电离辐射增强雷帕霉素治疗毛细血管扩张性共济失调淋巴母细胞DNA双链断裂的修复能力

目的 :不像正常淋巴母细胞 ,电离辐射后纯合子毛细血管扩张性共济失调 (A- T)淋巴母细胞不显示 DNA双链断裂(dsb)正确修复的增强。由于 A- T突变在哺乳细胞对雷帕霉素的反应起作用 ,本研究观察雷帕霉素对电离辐射增强 dsb修复的效应。方法 :1选用正常淋巴母细胞株 GM6 0 7和 TK6及纯合子 A- T淋巴母细胞株 GMl5 2 6和 GM3189。 2穿梭载体p Z189和 p Z189kan用于分析 DNA修复 ,用碱裂解法制备其质粒 ,氯化铯梯度离心法纯化 ,限制性内切酶 Eco RI酶切导致p Z189dsb。 3正常和 A - T细胞分别与雷帕霉素孵育 40 min后 ,用 1 3 7　 C…     

AT细胞对电离辐射敏感原因的探讨

AT细胞具有对电离辐射和拟辐射物质的高敏感性以及DNA合成抑制抗性,存在复杂的基因异质性。本文从AT细胞的遗传学互补性分析、DNA损伤修复缺陷以及DNA拓扑酶学研究三方面对AT细胞辐射敏感性的分子机理等进行了讨论,认为DNA双链路复缺陷与重接忠实性下降可能足AT细胞电离辐射敏感性的原因。     

咖啡因对辐射诱导TK6细胞凋亡的影响

根据凋亡细胞的显微镜下形态学变化特点和DNA降解后的DNA含量变化特点,实验用形态学和流式细胞计(FCM)检测了咖啡因对γ射线诱导人淋巴母细胞TK6凋亡的影响。     

AT细胞对电离辐射敏感原因的探讨

AT细胞具有对电离辐射和拟辐射物质的高敏感性以及DNA合成抑制市性，存在复杂的基因异质性，本从AT细胞的遗传学互补性分析，DNA损伤修复缺陷以及DNA拓扑酶学研究三方面对AT细胞辐射敏感性的分子机理等进行了讨论，认为DNA双链修复缺陷与重接忠实性下降可能是AT细胞电离辐射敏感性的原因。     

纵隔淋巴母细胞性淋巴瘤的CT诊断

目的 探讨纵隔淋巴母细胞性淋巴瘤的影像特征.方法 收集本院2007-05-2010-05共8例经病理检查证实为纵隔淋巴母细胞性淋巴瘤,回顾性分析其影像学特征.结果 8例均为T淋巴母细胞性淋巴瘤,年龄为8～35岁,25岁以下7例,均表现为前上纵隔巨大肿块,不同程度推挤、压迫中纵隔大血管,4例侵犯大血管间隙,7例合并胸腔及心包积液.结论 纵隔淋巴母细胞性淋巴瘤有一定的好发年龄、好发部位及特异的CT表现,大部分能与纵隔其他肿瘤进行鉴别.     

ATM基因对60Co γ射线照射后AT细胞hTERT表达的影响

目的研究外源性ATM基因对电离辐射照射的毛细血管扩张-共济失调症（ataxia tehngiectasia，AT）患者皮肤的成纤维细胞系AT细胞（AT5BIVA）hTERT mRNA和蛋白表达的影响。方法以正常人皮肤的成纤维细胞系GM细胞（GM0639）为对照，应用RT-PCR与Western blot实验方法，观察经0、1、3和5Gy（剂量率1．0Gy／min）^60Coγ射线照射后，AT细胞、空载体AT细胞、ATM^＋-AT细胞和GM细胞的hTERT mRNA和蛋白表达的变化。结果未照射时，除GM细胞外，其余各细胞均有hTERT mRNA和蛋白的表达；ATM^＋-AT细胞的hTERT mRNA和蛋白表达量较AT细胞明显下降（P〈0．05）；ATM^＋-AT细胞的hTERT mRNA和蛋白表达量仍然明显高于GM细胞的hTERT mRNA表达量。在1～5Gy剂量范围内，AT、空载体AT、ATM^＋-AT和GM细胞的hTERT mRNA和蛋白表达量呈剂量依赖性增加；在相同照射剂量点，ATM^＋-AT细胞的hTERT mRNA表达量较AT细胞均有明显降低（P〈0．05）。结论电离辐射可诱导细胞hTERT mRNA和蛋白的表达；并且细胞hTERT mRNA和蛋白表达量呈剂量依赖性增加；外源性ATM基因可下调AT细胞hTERT mRNA和蛋白的表达。推测端粒酶参与电离辐射诱导DNA损伤的修复。     

脏器炎性肌纤维母细胞肿瘤的诊断与鉴别诊断

目的 探讨脏器炎性肌纤维母细胞瘤(Inflammatory miofibroblastic tumor,IMT)的诊断和鉴别诊断.方法 分析21例IMT的临床病理特征,病理组织学特点和免疫组化表型.所有病例行HE染色和免疫组化染色.结果 脏器IMT主要有三种细胞:肌纤维母细胞,纤维母细胞和炎细胞,这些细胞构成了IMT的三种组织学亚型:(1)黏液一血管型;(2)梭形细胞密集型;(3)少细胞纤维瘢痕型.所有病例表达vim、SMA和MSA,部分病例表达PCK和ALK.结论 脏器IMT的病理组织学和免疫表型是诊断的重要依据,鉴别诊断包括腹腔黏液囊肿和肿瘤,钙化性纤维性肿瘤.孤立性纤维性肿瘤,伴淋巴组织浸润的平滑肌瘤、和胃肠间质瘤.     

不同LET射线及其联合照射下淋巴母细胞微核率的剂量效应

目的 探讨在α粒子、γ射线以及联合照射下淋巴母细胞微核率的剂量效应.方法 以HMy2.CIR淋巴母细胞为对象,分别以不同剂量的α粒子和γ射线进行照射,以及先以0.025 ～0.500 Gy的α粒子照射后即刻以不同剂量的γ射线进行照射,用胞质分裂阻断法检测淋巴细胞微核,建立不同照射条件下淋巴母细胞微核率的剂量-效应曲线.结果 对于γ射线照射,微核率剂量-效应符合线性平方模型Y=c+αD+ βD2.对于α粒子照射,当照射剂量＜0.250 Gy时,细胞微核率随剂量的增加呈线性增加,当其剂量进一步增加时,微核率剂量-效应曲线呈现下弓型,可以采用反映辐射旁效应的BaD模型Y=c +αD +σ[1 -exp(-δD)]exp(-βD)进行很好地拟合.对于联合照射,当α粒子剂量较低时,微核率的剂量效应与γ射线照射时的相似;但当α粒子剂量较大时,微核率的剂量-效应更接近于α粒子照射.同时,0.2、0.5 Gyα粒子联合γ射线照射引起的微核率显著高于它们单独照射时的微核率之和(=5.22 ～ 11.86,P＜0.05).结论 α粒子照射具有与γ射线不同的辐射损伤规律,辐射旁效应可能在其中发挥了重要作用,而联合照射则可以引起细胞损伤的协同增强.     

AT2R基因转染对树突状细胞成熟和免疫功能的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因表达对树突状细胞(DC)成熟及免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫炎性反应机制。方法用免疫磁珠分离纯化C57BL/6J小鼠骨髓细胞,体外培养为DC,再转染携带绿色荧光蛋白的AT2R基因重组腺病毒载体(p Ad CMV/AT2R)或空病毒载体(p Ad-GFP),分为对照组、脂多糖组、p AdGFP组、p Ad CMV/AT2R组及p Ad CMV/AT2R+AT2RB组(AT2R拮抗剂)。用荧光显微镜、RT-PCR、Western印迹检测绿色荧光及AT2R mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测DC表面标志CD86和MHCⅡ的表达率;MTT检测DC刺激T淋巴细胞增殖能力;ELISA检测细胞因子白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果 DC转染病毒后有绿色荧光及AT2R mRNA和蛋白的表达,p Ad CMV/AT2R组CD86和MHCⅡ的表达、T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都较对照组高(P<0.01),但比脂多糖组显著降低(P<0.05或P<0.01),p Ad CMV/AT2R+AT2RB组上述变化也显著高于对照组(P<0.01),但与脂多糖组比较无显著差异(P>0.05)。结论 DC表达AT2R基因,AT2R能抑制DC成熟诱导的局部免疫炎性反应,推测AT2R可能介导抑制动脉粥样斑块的进展。     

外科创伤对小鼠抗菌细胞免疫的影响

本实验利用李斯特氏菌感染的小鼠作为急性细胞内感染时细胞免疫模型,观察了创伤对细胞免疫的影响。实验表明,创伤后,机体对细菌感染的敏感性增高,脾脏对细菌的滤过和清除功能受到抑制,外围血淋巴细胞对PHA刺激后的母细胞转化率降低,动态观察表明,淋巴母细胞转化速度明显延迟,提示创伤导致T细胞放大系统失调,细胞免疫功能受到抑制。这可能是创伤后机体对细菌感染敏感性增高的主要原因。实验还表明,疫苗接种能提高脾脏滤过和清除细菌的功能。     

电离辐射对人淋巴母细胞致突效应的辐射适应性：HPRT突变体的分子分析

电离辐射对人淋巴母细胞致突效应的辐射适应性：ＨＰＲＴ突变体的分子分析［英］／ＲｉｇａｎｄＯ…ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．－１９９４．５４（ｓｕｐｐｌ）．－１９２４ｓ～１９２８ｓ研究者用￣（１３７）Ｃｓ放射源照射指数生长的正常人淋巴瘤样细胞ＡＨＨ＿１，分为正常...     

小鼠肠系膜淋巴结淋巴母细胞在体内归巢的辐射效应

本实验采用液体闪烁计数及放射自显影技术,研究了³H·TdR标记的供体ICR小鼠肠系膜淋巴结(MLN)淋巴母细胞经0Gy～16by的Co⁶⁰γ线体外照射后,在同系受体动物体内的迁移与归巢。实验结果表明；中等剂量以上的Co⁶⁰γ线外照射对MLN淋巴母细胞的选择性归巢有明显的抑制作用。     

外源性FGF9对体外肺泡Ⅱ型上皮细胞作用的实验研究

目的观察外源性成纤维细胞生长因子9（fibroblast growth factor 9,FGF9）对体外大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ细胞）生长的影响。方法体外原代分离、纯化、培养成年大鼠ATⅡ细胞,锥虫（台盼）蓝拒染法测定细胞活力,透射电镜鉴定细胞,碱性磷酸酶（AKP）染色法确定细胞纯度。实验组分别用10,30,50 ng/ml FGF9和200μg/ml肝素处理细胞24 h,对照组为未经药物处理的ATⅡ细胞。选择30 ng/ml FGF9浓度后,再通过噻唑蓝检测法（MTT法）分别检测24,48,72和96 h的细胞存活率。结果原代培养ATⅡ细胞的产量约为2×107个/鼠,细胞活力〉90%,电镜下观察到ATⅡ细胞典型细胞结构——板层小体,细胞纯度〉90%。采用30和50 ng/ml浓度FGF9刺激细胞24 h,ATⅡ细胞存活率明显增高（P〈0.01）。采用30 ng/ml FGF9刺激ATⅡ细胞不同时间（24,48,72和96 h）发现,24,48,72和96 h细胞存活率均明显高于对照组（P均〈0.01）。结论利用弹性蛋白酶消化分离和大鼠IgG免疫黏附纯化,可获得高产量、高纯度及高活力的原代ATⅡ细胞。FGF9以浓度和时间依赖的方式促进ATⅡ细胞增殖。     

血管紧张素Ⅱ2型受体重组腺病毒的扩增及其在INS－1细胞中的转染

目的：利用人胚肾（HEK）293A细胞株扩增含有大鼠血管紧张素Ⅱ2型受体（AT2R）基因的重组腺病毒,并在大鼠胰岛素瘤细胞INS－1细胞株中进行转染,构建AT2R高表达的胰岛β细胞模型。方法利用293A细胞株扩增重组腺病毒Ad－G－AT2R－EGFP和对照病毒Ad－CMV－EGFP,并测定病毒滴度。在INS－1细胞中瞬时转染后利用实时PCR、Western 印迹以及免疫荧光和激光共聚焦技术检测细胞中AT2R与AT1R的表达。结果扩增后得到重组腺病毒Ad－G－AT2R－EGFP和Ad－CMV－EGFP的滴度分别为9×109和8×109 pfu／ml。在INS－1细胞中转染Ad－G－AT2R－EGFP后,AT2R mRNA的表达随病毒感染复数（multiplicity of infection,MOI）值的增加呈剂量依赖性增加。当MOI值为10时,AT2R mRNA的表达达到峰值（P＜0．05）,同时AT2R蛋白的表达明显高于转染了Ad－CMV－EG－FP的细胞和未转染细胞,但AT1R的表达无显著变化。结论成功扩增并得到高滴度且携带有AT2R基因的重组腺病毒载体,并将其转染入INS－1细胞中构建出AT2R高表达的胰岛β细胞模型,为下一步探讨AT2R在胰岛β细胞中的作用奠定了基础。     

CD9类单克隆抗体的研制

本研究用血小板作为免疫原,免疫Balb/C小鼠,并按常规方法进行细胞融合.在筛选时,用血小板、幼稚B细胞(Nalm-6)及EB病毒转化后的人B淋巴母细胞系Raji细胞同时检测杂交瘤细胞上清,仅选与血小板及Nalm-6细胞反应,不与Raji细胞反应的抗体分泌杂交瘤细胞,建立了B9-1、B9-2、B9-3杂交瘤株.根据B9系列抗体与各种血液、造血细胞的反应特点,对通过对肾小球血管内皮及远端曲管上皮反应性及对其相应抗原分子量测定表明,B9系列抗体为CD9类抗体.本系列抗体与某些白血病细胞反应结果表明,与CD10类抗体配伍,可能形成更有效的针对普通型急性淋巴细胞白血病的导向药物.对B9系列抗体在血小板及白血病免疫分型中的研究前景也作了简要讨论.     

AT细胞系辐射敏感性与细胞凋亡的相关研究

目的 探讨AT细胞高辐射敏感性与细胞凋亡之间的联系。方法 以液体闪烁测量法测3H-TdR掺入百分率来观察^60Co γ射线照射对AT5BIVA（AT）和GM0639（GM）细胞增殖的影响;实验于照射后0、24、48和72 h,用细胞流式术动态检测AT和GM细胞的自发凋亡率及^60Co γ射线照射诱发的凋亡率。结果 ^60Co γ射线0～6 Gy照射后,AT和GM两种细胞3H-TdR掺入百分率均呈剂量依赖性降低,且AT细胞降低得比GM细胞快,两种细胞3H-TdR掺入百分率与受照射剂量间可拟合成指数方程：SAT=0.9718e^-0.6855D（R^2=0.9950）、SGM=1.0928e^-0.3731D（R^2=0.9777）;AT细胞的自发凋亡率高于GM细胞;2～6 Gy照后24 h,两种细胞由辐射诱发的凋亡率均随照射剂量增大而升高,且在同一剂量点,前者凋亡率高于后者;2 Gy照射后0～72 h,AT和GM细胞的凋亡率均呈时间依赖性增加,且随照后时间延长两者间差异逐步增大,在72 h达到显著水平。结论 AT细胞高辐射敏感性与其较高的自发及辐射诱发的凋亡密切相关。     

电离辐射诱发的1,4,5-三磷酸肌醇受体基因表达

采用差示反转录PCR(DD-RTPCR)的方法分离、克隆参与细胞对辐射做出应急反应的基因:经EB病毒转染的正常淋巴样母细胞系C3ABR,用3Gy的γ射线(137Cs)照射后作为实验细胞,以未经照射的细胞作为对照,分别提取其mRNA,以3'端具有两个锚定碱基的oligo-dT₁₁为引物进行反转录,接着以随机寡核苷酸(GCCATTGCCA)为5'端引物,3'端引物仍采用进行反转录时所用的锚定引物,进行PCR扩增。     

中枢神经系统(CNS)淋巴瘤

作者回顾性地分析了55例原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤,探讨其CT表现和组织学特征的关系。男36例,女19例。年龄17～81岁。依形态学特征WF分类把非何杰金氏淋巴瘤分成十类,三科预后。低度:小淋巴细胞型,滤泡分化小细胞型和滤泡混合型。中度:滤泡大细胞型,弥散分化小细胞型,弥散混合型和弥散大细胞型。高度:成免疫细胞型,淋巴母细胞型和未分化小细胞型。作者见到,55例中只出现WF分类中六种组织学类型。低度者2例(均为小细胞型),中度者44例(5例弥散分化小细胞型,9例弥散混合型,30     

神经母细胞瘤bc1-2基因产物的表达

在各种淋巴增生紊乱的组织和包括正常神经元在内的胚胎和成人组织中,都有对B细胞白血病/淋巴瘤-2基因(bcl-2)产物的免疫反应性,最近发现,在一些神经母细胞瘤组织层中亦有。作者检查了34例神经母细胞瘤及节细胞神经母细胞瘤病人的46个标本,它们包含了各临床阶段和所有病灶。在检查中发现,无论是来自1期还是4期、原发灶还是继发灶、化疗前还是化疗后的组织标本,都有对bcl-2的免疫反应性。而未分化的神经母细胞     

VS MC转染表达AT2R对AT1R表达的影响

目的　探讨血管平滑肌细胞 (VSMC)转染表达血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) 2型受体 (AT2R)后其 1型受体 (AT1R)表达所受的影响。方法　用同源重建方法构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV AT2R) ,体外转染VSMC ,分别用流式细胞仪检测AT1R、AT2R细胞转染表达率、免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达、RT PCR法和蛋白印迹法检测其mRNA和蛋白表达。结果　AdCMV AT2R转染后 ,在不同浓度AngⅡ刺激下AT1R、AT2R在VSMC的细胞转染表达率如下表。如果表明随着转染表达时间延长 ,AT2R细胞表达率呈显著增加趋势 ,4 8小时最高表达率达 89.5 1% ,AngⅡ作用与否及不同浓度AngⅡ作用对AT2R表达无显著影响。而转染前后AT1R表达相对较稳定 ,受不同浓度AngⅡ作用 ,其表达明显呈增加趋势。AT2R峰值表达时 ,免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达结果也提示AT2R表达随转染表达时间延长显著增加 ,转染前后AT1R表达无明显变化 ,在一定浓度范围内 ,AngⅡ刺激对AT2R表达无显著影响 ,却显著增加AT1R的膜表达。RT PCR法和蛋白...