失神经支配红白肌感觉神经营养活性研究

目的　探讨对失神经支配红、白肌肉内神经生长因子 (NGF)变化规律及 NGF含量与感觉神经营养活性的关系。方法　剪断大鼠坐骨神经制成腓肠肌和比目鱼肌失神经支配模型 ,分别于神经损伤后 1、3、7和 14天取材 ,运用免疫组织化学方法检测失神经支配红、白肌肉内 NGF含量 ,同时用鸡胚背根神经节培养方法测定失神经支配肌肉提取液感觉神经营养活性。结果　腓肠肌和比目鱼肌失神经支配后其 NGF含量均下降 ,两种肌肉组比较无统计学意义(P>0 .0 5 ) ,组内比较以比目鱼肌组下降明显 ;但两种失神经支配肌肉提取液感觉神经营养活性未降低 ,在伤后 7天时反高于对照组 ,两种肌肉组间比较无差异。结论　周围神经损伤会引起其相应支配靶器官 -肌肉组织内 NGF的含量发生变化 ,且具有时间性 ,但红、白肌肉内 NGF含量的变化不一致 ;失神经支配肌肉的神经营养活性是各种营养因子的共同作用结果 ,不能用单一某种神经营养因子来代表     

氨哮素对失神经支配红白肌感觉神经营养活性的影响

目的　观察以氨哮素为代表的外界因素对失神经支配红、白肌肉内感觉神经生长因子 (nerve growthfactor,NGF)含量及感觉神经再生的影响。　方法　选用 Wister大白鼠 6 4只 ,体重 2 0 0～ 2 5 0 g,雌雄不拘。平均分成8组 ,每组 8只 (双侧 ,共 16例标本 )。其中 4组为实验组 ,另 4组为对照组 ,分别于神经损伤后 1、3、7和 14 d取材。剪断大白鼠双侧坐骨神经制成腓肠肌 (gastrocnemius,GAS)和比目鱼肌 (soleus,SOL)失神经支配模型。实验组术后每日按2 0 0 μg/ kg剂量给大鼠服用氨哮素 ;对照组术后每日给生理盐水。在各时间点用免疫组织化学方法检测实验组和对照组动物 GAS和 SOL 内 NGF含量 ,另用鸡胚背根神经节培养方法测定各组肌肉提取液感觉神经营养活性。　结果　与对照组相比 ,实验组 SOL 内 NGF含量在术后第 1、3和 7天时增高比较明显 (P<0 .0 1) ;GAS中只有术后第 1天 NGF含量增高明显 (P<0 .0 5 ) ,第 3、7和 14天时实验组 NGF含量与对照组相近 (P>0 .0 5 )。实验组内比较 ,GAS组术后第 1天NGF含量最高 (P<0 .0 1) ,以后 NGF含量逐渐下降 ;SOL 组 NGF含量各时间段相近 (P>0 .0 5 )。实验组两种肌肉间比较 ,在伤后第 7天时 ,SOL内 NGF的含量高于 GAS(P<0 .0 5 )。在对鸡胚背根神经节的神经营养活性     

神经寄养法预防失神经骨骼肌萎缩的研究进展

周围神经损伤后,其支配的肌肉失去神经营养就会发生萎缩、变性.随着时间的延长,经过一系列的病理过程,失神经肌肉纤维化,发生不可逆变性,影响损伤神经修复后的功能恢复.而且,神经损伤后神经再生速度相对缓慢,而失神经支配后骨骼肌发生肌萎缩变性纤维化又相对较快,往往在肌肉获得神经再支配之前就已丧失了肌细胞再生的物质基础,表现为骨骼肌的不可逆萎缩.如何防治失神经骨骼肌萎缩?目前临床上主要采用生物电刺激、被动活动、药物治疗、神经营养因子和细胞因子等方法,但疗效都非常有限,最终无法阻断失神经骨骼肌发生不可逆萎缩、变性与纤维化.随着显微外科技术的发展,神经修复的效果有了巨大的进步,各种神经寄养法可以有效预防失神经骨骼肌萎缩,本文综述这方面的研究进展.     

大鼠骨骼肌异位移植寄养后运动神经植入的电生理研究

目的探讨大鼠骨骼肌异位移植寄养后运动神经植入促进神经再生的作用。方法取鼠龄8个月的健康雄性SD大鼠60只，随机均分为三组：即对照组、原位再植组及异位移植寄养组。对照组：切断支配右侧股薄肌的闭孔神经，造成肌肉失神经支配；原位再植组；切取右侧股薄肌，再回植于原位，闭孔神经植入肌肉；异位移植寄养组：切取右侧股薄肌，移植寄养于左侧股部，闭孔神经植入肌肉。术后25周，采用神经肌电图仪收集各组的神经电生理信息，观察股薄肌大体形态并测量肌湿重。结果对照组股薄肌呈失神经电位；异位移植寄养组和原位再植组相比，神经肌肉电位潜伏期、波幅和神经传导速度差异均无统计学意义（P〉0、05）。对照组股薄肌萎缩明显，肌湿重为158．0±19．3mg；异位移植寄养组与原位再植组股薄肌萎缩不明显，肌湿重分别为509．6±14．5mg和516．8±12．7mg，二者差异无统计学意义（P〉0．05），但均大于对照组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论运动神经植入能有效防止或减轻异位移植寄养的骨骼肌失神经性萎缩，有助于恢复神经、肌肉的部分功能。     

骨骼肌乙酰胆碱受体的上下调节——神经肌肉阻滞药的效应(续)

四、乙酰胆碱上调节的特异性损害(一)失神经支配综合征1.下运动神经元和直接肌肉损伤:运动神经完全横断可引起神经华勒氏变性(Walleriandegeneration)。当坐骨神经有75～80％损害后,失神经支配侧的dTC有效剂量是对侧的两倍以上。失神经支配下肢在肌颤张力恢复时,其血浆内dTC浓度明显高于对侧。此外,在受损下肢Ach R数量明显增加。     

不同时期失面神经支配肌细胞直径与酶含量变化的研究

目的:观察不同时期大鼠眼轮匝肌失神经支配后肌细胞直径与酶含量的变化,为临床面神经损伤最佳手术修复时机提供理论依据.方法:建立面神经损伤大鼠模型,应用计算机图像分析仪及比色分析技术,分别观察面神经离断术后第1、3天,第1、2、4、6、8周眼轮匝肌肌细胞直径和Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量的变化.结果:面神经离断术后眼轮匝肌肌细胞直径从正常值降到只占正常值的20%;Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶的灰度值亦分别从术后1天的(1.24±0.17)、(8.55±0.36)增加到术后8周的(1.42±0.10)、(9.74±0.33),差异均有统计学意义(P<0.05).结论:大鼠面神经离断术后眼轮匝肌肌细胞直径、Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量下降,并且随失神经支配时间延长呈进行性下降,提示面神经损伤修复手术应早期进行,有利于面神经功能恢复.     

失神经肌萎缩研究现状

随着显微外科的发展周围神经损伤的早期修复技术已越来越多地被一线医师所掌握 ,但是神经修复后靶器官功能的恢复常常不尽人意 ,归其原因是多方面的 ,其中肌肉的失神经萎缩的防治一直是显微外科界研究和探索的一个难题 ,本文在阅读了部分相关文献基础上综述如下。1　病因分析1.1　营养因素　神经细胞对它的效应器肌肉细胞通过产生肌肉营养物质而发生作用 ,通常认为这种营养物质影响着肌细胞的生长、发育、分化与成熟 ,维持正常肌肉生理生化及形态结构等方面的稳定性。此即失神经肌萎缩包括营养性萎缩的理论基础。神经伤后 ,营养因子的更新换…     

去神经肌肉组织的代谢变化及其萎缩的预防

肌肉失神经支配后 ,肌肉的各种生理活动随即发生变化 ,肌肉萎缩 ,甚至纤维化。长时间的肌肉失神经支配会导致肌肉功能恢复障碍。失神经支配后 ,与肌萎缩直接相关的是肌肉的代谢变化。不论去神经肌萎缩的机制如何 ,其最终途径都是通过影响代谢来完成的 ,不同原因所致的肌萎缩其代谢变化各不相同。因此 ,研究和认识肌肉萎缩的代谢变化 ,有助于我们寻找预防肌肉萎缩的治疗方法 ,为肌肉的再神经支配创造条件。现将有关文献综述如下。1　肌肉去神经后的代谢变化　1.1　去神经后酶活性的变化　1.1.1　磷酸肌酸激酶的变化　肌肉纤维根据其生理生化…     

骨骼肌失神经和再神经化时肌卫星细胞的变化

目的探讨骨骼肌失神经和再神经化时肌卫星细胞的变化规律，了解肌肉相应形态功能变化的细胞学机制。方法取1月龄Wistar大鼠27只制成失神经肌萎缩模型，于术后1～6个月，逐月取3只大鼠双侧小腿三头肌行组织学、组织化学等形态学检测；同时于术后1、2、3周和1～6个月逐月各取1只大鼠双侧小腿三头肌行细胞生物学检查。取1月龄Wistar大鼠35只制成神经再生模型，分别于失神经即时、术后1～6个月逐月取5只大鼠行神经植入手术，动态观察电生理指标变化至植入术后8周，然后进行形态学指标检测。结果骨骼肌失神经组显示肌湿重、肌细胞截面积迅速减少，胶原纤维含量逐渐增加，失神经后3～4个月DNA增殖期核所占百分比最高，后迅速减少，肌卫星细胞失神经3周数量开始明显增加，但2个月后急剧下降，至4个月时含量已极低。神经再生组神经植入后4～5周可引出肌诱发动作电位，以萎缩2～3个月后神经植入再生效果好，此时肌卫星细胞的分化能力较强。结论骨骼肌失神经支配4个月后卫星细胞数量极少导致肌肉进入萎缩的不可逆期；当失神经2～3个月时再神经化，增殖能力活跃的肌卫星细胞促使此时的萎缩肌功能恢复较好。     

电穿孔介导睫状神经营养因子基因转染延缓失神经肌萎缩

目的　探索一次性电穿孔介导睫状神经营养因子 (ciliaryneurotrophicfactor ,CNTF)转染延缓失神经骨骼肌萎缩的疗效。方法　制备 3 6只SD大鼠右下肢腓肠肌失神经支配模型 ,按手术先后顺序随机分成失神经对照组 (A组 )和CNTF基因转染组 (B组 ) ,每组 18只大鼠。于术后 2、4、8周测定肌湿重维持率、肌细胞截面积、肌肉蛋白含量、胶原纤维与肌细胞面积比和细胞凋亡数。结果　术后 2、4周B组的肌湿重维持率、肌细胞截面积和肌肉蛋白含量均明显高于A组 (P <0 .0 5 ) ,但胶原纤维与肌细胞面积比和细胞凋亡数明显低于A组 (P <0 .0 5 )。术后 8周 ,两组间各参数无明显区别 (P >0 .0 5 )。结论　一次性电穿孔介导CNTF基因转染可延缓失神经骨骼肌萎缩四周。     

细胞外ATP对失神经支配后骨骼肌和脊髓前角运动神经元ATPase活性的影响

目的了解细胞外三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）对坐骨神经损伤后腓肠肌和相应脊髓节段ATPase活性的影响。方法SD大鼠168只，切断其右侧坐骨神经后，随机分为3组，每组56只。损伤组：坐骨神经离断后不修复。对照组和实验组在坐骨神经离断修复后，于腓肠肌内注射同体积的生理盐水和ATP。术中和术后每日用药1次至取材为止。3组分别于手术后12h、1d、3d、7d、14d、28d、56d时每组各取8只大鼠，测定腓肠肌和L4-6水平脊髓前角运动神经元Na-K-ATPase及Ca-ATPase活性。术后7d、14d、28d、56d取双侧腓肠肌称肌湿重。结果实验组术后能显著改善ATPase的活性，这种改变与肌湿重的变化相一致，与损伤组和对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞外ATP可通过对ATPase的影响，对失神经骨骼肌和脊髓前角运动神经元具有一定的保护和促进功能恢复作用。     

周围神经损伤后急性期NGF、BDNF基因表达变化的实验研究

目的 观察大鼠坐骨神经损伤急性期神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)mRNA含量的变化.方法 取SD大鼠48只,随机均分为8组.其中7组切断右侧坐骨神经并原位缝合,另1组为健康对照组.分别于术后1,2,3,4,5,6,7 d以吻合口为中心,取上下各5 mm共1cm坐骨神经提取总RNA,采取反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测组织中NGF、BDNF mRNA含量变化.结果 大鼠周围神经中NGF mRNA含量在正常组织有低水平表达.在损伤后1 d即明显升高,在损伤后5 d降低,随即恢复较高水平.BDNF在正常组织亦低水平表达,在损伤后4 d明显增高,5,6 d低至正常组织水平,7 d恢复较高水平.结论 大鼠坐骨神经损伤急性期NGF、BDNF基因表达变化不同步,提示不同因素在损伤后急性期NGF、BDNF含量变化中起作用.     

Expression of adenovirus-mediated neurotrophin-3 gene in Schwann cells of sciatic nerve in rats

Sｕｃｃｅｓｓｆｕｌｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｎｅｒｖｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｆｔｅｒｍｉｃｒｏｓｕｒｇｉｃａｌｒｅｐａｉｒｒｅｑｕｉｒｅｓｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｍｉｃｒｏ ｍｉｌｉｅｕ .Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒｓ(ＮＴＦｓ) ,ｍａｉｎｐａｒｔｓｏｆｔｈｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅｍｉｃｒｏ ｍｉｌｉｅｕ ,ｈａｖｅｂｅｅｎｓｈｏｗｎｔｏｐｌａｙａｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｔｒｏｐｈｉｃｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｐｅｒｉｐｈｅｒａ…     

Extracts obtained from predegenerated nerves improve functional recovery after sciatic nerve transection

Gap injuries of peripheral nerves, resulting from trauma or neurosurgical procedures, presage badly, for the presence of the distal stump of the nerve seems to be indispensable for regeneration. The standard grafting method requires a lesion of a healthy nerve, and therefore various substitutional materials are under consideration. The aim of the present work was to examine the recovery of rat sciatic nerves after supplying 10-mm-long gaps with an autologous connective-tissue chambers filled with fibrin only or fibrin and various neuroactive substances (brain-derived neurotrophic factor (BDNF), extracts from predegenerated or non-predegenerated nerves). The nerves were allowed to regenerate for 16 weeks. Recovery was measured functionally using the sciatic functional index, and by comparing the weight ratios of calf muscles. The histologic features of regeneration were assessed by counting the number of acetylcholinesterase-positive nerve fibers present inside implanted chambers. We found that chambers filled with fibrin and predegenerated peripheral nerve extracts or BDNF supported functional nerve regeneration much more strongly than chambers filled with fibrin only or fibrin and non-predegenerated peripheral nerve extracts. We conclude that autologous connective-tissue chambers filled with fibrin and predegenerated peripheral nerve extracts or BDNF seem to be a promising tool in peripheral nerve gap injury treatment, with likely clinical implications.     

周围神经损伤后影响白细胞介素-1受体表达的研究

目的　探讨周围神经损伤后有无白细胞介素 - 1(IL - 1)受体表达、其表达和创伤及 IL - 1干预后的变化规律。方法　选用昆明小鼠 72只制作单侧坐骨神经切割伤一期端端缝合模型 ,实验组和对照组各 36只 ,实验组损伤神经局部用 IL - 1浸泡 ,对照组用等量保存液。分别在术后 3小时 ,1、3、7、14和 2 8天用 L SAB法 ,检测神经近断端的 IL - 1受体表达 ,同时检测正常神经的 IL - 1受体表达水平。结果　正常神经有 IL - 1受体表达 ,定位于雪旺细胞膜。周围神经损伤后 ,对照组 IL - 1受体表达呈双相增强的特点 ;而实验组在 IL - 1处理后 ,其表达的双相规律不变 ,增强强度减小。结论　雪旺细胞是 IL - 1作用的靶细胞     

Timing the commitment to a wound-healing response of denervated limb stumps in the adult newt, Notophthalmus viridescens

Adult newt limbs that are denervated 1 day after amputation undergo a wound-healing response and, although they become reinnervated, will not regenerate unless reinjured. Experiments were designed to determine when denervated limb stumps of adult newts become committed to a wound-healing response. In Experiment I, limbs were amputated and denervated 1 day after amputation. On days 7, 14, 21, 28, and 35 days after the initial amputation and denervation, stumps were reamputated to remove the distal tip. This design varied the time the distal stump was devoid of nerves before reamputation. None of the limbs reamputated at 7 days regenerated. About half of the limbs reamputated at 14 days regenerated and almost all of those reamputated at days 21, 28, and 35 regenerated. In Experiment II, limbs were denervated and then amputated on day 7 or 14, at two different levels. Limbs with a short stump became innervated earlier and regeneration occurred more frequently at both levels of amputation. The results of these experiments show that denervated limb stumps become committed to a wound-healing response between days 7 and 14 after amputation/denervation. If sufficient nerves arrive before day 7, a regeneration response is initiated. If the stump is denervated for 14 days or longer, commitment to wound healing occurs and ingrowing nerves cannot initiate a regeneration response.     

嗅鞘细胞移植对坐骨神经切断后神经元的作用

目的研究嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植对周围神经切断后脊髓及神经节内神经元的保护作用。方法SD大鼠55只,随机分为3个组:空白组5只、实验组及对照组各25只。行右侧坐骨神经切断,近端断端行肌肉内包埋,实验组和对照组分别予OECs及细胞培养液,空白组暴露神经后不作任何处理。术后1、2、3、7和14d,分批处死,行组织学观察及TUNEL标记观察神经元的改变。结果空白组术后14d均无阳性变化。大鼠坐骨神经切断后,脊髓及神经节内均有神经元凋亡发生。术后1、2、3d实验组细胞存活率分别为98.4%±6.5%、97.6%±6.5%及95.2%±6.7%,对照组分别为97.8%±6.7%、97.4%±6.4%及94.3%±6.8%,比较差异无统计学意义(P>0.05);7、14d实验组细胞存活率分别为92.4%±8.9%、87.7%±9.4%,较对照组87.4%±8.6%、83.4%±8.5%高,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1、2d实验组及对照组脊髓前角运动神经元无细胞凋亡;3、7、14d实验组脊髓前角运动神经元凋亡指数分别为1.2±0.8、1.4±0.6及4.1±1.3,较对照组2.1±1.1、3.1±1.1、6.1±1.8低,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1、2、3d神经节内细胞无凋亡;7d实验组神经节内的凋亡指数2.10±0.32,较对照组4.40±0.56低,差异有统计学意义(P<0.05);14d实验组神经节内的凋亡指数4.3±1.80与对照组6.70±2.50比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论周围神经损伤后脊髓及神经节内神经元有神经元凋亡发生,OECs移植对神经元凋亡有保护作用。     

High-resolution magnetic resonance imaging is a noninvasive method of observing injury and recovery in the peripheral nervous system

OBJECTIVE: Noninvasive observation of degenerating and regenerating peripheral nerves could improve the diagnosis and treatment of nerve injuries. We constructed a novel phased-array radiofrequency coil to permit magnetic resonance imaging (MRI) observation of the sciatic nerve and its target muscles in rats after injury. METHODS: Adult male Lewis rats underwent either crushing (n = 18) or cutting and capping (n = 17) of their right sciatic nerves and then underwent serial MRI. Serial gait track analysis was performed to assess behavioral recovery. Animals from both groups were killed at several time points for histological evaluation of the nerves, with axon counting. RESULTS: Crushed sciatic nerves demonstrated increased T2-weighted signals, followed by signal normalization as axonal regeneration and behavioral recovery occurred. Cut sciatic nerves prevented from regenerating displayed a prolonged phase of increased signal intensity. Acutely denervated muscles exhibited hyperintense T2-weighted signals, which normalized with reinnervation and behavioral recovery. Chronically denervated muscles demonstrated persistently increased T2-weighted signals and atrophy. CONCLUSION: In this study, we demonstrated the ability of MRI to noninvasively monitor injury and recovery in the peripheral nervous system, by demonstrating changes in nerve and muscle that correlated with histological and behavioral evidence of axonal degeneration and regeneration. This study demonstrates the potential of MRI to distinguish traumatic peripheral nerve injuries that recover through axonal regeneration (i.e., axonotmetic grade) from those that do not and therefore require surgical repair (i.e., neurotmetic grade). This diagnostic modality could improve treatment by providing earlier and more accurate diagnoses of nerve damage, as well as reducing the need for exploratory surgery.