急性白血病细胞凝集素受体、免疫分型及FAB分型研究

本研究用8种凝集素(WGA,ConA,LCA,RCA,PNA,SBA,UEA,DBA)和一组单抗分别对41例急性白血病(AL)细胞进行亲和细胞化学(ABC法)标记和免疫细胞化学(APAAP法)标记,观察各型AL细胞上凝集素受体分布与变化、抗原表达、免疫分型、结合AL骨髓细胞形态学与细胞化学染色特征。结果表明,各种凝集素受体在各型AL细胞上的分布与表现形式是多样的、不规则的,各型AL之间无明显区别;正常外周血淋巴细胞PNA,SBA,UEA结合阴性,与正常     

急性淋巴细胞白血病细胞分化与花生凝集素受体表达

用系列单抗与标记的花生凝集素（ＰＮＡ）对３８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞行免疫分型与确定分化阶段，检测ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达情况，与正常成熟淋巴细胞（ＮＭＬ）对照。发现Ｔ－ＡＬＬ，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ细胞大多表达ＰＮＡ受体，而ＮＭＬ细胞极少表达ＰＮＡ受体，两者有显著差异（Ｐ〈０．０１）。经神经氨酸酶（ＮＡ）预处理后，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ与ＮＭＬ细胞ＰＮＡ受体表达明显增加（Ｐ〈０．０５），以ＮＭ     

全反式维甲酸诱导分化的HL-60细胞表面凝集素受体的变化

目的：了解人类早幼粒细胞性白血病细胞株（HL-60）细胞经全反式维甲酸诱导分化后各时相细胞表面5种凝集素受体的变化.方法：以刀豆凝集素（ConA）、麦胚凝集素（WGA）、花生凝集素（PNA）、蓖麻凝集素（RCA）、荆豆凝集素（UEA-1）共5种Na^125I-凝集素,标记经全反式维甲酸诱导分化的HL-60细胞,检测各时相细胞表面凝集素受体的变化.结果：HL-60细胞从幼稚分化发育至成熟各阶段中,细胞表面与UEA-1、WGA、ConA结合的凝集素受体有增多的趋势,诱导分化前后各凝集素放射活性比较有显著性差异（P＜0.05）,其中WGA放射活性在分化前后明显增加,而与PNA结合的凝集素受体在HL-60细胞分化过程中呈减少的趋势,在诱导分化后期减少最为明显,诱导分化前后放射活性比较有显著性差异（P＜0.05）.结论：D-半乳糖-N-乙酰氨基半乳糖结构主要表达于HL-60细胞早幼粒阶段,随着细胞的分化成熟而显著减少,其可能是肿瘤特异性抗原.HL-60细胞在经全反式维甲酸诱导分化过程中,细胞膜上含L-岩藻糖糖链结构增多,N-乙酰氨基葡萄糖结构增多和/或唾液酸化作用增强,并出现D-葡萄糖和/或D-甘露糖糖链结构.     

白血病细胞促凝集活性的初步研究

应用小鼠睥淋巴细胞凝集试验,测定了49例急性白血病患者白血病细胞提取液的内源性凝集素活性。结果表明,白血病细胞含有很高的内源性凝集素活性,与正常对照组有显著性差异(P<0.001).该内源性凝集素活性能被胰蛋白酶和半乳糖抑制。且白血病细胞内源性凝集素活性与白血病疾病状态密切相关。     

急性髓系白血病细胞c-Kit受体表达与外周血白细胞数量的关系

目的探讨急性髓系白血病细胞c-Kit受体表达与外周血WBC数量的关系。方法以流式细胞仪分析57例急性髓系白血病患者骨髓原始细胞c-Kit受体表达及血细胞仪检测外周血WBC总数量（包含原始细胞及成熟白细胞）。结果低WBC组c-Kit受体表达显著高于高WBC组（t=4.01,P〈0.01）;CR组c-Kit受体表达略低于部分缓解组和未缓解组,但无统计学意义（t=0.67,P〉0.05）。结论急性髓系白血病患者外周血白细胞总量与骨髓原始细胞c-Kit受体表达有关。     

小鼠胚胎神经管发育过程中WGA、RCA和ECL凝集素受体的表达及其意义

目的：探讨WGA、RCA和ECL凝集素受体与小鼠胚胎神经管发育的关系。方法:根据受孕天数将30只雌性昆明小鼠随机分为6组,每组5只。以生物素标记的凝集素WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和细胞化学染色和图像分析方法检测上述三种凝集素受体在各组小鼠胚胎神经管上皮及其周围间充质的分布状况和变化规律。结果:三种凝集素受体均存在于不同发育阶段的小鼠胚胎神经管上皮,但三者的表达部位、表达水平的变化趋势均不相同。其中,WGA受体和ECL受体在各组神经管头部、体部和尾部表达的总体趋势均是先下降后上升;而RCA受体在各组神经管头部和尾部表达的总体趋势是逐渐上升,在体部则是逐渐下降。三种凝集素受体在神经管头部和尾部的表达均强于神经管的体部,以WGA受体和RCA受体更为明显。结论:WGA受体、RCA受体和ECL受体都直接或间接参与了神经管形态构建过程,并且在这一过程中三种受体均发生着规律性的时空变化。     

细胞免疫表型分析在急性白血病诊断中的作用

采用流式细胞术对45例急性白血病病人进行免疫表型分析。急性髓系白血病均表达髓系抗原,部分同时伴有淋系统抗原（CD47）表达,急性淋系白血病均表达淋系抗原,少数伴有髓系抗原（CD13、CD33）表达。1例慢粒急淋变既表达髓系抗原标记,又表达B系抗原标记。结果表明,白血病免疫表型是急性白血病诊断与分型的重要手段,但仍需结合细胞形态学、组织化学检测。     

40例形态学和免疫学分型不一致的急性白血病分析

选用一组国产敏感特异的McAb,采用APAAP桥联免疫酶标组化染色技术对40例形态学和免疫学分型不一致的急性白血病进行了分析。结果表明,32例形态学难以分类或虽能分类但与免疫学分型不同的急性白血病均有明确的细胞系列特异性标记表达。其中B-ALL14例、T-ALL1例、ANLL2例、同时表达T和B系相关分化抗原的双标-ALL 11例、HAL4例,同时表达淋巴和髓系相关的特异性标记。有8例未测到任何标记抗原,归属于急性未分化型白血病。     

急性白血病细胞p53基因表达

目的：检测急性白血病细胞内ｐ５３基因表达情况。方法：３Ｈ－ｄＡＴＰ标记基因探针的斑点杂交。结果：急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）表达ｐ５３ＲＮＡ水平与正常对照类似，急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中５９．４％表达低水平ｐ５３或表达缺失，ｐ５３表达缺失在Ｍ４、Ｍ５中多见。结论：急性白血病细胞中存在ｐ５３ＲＮＡ表达异常。     

凝集素受体WGA、RCA和ECL在过量维甲酸致昆明小鼠腭裂发生中的作用

目的  探讨凝集素受体WGA、RCA和ECL在过量维甲酸（RA）致小鼠腭裂畸形中的作用。   方法  以生物素标记的凝集素受体WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和细胞组织化学染色方法检测上述3种凝集素受体在RA致畸鼠胚（实验组）和相应对照组鼠胚腭板上皮及其间充质的分布状况和变化规律。  结果  3种凝集素受体在实验组不同发育阶段的小鼠胚胎腭突上皮内的表达量显著低于相应对照组。3种凝集素受体在小鼠胚胎腭板间充质中的表达量在实验组及对照组之间差异无统计学意义。  结论  WGA、RCA、ECL 3种凝集素受体在腭板上皮中表达量的下调与RA致昆明小鼠腭裂发生相关。     

正常和白血病小鼠骨髓细胞和脾细胞电泳及与PNA结合的某些特性

L_(801)粒系白血病小鼠骨髓细胞及脾细胞电泳率(EPM)均比相应的正常细胞为高。花生凝集素PNA能凝集正常LACA小鼠骨髓细胞,但不能凝集白血病细胞。本文还显示正常LACA小鼠骨髓细胞PNA凝集组的CFU-GM产率低于不凝集组。揭示LACA小鼠骨髓内能被PNA凝集的细胞中较成熟的细胞比较多。     

大肠癌凝集素受体的特异性和定位分布的研究

本文应用7种凝集素对82例大肠癌及40例非癌大肠粘膜进行了亲合组织化学研究,结果表明:PNA在大肠癌的阳性率是86.6%,正常大肠粘膜全为阴性;UEA—1在左侧大肠癌的阳性率是58.7%,左侧大肠正常粘膜不表达UEA—1受体;ConA在大肠癌的阳性率是82.9%,正常大肠粘膜阳性率为56.7%;DBA、SBA在大肠癌的阳性率分别比正常大肠粘膜减少52.4%和26.8%。作者认为PNA受体是大肠癌的较高特异性肿瘤标记,UEA—1、ConA、DBA和SBA四种凝集素受体对大肠癌也有一定意义,可能为肿瘤相关标记。癌细胞PNA、UEA—1和RCA受体的定位分布与大肠癌的分化和组织学类型有关,大肠癌凝集素结合反应与癌转移之间无必然联系,但PNA和UEA—1对淋巴结微小转移癌灶的检出有一定帮助。     

间接免疫酶标法检测白血病细胞表面的运铁蛋白受体

用间接免疫酶标法检测急性单核细胞性白血病(急单)、急性粒细胞性白血病(急粒)、急性淋巴细胞性白血病(急淋)、慢性粒细胞性白血病(慢粒)、慢性淋巴细胞性白血病(慢淋)患者外周血细胞表面的运铁蛋白受体(TR)。47例患者中43例阳性,4例阴性;而48例正常血象者及非白血病患者外周血细胞的TR均为阴性。表明白血病细胞表面TR增加。用此法检测2例白血病及5例正常骨髓片TR阳性细胞的百分率与形态检查幼稚细胞总数的百分率基本相符,而1例急性巨核细胞性白血病及1例急淋骨髓片TR阳性细胞百分率明显高于幼稚细胞,提示白血病细胞TR表达可能较早于形态变异。     

CXCR3在急性白血病患者外周血淋巴细胞的表达及其意义

目的探讨急性白血病(AL)患者外周血T淋巴细胞趋化因子受体CXCR3表达及其临床意义。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法检测133例AL以及33例对照组外周血T淋巴细胞CXCR3表达。结果 AL患者外周血T淋巴细胞表面趋化因子受体CXCR3的表达阳性率明显高于对照组,分别为(28.24±18.14)%和(12.19±3.89)%(P<0.05)。在各型AL中,以B-ALL的表达率最高(40.14±17.56)%,而T-ALL型为(14.06±8.29)%,仅略高于正常对照(P>0.05);AL髓外浸润患者外周血T淋巴细胞CXCR3的表达为(34.54±19.87)%,明显高于非髓外浸润患者(20.44±12.15)%(P<0.01)。但AL患者外周血T淋巴细胞CXCR3的表达与白细胞总数、幼稚细胞百分率及CD3阳性率表达无关。结论 AL外周血T淋巴细胞CXCR3的表达可能与白血病的迁移、浸润密切相关。     

子宫颈上皮细胞癌变过程中细胞复合糖类变化研究

作者应用凝集素PNA、PSA、BSL观察了新疆妇女宫颈上皮细胞癌变过程中细胞复合糖类的变化。PNA受体的表达与宫颈上皮细胞的分化关系密切。正常宫颈上皮基底细胞阳性,棘层和表层细胞PNA受体阴性,去分化后有丰富的PNA受体表达。宫颈上皮细胞PNA受体的出现可被认为是上皮细胞去分化的标志。PSA受体在宫颈上皮细胞癌变过程中呈递增趋势,然而PSA受体与宫颈上皮细胞的分化状态关系不大。     

涎腺腺样囊性癌的凝集素免疫组织化学分析

应用7种凝集素探针,观察了33例涎腺腺样囊性癌中的凝集素受体分布,并与正常涎腺组织进行比较。癌变组织中的PNA受体比正常组织明显增加,但UEA_1受体却较正常组织减少。     

鼻咽癌凝集素受体的检测和分析

应用ABC亲合细胞化学方法,以生物素化凝集素UEA,SBA,PNA,PSA标记94例鼻咽癌和23例慢性鼻咽炎组织切片。结果显示。鼻咽癌UEA,SBA受体阳性率(26.6%,8.5%)显著低于正常上皮(96.5%,85.2%),并随着癌瘤分化程度降低而递减。表明鼻咽上皮癌变后UEA,SBA受体明显丢失,反映了细胞分化水平,说明癌细胞糖蛋白合成障碍,糖链结构发生变化,导致肿瘤生物学特性发生改变。本结果指出,应用PNA作标记对于认识鼻咽低分化腺癌可能有所裨益。     

白血病细胞系中B-Raf与Raf-1的表达及活性

目的：研究白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中的Ｂ－Ｒａｆ和Ｒａｆ－１表达水平及激酶活性。方法：利用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测Ｂ－Ｒａｆ和Ｒａｆ－１表达水平,利用免疫沉淀及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测Ｒａｆ－１及Ｂ－Ｒａｆ的激酶活性。结果：Ｒａｆ－１在白血病细胞及正常人外周血淋巴细胞中均有表达,表达水平基本相似,其激酶活性较低;Ｂ－Ｒａｆ仅在白血病细胞中表达,且在Ｊｕｒｋａｔ和Ｋ５６２细胞中的表达水平较高,其激酶活性也较高。结论：在白血病细胞中,Ｂ－Ｒａｆ的高表达及活化可能是白血病发病的机制之一。     

四种凝集素在肝癌及癌旁组织的表达

应用ABC免疫亲和组化方法检测了西非单叶豆(BSL)、花生凝集素(PNA)、双花扁豆凝集素(DBA)和荆豆凝集素(UEA)在肝癌及癌旁组织中的表达。结果显示四种凝集素在肝癌及癌旁组织中表现出不同的阳性率;肝癌PNA阳性表达率>BSL和DBA>UEA(P<0.05),而癌旁组织中的BSL阳性表达率显著高于其他三种(P<0.05);PNA和DBA在癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织。且各种凝集素在肝癌及癌旁组织阳性定位亦不同,表明细胞发生癌变时细胞表面的糖链结构发生了变化。     

用生物素标记植物凝集素了解结肠粘液变化对结肠癌的诊断价值

以生物素标记不同的植物凝集素,用抗生物素-生物素酶标法(ABC法)了解它们与正常结肠及结肠癌粘液结合情况并与萤光标记法作了比较。发现花生凝集素(PNA)能与几乎所有的癌性粘液结合(19/20),而仅与少数正常杯状细胞内粘液结合(3/20),双花扁豆凝集素(DBA)适相反。而邻近结肠癌的移行区粘膜上皮粘液的结合情况则介于二者之间。作者认为利用这种检查方法有助于结肠癌的诊断,并认为 ABC 法较FITC萤光标记更为敏感。