CCL22-CCR4轴在胃癌腹膜乳斑转移的机制研究

目的 探讨巨噬细胞衍生因子MDC/CCL22-CCR4反应轴在胃癌腹膜乳斑转移中的作用.方法 用RT-PCR和Western blot方法检测CCR4在5种胃癌细胞系中的表达;MTT法测定不同浓度CCL22对胃癌细胞株BGC-823增殖率的变化;Transwell小室体外侵袭实验检测CCL22对胃癌细胞株BGC-823趋化活性的影响;免疫组化检测标本中CCR4表达;单变量分析CCR4表达与胃癌临床病理参数的关系.结果 CCR4mRNA和CCR4蛋白在5种胃癌细胞系中均有表达.CCL22可以促进BGC-823细胞的增殖和趋化.CCR4在胃癌中有表达,CCR4表达水平与胃癌分化程度相关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小、位置、分期以及淋巴结转移等均无关(P>0.05).结论 CCL22-CCR4反应轴可能在胃癌腹膜乳斑转移中起作用.CCR4可能成为预防和治疗胃癌腹膜转移的潜在靶点.     

乳腺浸润性导管癌腋窝淋巴结转移与趋化因子受体CCR6/CCL20表达的关系

目的 观察CCR6/CCL20在乳腺浸润性导管癌腋窝淋巴结转移中的作用.方法 应用Western blot检测55例乳腺浸润性导管癌患者标本中肿瘤组织、邻近正常组织以及淋巴结转移组织中CCR6/CCL20通路成员的表达情况.结果 乳腺癌组织中CCR6/CCL20表达水平明显增高分别为正常组织的3.6、2.1倍(P＜0.05,P＞0.05);CCR6表达水平与腋窝淋巴结转移相关(P＜0.05).结论 趋化因子受体CCR6/CCL20表达可能在乳腺癌腋窝淋巴结转移过程中起重要作用.     

CCL5及其受体在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的检测趋化因子CCL5及其受体在浸润性乳腺癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法应用SYBR Green Ⅰ real time-PCR定量检测33例浸润性乳腺癌患者癌组织及其癌旁组织的CCL5及其受体CCR1、CCR3、CCR5 mRNA的表达。结果各期癌组织CCR1及CCR3 mRNA的相对表达量与癌旁正常组织差异无统计学意义（P〉0．05），CCR5及CCL5 mRNA的相对表达量均高于癌旁正常组织（P〈0．05），Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的表达量差异无统计学意义（P〉0．05），Ⅲ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的相对表达量为2．477，Ⅳ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的相对表达量最高（3．710）。CCR5及CCL5 mRNA的表达高度相关（Pearson相关系数为0．971）。结论趋化因子CCL5及其受体CCR5 mRNA在Ⅳ期乳腺癌组织中的表达水平最高，CCL5可能以自分泌方式与受体CCR5结合促进乳腺癌生长和转移。     

胆囊癌及其良性病变组织中CCL3及其受体表达的临床病理意义

目的 研究胆囊癌、慢性胆囊炎和胆囊结石组织中CCL3及其受体CCRl表达水平及其临床病理意义.方法 108例胆囊腺癌、15例慢性胆囊炎和20例胆囊结石组织标本常规制作石蜡包埋切片,CCL3和CCR1染色方法 为SP免疫组化法.结果 胆囊腺癌CCL3和CCR1表达阳性率及其评分明显高于慢性胆囊炎和胆囊结石组织(P<0.01);腺瘤癌变或高分化腺癌、肿块最大径<2 cm、淋巴结未转移及未侵犯周围组织病例CCL3和CCR1的表达阳性率及其评分明显低于低分化腺癌、肿块最大径≥2 cm、淋巴结转移和侵犯周围组织病例(P<0.05或P<0.01);胆囊癌中CCL3和CCR1表达呈高度一致性(P<0.01),其评分值呈高度密切正相关(r=0.68,P<0.01).结论 CCL3及其受体CCR1表达可能是反映胆囊癌发生、进展、生物学行为和预后的重要生物学标记物.     

趋化因子MDC/CCL22-CCR4反应轴在小鼠胃癌腹膜乳斑转移中的作用

目的 探讨趋化因子MDC/CCL22-CCR4反应轴在小鼠胃癌腹膜乳斑转移中的作用.方法 用RT-PCR和Western blot方法检测615小鼠前胃癌细胞(MFC)CCR4的mRNA和蛋白质的表达;在615实验小鼠腹腔内注射0.2 ml Dil荧光颗粒标记的MFC悬液(含癌细胞1×104个)制备腹膜乳斑转移模型,观察MFC转移过程及部位,取大网膜分别做CCL22和CCR4的免疫组化染色,在扫描电镜下观察乳斑区结构.实验动物被分为MFC组和生理盐水组,在腹腔注入MFC后第6、8、10天用ELISA方法分别检测MFC组和生理盐水对照组腹水中的CCL22浓度. 结果 MFC初期转移在大网膜乳斑区,在乳斑区可检测到CCR4和CCL22表达.在扫描电镜下可见乳斑区主要由巨噬细胞、淋巴细胞和不连续的内皮细胞构成.CCL22在盐水对照组平均值是43 pg/ml,MFC组平均值是364 pg/ml.结论 MDC/CCL22-CCR4反应轴在小鼠胃癌大网膜乳斑转移中可能发挥重要作用.     

抑制miR-223表达促进巨噬细胞的M2型激活

目的观察microRNA-223(mi R-223)在巨噬细胞M2型激活中的表达及作用。方法运用慢病毒载体感染的方式在巨噬细胞中过表达或敲低miR-223的表达;应用qPCR检测不同激活状态及转染状态巨噬细胞中miR-223的表达;应用Elisa及流式细胞术检测M2型巨噬细胞的激活状态;应用Transwell迁移实验和划痕实验检测乳腺肿瘤细胞的迁移情况。结果 miR-223在单核/巨噬细胞中的表达明显高于肿瘤细胞,在单核细胞向巨噬细胞分化过程中miR-223表达下调,且IL-4或与肿瘤细胞共培养激活的巨噬细胞下调显著。敲低miR-223的表达而不是增加其表达能够促进M2型巨噬细胞标记物CCL18、IL-10和CD206的表达,并促进共培养肿瘤细胞的迁移。结论 miR-223可作为靶向肿瘤微环境调控肿瘤转移的靶点。     

趋化因子受体CCR6/CCL20在结直肠癌肝转移中的作用

目的观察CCR6／CCL20在结直肠癌肝转移中的作用。方法应用Westernblot检测60结直肠癌患者标本中肿瘤组织、邻近正常黏膜以及肝转移组织中CCR6／CCL20通路成员的表达情况，免疫组织化学法检测CCR6／CCL20在细胞水平的分布。结果结直肠癌组织中CCR6与CCL20表达水平明显增高，分别为正常黏膜的3．4倍、2．2倍（P〈0．05）；CCR6表达水平与TNM分期相关（P〈0．05）；CCR6／CCL20在结直肠癌组织中表达情况呈线性相关，相关系数为0．437，P〈0．05。结论趋化因子受体CCR6／CCL20在结直肠癌与肝转移组织中呈高表达，CCR6／CCL20信号转导通路可能在结直肠癌肝转移过程中起一定作用。     

趋化因子受体在肝癌细胞中的表达及其意义

目的 观察趋化因子受体(CCR1 CCR7 CXCB3 CXCR4)在人肝癌细胞系(Hep3BHepG2 HLE和HLF)的表达,并探讨其作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫组织化学、流式细胞仪测定趋化因子受体在肝癌细胞表面的表达,通过肝癌细胞Hep3B体外侵袭实验即重组大鼠巨噬细胞激动蛋白(CCL3)-1对Hep3B细胞穿透人工重组基底膜能力的影响来检测趋化因子受体在肝癌侵袭转移时所起的作用,并通过激光共聚焦显微镜观察趋化因子受体在肝癌细胞侵袭转移过程中的作用机制.结果 通过RT-PCR,流式细胞术可检测到CCR1 mR-NA及蛋白在肝癌细胞中表达,免疫组织化学显示CCR1在肝癌细胞包膜和胞质内都有表达.细胞侵袭实验提示Hep3B在CCL3的刺激下,实验组Hep-3B细胞通过基底膜的数量(213±12)多于对照组细胞通过基底膜的数量(102±11),差异有统计学意义(P<0.01).运用激光共聚焦检测到实验组胞内钙离子的浓度增加到.结论 肝癌细胞系(Hep3B HepG2 HLE和HLF)的表面的表达CCRl,且CCR1在肝癌细胞侵袭转移中发挥重要的作用,其作用机制与细胞内钙离子浓度有很关.     

CCL5与乳腺癌腋窝淋巴结转移和预后的关系及发生机制的研究

目的：探讨CCL5与乳腺癌腋窝淋巴结转移、预后的关系及其发生机制。方法：Lum ine X蛋白检测试剂盒检测乳腺癌患者血清和肿瘤组织裂解液中CCL5的表达;生物信息学方法分析GEO和TCGA数据库中CCL5与乳腺癌临床病理学特征的相关性及预后关系。结果：乳腺癌患者体内CCL5水平与腋窝淋巴结转移程度呈正相关,且无论淋巴结状态及转移程度如何,血清和肿瘤组织裂解液中CCL5表达水平都呈正相关;ROC曲线证实CCL5水平可以在一定程度上预测乳腺癌患者的腋窝淋巴结转移。乳腺癌患者体内CCL5水平与ER阴性、PR阴性、核分级更高、临床分期更晚、HER2过表达等预后不良的临床特征正相关;CCL5可能通过CCR5在乳腺癌中发挥作用。结论：CCL5可能通过CCR5影响乳腺癌患者的腋窝淋巴结转移及预后。     

趋化因子受体CXCR1及CXCR2在胃癌腹膜转移中的表达及意义

目的检测趋化因子受体CXCR1及CXCR2在胃癌原发灶、癌旁组织和腹膜转移灶中的表达情况,分析其在胃癌腹膜转移中的临床意义。方法免疫组化法检测趋化因子受体CXCR1、CXCR2在胃癌腹膜转移患者原发灶、转移灶、癌旁组织和未转移患者原发灶中的表达情况;对胃癌腹膜转移的患者进行随访,比较趋化因子受体CXCR1及CXCR2阳性和阴性表达的中位生存时间;Logistic回归多因素分析胃癌腹膜转移的危险因素。结果CXCR1、CXCR2在胃癌腹膜转移组原发灶和癌旁组织中的表达有统计学差异（均P〈0．05）。发生腹膜转移和未发生腹膜转移的原发灶间,CXCR2的表达也有统计学差异（P〈0．05）,而CXCR1的表达差异则无统计学意义（P〉0．05）。CXCR2在胃癌腹膜转移灶中的阳性表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、肿瘤大小相关（均P〈0．05）;CXCR1在胃癌腹膜转移灶中的表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、肿瘤大小、肿瘤部位、淋巴转移、年龄、性别均无相关性（均P〉0．05）。CXCR2表达阳性的患者的术后生存时间低于CXCR2表达阴性的患者。原发肿瘤的大小、浸润深度、分化程度,以及原发灶中CXCR2的表达是胃癌腹膜转移的危险因素。结论趋化因子受体CXCR1、CXCR2的表达水平与胃癌的生长有关;而CXCR2的表达与胃癌腹膜转移有关。     

胃癌患者血清中CCL20和CCR6的表达及临床意义

目的 测定趋化因子CCL20及其受体CCR6在胃癌患者的血清中表达,并探讨CCL20和CCR6表达水平与胃癌的发生发展关系.方法 应用荧光定量PCR技术、流式细胞术和酶联免疫吸附法测定50例胃癌患者和30例健康对照者外周血中CCL20和CCR6的mRNA和蛋白表达水平.结果 胃癌患者CCL20和CCR6的mRNA表达均显著高于健康对照组(P<0.01);胃癌患者外周血中CCL20和CCR6的蛋白表达分别为(45.4±10.9)pg/mL和(7.11±1.03)%,显著高于健康人的(18.6±4.7)pg/mL和(1.83±0.43)%(P<0.01),且其升高程度与胃癌临床分期有明显关系.结论 胃癌患者CCL20和CCR6的表达与胃癌的发生发展存在一定的相关性,可能参与胃癌的发病过程,推测其可能作为胃癌诊断、复发和转移的分子标志物.     

趋化因子CCL25/CCR9在胰腺癌患者的表达研究

目的 检测胰腺癌患者CCL25/CCR9的表达情况,并结合临床病理资料分析CCL25/CCR9对原发性胰腺癌临床预后的影响.方法 搜集2006年1月至2008年1月手术切除的58例胰腺癌患者的癌组织和引流淋巴结以及10例胰腺良性肿瘤的蜡块标本.采用免疫组化方法检测上述标本CCL25/CCR9蛋白表达情况;同时复习临床资料,分析胰腺癌患者CCL25/CCR9表达情况与预后的关系.结果 免疫组化结果显示,在胰腺良性病变、胰腺癌及胰腺癌引流淋巴结中的阳性率:CCL25分别为40.0%、62.1%、91.4%,组间表达存在差异(X2=19.31,P<0.05);CCR9分别为40.0%、79.3%、86.2%,组间表达存在差异(x2=11.12,P<0.05).胰腺癌淋巴结转移组的CCL25阳性表达率(87.1%)高于无淋巴结转移组(63.0%),胰腺癌淋巴结转移组的CCR9阳性表达率(90.3%)高于无淋巴结转移组(66.7%);且随着癌细胞分化程度的降低和TNM分期的增加,CCL25/CCR9表达均增加(P<0.05).CCL25/CCR9阳性胰腺癌患者生存率较阴性组低.结论 CCL25/CCR9与胰腺癌的发生发展有关,可作为评估胰腺癌患者预后的相关指标,具有一定的临床指导意义.

Abstract：

Objective To investigate the expressions of CCL25 and CCR9 in pancreatic cancer and tumor draining lymph nodes (TDLNs) , and to find out the relationship between the expressions of CCL25/CCR9 and the prognosis of pancreatic cancer. Methods 58 patients with pancreatic cancer and 10 patients with pancreatic benign diseases who received resectional surgery were studied from Jan 2006 to Jan 2008. Immunohistochemistry was used to detect the expressions of CCL25 and CCR9 in pancreatic cancer,TDLNs and benign diseases. Result Immunohistochemistry showed that the positive rate of CCR9 in TDLNs (86. 2%) was higher than in pancreatic cancer (79. 3%) (P<0. 05),which in turn was higher than benign diseases (40%) (P<0. 05). The positive rates of CCL25 in TDLNs, pancreatic cancer and benign diseases were 91.4% (53/58), 62.1% (36/58) , 40% (4/10),respectively. The expressions of CCL25/CCR9 protein in pancreatic cancer was associated with the clinical stage and the pathological type. There was significant difference in the survival time between the CCL25/CCR9 positive and negative patients (P<0. 05). Conclusions The expressions of CCL25/CCR9 were increased in pancreatic cancer and TDLNs, which suggested that CCL25/CCR9 might be involved in pancreatic cancer metastasis. CCL25/CCR9 might be regarded as an important marker in the prognosis.     

MiR-146a与胃癌组织TAMs的相关性研究

目的:通过检测胃癌组织内肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)中MiR-146a的表达,探讨MiR-146a对TAMs的影响。方法:采用RT-PCR法分别检测BALB/c小鼠BGC-823移植瘤和腹腔中TAMs、胃癌患者肿瘤组织及外周血单核细胞中MiR-146a的表达量;转染MiR-146amimics的巨噬细胞与BGC-823细胞混合接种于小鼠,观察TAMs中MiR-146a的表达对肿瘤生长的影响。结果:1)小鼠BGC-823移植瘤TAMs中MiR-146a表达量显著降低,MiR-146amimics能明显抑制小鼠BGC-823移植瘤的生长。2)人胃癌组织TAMs中MiR-146a表达水平越低,肿瘤分化程度越差,肿瘤体积越大;与年龄、性别、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及远处转移无关(P0.05)。结论:MiR-146a作为抑癌基因调节TAMs的功能,抑制胃癌的发生发展。     

趋化因子受体CCR7诱导血管生成拟态形成在肝门部胆管癌中的作用

目的:探讨趋化因子受体CCR7和血管生成拟态(VM)在肝门部胆管癌组织的表达及其与临床病理因素的关系。方法:免疫组织化学染色检测63例肝门部胆管癌标本和20例正常胆管组织CCR7的表达,PAS双重染色检测血管生成拟态的表达,将CCR7表达和VM形成与临床病理因素进行相关性分析。结果:63例肝门部胆管癌组织中,CCR7阳性率79.4%。正常胆管表达率10%;胆管癌组织25例存在血管生成拟态形成,正常组织中无Vm形成;与临床病例因素相关性分析,CCR7和VM在肝门部胆管癌中的表达与肿瘤的分化程度和淋巴结转移呈显著相关;单变量和多变量相关性分析CCR7、VM、分化程度和淋巴结转移与生存率有关,而CCR7是影响肝门部胆管癌生存率的独立性因素。结论:肝门部胆管癌存在CCR7和血管生成拟态的表达,两者呈正相关;CCR7和VM的表达与肝门部胆管癌的淋巴结转移和肿瘤分化程度有关;CCR7是影响肝门部胆管癌生存率的独立性因素。     

CC趋化因子受体4过表达对甲状腺未分化癌细胞转移的影响

目的 :探讨CC趋化因子受体4(CC chemokine receptor 4,CCR4)对甲状腺未分化癌增殖和侵袭、转移能力的影响。方法:构建过表达CCR4的甲状腺未分化癌细胞株KHM-5M和C643,用CCK-8法检测CCR4对细胞增殖能力的影响;用transwell小室检测CCR4对甲状腺未分化癌侵袭、转移能力的影响。Western印迹检测CCR4对上皮-间质转化(EMT)相关的E-钙黏蛋白、波形蛋白和Snail蛋白表达的影响。结果:甲状腺未分化癌KHM-5M和C643细胞株转染CCR4慢病毒后,CCR4蛋白的表达量显著升高。与对照组相比,过表达CCR4对甲状腺未分化癌细胞的增殖能力无显著影响,而侵袭、转移能力明显升高。过表达CCR4后,E-钙黏蛋白表达显著下降,波形蛋白和Snail蛋白表达显著升高。结论:CCR4通过EMT促进甲状腺未分化癌侵袭、转移,但对甲状腺未分化癌增殖能力无显著影响。     

趋化因子受体5表达与乳腺癌临床病理特征及预后的相关性研究

目的 探讨趋化因子受体5(CCR5)在乳腺癌病灶和腋窝转移淋巴结中的表达及其与临床病理意义.方法 收集72例乳腺导管浸润癌及其腋窝淋巴结组织,50例乳腺纤维腺瘤组织,40例正常乳腺组织石蜡标本切片.采用免疫组化方法检测CCR5的表达情况;同时检测乳腺癌组织中C-erbB-2,p53,Ki-67,ER,PR的表达情况,并与临床病理资料进行统计学分析.结果 (1)乳腺癌组织中CCR5蛋白表达阳性率达84.72%(61/72),乳腺纤维腺瘤组织中表达阳性率较低(14%,7/50),正常乳腺组织中不表达CCR5;(2)乳腺癌CCR5表达与腋窝淋巴结转移呈正相关(X<'2>=4.982,P=0.026,r=0.305);(3)50例伴腋窝淋巴结转移的患者中,乳腺癌原发灶及转移淋巴结同时表达CCR5阳性者39例,具有较高的同源性;(4)乳腺癌CCR5表达与癌基因C-erbB-2之间呈低度正相关(P<0.05,r=0.291);(5)乳腺癌CCR5表达与患者年龄、绝经与否、肿瘤最大径、肿瘤分期等临床特征无关(均P>0.05);(6)乳腺癌CCR5表达与p53,Ki-67,ER,PR无关表达(均P>0.05).结论 CCR5在乳腺癌的发生、发展及腋窝淋巴结转移方面起一定作用;CCR5可间接作为预测乳腺癌腋窝淋巴结转移及预后判断的指标之一.     

CC趋化因子受体2/单核细胞趋化蛋白1与肾脏疾病的研究进展

CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor,CCR2)是单核细胞趋化蛋白-1(mono-cyte chemoattractant protein,MCP-1)的主要受体,可与MCP-1发生特异性结合将信号转入细胞内,趋化并激活单核/巨噬细胞,促进炎症的发生发展.研究表明,CCR2/MCP-1参与了多...     

趋化因子受体CCR7在肝门部胆管癌组织中的表达及其意义

目的：探讨趋化因子受体CCR7在肝门部胆管癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法：免疫组织化学染色检测45例肝门部胆管癌手术标本和20例正常胆管组织中CCR7的表达,HE染色检测标本中肿瘤神经浸润情况,与临床病理因素进行相关性分析。结果：CCR7在45例肝门部胆管癌组织阳性表达32例（71.1%）,正常胆管组织中有2例表达弱阳性（10.0%）,二者阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）。45例肝门部胆管癌组织中38例有神经浸润,其中30例CCR7呈阳性表达。相关分析认为,CCR7表达与淋巴结转移、神经浸润有关（P〈0.05）;与患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关（P〉0.05）。结论：CCR7在肝门部胆管癌组织中高表达,CCR7的表达与肿瘤的淋巴结转移、神经浸润有关。     

浸润慢性胰腺炎组织的巨噬细胞表达趋化因子受体CCR5

有关免疫机制涉及慢性胰腺炎的发生了解得不多 ,慢性炎症组织含有表达 CC趋化因子受体 CCR5的单核细胞增多 ,后者也是 HIV进入巨噬细胞的共同受体。至于这一受体是否涉及慢性胰腺炎中的炎症过程尚不得而知 ,如果在炎性细胞中检出趋化因子受体 ,将强力提示参与慢性胰腺炎的发病机理。为了进一步阐明这一过程 ,作者分析 CCR5两个配基的表达 ,即RANTES和 MIP- 1α与慢性胰腺炎的关系。方法　自 7例器官供体取得人健康胰腺组织标本 ,供体平均年龄 4 6 .5岁 ;另自 2 2例病人取得慢性胰腺炎组织 ,其平均年龄为 4 5岁。用 Northern blot分…     

前列腺素E2对小鼠树突状细胞迁移能力及抗乳腺癌免疫作用的影响

目的观察前列腺素E2（PGE2）对体外培养的乳腺癌抗原负载小鼠树突状细胞（DC）迁移能力及抗乳腺癌免疫作用的影响.方法用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白细胞介素-4培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,负载乳腺癌抗原后加入PGE2,进行表型、CCR7mRNA及蛋白、同种异体混合淋巴细胞反应、特异性淋巴细胞（CTL）杀伤活性测定.将TM40D接种于小鼠左侧胸壁皮下制作乳腺癌动物模型,1周后皮下接种PGE2组及对照组DC,观察肿瘤抑制状况.结果体外实验显示,PGE2不影响DC的刺激淋巴细胞增殖能力和同种异体特异性杀伤活性.与对照组DC相比,PGE2培养组DC的CD80、CD86阳性细胞数增多,CCR7mRNA和蛋白表达上调（P＜0.05）.体外趋化试验显示,PGE2使DC对其配体CCL19和CCL21反应性增强（P＜0.05）.在乳腺癌动物模型中,PGE2培养组DC抑制肿瘤生长作用优于对照组.结论PGE2可以通过促进DC成熟并促进其体内迁移能力,提高抗乳腺癌DC疫苗的功效.