黄芪发酵粉对糖尿病大鼠生物效应的影响

目的:观察黄芪发酵粉对糖尿病大鼠一般状况、血糖、血脂等生物效应的影响。方法:60只SD大鼠随机分为6组,正常对照组(NC组)、糖尿病对照组(DM组)、盐酸二甲双胍片组、黄芪低剂量组(ASl组)、黄芪中剂量组(AS2组)和黄芪高剂量组(AS3组)。给药4 w后,观察动物的一般状态、体重、摄食量和饮水量;大鼠腹主动脉取血,分离血清,测各组大鼠空腹血糖(FBG);大鼠眼眶后静脉丛取血,测各组大鼠胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)及低密度脂蛋白(LDL-C)。结果:DM组大鼠体重明显低于NC组(P0.01),盐酸二甲双胍片组、ASl组、AS2组、AS3组大鼠体重明显高于DM组大鼠(P0.05)。与NC组比较,DM组大鼠血糖、血脂水平明显升高(P0.01,P0.001);与DM组比较,盐酸二甲双胍片组、AS1组、AS2组、AS3组大鼠血糖、血脂水平明显降低(P0.05)。结论:黄芪发酵粉具有调节脂代谢、降低血糖的生物效应。     

有氧运动对焦虑大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的水平影响研究

目的 :观察焦虑大鼠和有氧运动焦虑大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量的变化。方法 :清洁级SD雄性大鼠60只随机分成3组,即:A组自然对照组(national control group)(n=20),B组基础对照组(Foundation control group)(n=20),C组有氧运动组(aerobic exercise group)(n=20)。用昼夜颠倒的方法制焦虑大鼠模型。将B组、C组40只大鼠白天置于黑暗密闭空间,晚上用灯管照明,共持续14 d。自然对照组和基础对照组:40只大鼠每天自由饮食。有氧运动组:让焦虑模型大鼠20只每周1、3、5进行持续1 h的动物跑台跑步训练,共持续6周。结果 :有氧运动组大鼠与基础对照组相比,大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量明显低于基础对照组(P<0.01);有氧运动组大鼠与自然对照组相比,大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量低于自然对照组(P<0.05);自然对照组与基础对照组比较:大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的含量明显低于基础对照组(P<0.01)。结论 :适宜的有氧运动可以缓解大鼠的焦虑程度,降低焦虑大鼠血清甲状腺激素(TH)、多巴胺(DA)的水平,是一种有效地缓解焦虑的方法,值得广泛推广。     

灌注华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤抑制的实验观察

目的:观察膀胱内灌注华蟾素(Cinobufagin,Cino)对SD大鼠膀胱肿瘤的影响。方法:75只SD雌性大鼠随机分成5组:空白对照组(A组)、MNU组(B组)、华蟾素处理组(C组)、阿霉素处理组(D组)、卡介苗处理组(E组),每组15只。所有SD雌性大鼠采用MNU膀胱灌注,每间隔1周灌注2 mg/0.2 ml 1次,共6次,诱导大鼠膀胱肿瘤模型。处理组分别予以华蟾素、阿霉素(ADM)、卡介苗(BCG)行膀胱内灌注。实验结束后1周处死大鼠,完整切除膀胱,膀胱肿瘤组织行HE染色,观察膀胱肿瘤病理类型,并计算各组的致癌率。结果:大鼠肿瘤组织HE染色,光镜观察A组大鼠14只大鼠均未见明显异常增生,B组13只大鼠发生膀胱移行细胞癌,C组6只大鼠发生膀胱移行细胞癌,D组7只大鼠发生膀胱移行细胞癌,E组5只大鼠发生膀胱移行细胞癌。结论:华蟾素能有效拮抗、抑制MNU诱导膀胱肿瘤的发生。     

桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠的影响

目的:观察桑寄生对去卵巢大鼠骨质疏松影响,并探讨其作用机制.方法:将26只Wistar大鼠随机分为假手术组(8只)、模型组(8只)、桑寄生组(10只).模型组和桑寄生组切除大鼠双侧卵巢, 制备去卵巢骨质疏松的动物模型,观察服用桑寄生水煎剂后,去卵巢骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、血清雌二醇( E2 )、骨钙素(BGP)及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的变化.结果:模型组大鼠的E2和BMD水平显著下降(P<0.01),而血清BGP和TRACP水平明显升高(P<0.01).桑寄生组大鼠BMD水平增加,而 TRACP水平得到恢复.结论:桑寄生能抑制去卵巢大鼠的骨质疏松,具有调节骨代谢的作用.     

一氧化碳释放分子对呼吸心跳骤停大鼠海马组织及ATP、LA表达的影响

目的:探究一氧化碳释放分子(CORM)对呼吸心跳骤停(CA)大鼠海马组织及三磷酸腺苷(ATP)、乳酸(LA)表达的影响。方法:将大鼠平均分为阴性对照组(NC组)、无差异对照组(NS组)和一氧化碳释放分析组(CORM组),制备心跳骤停大鼠模型,分别比较大鼠窒息后的相关指标和平均动脉压(MAP)水平;检测3组大鼠血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平和ATP、LA含量的变化;用TUNEL检测大鼠脑组织中海马细胞凋亡情况;用HE、尼氏染色观察大鼠脑组织病理学的改变,及观察大鼠脑组织超微结构的变化。结果:和NS组大鼠相比,CORM组大鼠出现自主心率时间明显减少(P<0.05),复苏成功率升高,但组间无明显差异(P>0.05);NS组和CORM组大鼠窒息至CA时间和心肺复苏后MAP值比较没有显著的变化(P>0.05)。NS组大鼠血清中NSE水平明显高于NC组(P<0.05),干预后的CORM组大鼠血清中NSE水平明显低于NS组(P<0.05)。和NC组相比,NS组大鼠脑组织中ATP的含量明显减少,LA的含量显著增多(P<0.01);干预后的CORM组和NS组...     

动脉灌注化疗对大鼠脑胶质瘤的治疗作用及其机制

目的:探讨动脉灌注化疗对大鼠脑胶质瘤的治疗作用及其机制,为临床应用提供依据。方法:24只脑胶质瘤模型大鼠随机分为动脉组、静脉组和对照组,每组8只,分别通过大鼠尾静脉(静脉组)及颈动脉(动脉组)给予化疗药物VM-26,对照组大鼠给予生理盐水。观察各组大鼠肿瘤体积和生存期;给予不同途径治疗1周后处死大鼠,采用PCR法观察大鼠肿瘤细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)mRNA的表达水平;免疫组织化学法检测大鼠肿瘤细胞中PCNA的阳性细胞数;流式细胞术检测大鼠肿瘤细胞凋亡率。结果:动脉组大鼠经治疗后肿瘤生长速度最慢,静脉组其次,对照组最快,动脉组大鼠肿瘤体积小于静脉和对照组(P<0.05),静脉组大鼠肿瘤体积小于对照组(P<0.05)。与对照组比较,动脉组和静脉组大鼠生存期延长(P<0.05);动脉组大鼠生存期长于静脉组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。动脉组大鼠肿瘤组织中PCNA及TOPOⅡ mRNA表达水平低于对照组和静脉组(P<0.05),静脉组大鼠肿瘤组织中PCNA及TOPOⅡ mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。动脉组大鼠肿瘤组织中PCNA阳性细胞数低于静脉组和对照组(P<0.05)。动脉组大鼠肿瘤细胞凋亡率高于静脉组和对照组(P<0.05)。结论:动脉灌注途径化疗使肿瘤细胞增殖速度减慢,肿瘤细胞凋亡明显增多,能更有效控制肿瘤生长。     

基于CN/IL-10信号途径探讨乌司他丁对神经性疼痛大鼠模型的镇痛效应及作用机制

目的:探讨乌司他丁(UTI)对神经性疼痛大鼠的镇痛效应及其相关分子机制.方法:将40只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(CCI组)、UTI组、UTI+他克莫司(FK506)组,每组10只.除Sham组外,其它各组大鼠构建慢性坐骨神经结扎(CCI)模型,各组大鼠给予相应给药处理后,采用疼痛行为测量法测定大鼠...     

二烯丙基硫醚对睡眠剥夺大鼠认知功能的影响

目的:观察二烯丙基硫醚(DAS)对睡眠剥夺(SD)模型大鼠认知功能的影响.方法:取40只SD大鼠随机分为4组(每组10只),对照(Control)组、睡眠剥夺(SD)组、DAS对照(DAS)组和DAS干预(DAS+SD)组,其中SD组和DAS+SD组大鼠用改良多平台水环境法制备SD大鼠模型,DAS组和DAS+SD组从S...     

穿山龙总皂苷对CIA大鼠滑膜血管新生的作用

目的:探讨穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜血管新生及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的作用.方法:42只Wistar大鼠随机分为7组:正常对照组(A组)、CIA模型组(B组)、雷公藤组(C组)、穿山龙总皂苷高剂量组(D组)、穿山龙总皂苷中剂量组(E组)、穿山龙总皂苷低剂量组(F组)和薯蓣皂苷元组(G组),每组6只大鼠.B-G组大鼠均建立CIA大鼠模型,待模型成功建立后,C-G组大鼠分别给予相应的药物灌胃,连续21d.采用免疫组织化学染色法检测关节滑膜的微血管密度(MVD)和VEGF的表达.结果:CIA模型组大鼠滑膜MVD和VEGF的表达显著高于正常对照组(P＜0.01);C-G组大鼠滑膜MVD和VEGF的表达明显低于模型组(P＜0.01),且各治疗组间比较无显著差异(P＞0.05).结论:穿山龙总皂苷可能通过降低关节滑膜VEGF的表达发挥抑制滑膜血管新生的作用.     

丙泊酚预处理对单肺机械通气大鼠肺组织血红素氧合酶-1表达的影响

目的:研究丙泊酚预处理对单肺机械通气(OLV)时大鼠肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法:36只雄性SD大鼠随机分成6组(n=6):对照(C)组,双肺通气(T)组,右侧单肺通气-左肺(OL)组,右侧单肺通气-右肺(OR)组,丙泊酚-右侧单肺通气-左肺(POL)组,丙泊酚-右侧单肺通气-右肺(POR)组。T组插气管导管双肺通气;OL、OR、POL和POR组大鼠麻醉后行右侧单肺通气,POL和POR组大鼠单肺通气1h前静脉泵入丙泊酚(50mg/kg)。C组大鼠麻醉后,直接开胸取左全肺。T、OL和POL组大鼠通气1h后取出左全肺,OR和POR组大鼠取出右全肺,行湿/干质量(W/D)比值计算,并采用Westernblot法测定HO-1蛋白的表达。结果:各组大鼠肺组织W/D比较差异有统计学意义(F=65.371,P<0.001),OL、OR组大鼠肺组织W/D高于C组(P<0.05)。各组大鼠肺组织HO-1蛋白表达差异有统计学意义(F=72.851,P<0.001),T、OL、OR组大鼠肺组织中HO-1蛋白的表达高于C组,POL组高于OL组,POR组高于OR组(P<0.05)。结论:丙泊酚预处理可以使大鼠肺组织HO-1表达增加,减轻OLV所造成的组织水肿。     

白藜芦醇对气态甲醛诱导大鼠脑损伤及神经颗粒素表达的影响

目的探讨气态甲醛蓄积对大鼠学习记忆能力及前额皮层、海马区神经颗粒素(neurogranin,Ng)表达的影响,研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对气态甲醛蓄积所致脑损伤的防治效果。方法成年雄性SD大鼠84只,每组12只完全随机分组法分为对照组(N组)、气态甲醛蓄积低浓度组(FL组)、气态甲醛蓄积中浓度组(FM组)、气态甲醛蓄积高浓度组(FH组)、气态甲醛蓄积低浓度+白藜芦醇组(FLR组)、气态甲醛蓄积中浓度+白藜芦醇组(FMR组)、气态甲醛蓄积高浓度+白藜芦醇组(FHR组),每组12只。采用气态甲醛暴露法建立甲醛染毒动物模型,运用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,采用蛋白免疫印迹法检测前额皮层、海马Ng表达与分布。结果(1)与N组大鼠逃避潜伏期、原平台滞留时间[(19.75±4.08)s,(43.47±2.43)s]相比,FM、FH组大鼠逃避潜伏期均延长[(25.52±2.98)s、(27.45±2.39)s,t=-4.97,-5.82;均P<0.01],原平台滞留时间均缩短[(30.99±4.21)s、(18.70±2.58)s,t=10.24,25.71;均P<0.01]。与FM、FH组等对应甲醛蓄积组相比,FMR、FHR组大鼠逃避潜伏期均明显延长[(21.37±3.80)s、(24.26±3.56)s,t=1.86,3.93;均P<0.05],原平台滞留时间明显延长[(40.33±3.63)s、(23.46±4.73)s,t=-7.50,-3.95;均P<0.01]。(2)与N组大鼠皮层、海马Ng表达[(0.99±0.03),(1.07±0.03)]相比,FM、FH组大鼠皮层、海马Ng蛋白表达显著降低[(0.62±0.06),(0.39±0.03),(0.77±0.09),(0.46±0.10),t=11.55,14.08,11.51,13.17;均P<0.01]。与FM、FH组等对应甲醛蓄积组相比,FMR、FHR组大鼠皮层、海马Ng表达均有明显升高[(0.94±0.11),(0.48±0.04),(0.95±0.05),(0.60±0.09),t=-5.26,-2.09,-5.32,-2.21;均P<0.05]。结论白藜芦醇能改善气态甲醛蓄积所致大鼠学习记忆功能减退,其机制可能是与Ng表达上调有关。     

丁苯酞对血管性痴呆小鼠认知功能的影响及Nrf2/SIRT3信号通路的调节作用

目的探讨丁苯酞对血管性痴呆(vascular dementia,VD)小鼠认知功能及Nrf2/SIRT3信号通路中的调节作用。方法将36只野生型小鼠(Nrf2^+/+)按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、模型组(Nrf2^+/+VD组)、丁苯酞治疗组(Nrf2^+/+NBP组),每组12只。将24只Nrf2基因敲除小鼠(Nrf2^-/-)按照随机数字表法分为Nrf2^-/-模型组(Nrf2^-/-VD组)和Nrf2^-/-治疗组(Nrf2^-/-NBP组),每组12只。采用反复三次结扎小鼠双侧颈总动脉的方法建立脑缺血再灌注致认知功能障碍的小鼠模型;应用Morris水迷宫实验检测小鼠的认知功能,HE染色观察海马CA1区神经元形态结构的变化,免疫组化分析小鼠海马CA1区caspase-3、caspase-9的阳性表达,Western blot检测小鼠海马Nrf2、p62、LC3、SIRT3的蛋白表达。结果(1)Morris水迷宫实验中:与VD组小鼠相比,Sham组与Nrf2^+/+NBP组小鼠第5天逃避潜伏期明显缩短[(20.69±8.91)s,(7.58±9.47)s,(8.41±12.20)s;q=3.58,5.07,均P<0.05],目标象限停留时间百分比明显增加[(16.80±3.27)%,(25.25±5.51)%,(24.18±6.46)%;q=3.36,4.43,均P<0.05];与VD组比较,Nrf2^-/-VD组小鼠第5天逃避潜伏期明显延长[(33.71±9.05)s],目标象限停留时间百分比明显降低[(10.84±3.26)%],均差异有统计学意义(q=3.56,3.58;均P<0.05)。与Nrf2^-/-VD组比较,Nrf2^-/-NBP组小鼠逃避潜伏期、目标象限停留时间百分比均差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)病理学结果显示:与VD组小鼠比较,Sham组与Nrf2^+/+NBP组小鼠海马CA1区锥体神经元形态结构损伤更轻,Nrf2^-/-VD组的损伤更为严重,且经NBP治疗后神经元形态改善并不明显。(3)凋亡蛋白的表达:与VD组相比,Sham组与Nrf2^+/+NBP组小鼠海马CA1区caspase-3、caspase-9表达均降低(t=3.48,2.95,3.46,2.93,均P<0.01),而Nrf2^-/-VD组的表达均增加(t=-2.99,-3.77,均P<0.01);同Nrf2^-/-VD组小鼠比较,Nrf2^-/-NBP组小鼠海马CA1区caspase-3、caspase-9的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。(4)Western blot结果显示:与VD组相比,Nrf2^+/+NBP组小鼠海马Nrf2、SIRT3、p62蛋白表达增加,LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低(t=-3.24,-4.04,-4.03,3.62,均P<0.01);Sham组Nrf2表达、LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低,SIRT3、p62表达增加(t=3.44,4.72,-3.92,-4.19,均P<0.01);Nrf2^-/-VD组Nrf2、SIRT3、p62蛋白表达降低,LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(t=9.14,4.20,4.30,-3.78,均P<0.01);同Nrf2^-/-NBP比较,Nrf2^-/-VD组Nrf2、SIRT3、p62蛋白表达降低,LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(t=2.40,3.24,1.21,-1.16,均P<0.01);Nrf2^+/+NBP组Nrf2、SIRT3、p62蛋白表达升高,LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低(t=-3.29,-5.00,-7.12,6.24,均P<0.01)。结论丁苯酞可以减轻VD小鼠海马区的凋亡损伤,改善反复缺血再灌注损伤所致的认知功能障碍,其机制可能与调控Nrf2/SIRT3通路、抑制海马区神经细胞凋亡、自噬有关。     

骨髓基质干细胞移植对慢性酒精中毒大鼠认知功能的影响及其机制

目的 探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)静脉移植对慢性酒精中毒大鼠认知功能的影响及其机制.方法 体外分离、培养并鉴定SD大鼠BMSCs.成年雄性SD大鼠(n=28)分为对照组、慢性酒精中毒组、BMSCs回输组和PBS回输组,每组n=7.其中,BMSCs回输组和PBS回输组于酒精灌胃7周后经尾静脉回输BMSCs(1×10~7个细胞/只)或磷酸盐缓冲液(PBS),所有大鼠均于灌胃8周后处死.通过Morris水迷宫进行认知功能检测;BrdU免疫荧光染色观察大鼠脑内海马齿状回神经细胞的增殖情况;免疫组化染色观察大鼠海马区NGF和BDNF表达情况.结果 ①Morris水迷宫实验中,BMSCs回输组各时间点逃避潜伏期[(33.83±3.26)s,(13.14±2.64)s,(6.53±0.98)s,(4.45±0.85)s]明显短于慢性洒精中毒组[(53.78±4.29)s,(36.53±2.39)s,(18.28±2.13)s,(8.67±0.46)s,(P<0.01)];平台象限时间百分比[(73.99±1.49)%]明显长于慢性酒精中毒组[(51.25±3.69)%,(P<0.01)],且与对照组差异无显著性.②BMSCs回输组齿状回BrdU 阳性细胞数显著多于慢性酒精中毒组(P<0.01).③BMSCs 回输组大鼠海马NGF和BDNF表达均明显高于慢性酒精中毒组.结论 首次证实静脉移植BMSCs能够明显改善慢性酒精中毒大鼠的认知功能;其认知功能改善的机制可能与自/旁分泌BDNF和NGF营养因子刺激了海马内源性神经细胞增殖有关.     

铁超载对大鼠认知功能及海马神经元自噬的影响

目的探讨铁超载对大鼠认知功能的影响及其可能的内在机制。方法将30只8周龄雄性SPF级Srague Dawley(SD)大鼠随机分为两组,铁超载组(IO组)及空白对照组(Sham组),每组n=15。IO组大鼠采用右旋糖酐铁腹腔注射100 mg/(kg·d)持续28 d。利用Morris水迷宫方法检测两组大鼠的认知功能;Western blot法检测两组大鼠海马内的转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TfR1)、自噬相关蛋白p-AMP-蛋白激酶(p-AMP-activated protein kinase,p-AMPK)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、B细胞淋巴瘤-2相互作用蛋白1(Bcl-2 interacting protein 1,Beclin1)的变化;免疫荧光观察大鼠海马内LC3、Beclin1的表达;HE染色观察各组大鼠海马内的神经元形态变化。透射电镜法观察大鼠海马区神经元内自噬小体数量及内质网形态的改变。所得数据应用SPSS 20.0统计软件进行重复测量方差分析和t检验。结果Morris水迷宫定位航行实验结果显示,两组大鼠逃避潜伏期的组别和训练时间交互作用显著(F=3.55,P<0.01)。简单效应分析显示,与Sham组[(28.09±18.41)s、(21.42±15.53)s、(16.96±8.35)s、(10.24±3.75)s]相比,IO组大鼠在第2~5天的平均潜伏期[(56.68±30.65)s、(58.21±36.09)s、(36.58±13.54)s、(27.29±14.30)s]明显延长(t=8.57,6.81,9.51,7.12,均P<0.01)。在第6天撤掉平台的空间探索实验中,与Sham组[(41.89±3.89)%]相比,IO组在平台象限内停留的时间百分比[(25.46±3.56)%]明显降低(t=24.06,P<0.01)。Western blot结果显示,IO组大鼠海马内TfR1(2.10±0.48)、p-AMPK(0.74±0.10)、LC3(1.11±0.40)、Beclin1(1.05±0.20)的相对表达水平较Sham组[TfR1(0.11±0.18)、p-AMPK(0.19±0.02)、LC3(0.22±0.11)、Beclin1(0.17±0.02)]明显升高(t=1.58,14.58,10.06,20.65,均P<0.01)。HE染色结果显示,与Sham组相比,IO组大鼠海马内神经元细胞排列稀疏、形态不规整、细胞数明显减少。透射电镜结果显示,与Sham组相比,IO组大鼠海马内神经元内自噬小体数量增多。结论铁超载可能通过提高海马区内的自噬水平发挥其神经毒性作用,引发认知功能障碍。     

重组人粒细胞集落刺激因子对Aβ1-42诱导老年痴呆模型大鼠认知功能的改善作用

目的 探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对老年痴呆模型大鼠认知障碍的改善以及抗凋亡方面的作用.方法 随机将84只健康雄性Wistar大鼠分为Aβ组、rhG-CSF治疗组及假手术组,每组28只.注射Aβ1-42 10μg制备Alzheimer病模型.rhG-CSF组皮下注射rhG-CSF 50μg/(kg·d),Aβ组给予同体积牛理盐水,连续5d.分别于给药后第7,14,21,28天进行Morris水迷宫测试,记录其逃避潜伏期和目的 象限游泳距离百分比,然后取脑组织采用免疫组织化学法检测海马区caspase-3蛋白的表达,计数免疫阳性细胞数.结果 (1)给药后第14、21、28天,rhG-CSF组逃避潜伏期[分别为(34.33±6.47)s,(42.08±6.36)s,(46.88±7.66)s],短于AB组[分别为(49.79±4.87)s,(50.25±6.81)s,(51.33±6.90)s],rhG-CSF组目的 象限游泳距离百分比[分别为(41.00±7.62)%,(43.33±8.16)%,(44.67±8.07)%],长于AB组[分别为(25.33 ±6.89)%,(23.83±4.67)%,(21.50±4.64)%],差异均具有显著性(P<0.05).(2)假手术组海马区Caspase-3蛋白表达差异无显著性;注射Aβ1-42后,AB组、rhG-CSF组与 假手术组相比各时间段海马区Caspase-3蛋白的表达明显增加(P<0.05);给予rhG-CSF后,rhG-CSF组第7、14天caspase-3蛋白表达[分别为(7.93±6.33),(8.83±5.94)],明显低于Aβ组[分别为(10.43±7.16),(11.34±5.17)],差异具有显著性(P<0.05),第21,28天两组比较差异无显著性.结论 rhG-CSF能改善Aβ1-42诱导Alzheimer病模型大鼠的认知障碍,减少海马神经元的凋亡,在一定程度上延缓学习记忆功能的衰退.

Abstract：

Objective To investigate the effects of rhG-CSF on the improvement of cognitive impairment and anti-apoptosis of Alzheimer disease (AD) induced by Aβ1-42 in rat. Methods Healthy male Wistarirats were randomly assigned to the Aβ group, treatment group and sham operation group. Aβ1-42 (10μg) was injected into bilateral hippocampus to create the rat model of AD. Rats in rhG-CSF group were subcutaneously subjected to 50μg/(kg · d) rhG-CSF for 5 days, while rats in Aβ group were subjected to normal saline. Morris water maze tests were done and expressions of caspase-3 protein were determined by immunohistochemical method on the 7th, 14th, 21st, and 28th day after administration. Results (1) The avoiding latent periods of rhG-CSF group ( ( 34. 33 ±6. 47 ) s, (42. 08 ± 6. 36 ) s, (46. 88 ± 7. 66 ) s, respectively ) were shorter than that of Ap group ((49.79 ±4.87)s, (50.25 ±6.81 )s, (51. 33 ±6.90)s, respectively). The percentages of swimming distances in the target quadrant in rhG-CSF group ( (41.00 ±7.62)% ,(43.33 ±8. 16)% ,(44. 67 ±8.07)% ,respectively) were increased comparing with Ap group((25.33 ±6.89)% , (23. 83 ±4.67)% ,(21.50 ±4.64)% ,respectively). The differences were all statistically significant (P<0.05). (2) Compared with sham operation group,the positive rate of caspase-3 protein in rat's hippocampus of Ap group significantly increased after injecting Aβ1-42 The positive rates of caspase-3 protein in rhG-CSF group on the 7th, 14th day ( (7. 93 ±6. 33) and (8. 83 ±5. 94) were lower than Aβ group ( ( 10.43 ±7. 16) and ( 11. 34 ± 5. 17 ) . The differences were statistically significant (P< 0.05). Conclusion RhG-CSF can improve the cognitive impairment of Alzheimer Disease (AD) induced by Aβ1-42 in rat, decrease the apoptosis of hippocampal neurons and delay the decline of its learning and memory ability to some extent.     

慢性应激对大鼠脑内白介素-18表达的影响

目的 探讨白介素-18(IL-18)表达水平与中枢神经元结构、功能改变之间的关系.方法 青年雄性Wistar大鼠30只,体质量在185～255g之间,随机分为对照组(C组,n=15)和实验组(T组,n=15).T组大鼠孤养并给予连续21 d的不可预见性综合刺激;C组大鼠群养,不给予任何刺激.第22天脑组织取材、切片并进行IL-18的免疫组化并测定IL-18阳性细胞的平均光密度值;实验前后分别进行旷场分析法和体质量测定.结果 实验后T组的体质量、中央格停留时间、水平穿越格数、直立次数、修饰次数和粪便粒数[分别为(297.33±25.83)g,(5.14±2.02)s,(19.00±9.01)格,(9.47±3.64)次,(3.93±1.87)次和(4.93±1.94)粒]与C组[分别为(322.00±30.34)g,(1.97±0.93)s,(39.80±18.58)格,(14.80±5.88)次,(7.27±2.87)次和(1.93±1.16)粒]相比差异有显著性(P<0.05～0.01).T组在海马CA1区和缰核的IL-18阳性细胞的平均光密度值[分别为(0.3923±0.0084)和(0.4577±0.0234)]大于C组[分别为(0.3165±0.0063)和(0.3400±0.0097)],差异有显著性(P<0.01).结论 慢性不可预见性应激后大鼠海马神经胶质细胞和缰核神经元IL-18表达显著增加.     

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马NR2B蛋白及其mRNA表达的影响

目的 观察补阳还五汤对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2B(N-Methyl-D-asparate receptor subunit 2B,NR2B)蛋白及其mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤治疗VD的机制.方法 四血管阻断(four vessel occlusion,4VO)法制备VD大鼠模型.设立假手术组、VD模型组、尼莫地平组(20mg·kg-1·d-1,灌胃30d)和补阳还五汤治疗组(50g生药·kg-1·d-1,灌胃30d).Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力的改变,免疫组化和Western-Blot技术检测大鼠海马神经元NR2B蛋白的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NR2B mRNA表达的变化.结果 与假手术组大鼠逃避潜伏期[(24.18±7.90)s]和平均探索次数[(7.99±1.32)次/min]相比,VD模型组大鼠逃避潜伏期[(51.25±18.28)s]延长和平均探索次数[(5.26±0.74)次/min]减少(P<0.05);补阳还五汤组[(25.91±9.56)s和(7.52±1.27)次/min]明显改善了模型大鼠学习、记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性(P>0.05).VD模型组大鼠的NR2B蛋白(0.33±0.06)及其mRNA(593±53)表达水平较假手术组(0.71 ±0.13)、(5887±501)明显降低(P<0.05);补阳还五汤治疗组大鼠海马的NR2B蛋白(0.66±0.11)及其mRNA(5692±482)表达水平较模型组的表达明显升高(P<0.05);假手术组、尼莫地平组组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性(P>0.05).结论 补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CAI区神经元的损伤及促进海马组织NR2B蛋白及其mRNA的表达有关.     

慢性不可预见性应激模型大鼠海马MAPKs信号蛋白的差异表达

目的 研究慢性不可预见性应激大鼠的认知功能,以及不同的促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号蛋白在慢性不可预见性应激大鼠海马的差异表达.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组和慢性不可预见性应激组(CUS),CUS组大鼠每天接受一种应激,共21d,正常对照组不接受任何应激.应激结束后, Morris水迷宫检测空间忆功功能,免疫组织化学和western blot检测MAPKs通路信号蛋白在海马的表达.结果 前5次的定位航行试验,CUS组大鼠找到站台所用的时间显著多于对照组大鼠(F=5.258～10.225,P<0.05),后3次2组大鼠间差异无显著性(F=4.458～4.590,P>0.05);CUS组大鼠在空间探索试中,穿越站台的次数显著少于对照组大鼠[(1.8±0.5)次,(7.0±3.9)次,t=3.741,P<0.05].免疫组织化学法示CUS组大鼠齿状回pCREB标记指数显著低于对照组.Western blot示CREB、ERK1、P-ERK1、ERK2、P-ERK2、P38、P-P38和 JNK信号蛋白水平在2组大鼠海马的表达差异无显著性.但CUS组大鼠的P-CREB水平[(13.6±8.3)%,(36.0±14.5)%,t=3.792,P<0.05]和P-JNK水平[(30.8±7.8)%,(113.8±55.3),t=4.204,P<0.05]显著低于正常对照组.结论 JNK-CREB信号通路异常在21 d 慢性不可预见性应激中起着重要作用.CUS大鼠空间记忆功能是降低的,但通过锻炼,空间忆功功能可以恢复到正常水平.     

趋化因子配体2中和抗体对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓小胶质细胞活化的影响

目的 探讨鞘内注射趋化因子配体2(CCL2)中和抗体对胫骨癌痛大鼠机械痛行为及脊髓小胶质细胞活化的影响.方法 采用Walker 256乳腺癌细胞,构建大鼠胫骨癌痛模型.雌性SD大鼠(160～180 g)40只,随机分为5组(n=8):假手术组(Ⅰ组)、假手术+CCL2中和抗体组(Ⅱ组)、骨癌痛组(Ⅲ组)、骨癌痛+ control IgG组(Ⅳ组)和骨癌痛+CCL2中和抗体组(Ⅴ组).术后第10～12天,每天1次鞘内注射CCL2中和抗体或control IgG( 10 μg/15μ1).分别于术前、术后1d,3d,5d,7d,10 d,14 d,21 d测定各组大鼠机械痛敏阈值(PMWT).另取30只大鼠,分组同前(n=6),术后14d取材,免疫荧光染色法测定各组大鼠脊髓背角小胶质细胞标志物(Iba-1)的平均光密度值(MOD).结果 (1)痛行为学:术后10d,14 d,21 d,Ⅲ组大鼠PMWT分别为:(1.78 ±0.38)g,( 1.70±0.17)g,(1.35±0.07)g;Ⅳ组大鼠PMWT分别为:(2.99±0.67)g,(2.52±0.75)g,(1.13±0.07)g;Ⅴ组大鼠PMWT分别为(5.88±0.66)g,(7.81±0.75)g,(6.19±0.53)g.与Ⅲ组相比,Ⅴ组大鼠PMWT值明显升高(P＜0.01),Ⅳ组大鼠PMWT值无明显变化(P＞0.05).(2)免疫荧光染色:术后14d,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠脊髓背角Iba-1的MOD值分别为(151.3±10.8),(149.2±10.6),(74.5±5.0);与Ⅲ组相比,Ⅴ组大鼠MOD值明显升高(P＜0.01);Ⅳ组大鼠MOD值无明显变化(P＞0.05).结论 鞘内注射CCL2中和抗体能显著减轻胫骨癌痛大鼠的机械痛敏,并能抑制其脊髓小胶质细胞的活化.     

实验性大鼠蛛网膜下隙出血后脑血管痉挛神经功能评分与血浆内皮素、一氧化氮合酶水平的关系

目的 观察实验性SD大鼠蛛网膜下隙出血脑血管痉挛后神经功能评分,脑血管直径与内皮素-1(ET-1)和一氧化氮合酶(NOS)水平之间的关系.方法 SD大鼠尾动脉取血,立体定位仪下枕大池2次注血的方法造模,采用神经生物学功能评分,印度墨水血管灌注观察脑血流,测量大脑动脉的直径,测定血中ET-1、NOS的含量.结果 大鼠枕大池2次注血后7 d大脑中动脉、颈内动脉和基底动脉直径分别为(169.33±8.67)mm、(227.33±14.25)mm、(226.33±5.99)mm,与对照组[(259.5±7.48)mm,(228.17±8.09)mm,(254.67±8.48)mm]相比差异有显著性(P<0.05);7d后神经功能评分为(9.45±1.77)分,与对照组相比[(0.60±0.49)分]差异有显著性(P<0.05);ET-1和NOS含量在注血组7d分别为:(231.25±19.45)g/L,(198.50±9.52)×103U/L,与对照组相比[(72.99±5.83)g/L,(230.76±17.06)×103U/L]差异有显著性(P<0.05).结论 大鼠枕大池2次注血法能够产生蛛网膜下隙出血后的脑血管痉挛模型,神经功能评分升高,神经功能评分与大脑中动脉直径和血中内皮素含量密切相关.