中药乳宁Ⅱ号对人乳腺癌MCF—7细胞株体内外生长的影响

为验证中药乳宁Ⅱ号对乳腺癌的治疗作用，本文选用人乳腺癌细胞株ＭＣＦ－７作为研究对象，观察乳宁Ⅱ号对其体内外生长的影响。结果表明，含中药乳宁Ⅱ号的药物血清法在培养液中浓度为２０％和３０％时对ＭＣＦ－７的体外生长的抑制率达２４．４％、２４．２％（Ｐ〈０．０５），流式细胞仪检测结果说明其机理可能是抑制癌细胞的ＤＮＡ合成，阻滞癌细胞于Ｇ０／Ｇ１期，减少Ｓ期比率；同时用中药乳宁Ⅱ号灌饲ＭＣＦ－７荷瘤裸小鼠的     

桑黄提取物的抗肿瘤作用研究

目的 研究桑黄提取物对小鼠S180实体瘤、H22肝癌和Lewis肺癌实体瘤的生长抑制作用,体外对人瘤细胞的直接抑制作用.方法 建立小鼠S180实体瘤、H22肝癌和Lewis肺癌实体瘤模型,观察桑黄提取物高(1000mg/kg)、中(500mg/kg)、低(250mg/kg)剂量组体内抑制肿瘤生长作用,MTT法检测桑黄提取物抑制人肿瘤细胞增殖的作用.结果 ①桑黄提取物高、中、低剂量对小鼠S180实体瘤的抑制作用分别为27.9%、75%、31.2%;对小鼠H22肝癌的抑制率分别为46%、63%、57%;对小鼠肺癌Lewis的抑制率分别为57.1%、54.5%、45.9%.②体外对人瘤细胞的抑制作用:桑黄提取物给药剂量(20 μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160 μg/ml)对人卵巢癌细胞(A2780)的抑制率分别为16.9%、18.5%、25.8%、31.5%;对人乳腺癌(MCF7)细胞的抑制率分别为19.9%、28.1%、32.25%、30.8%.结论 桑黄提取物各剂量组对小鼠H22、S180、Lewis实体型肿瘤的生长均有抑制作用,体外对人肿瘤细胞MCF7,OVCA278有直接杀伤作用.     

阳和汤对裸鼠人癌移植瘤的抗肿瘤作用研究

目的：观察阳和汤对动物移植性肿瘤的抑制作用和可能的作用机理。方法：采用荷瘤模型裸鼠进行在体抑瘤实验，对体外培养肿瘤细胞进行肿瘤细胞增殖及诱导细胞凋亡实验。结果：发现阳和汤8g生药／kg、4g生药/kg（相当于人用量16、8倍）可明显抑制人小细胞肺癌在裸鼠体内的生长，其抑瘤率为59．2％-30．1％，对体外培养的肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用，IC50在7-15μg／mL范围内，并对肿瘤细胞诱导凋亡的作用，表现为G，期细胞数增多，S期细胞数减少，c2M期细胞数增多。结论：阳和汤具有明显的抑制动物移植肿瘤生长的作用，对体外培养的癌细胞生长也有一定的抑制作用，其抑瘤作用机制和对癌细胞直接的杀伤，通过及干扰其细胞生长周期、诱导细胞凋亡有着紧密的联系。     

一种真菌菌丝体甲醇提取物—A7的抗肿瘤活性研究

目的 研究一种真菌菌丝体甲醇提取物－A7的抗肿瘤活性。方法 MTT法观察A7对人BEL－7402肝癌细胞、HCT－8结肠癌细胞、SPC-A－1肺腺癌细胞、GLC－82肺腺癌细胞和EC－109食管癌细胞的生长抑制作用；以小鼠移植性肿瘤S180模型，观察A7的体内抗肿瘤作用。结果 A7对前述癌细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为0．8，1．7，4．7，5．0，7．6μg/mL，均小于10μg/mL。动物实验表明，50mg/kgA7对S189实体肉瘤的抑制率达46．8％（P＜0．001）。结论 A7在体外和体内都具有一定的抗肿瘤活性。     

固本抑瘤Ⅱ号及其拆方含药血清诱导MCF7细胞自噬的研究

目的:研究固本抑瘤Ⅱ号(GYⅡ)及其拆方大鼠含药血清对人乳腺癌细胞MCF7自噬的影响。方法:制备GYⅡ及其拆方大鼠含药血清,培养MCF7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制,单丹磺酰尸胺(MDC)及Hoechst 33342双染色荧光显微镜、微管相关蛋白1轻链3(MAP-LC3)蛋白Ⅱ(MAP-LC3-Ⅱ)染色激光共聚焦及透射电镜观察自噬,MAP-LC3-Ⅱ/DNA双参数流式细胞术同步分析细胞自噬与细胞周期。结果:与空白组比较,全方组、益气组含药血清处理MCF7细胞表现出细胞抑制效应,活血组、鸡血藤组含药血清处理MCF7细胞均表现出明显的自噬。结论:GYⅡ全方和益气组具有抑制MCF7细胞增殖的效应,而活血组和鸡血藤组未见抑制作用,可能与该两组含药血清诱导MCF7细胞自噬有关。     

温阳法中药复方对乳腺癌MCF-7细胞周期阻滞及抗侵袭转移的影响

目的:探讨温阳法中药复方对乳腺癌MCF-7细胞的生物学活性、细胞周期及抗侵袭转移的影响。方法:采用MTT法测定温阳法中药复方在不同作用时间下对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用;应用流式细胞技术检测其对细胞周期的影响;利用Western Blot法测定温阳法中药复方对乳腺癌MCF-7细胞肿瘤迁移和侵袭相关因子MMP-2及TIMP-2蛋白表达的影响。结果:倒置显微镜下观察发现,温阳法中药复方对人乳腺癌细胞MCF-7作用48 h后细胞发生不同程度的形态学改变;3600μg/mL剂量温阳法中药复方具有明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长;1800、2700μg/mL剂量温阳法中药复方作用于乳腺癌MCF-7细胞48 h后,S期细胞数量显著增加;同时,1800、2700μg/mL剂量温阳法中药复方组MMP-2、TIMP-2的表达与空白对照组相比均有显著差异。结论:温阳法中药复方能够明显抑制乳腺癌MCF-7细胞生长,并且抑制作用具有时间-剂量依赖性,可将乳腺癌MCF-7细胞周期阻滞于S期,同时,通过调控MMP-2/TIMP-2平衡达到抗乳腺癌细胞侵袭转移的作用。     

乳宁冲剂及拆方对裸鼠移植瘤生长及肺转移的影响

通过体内实验探讨乳宁冲剂及其拆方对裸鼠移植瘤生长及肺转移的抑制作用。选雌性BALB/c裸鼠,以对数生长的体外培养的MDA MB435高转移乳腺癌细胞造模。随机分为模型组、乳宁冲剂组、乳宁冲剂拆方温肾组、乳宁冲剂拆方疏肝活血组、三苯氧胺组(TAM组)、环磷酰胺组(CTX组),给药7周后记录移植瘤直径、瘤重,解剖显微镜下计数肺转移结节,病理切片观察肺转移灶大小及流式细胞仪检测瘤组织细胞周期。结果:乳宁冲剂组对肿瘤生长抑制作用明显;乳宁冲剂组及拆方温肾组、理气活血组对裸鼠乳腺癌移植瘤的肺转移抑制作用分别为46.36%、32.73%、18.2%,乳宁冲剂组作用与CTX组(50.91%)比较无显著差异;乳宁冲剂组可抑制细胞的有丝分裂,增加G0/G1期细胞数量,减少S期细胞数目,与模型组比有统计学意义(P<0.05),温肾组也有此作用趋势。乳宁冲剂全方抑制肿瘤生长及抗转移作用优于拆方,而拆方组以温肾组抗转移作用优于疏肝活血组。乳宁冲剂可能通过调整细胞周期,抑制DNA合成而抑制肿瘤生长及转移。     

水飞蓟素对乳腺癌细胞系的作用及其机制研究

目的：研究水飞蓟素在体外对不同乳腺癌细胞系的作用，并进一步探讨其作用机制。方法：MTT实验测定水飞蓟素对乳腺癌细胞系MCF－7和SK－BR－3的半数抑制浓度（IC50）；软琼脂克隆形成试验检测加药后两种细胞在软琼脂内的增殖能力。在此基础上，用Her-2抑制剂AG825进行干预，对水飞蓟素的作用机制进行初步探讨。结果：水飞蓟素对两种乳腺癌细胞有不同程度的抑制作用，其中对MCF－7细胞的作用较强，IC50≤0．02％，而对SK－BR－3的作用较弱。Her-2抑制剂AG825可增加SK－BR－3细胞对药物的敏感性，抑制了水飞蓟素作用后该细胞在软琼脂中集落的形成。结论：水飞蓟素在体外对MCF－7细胞具有明显的抑制作用，而AG825可增强SK－BR－3细胞对药物的敏感性。因此，SK－BR－3细胞中Her-2的高表达可能是该细胞对水飞蓟素敏感性差的原因，而水飞蓟素也可能通过Her-2调节某个或某几个下游分子起作用。     

消痰散结方对MKN—45人胃癌细胞ICAM—1表达的影响

目的：观察水痰散结方对体外培养的胃癌细胞粘附分子ICAM－1表达的影响，初步探讨消痰散结方抑制胃癌细胞转移的作用环节。方法：制备消痰散结药物血清，体外培养MKN－45人胃癌细胞，拟消痰散结方药物血清干预培养细胞，采用免疫组化ABC法检测胃癌组织中ICAM－1的。结果：中药组胃癌组织中ICAM－1表达水平明显低于空白对照组。结论：消痰散结方抑制胃癌细胞转移的环节可能和影响粘附分子的表达，从而影响细胞的粘附性机能有关。     

阿魏酸钠对人大肠癌Moser细胞和乳腺癌MCT7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究大肠癌 Moser 细胞和乳腺癌 MCF7细胞对市售4种中药制剂(斑蟊酸钠、苦参素、华蟾素和阿魏酸钠)的敏感性,以及阿魏酸钠影响大肠癌细胞增殖的可能机理。方法:采用 MTT 法测定药物对细胞增殖的抑制率和药物间的协同抑制作用;酶联免疫法检测 CEA 表达水平;流式细胞法测定细胞周期。结果:4种中药对乳腺癌 MCF7细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,但只有阿魏酸钠可明显抑制大肠癌Moser 细胞的增殖;阿魏酸钠与5种化疗药物联合对 Moser 细胞有协同作用;阿魏酸钠对 Moser 细胞表达CEA 没有影响;阿魏酸钠可诱导 Moser 细胞凋亡。结论:斑蟊酸钠、苦参素和华蟾素对不同肿瘤细胞的抑制效果差异很大;阿魏酸钠不仅有抑制肿瘤细胞增殖的作用,还与化疗药物有协同效果;阿魏酸钠抑制 Moser 细胞增殖的机理似与转化生长因子信号传导途径无关。     

三氧化二砷和顺铂联用对乳腺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用

目的 观察三氧化二砷(As2O3)和顺铂(DDP)联用对人乳腺癌细胞系MCF-7裸鼠移植瘤生长抑制有无增效作用.方法 建立裸鼠人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型,成瘤后动物随机分为4组:对照组、As2O3组、DDP组、As2O3+DDP组.对照组予0.9%氯化钠注射液0.2 mL,隔日1次腹腔注射,共8次.As2O3...     

紫龙金抑制人乳腺癌细胞系MCF-7生长的体内外实验研究

目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影响;(3)17-β-雌二醇缓释药片包埋法构建MCF-7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,并检测紫龙金(实验组灌胃生药20g紫龙金/kg体重)对肿瘤生长的抑制效应。结果 (1)紫龙金降低MCF-7细胞的存活率,并呈剂量和时间依赖性;(2)紫龙金组MCF-7细胞克隆形成率显著低于对照组,且随着浓度的增加,克隆形成能力明显降低[0.75、1.5、3.0、6.0mg/mL紫龙金组细胞克隆形成抑制率分别为(12.66±1.54)%、(88.83±2.13)%、100%、100%],克隆直径也明显减小或无克隆形成;(3)紫龙金下调p-ERK1/2蛋白的表达;(4)实验组裸鼠与对照组裸鼠4周后移植瘤的平均体积分别为(0.73±0.58)cm3、(1.36±0.64)cm3,平均瘤重分别为(1.02±0.25)g、(1.66±0.09)g,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05),实验组抑瘤率为38.55%。结论紫龙金可显著抑制MCF-7细胞的体内和体外增殖、转化和致瘤性,这可能与p-ERK1/2蛋白的表达下调有关。     

疏肝益肾方对人乳腺癌TAM耐药细胞株MCF-7 TAM-R的作用及其机制的研究

目的:研究疏肝益肾方对他莫昔芬耐药乳腺癌细胞MCF-7 TAM-R的作用,并探讨其可能的机制。方法:采用中药血清药理学方法制备大鼠含疏肝益肾方高中低剂量血清、TAM阳性对照血清、空白阴性对照血清,体外培养MCF-7 TAM-R细胞。CCK8法观察各组含药血清对MCF-7 TAM-R细胞株的抑制率,基因芯片检测MCF-7 TAM-R耐药细胞株可能的作用机制。结果:CCK8实验结果显示疏肝益肾方高中低剂量均可不同程度抑制MCF-7 TAM-R细胞株的增殖,且中药高剂量组在48小时抑制作用最强(P0.05)。基因芯片结果显示高剂量疏肝益肾方可以下调MCF-7 TAM-R耐药细胞株MAPK通路、VEGF通路等通路的表达。结论:1疏肝益肾方对TAM耐药乳腺癌细胞MCF-7 TAM-R的增殖有抑制作用。2疏肝益肾方逆转MCF-7 TAM-R细胞他莫昔芬耐药的机制涉及多条通路,可能与抑制MAPK通路、VEGF通路等通路有关。     

Selective Inhibition of Cell Proliferation by Lycopene in MCF‐7 Breast Cancer Cells In vitro: A Proteomic Analysis

Lycopene, a red pigmented carotenoid present in many fruits and vegetables such as tomatoes, has been associated with the reduced risk of breast cancer. This study sought to identify proteins modulated by lycopene during cell proliferation of the breast cancer cell line MCF‐7 to gain an understanding into its mechanism of action. MCF‐7 breast cancer cells and MCF‐10 normal breast cells were treated with 0, 2, 4, 6, 8, and 10 μM of lycopene for 72 h. 3‐(4,5‐Dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyltetrazolium bromide (MTT) tetrazolium reduction assay was used to measure cell proliferation and two‐dimensional fluorescence difference gel electrophoresis to assess the changes in protein expression, which were identified using MALDI‐ToF/ToF (matrix‐assisted laser desorption ionization tandem time‐of‐flight) and Mascot database search. MTT and cell proliferation assays showed that lycopene selectively inhibited the growth of MCF‐7 but not MCF‐10 cells. Difference gel electrophoresis analysis revealed that proteins in the MCF‐7 cells respond differently to lycopene compared with the MCF‐10 cells. Lycopene altered the expression levels of proteins such as Cytokeratin 8/18 (CK8/18), CK19 and their post translational status. We have shown that lycopene inhibits cell proliferation in MCF‐7 human breast cancer cells but not in the MCF‐10 mammary epithelial cells. Lycopene was shown to modulate cell cycle proteins such as beta tubulin, CK8/18, CK19 and heat shock proteins. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

舒肝凉血方联合三苯氧胺对雌激素依赖性乳腺癌的抑瘤作用

目的:研究中药舒肝凉血方联合三苯氧胺(TAM)对荷雌激素依赖性乳腺癌裸鼠的肿瘤抑制作用,并探讨其可能的机制。方法:建立裸鼠MCF-7乳腺癌移植瘤,随机分为对照组、TAM组、舒肝凉血汤组(简称中药)及中药+TAM组,给药28d后,计算肿瘤抑制率,采用流式细胞技术观察肿瘤细胞周期分布情况,采用TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况,采用放射免疫法检测裸鼠血清中的雌二醇和孕酮水平。结果:治疗各组移植瘤生长速度均低于对照组,TAM组、中药组及中药+TAM组的抑瘤率分别为28.30%、26.30%、41.01%,各治疗组的平均瘤重与对照组相比差异有统计学意义(P&lt;0.01);治疗各组G0/G1期细胞增多,出现G0/G1期细胞阻滞,其中中药+TAM组周期阻滞最明显;凋亡检测发现中药+TAM组的凋亡率显著高于对照组(P&lt;0.001),且高于单独应用中药和TAM组;中药组和中药+TAM组的血清雌二醇水平显著低于对照组(P&lt;0.0001)。结论:舒肝凉血方与TAM联合应用,可以使TAM的抑瘤作用增强,此作用可能与中药复方诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡,以及降低动物血清中雌二醇水平有关。     

The Puzzling Issue of ‘Vehicle‐Treated Control’ when Using Ethanol as Drug Carrier for MCF‐7 Cells

Ethanol has been commonly used as a vehicle for drug discovery purpose in vitro. The human breast cancer MCF‐7 estrogen dependent cell line is a common in vitro model used for hormonal therapy study. However, special precaution is suggested when ethanol is used in pharmacological tests as solvent in order to evaluate the biological activity of potential drugs especially concerning about the MCF‐7. Ethanol was shown to stimulate the proliferation of this estrogen receptor positive cell line. Here, we have further demonstrated that the dose responsive stimulatory effect of ethanol on the MCF‐7 cells after pre‐incubating the breast carcinoma cells with phenol red‐free medium and stripped fetal bovine serum. Our findings open a discussion for the evaluation of ethanol as solvent for drug discovery and screening when using MCF‐7 cells as a testing model. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

Danshen (Salvia miltiorrhiza) extract inhibits proliferation of breast cancer cells via modulation of Akt activity and p27 level

Danshen is widely used in traditional Chinese medicine, often in combination with other herbs. To check the effect of Danshen on the proliferation of breast cancer cells, Danshen extract was used to treat MCF‐7 and MCF‐7 HER2 cells, the latter of which overexpresses HER2. HER2 is a receptor tyrosine kinase, and is involved in signal transduction pathways leading to tumor cell proliferation. MTT and cell proliferation assays revealed that Danshen strongly inhibited the proliferation of both MCF‐7 vec cells and MCF‐7 HER2 cells. Flow cytometry analyses indicated that Danshen induced cell cycle delay in the G1 phase. HER2 expression was shown to confer resistance to Danshen‐induced inhibition of proliferation and cell cycle delay, suggesting that HER2 is responsible for the resistance to Danshen. Danshen treatment induced the down‐regulation of Akt phosphorylation and an increase in p27 in MCF‐7 vec and MCF‐7 HER2 cells. Nevertheless, MCF‐7 HER2 cells were more resistant to the Danshen‐induced inhibition of Akt phosphorylation and p27 up‐regulation. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

穿心莲内酯联合5-FU对人胃癌BGC-823细胞的体内外抑制作用

目的：探讨穿心莲内酯联合5-Fu对人低分化胃癌细胞株BGC-823的协同抗肿瘤作用。 方法：以人胃癌BGC-823细胞株为靶细胞,通过体外细胞培养和裸鼠移植瘤试验,采用 MTT法检测、绘制效应-合用指数曲线、抑瘤率计算等方法。 结果：穿心莲内酯在7.5～120μg/mL、5-FU在3.75～60μg/mL范围内均能抑制BGC-823细胞的生长,具有剂量-效应关系和时间-效应关系。两药联合作用24h、48h、72h时的中效抑制浓度分别为17.32、9.54、4.11μg/mL,显著小于单药应用组。72h效应-合用指数曲线表明两药在抑制效应≤0.97范围内可产生协同作用。穿心莲内酯联合5-FU对人BGC-823细胞裸鼠移植瘤的抑瘤率为（75.51±12.57）%,与 单药组相比差异均有显著性。结论：穿心莲内酯、5-Fu能在体内外抑制人胃癌BGC一823细胞的生长,两药联合产生协同或相加作用。     

双苄基异喹啉化合物Ys-96与阿霉素或长春新碱联合用药对体外培养人癌细胞的抗癌增效作用

目的:研究双苄基异喹啉化合物Ys96与阿霉素或长春新碱联合用药对体外培养人癌细胞系MCF7和KB的抗癌增效作用。方法:在体外培养的敏感株人乳腺癌细胞MCF7及其阿霉素耐药株MCF7/Adr和敏感株人口腔粘膜上皮样癌细胞KB及其长春新碱耐药株KBv200的体外试验系统中,采用Berenbaum所报道的评价二药相互作用性质的试验方法,对源于中药汉防己的双苄基异喹啉化合物Ys96与阿霉素或长春新碱联合用药的抗癌作用进行了研究。结果:3种不同比例混合的Ys96和阿霉素或长春新碱联合用药对敏感株MCF7或KB以及耐药株MCF7/Adr或KBv200的IC50分数值之和(SFIC)均小于1.0,而且所有联合用药的等效曲线形态均为凹型。结论:Ys96与阿霉素或长春新碱联合用药对上述体外培养的人癌细胞具有抗癌增效作用。