选择性COX-2抑制剂联合顺铂对肺癌新生血管的影响及机制研究

目的研究选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂尼美舒利(NIM)单独应用以及联合顺铂(DDP)对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤血管生成的影响及其机制,为肺癌的治疗提供新思路。方法培养肺癌A549细胞,构建肺癌A549裸鼠移植瘤模型。依据随机数字表法将研究对象分为4组进行药物干预:对照组、NIM组、DDP组、NIM+DDP组,每组8只,观察一般状态。给药后第22天处死裸鼠,获取肿瘤组织,测量称取瘤重、瘤径,计算并比较各组体积抑瘤率。用CD31标记微血管,采用微血管计数法检测各组微血管密度。采用免疫组织化学检测肺癌A549裸鼠移植瘤内血管内皮生长因子的表达。结果本研究成功构建肺癌A549裸鼠移植瘤模型。NIM+DDP组第9、13、17、21天的移植瘤体积增长较其他3组慢(P值均<0.001)。NIM+DDP组体积抑瘤率最大。NIM+DDP组较其他3组移植瘤微血管密度低(F=27.861,P<0.001)。结论选择性COX-2抑制剂单独使用有抑制新生血管生成的作用,推测选择性COX-2抑制剂具有抗肿瘤能力,可能成为肺癌靶向治疗因子。选择性COX-2抑制剂联合DDP对新生血管因子表达的抑制效果更显著,对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长的抑制更显著。     

补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株与顺铂敏感细胞株荷瘤BALB/c小鼠移植瘤P-gp蛋白表达的影响

目的探讨补中益气汤对肺腺癌顺铂(DDP)耐药与敏感细胞株荷瘤BALB/c小鼠移植瘤P-gp蛋白表达的影响。方法体外培养肺腺癌顺铂耐药株A549/DDP及敏感细胞株A549,接种于BALB/c小鼠腋窝皮下,荷瘤成功后给予顺铂或顺铂联合低、中、高剂量补中益气汤治疗。实验共分为10组:A549/DDP或A549荷瘤对照组、A549/DDP或A549荷瘤+顺铂组、A549/DDP或A549荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组、A549/DDP或A549荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组、A549/DDP或A549荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组。给药结束后,测量移植瘤体积并计算药物抑瘤率及抑瘤作用提高率,蛋白质印迹法检测移植瘤组织P-gp蛋白的表达。结果顺铂对A549/DDP移植瘤体积无显著影响(P0.05),而使A549移植瘤体积显著缩小(P0.05);联合低、中、高剂量补中益气汤的A549/DDP及A549移植瘤体积均缩小(P0.05),抑瘤率均增加(P0.05),随着中药剂量的增加,移植瘤体积随之缩小,抑瘤率随之增加,抑瘤作用提高率也随之增加;单独顺铂可上调A549/DDP移植瘤组织中P-gp蛋白表达(P0.05),下调A549移植瘤组织中P-gp蛋白表达(P0.05);联合低剂量补中益气汤并未显著下调A549/DDP及A549移植瘤组织中P-gp蛋白表达(P0.05);联合中、高剂量补中益气汤的A549/DDP及A549移植瘤组织中P-gp蛋白表达均显著下调(P0.05),两剂量间无差异(P0.05)。结论在顺铂耐药与顺铂敏感的肺腺癌移植瘤组织中,补中益气汤均有缩小移植瘤体积、提高顺铂抑瘤率、下调P-gp蛋白表达的作用,尤以中、高剂量作用最显著。     

宁夏密点麻蜥不同部位干预顺铂耐药胃癌模型裸鼠的效应及机制研究

目的:通过建立人胃癌耐药细胞株MKN-45/顺铂皮下瘤裸鼠模型，探讨宁夏密点麻蜥身体不同部位联合顺铂对顺铂耐药胃癌模型裸鼠的干预作用。方法:将36只BALB/c裸鼠均注射MKN-45/顺铂单细胞悬液于右前腋侧皮下制备胃癌裸鼠顺铂耐药模型。造模成功后随机分为模型组、顺铂组、宁夏密点麻蜥头部+顺铂组、宁夏密点麻蜥四肢+顺铂组、宁夏密点麻蜥躯干+顺铂组、宁夏密点麻蜥尾部+顺铂组共6组。除模型组外，余组均给予相应药物治疗28 d。测定各组裸鼠肿瘤体积大小、肿瘤重量及抑瘤率；分别采用免疫印迹法及免疫组织化学法检测各组裸鼠瘤组织中耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药蛋白1(MRP1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平；采用TUNEL法检测各组裸鼠瘤组织中耐药细胞凋亡情况。结果:与模型组比较，各给药组肿瘤重量均减轻(P<0.05),各给药组中P-gp、MRP1、Bcl-2的表达均显著降低(P<0.05),Bax的表达均显著增高(P<0.05),耐药细胞凋亡率均显著增高(P<0.05);与顺铂组比较，宁夏密点麻蜥不同部位+顺铂各组肿...     

蛋白激酶C抑制剂联合顺铂治疗非小细胞肺癌的实验研究

目的 初步探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红碱(CH)与化疗药物顺铂联合应用在非小细胞肺癌(NSCLC)治疗中的作用及其可能的机制.方法 应用四甲基偶氮唑蓝试验及流式细胞术分别检测CH、顺铂以及CH与顺铂联用对人NSCLC细胞株A549增殖和凋亡的影响.用裸鼠移植瘤实验检测CH、顺铂以及CH与顺铂联用对A549细胞成瘤性的影响.应用人肺腺癌细胞株A549细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,用随机数字表法将24只倚瘤裸鼠分为CH组、顺铂组、CH+顺铂组及生理盐水对照组,每组5只,裸鼠分别腹腔注射CH、顺铂、CH+顺铂和生理盐水(共3周,顺铂及生理盐水每周注射1次,CH每周注射2次),观察移植瘤的生长情况.结果 CH可抑制NSCLC细胞株A549增殖,浓度增加其细胞毒作用亦增强,CH与顺铂联用呈协同或相加作用;CH组、顺铂组及CH+顺铂组A549细胞的凋亡率分别为(5.36±0.70)%、(5.23±0.55)%及(17.28±2.17)%,均高于对照组的(2.75±0.35)%(t=7.88,P＜0.05),CH+顺铂组A549细胞的凋亡率分别高于CH组及顺铂组(t=5.62,P＜0.05);裸鼠移植瘤体内实验结果表明,CH及顺铂均町抑制移植瘤的生长,CH+顺铂组的抑瘤率(80.5%)高于CH组(72.4%)及顺铂(64.3%)组(t=11.34,P＜0.01).结论 CH与顺铂联用对A549细胞及裸鼠移植瘤有显著的协同抗肿瘤作用,其作用机制可能是通过增强对A549细胞增殖的抑制以及诱导其凋亡而实现.     

二氧化硒联合顺铂对裸鼠皮下耐药细胞株SKOV3/CDDP移植瘤的影响及其作用机制

目的探讨二氧化硒(SeO2)联合顺铂(DDP)对裸鼠皮下耐药细胞株SKOV3/CDDP移植瘤的影响及其可能的作用机制。方法将人卵巢癌SKOV3/CDDP细胞接种于SPF级雌性BALB/C裸鼠皮下,随机分成治疗组和对照组。治疗组分为DDP组、SeO2组、DDP联合SeO2组,分别给予DDP、SeO2、DDP+SeO2腹腔注射,对照组给予生理盐水,观察各组成瘤率、生长率、平均抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线。用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡程度、HE染色和免疫组化染色法检测肿瘤细胞P糖蛋白(P-gp)的表达。结果 DDP组、SeO2组、DDP联合SeO2组的平均抑瘤率分别为48.29%、41.69%、72.28%,肿瘤平均细胞凋亡率分别为25.92%、24.14%、45.43%,DDP联合SeO2组与其他治疗组的抑瘤率、细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P均<0.05),且其S期细胞明显减少。SeO2组、DDP联合SeO2组P-gp的阳性表达水平明显低于DDP组及对照组(P均<0.05)。结论 SeO2和DDP对诱导耐药卵巢癌细胞凋亡有协同作用,SeO2可能通过降低P-gp的阳性表达来增加耐药卵巢癌对DDP的敏感性。     

PI3K/Akt抑制剂联合顺铂治疗肺癌的实验研究

目的 探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002[2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮]联合化疗药物顺铂(DDP)治疗肺癌的效应及可能机制,以期为肺癌的临床治疗提供新的理论依据.方法 培养肺腺癌A549细胞,采用MTT方法及流式细胞仪检测LY294002联合DDP对A549细胞增殖及凋亡的影响;通过裸鼠移植瘤实验检测LY294002联合DDP对A549细胞成瘤性的影响.结果 在一定剂量范围内,LY294002与DDP均可抑制A549细胞的生长,其抑制作用呈量-效关系.LY294002与DDP联合作用可增强对A549细胞的抑制作用.LY294002与DDP均可有效的诱导A549细胞凋亡,联用后凋亡率显著增加.裸鼠移植瘤实验显示,LY294002与DDP均可抑制移植瘤的生长,联用后抑瘤率增加.结论 LY294002可增强DDP对A549细胞、裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用,该作用可能是通过增强对A549细胞增殖的抑制以及诱导其凋亡来实现的.     

补中益气汤对A549/DDP与A549荷瘤BALB/c小鼠移植瘤生长的影响

目的观察补中益气汤对A549/DDP与A549荷瘤BALB/c小鼠移植瘤生长的影响。方法 BALB/c小鼠右腋窝皮下接种A549/DDP或A549细胞株,成瘤后连续腹腔注射顺铂25 d,2次/d,中药治疗组同时连续灌胃低、中、高剂量补中益气汤25 d,2次/d。给药后0、5、10、15、20、25 d,测量移植瘤的长径与短径,计算移植瘤的体积并绘制肿瘤的生长曲线。实验结束后处死小鼠,剥离瘤组织并称重,计算药物抑瘤率及抑瘤作用提高率。结果对于A549/DDP移植瘤,给药10 d后,补中益气汤开始缩小移植瘤体积,随着给药时间的延长和给药剂量的增加,移植瘤体积逐渐缩小;给药25 d后,随着补中益气汤剂量的增加,移植瘤重量随之减轻,抑瘤率随之增加,抑瘤作用提高率也随之显著增加。对于A549移植瘤,给药5 d后,补中益气汤即开始缩小移植瘤体积,随着给药时间的延长和给药剂量的增加,移植瘤体积逐渐缩小;给药25 d后,随着补中益气汤剂量的增加,移植瘤重量随之减轻,抑瘤率随之增加,抑瘤作用提高率也随之显著增加。结论补中益气汤能抑制BALB/c肺腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长,在顺铂耐药与顺铂敏感的肺癌组织中均可发挥抑瘤作用。     

耐药相关蛋白在肺癌组织的表达与药物敏感性的关系

目的探讨耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达与药物敏感性的关系。方法应用免疫组化法、四唑蓝快速比色法(MTT法)分别检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、谷胱苷肽s转移酶(GST-π)蛋白在87例肺癌组织中的表达和10种抗癌药的体外药敏试验。结果P-gp、MRP、GST-π阳性表达及高表达者中,腺癌组药物敏感数明显低于鳞癌组(P<0.05),LRP阳性表达者中NSCLC组药物敏感数明显低于LRP阴性表达者(P<0.05)。LRP与MMC、5-FU、VP-16、VCR均呈负相关(P<0.05或0.01)。P-gp与顺铂(CDDP)呈负相关(P<0.05)。GST-π与MTX、HCPT呈正相关(P<0.05行)。结论P-gp、MRP、LRP、GST-π的蛋白表达及共表达与体外药敏试验存在较好相关性,可作为监测肺癌细胞原发性耐药的指标。     

3-BrPA对肺癌A549/DDP细胞耐药的逆转作用研究

目的探究3-Br PA对肺癌A549/DDP细胞耐药的逆转作用及其机制。方法 1细胞培养:RPMI1640培养基培养肺癌A549细胞及人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞;2采用CCK8及Western blot法观察3-Br PA对A549/DDP细胞的耐药逆转作用和P-糖蛋白(P-glycoprote,P-gp)的表达水平;采用流式细胞术检测不同浓度3-Br PA作用A549/DDP细胞后细胞内罗丹明-123(Rhodamine-123,Rh123)的蓄积情况。结果顺铂对A549细胞、A549/DDP细胞及3-Br PA作用后的A549/DDP细胞的IC50分别为6.714μg/ml、38.99μg/ml及12.86μg/ml,逆转倍数为3.03,相对逆转效率为81%。3-Br PA可使A549/DDP细胞的P-gp表达下调。3-Br PA可使A549/DDP细胞内的Rh123蓄积增多并呈剂量依赖性。结论 3-Br PA可逆转A549/DDP细胞对顺铂耐药,作用机制可能与其抑制P-gp的功能和表达有关。     

低分子肝素对人肝癌裸鼠模型中COX-2表达影响的研究

目的研究低分子肝素对人肝癌裸鼠模型（LCI—D20）中环氧合酶-2（COX-2）表达的影响。方法采用人肝癌组织移植制作人肝癌裸鼠模型36只并随机分为对照组、化疗组、肝素组和联合组各9只，造模第1天：对照组腹腔注射生理盐水；化疗组腹腔注射5-氟脲嘧啶（5-Fu）＋顺铂（DDP）；肝素组皮下注射低分子肝素；联合组腹腔注射5-Fu＋DDP、皮下注射法安明，1次／d，均共用5周。观察各组原位肿瘤体积、抑瘤率、肿瘤微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、COX-2及血清AFP水平。结果化疗组、肝素组和联合组裸鼠原位肝癌体积明显小于对照组；化疗组与对照组相比MVD差异无显著意义，而肝素组与联合组的MVD、COX-2及VEGF阳性率、血清AFP均明显低于化疗组和对照组（P〈0．05）；肝素组和联合组抑瘤率低于化疗组，但差异无统计学意义。结论低分子肝素对人肝癌裸鼠模型中肿瘤血管形成具有抑制作用，该作用与抑。制COX-2表达有关。     

塞来昔布抑制肺癌增殖及血管生成的实验研究

目的探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(西乐葆)对A549肺癌移植瘤的抑制作用及其对肿瘤组织血管生成的影响。方法建立裸鼠肺癌细胞株A549移植瘤模型,药物组给予含1 250 ppm塞来昔布的饮水,连续28 d,计算抑瘤率。采用免疫组化法研究移植瘤血管内皮生长因子(VEGF),微血管密度(MVD)的表达.。结果药物组平均瘤重(0.65±0.20)g,对照组平均瘤重(1.45±0.30)g,两组有显著性差异(P<0.01),塞来昔布抑瘤率为57.23%。药物组与对照组VEGF积分分别为(0.184±0.022)和(0.295±0.032)(P<0.01),MVD平均值分别为(18.80±3.67)和(34.50±5.20)(P<0.01)。结论塞来昔布对A549肺癌移植瘤有明显抑制作用,其作用机制之一与抑制肿瘤血管生成相关。     

补中益气汤与siRNA对肺腺癌A549/DDP细胞耐药逆转作用的比较

目的比较补中益气汤含药血清与siRNA技术(RNA)对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的耐药效果及对多药耐药蛋白P-gp表达的影响。方法制备补中益气汤含药血清,设计并合成针对P-gp基因对应序列的siRNA,转染A549/DDP细胞;实验分组为空白对照组、补中益气汤含药血清处理组、siRNA处理组,利用RT-PCR检测P-gp mRNA,Western印迹及免疫细胞化学法检测P-gp蛋白质的表达;MTT法检测A549/DDP细胞耐药逆转效果。结果补中益气汤含药血清和siRNA均能降低P-gp mRNA和蛋白质表达,恢复顺铂敏感性,耐药倍数分别降至2.01、2.73,具有统计学意义(P<0.05)。结论补中益气汤含药血清和siRNA均能有效逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的多药耐药。     

靶向融合肽对裸鼠顺铂耐药卵巢癌移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的 观察靶向融合肽（MAP2K6-FP）对裸鼠顺铂耐药卵巢癌移植瘤生长的影响,并探讨其可能机制。方法 取裸鼠14只,每只裸鼠腹腔内注射200μL的SKOV3/DDP细胞（5×106/mL）制备顺铂耐药卵巢癌移植瘤模型,注射1周后,将制模成功的裸鼠随机分为两组（各7只）。观察1组尾静脉注射0.25 mg/kg的MAP2K6-FP,每周2次;对照1组尾静脉注射5 mL/kg的生理盐水,每周2次;两组均注射4周。腹腔注射细胞5周后,统一处死全部裸鼠。比较两组裸鼠腹围、腹水量、转移器官数、瘤结节数、瘤体重量及移植瘤中血管内皮生长因子特异性受体3(VEGFR-3)、淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)、唾液酸糖蛋白（D2-40）、表皮生长因子受体3(EGFR3)。另取受精后4 d的斑马鱼卵,随机分成两组各20尾,观察2组加入20 mmol/L的MAP2K6-FP,对照2组加入等量生理盐水,1 h后比较两组斑马鱼淋巴管生成情况。结果 与对照1组比较,观察1组腹围、腹水量、转移器官数、瘤结节数、瘤体重量减少及移植瘤中VEGFR-3、LYVE-1、D2-40、EGFR3表达降低（P均<0...     

选择性环氧合酶-2抑制剂罗非昔布对胆囊癌生长的影响

目的研究选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂罗非昔布对人胆囊癌细胞生长及凋亡的影响,观察罗非昔布对人裸鼠胆囊癌移植瘤生长的抑制作用。方法用免疫组化检测细胞COX-2的表达,用TUNEL染色法检测细胞凋亡。建立裸鼠胆囊癌移植瘤模型,给予罗非昔布8周,观察肿瘤大小、肿瘤组织的COX-2的表达情况。结果罗非昔布能诱导胆囊癌细胞的凋亡、降低胆囊癌细胞的COX-2的表达。罗非昔布对裸鼠胆囊癌移植瘤的抑瘤率为89．4％;肿瘤组织的COX-2的表达较对照组明显下降。结论选择性环氧合酶-2抑制剂罗非昔布能抑制人胆囊癌细胞的生长,并诱导其凋亡。罗非昔布能显著抑制裸鼠胆囊癌移植瘤的生长。     

全反式维甲酸联合维生素D3对肺癌原代细胞化疗敏感性的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)联用维生素D3(VD3)逆转肺癌细胞多药耐药、提高肺癌细胞化疗敏感性的机制。方法将ATRA、VD3联合作用于培养后的人肺癌原代细胞,观察肺癌原代细胞对顺铂化疗的敏感性及多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)的表达水平。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP呈高表达;ATRA及VD3作用后肺腺癌原代细胞MRP、LRP表达量明显降低,肺鳞癌MRP、LRP的表达量无明显变化;顺铂化疗的敏感性提高。结论MRP、LRP在肺癌尤其非小细胞肺癌中高表达,可反映肿瘤细胞多药耐药性;ATRA或VD3可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平,提高肺腺癌的化疗敏感性;但对肺鳞癌MRP、LRP基因表达水平无明显影响;ATRA和VD3联用有协同作用。     

二甲双胍联合顺铂对人肺癌裸鼠移植瘤治疗作用的研究

目的 研究二甲双胍联合常用的化疗药物顺铂对于人肺癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用及对生存素(Survivin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和Ki67分子表达的影响,致力于探索治疗肺癌的新的有效药物.方法 建立肺癌裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分为二甲双胍组、顺铂组、二甲双胍联合顺铂组及对照组,给药42 d后,处死动物,留取肿瘤组织,免疫组织化学法及实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中Survivin、MMP-2和Ki67蛋白及mRNA的表达.结果 二甲双胍组、顺铂组和二甲双胍联合顺铂组抑瘤率分别为28.97％、35.34％和54.65％.与对照组比较,顺铂组及二甲双胍联合顺铂组Survivin、MMP-2和Ki67蛋白及mRNA表达水平均降低(P值均＜0.05),二甲双胍组MMP-2蛋白及mRNA表达水平降低(P值均＜0.05);与二甲双胍组、顺铂组比较,二甲双胍联合顺铂组Survivin、MMP-2和Ki67蛋白及mRNA表达水平均降低(P值均＜0.05).结论 二甲双胍组可抑制MMP-2的表达,顺铂组及二甲双胍联合顺铂组均可抑制Survivin、MMP-2和Ki67的表达,二甲双胍和顺铂联合应用可以增强抗肿瘤的疗效.     

选择性COX-2抑制剂尼美舒利对肺癌放射治疗增敏作用及其机制研究

目的 观察选择性环氧化酶抑制剂与放射治疗联合应用对人肺腺癌A549裸鼠移植瘤生长的影响并进一步探讨其放疗增敏机制.方法 首先构建人肺腺癌A549裸鼠移植瘤模型,待裸鼠移植瘤长至最长径6.0 mm时随机分为4组:对照组、尼美舒利组、放疗组、尼美舒利联合放疗组.尼美舒利溶于0.5％羟甲基纤维素钠中,采用灌胃方式给药,剂量为60 mg·kg1·d-1,共28 d.移植瘤最大径长至6.0 mm时予以局部单次大剂量放疗10 Gy.观察各组移植瘤最长径由6 mm长至12 mm所需时间,以移植瘤体积绘制生长曲线,计算抑瘤率,用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、前凋亡蛋白Bax、凋亡抑制蛋白Bcl-2在组织中表达情况,应用流式细胞技术测定细胞周期分布及凋亡率.结果 尼美舒利联合放疗对肺腺癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用.对照组移植瘤最长径由6 mm增长至12 mm所需时间为(7.12±0.72)d,放疗组为(8.34±0.71)d,尼美舒利组为(11.29±0.78)d,尼美舒利联合放疗组为(14.62±0.19)d.放疗组抑瘤率为21.2％,尼美舒利组为18.3％,尼美舒利联合放疗组为41.7％.应用免疫组化方法检测移植瘤中PCNA和Bcl-2表达的阳性面积百分比及灰度值:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均低于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组低于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);Bax表达阳性面积百分比及灰度值:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均高于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组高于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05).流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组凋亡率均高于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组高于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);G0/G1期各组差异无统计学意义(F＝2.731,P＞0.05);S期尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均低于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组低于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);G2/M期尼美舒利联合放疗组同其他各组相比增多(P值均＜0.05),对照组、放疗组、尼美舒利组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 尼美舒利可抑制人肺腺癌A549裸鼠移植瘤的生长,尼美舒利增强人肺腺癌A549裸鼠移植瘤对放射治疗的敏感性.其机制可能同抑制PCNA表达,从而抑制肿瘤细胞的生长,并通过抑制Bcl-2表达、增强Bax表达,而诱导A549细胞凋亡有关;还可能与细胞周期分布中对放疗不敏感的S期细胞数减少而对放疗敏感的G2/M期细胞数增加有关.     

去甲斑蝥酸钠对耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞的逆转作用及机制

目的 探讨去甲斑蝥酸钠(SNCTD)对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及可能分子机制.方法 (1)采用CCK法筛选出SNCTD对A549/DDP的无毒浓度(即对细胞抑制率＜10%的药物浓度),并检测出顺铂及与无毒浓度SNCTD联合对耐药细胞株的IC50;(2)采用流式细胞仪检测无毒浓度SNCTD对细胞内罗丹明123的蓄积情况;(3)采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测1、2倍无毒浓度SNCTD处理细胞48h后耐药相关基因mdrlmRNA,MRP1 mRNA的表达.结果 (1)SNCTD对A549/DDP的无毒浓度为5μg/ml,与顺铂联合用药降低A549/DDP的耐药性,逆转倍数为1.97;(2)无毒浓度SNCTD处理耐药细胞48h后细胞内罗丹明123荧光强度明显增强(F=36.99,P＜0.05);(3)1、2倍无毒浓度SNCTD处理耐药细胞后mdr1,MRP1mRNA表达明显减低,并具有浓度依赖性.结论 SNCTD对A549/DDP具有耐药逆转作用,其作用机制可能与下调耐药相关基因mdr1,MRP1的表达,影响膜蛋白外排泵功能有关.     

补中益气汤干预肺腺癌A549细胞移植瘤Wnt/β-catenin信号通路对顺铂敏感性的影响

目的 探讨补中益气汤干预肺腺癌A549细胞移植瘤Wnt/β-catenin信号通路对顺铂敏感性的影响。方法 体外培养A549细胞，接种于BALB/cnu裸鼠腋窝皮下，8 d成瘤，隔天开始分别给予低剂量(1.46 g/kg)、中剂量(2.91 g/kg)、高剂量(5.82 g/kg)补中益气汤治疗25 d。30只裸鼠随机分为5组：对照组、顺铂组、顺铂+低剂量补中益气汤组、顺铂+中剂量补中益气汤组、顺铂+高剂量补中益气汤组。测量移植瘤质量并计算药物抑瘤率；Western印迹检测细胞质中p-糖原合成激酶(GSK)-3βser9、p-GSK-3βtyr216、GSK-3β蛋白的表达；实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法检测移植瘤组织β-catenin、Survivin蛋白的表达。结果 给药25 d后，顺铂联合不同剂量补中益气汤使移植瘤质量均显著缩小(P<0.05),抑瘤率均显著增加(P<0.05),且呈剂量依赖性。与对照组相比，顺铂联合不同剂量补中益气汤组可显著下调移植瘤细胞质p-GSK-3βser9蛋白的表达(P<0.05),并显著下调β-catenin、Sur...     

RNA干扰Cdx2基因沉默对人胃癌裸鼠耐药模型Survivin和C-myc表达的影响

目的观察携带人尾型同源盒转录因子2（Cdx2）基因沉默的重组慢病毒颗粒（Cdx2-RNAi-LV）对人胃癌耐顺铂细胞SGC-7901／DDP裸鼠皮下移植瘤中Survivin和C—myc表达的影响。方法建立人胃癌耐顺铂细胞SGC-7901／DDP裸鼠皮下移植瘤模型,36只裸鼠随机分成3组（n=12）：PBS组、LV-RNAi组、Cdx2．RNAi-LV组;各组瘤体内分别注射磷酸盐缓冲液、慢病毒颗粒（0．5×10^8TU／m1）、含Cdx2基因重组慢病毒颗粒（0．5×10^8TU／m1）相应药物100μl,1次／3d,共6次;同时所有裸鼠腹腔注射药物顺铂（25mg／kg）,隔天1次,共10次;注射Cdx2-RNAi-LV病毒颗粒第20天后脱颈椎法处死裸鼠,完整切取肿瘤组织,并应用PT-PCR和Westernblot技术检测移植瘤中Survivin和C．myc基因的表达。结果Cdx2．RNAi．LV组、LV．RNAi组和PBS组的细胞均有Survivin、C—myc的mRNA和蛋白的表达,但各组细胞对应的Survivin、C—myc的mRNA和蛋白的表达水平有差别;Cdx2-RNAi—LV组Survivin、C．myc的mRNA和蛋白的表达量较PBS组和LV．RNAi组明显下调（P〈0．05）,而PBS组和LV—RNAi组比较差异元统计学意义（P〉0．05）。结论Cdx2基因沉默重组慢病毒颗粒瘤内注射下调人胃癌耐顺铂细胞裸鼠移植瘤Survivin和C-myc表达,可能是Cdx2基因沉默逆转肿瘤的耐药性机制之一。