅰ号胶囊对实验性激素性股骨头缺血性坏死兔TGF-β1表达的影响。方法:将40只健康成年新西兰大白兔随机分成空白组、骨蚀宁胶囊组、模型组和仙灵骨葆对照组4组,观察治疗前后TGF-β1的表达。结果:各组TGF-β1值治疗前后有显著性差异。结论:骨蚀宁Ⅰ号胶囊能够促进坏死股骨头的修复。     

生骨再造丸对激素性股骨头坏死兔骨髓组织中微小RNA-708表达的影响

目的:探索生骨再造丸对激素性股骨头坏死(SANFH)兔的干预作用及相关机制.方法:50只新西兰大白兔按随机数字表法分为空白组10只和实验组40只,实验组采用大肠杆菌脂多糖(LPS)联合甲泼尼龙琥珀酸钠造模法建立SANFH兔模型32只,按随机数字表法分为模型组10只,仙灵骨葆组11只,生骨再造丸组11只.仙灵骨葆组和生骨...     

恒古骨伤愈合剂促进坏死股骨头内BMP-2基因表达研究

目的:研究恒古骨伤愈合剂对兔坏死股骨头内BMP-2基因表达的影响。方法:以小剂量LPS间隔24h两次静注加甲基强的松龙(MPS)3次肌注制作的兔股骨头坏死模型,用恒古骨伤愈合剂治疗后取股骨头行免疫组化、原位杂交并提取总RNA行实时荧光定量PCR,观察兔股骨头内BMP-2基因表达的动态变化。结果:喂药至第4、8周时,恒古骨伤愈组与模型组股骨头内BMP-2基因表达均为阴性,表达量比较差别无统计学意义。喂药至第12周时,恒古骨伤愈组免疫组化和原位杂交结果为弱阳性,模型组为阴性,恒古骨伤愈组股骨头内BMP-2mRNA的表达量是模型组的3.13倍。正常兔喂药组与空白对照组比较差别无统计学意义。结论:小剂量LPS加MPS制作的兔股骨头坏死模型中股骨头内BMP-2基因表达受抑制,恒古骨伤愈合剂可促进坏死股骨头内源性BMP-2基因的表达,以用药时间长者效果明显。恒古骨伤愈对正常兔股骨头内BMP-2基因的表达无影响。     

髓内注射配合仙灵骨葆胶囊治疗激素型股骨头缺血性坏死30例

目的探讨髓内注射配合仙灵骨葆胶囊治疗激素型股骨头缺血性坏死临床疗效。方法运用药物髓内注射配合仙灵骨葆胶囊口服治疗激素型股骨头缺血性坏死患者30例,治疗3个疗程,观察患者症状和体征改善情况,并依据Harris评分系统对治疗前后数据进行统计分析。结果治疗后患者在疼痛、生活能力、关节活动度及行走距离方面都优于治疗前,P〈0.05,具有显著差异性。结论髓内注射配合仙灵骨葆胶囊治疗激素型股骨头缺血性坏死具有较好的疗效。     

骨蚀灵胶囊对兔早期激素性股骨头坏死骨组织VEGF mRNA表达的影响

目的:观察骨蚀灵胶囊对兔早期激素性股骨头坏死(SANFH)骨组织中VEGFmRNA表达的影响,探讨中药防治早期激素性股骨头坏死的可行性及其机理。方法:选用成年日本大耳白兔,随机分为3组:正常对照组、模型组和中药组。采用马血清和甲强龙联合应用的方法复制SANFH模型,中药组于激素注射完毕后第二天进行骨蚀灵胶囊灌胃治疗,4、8周分批处死动物,应用RT-PCR技术检测股骨头骨组织中VEGFmRNA表达的变化。结果:与正常组比较,模型组股骨头骨组织中VEGFmRNA表达明显降低,8周时较4周时降低明显,差异有统计学意义(P0.05);中药组VEGFmRNA表达较模型组明显升高,但仍未达到正常水平,差异有统计学意义(P0.05)。结论:增强股骨头骨组织VEGFmRNA表达是骨蚀灵胶囊有效治疗激素性股骨头坏死的作用机制之一。     

仙灵骨葆胶囊联合钙尔奇D对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠治疗作用及TGF-β1/Smads信号调控的影响

目的:探讨仙灵骨葆胶囊联合钙尔奇D对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠治疗作用及TGF-β1/Smads的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠共60只,随机分正常组、模型组、仙灵骨葆胶囊组、钙尔奇D组、仙灵骨葆胶囊联合钙尔奇D组(联合组),每组12只。地塞米松1mg/kg肌注以建模。同时予各治疗组灌胃药物,正常组和模型组灌胃生理盐水。结果 :治疗8周后,各治疗组大鼠体重均显著高于模型组体重(P0.05),且联合组体重显著高于仙灵骨葆胶囊组及钙尔奇D组(P0.05)。治疗8周后,各治疗组大鼠BMD均显著高于模型组BMD(P0.01),且联合组显著高于仙灵骨葆胶囊组及钙尔奇D组(P0.05)。8周后,各治疗组大鼠血清Ca、ALP均显著高于模型组(P0.05),且联合组显著高于仙灵骨葆胶囊组及钙尔奇D组(P0.05)。8周后,各治疗组大鼠TGF-β1、p-Smad2/3、Smad4均显著高于模型组(P0.01),且联合组显著高于仙灵骨葆胶囊组及钙尔奇D组(P0.05),各治疗组大鼠Smad7显著低于模型组(P0.01),且联合组显著低于仙灵骨葆胶囊组及钙尔奇D组(P0.05)。结论:仙灵骨葆胶囊联合钙尔奇D对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠具有治疗作用,可增加其骨密度、血清Ca、P、ALP活性,上调TGF-β1,p-Smad2/3、Smad4表达,下调Smad7表达来达到治疗作用。     

Bcl-2 mRNA在中药防治早期激素性股骨头坏死中的表达变化

目的:建立激素性股骨头坏死家兔模型,观察和评价中药对早期激素性股骨头坏死的防治效果,并探讨其作用机理。方法:选用成年雄性日本大耳白兔随机分为3组:正常组、治疗组、模型组。治疗组和模型组经耳缘静脉注射马血清两次,第1次10mL.kg-1,间隔3 w后,第2次注射6mL.kg-1,间隔2w后,连续3d每日1次腹腔注射甲强龙45mg.kg-1。注射激素后第2d治疗组用骨蚀灵胶囊进行灌胃,正常组和模型组两组均以等体积的蒸馏水灌胃。在灌胃第4w和第8w时分批处死动物,迅速取出股骨头,截取股骨头取材后迅速投入液氮中,从骨组织中提取核酸,应用RT-PCR法检测不同时间点Bcl-2 mRNA表达。结果:联合应用马血清和甲强龙的方法可成功造成家兔激素性股骨头坏死模型,成功率高,死亡率低。应用液氮下迅速研磨骨组织的方法成功提取了骨组织核酸,RT-PCR法检测不同时间点Bcl-2 mRNA表达,Bcl-2 mRNA的表达随着时间推移各组表达量逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中药骨蚀灵胶囊通过调节股骨头局部血循环,可以抑制细胞凋亡,同时促进成骨和组织修复,作用全面,通过多种途径防治激素性股骨头坏死早期病理变化,防止病变的进展。通过探讨中药防治激素性股骨头坏死机理的研究,能够加深对激素性股骨头坏死早期病理变化的认识,针对其中的关键环节进行干预,可以更好的预防和治疗糖皮质激素所导致的骨坏死。     

仙灵骨葆治疗激素性股骨头坏死的疗效及对血清VEGF、TGF-β1、PINP、BGP及骨密度的影响

目的:观察仙灵骨葆胶囊治疗激素性股骨头坏死的疗效及对血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)及骨钙素(BGP)及骨密度的影响。方法:将124例激素性股骨头坏死患者随机分为观察组(62例)和对照组(62例),对照组接受闭合髓芯钻孔减压术治疗,观察组在对照组的基础上给予仙灵骨葆胶囊治疗(3粒/次,2次/d,3个月为1个疗程,连续治疗2个疗程。观察两组治疗前后的血清VEGF、TGF-β1、PINP及BGP及骨密度指标变化情况,并记录两组治疗前后髋关节Harris评分、坏死体积与股骨头体积比的改善情况。结果:两组治疗第1个疗程、2个疗程后,血清VEGF、TGF-β1、PINP水平及坏死体积与股骨头体积较治疗前显著降低(P均0.05),BGP水平与股骨颈、股骨粗隆、Ward’s三角等骨密度指标及髋关节Harris评分显著升高(P均0.05);观察组上述指标改善情况显著优于对照组(P均0.05)。结论:仙灵骨葆胶囊治疗激素性股骨头坏死的疗效显著,能显著改善患者髋关节功能,其机制可能与下调VEGF、TGF-β1、PINP表达,上调BGP表达,改善骨密度有关。     

复方巴戟天合剂对激素性股骨头坏死大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨复方巴戟天合剂对激素性股骨头缺血性坏死大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF mRNA)表达的影响。方法:SD大白鼠72只,随机分成正常组、模型组、对照组、治疗组。除正常组外,第1～4周各组均每周2次im醋酸强的松龙24.5 mg.kg-1,第4～8周每周1次im醋酸强的松龙24.5 mg.kg-1,建立大鼠激素性股骨头缺血性坏死模型,每日给药1次,于实验后第4,8,12周分3批处死动物,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF mRNA的表达。结果:模型组造模第4,8周时VEGF mRNA的表达逐渐减弱,第12周稍有升高,但仍较正常组低(P<0.05);治疗组在各时期与模型组比较均有升高(P<0.05),治疗第12周与第8周比较有显著性差异(P<0.05)。结论:复方巴戟天合剂可增加股骨头内VEGF mRNA的表达,可起到与仙灵骨葆胶囊相近的治疗效果。     

右归饮对大鼠激素性股骨头坏死局部脂联素表达的影响

目的:研究补肾助阳中药右归饮对大鼠激素性股骨头坏死模型脂联素的影响。方法:取Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组、模型组、右归饮治疗组,采用内毒素和甲基强地松龙肌肉注射诱导造成激素性股骨头坏死模型后,右归饮治疗组给右归饮灌胃,空白对照组和模型组以等量生理盐水灌胃治疗,于6周后手术取股骨头,观察股骨头病理形态,计算空骨陷窝率,利用基因芯片技术检测股骨头基因表达,并利用RT-PCR技术检测脂联素基因adipoq的表达情况。结果:①HE染色显示右归饮治疗组较模型组骨膜变完整,同源软骨细胞数增加,骨小梁变整齐,软骨下血管变丰富。②模型组空骨陷窝率最高,右归饮治疗组次之,空白对照组最低。空白对照组、右归饮治疗组的空骨陷窝率与模型组相比较,差异均有统计学意义(P0.01)。③基因芯片表达结果显示,空白对照组与模型组相比较,脂联素基因adipoq无明显差异(Ratio值2.0);右归饮治疗组与模型组相比较,脂联素基因adipoq明显上调(Ratio值2.0)。结论:在大鼠激素性股骨头坏死模型模型中,糖皮质激素联合内毒素造模对股骨头局部的脂联素表达无明显影响;补肾助阳中药右归饮能明显刺激股骨头局部的脂联素的表达。     

生脉成骨胶囊对激素性股骨头坏死髋周骨髓基质干细胞ALP和BGP的影响

目的：通过研究生脉成骨胶囊对激素性股骨头缺血性坏死的股骨和髂骨的间充质细胞的碱性磷酸酶（ALP）和骨钙素（BGP）的变化,探讨其对髂、股骨骨髓干细胞成骨能力的影响。方法：将60只SD雄性大鼠随机分为6组：空白对照组、模型组、生脉成骨预防用药组、阿仑磷酸钠治疗组、丹郁骨康治疗组、生脉成骨治疗纽,除空白对照纽外,其余大鼠腹腔注射醋酸泼尼松龙,建立激素性股骨头坏死动物模型。造模成功后,各组给予相应的药物或生理盐水进行灌胃。取其股骨及髂骨,收集骨髓细胞悬液进行成骨细胞诱导培养,分别用ELISA法测定ALP、BGP的含量。结果：空白对照组、生脉成骨预防用药组、阿仑磷酸钠治疗组、丹郁骨康治疗组、生脉成骨治疗组股骨髂骨的ALP、BGP,含量均显著高于模型组（P〈0．05）,丹郁骨康治疗组的股骨和髂骨,以及生脉成骨治疗组的股骨ALP含量显著高于阿仑磷酸钠治疗组（P〈0．05）。结论：生脉成骨胶囊可以促进激素性股骨头坏死大鼠模型的股骨、髂骨间充质细胞碱性磷酸酶和骨钙素合成,在促进成骨细胞分化成熟方面上显著高于阿仑磷酸钠片。初步认为生脉成骨胶囊治疗激素性股骨头缺血性坏死的作用机理与促进成骨细胞的分化成熟程度以及提高成骨细胞骨蛋白的分泌速度有关。     

活骨通络汤治疗早、中期酒精性股骨头坏死的临床观察

目的:评定活骨通络汤对早、中期酒精性股骨头坏死的治疗效果.方法:将60例早、中期酒精性股骨头坏死患者随机分为治疗组、对照组.治疗组服用活骨通络汤,对照组服用仙灵骨葆胶囊.两组评定临床效果并对比.结果:活骨通络汤显效率和总有效率均优于仙灵骨葆胶囊.结论:活骨通络汤治疗早、中期酒精性股骨头坏死疗效确切.     

早期激素性股骨头坏死GR-α mRNA表达的变化及意义

目的：通过激素性股骨头坏死家兔模型,观察和评价GR-α mRNA在早期激素性股骨头坏死中的作用。方法：选用成年雄性日本大耳白兔,随机分为正常组、治疗组和模型组。治疗组和模型组经耳缘静脉注射马血清2次,第1次10mL/kg,间隔3周后第2次注射6mL/kg,间隔2周后,连续3天每日1次腹腔注射甲强龙45mg/kg。注射激素后第2天治疗组用骨蚀灵胶囊进行灌胃,正常组和模型组两组均以等体积的蒸馏水灌胃。在灌胃第4周和第8周时分批处死动物,迅速取出股骨头,截取股骨头取材后迅速投入液氮中,从骨组织中提取核酸后,应用RT-PCR法检测不同时间点糖皮质激素受体α（GR-α）mRNA表达。结果：联合应用马血清和甲强龙的方法可成功造成家兔激素性股骨头坏死模型,成功率高,死亡率低。应用液氮下迅速研磨骨组织的方法成功提取了骨组织核酸,RT-PCR法检测不同时间点GR-α mRNA表达,GR-α mRNA的表达随着时间推移各组表达量逐渐升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：糖皮质激素受体包括受体α和受体β,糖皮质激素主要和糖皮质激素受体α结合,发挥其生理及药理功能,糖皮质激素受体α的密度及亲和力与糖皮质激素的作用成正相关。在早期激素性股骨头坏死局部低氧环境中GR-α的表达增加从而加速了糖皮质激素的作用,加速了病理过程的发展。     

仙灵骨葆胶囊治疗酒精性股骨头坏死的临床观察

目的:评定仙灵骨葆胶囊对酒精性股骨头坏死的治疗效果。方法:对100例仙灵骨葆胶囊治疗的酒精性股骨头坏死门诊病例进行回顾性研究,分析随访结果,评价临床治疗效果。结果:根据Arlet及Ficat临床分期治疗后评估,优29例、良55例、可11例、差5例,有效率95%,优良率84%。结论:仙灵骨葆胶囊在酒精性股骨头坏死的治疗上疗效确切。