蛋白酶体抑制剂MG-132下调炎症因子表达抑制大鼠心肌再灌注损伤

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠缺血再灌注心肌组织中炎症因子的影响.方法 选择92只SD大鼠结扎左冠状动脉前降支30 min制作心肌缺血再灌注模型.治疗(I/R T)组及假手术 治疗(Sham T)组于再灌注前5 min静脉注射蛋白酶体抑制剂MG-132 0.75 mg/kg,对照(I/R)组及假手术(Sham)组注射与之相同容积的生理盐水.观察I/R组和I/R T组再灌注0、1、2、6、24 h心肌组织超微结构变化,核因子-κBp65(NF-κBp65)、肿瘤坏死因子-α(TNFα)的mRNA和蛋白质水平,嗜中性白细胞(PMN)计数,髓过氧化物酶活(MPO)性以及各组存活率.结果 与Sham组及Sham T组相比,I/R组的NF-κBp65、TNF-α水平,PMN计数,MPO活性均显著增加(P＜0.05).I/R组中1、2、6、24 h组的上述各项炎性指标比0 h组显著增高(P＜0.05);电镜下观察可见缺血再灌注组弥漫性心肌细胞肿胀、大量肌丝溶解,线粒体肿胀空化.与I/R组相比,I/R T组心肌细胞损伤程度大大减轻,并显著抑制了炎症因子的表达、嗜中性白细胞的浸润及MPO活性(P＜0.05),作用至少维持24 h,并使因心律失常死亡减少.结论 MG-132通过降低缺血再灌注心肌组织中炎症因子的表达,抑制了再灌注损伤.     

蛋白酶体抑制剂MG-132诱导K562细胞株凋亡的时程效应

目的研究不同时间蛋白酶体抑制剂MG-132对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株K562的干预作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测16μmol／LMG-132作用不同时间（0、24、48、72、96h5个时间点）对K562细胞株增殖的影响,免疫细胞组织化学法检测MG-132作用不同时间后核因子-κB（NF—κB）及糖皮质激素受体（GR）的表达,采用流式细胞术检测MG-132不同作用时间对凋亡的影响。结果MTT：MG-132干预K562细胞株不同时间后K562细胞株的抑制率表现为对时间的依赖性,实验组明显高于对照组（P均〈0．05）,以干预72h时抑制率最高,为（63．33±1．52）％。免疫细胞组织化学法：MG-132干预K562细胞不同时间后,K562细胞株中的NF—κB、GR的表达水平均表现为对时间的依赖性;对于NF—κB,实验组明显低于对照组（均P〈0．05）,以干预96h时表达最低,为51．15±1．64;对于GR,以干预72h时表达最高,为89．21±3．49。流式细胞术：MG-132干预K562细胞株不同时间后K562细胞株的凋亡率表现为对时间的依赖性,实验组明显高于对照组（P均〈0．05）,以干预72h时,凋亡率最高,为（17．57±1．45）％。结论MG-132可能是通过下调NF—κB、上凋GR的表达诱导了K562细胞的凋亡和抑制,并表现出对时间的依赖性。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的 探讨泛素蛋白酶体系统对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌钙蛋白I的影响.方法 将制作成功的心肌梗死后心衰大鼠模型纳入研究,45只大鼠随机分为:①MG-132组:结扎左冠状动脉前降支,腹腔内注射MG-132 0.1 mg/(kg·d)(溶于2 ml生理盐水);②心肌梗死(MI)组:结扎左冠状动脉前降支,腹腔内注射2 ...     

蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠失神经肌萎缩的防治作用

目的:探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠失神经肌肉萎缩的防治作用.方法:36只SD大鼠随机分为3组,每组12只.A组:50 μL MG-132组;B组:100 μL MG-132组;C组:对照组.制作成标准的右侧坐骨神经离断,腓肠肌失神经支配模型.分别在A组和B组大鼠失神经腓肠肌局部注射浓度为20 μmol/L的蛋白酶体抑制剂MG-132 50 μL和100 μL,1次/d;C组于相同部位注射100 μL PBS,1次/d.连续注射1 wk后半数处死各组动物,各组剩余动物连续注射4 wk后处死,取双侧腓肠肌进行肌肉湿重萎缩率、总蛋白含量、肌细胞直径和横截面积测定,并进行统计学分析.结果:A组和B组肌肉湿重萎缩率、总蛋白含量、肌细胞直径和横截面积注射1 wk时分别为(24.5±3.5)%和(18.2±3.3)%,(9.98±0.68)mg/mL和(10.56±0.84)mg/mL,(14.61±1.26)μm和(14.96±1.34)μm,(790.25±12.26)μm2和(800.28±18.98)μm2,与C组相比较差异均具有统计学意义(P＜0.05);肌肉湿重萎缩率A组和B组差异具有统计学意义(P＜0.05).注射4 wk时分别为(60.2±3.7)%和(52.1±4.0)%,(7.04±0.70)mg/mL和(7.96±0.68)mg/mL,(10.63±1.04)μm 和(12.16±0.98)μm,(470.48±11.14)μm2和(498.47±10.34)μm2,与C组相比较差别均具有统计学意义(P＜0.05).肌肉湿重萎缩率A组和B组差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:蛋白酶体抑制剂MG-132可以通过抑制肌肉降解的泛素-蛋白酶体途径延缓大鼠失神经肌肉萎缩,并且随时间的延长其作用具有剂量依赖性.     

NF-κBp65/IL-1β在心肌梗死大鼠心室重塑中的表达及罗格列酮对其的影响

目的观察罗格列酮对心肌梗死后大鼠心室重塑过程中NF-κBp65（nuclear factor-κBp65）,IL-1β（interleukinh-1β）表达的影响。方法45只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（B组,n=15）和心肌梗死组（n=30）,通过结扎左冠状动脉前降支（LAD）制作急性心肌梗死模型。模型制作成功24h后,心肌梗死组再随机分为心肌梗死对照组（A组,n=15）和罗格列酮干预组（C组,n=15）。罗格列酮干预组每日给以罗格列酮灌胃4mg/（kg.d）,假手术组和心肌梗死对照组每日给以等量生理盐水灌胃,持续8周。利用RealtimePCR法检测非梗死区IL-1β的表达,免疫组化法检测非梗死NF-κBp65的含量。结果给药8周后,A组非梗死区心肌中NF-κBp65,IL-1βmRNA的表达,左心重量指数与B、C组相比显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;C组与B组相比,非梗死区心肌中NF-κBp65,IL-1β的表达,左心室重量指数显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论罗格列酮可能通过抑制NF-κBp65,IL-1β的表达来改善大鼠心肌梗死后心室重塑。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的：研究蛋白酶体抑制剂MC-132对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响。方法：结扎SD大鼠左冠状动脉前降支30min后,松开结扎线再灌注6h制作心肌缺血再灌注模型。治疗（I30minR/6h＋T）组于再灌注前5min静脉注射蛋白酶体抑制剂MG-1320．75mg／kg,对照（（I30minR/6）组、假手术（Sham）组和缺血30min无再灌注（I30min）组注射与之相同容积的生理盐水,观察各组心肌梗死体积、心肌酶标志物水平变化。结果：与Sham组相比,I30min组的心肌梗死体积以及心肌梗死体积占左室心肌体积的百分比均明显增加（P〈0．01）,血浆肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白Ⅰ（TnⅠ）显著升高;再灌注前蛋白酶体抑制MG-132治疗则明显减小了缺血30min再灌注6h组大鼠的心肌梗死体积（P〈0．05）以及降低了血浆心肌损伤标志物水平（P〈0．05）。结论：MG-132能有效地预防急性心肌梗死后的再灌注损伤。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及其机制

目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及作用机制.方法 (1)30只SD大鼠随机分为空气对照组、高氧组和高氧+MG-132组.(2)建立高氧肺损伤大鼠模型.(3)进行肺损伤病理评分、肺湿/干重比例测定.检测泛素肺组织泛素化蛋白及NF-κBp65的表达.检测蛋白酶体20S及肺组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性,检测肺组织TNF-α、IL-6表达.结果 (1)高氧组肺损伤明显,肺湿/干重比例、肺损伤病理评分均增高(P<0.01),MG-132能使肺湿/干重比例、肺损伤病理评分降低(P<0.01).(2)免疫组化和Westernblotting结果均显示高氧组泛素化蛋白表达增强(P<0.01),MG-132增强其表达(P<0.01).(3)高氧组蛋白酶体20S活性较空气对照组明显升高(P<0.01),MG-132抑制其活性(P<0.01).(4)高氧组MPO活性、NF-κB表达均较空气组增强(P<0.01),同时TNF-α、IL-6表达也增强(P<0.01).而高氧+MG-132组均降低(P<0.01).结论 (1)MG-132可以减轻高氧引起的肺损伤.(2)MG-132可能通过抑制NF-κB/炎性因子通路而实现保护作用.     

蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的改善作用

目的研究不同剂量蛋白酶体抑制剂MG132对肿瘤恶病质的预防和治疗作用。方法采用小鼠结肠腺癌C26细胞接种BALB/c小鼠诱导的肿瘤恶病质模型。分为对照组(HC),肿瘤恶病质组(CC),MG132预防的低浓度组(PL),中浓度组(PM)和高浓度组(PH),MG132治疗的低浓度组(TL)、中浓度组(TM)和高浓度组(TH)。每天监测小鼠体质量、饮食量和肿瘤体积,预防组和治疗组分别于接种后第5、12天开始每天腹腔注射MG132(0.01、0.1、0.5 mg/kg)。第19天各组处死8只小鼠,称量肿瘤、左侧腓肠肌和附睾脂肪组织质量,检测血清葡萄糖(Glu)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平。CC、PM和TM组剩余8只小鼠继续原治疗至其死亡,观察生存时间。结果与CC组相比,MG132预防和治疗组小鼠自发活动量、去瘤体质量、腓肠肌纤维横切面积、腓肠肌和附睾脂肪质量增加,Glu和ALB水平升高,TG水平降低,生存时间延长,均以PM和TM组效果最好,且两组间以上指标差异均有统计学意义(P<0.05);PH组最显著地抑制了肿瘤生长(P<0.05)。结论 MG132的中浓度剂量能较好地改善恶病质,延长生存时间,且预防效果更明显。     

蛋白酶体抑制剂MG-132在大鼠重症急性胰腺炎及其肺损伤中的保护作用

目的观察蛋白酶体抑制剂MG-132在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）中的保护作用,并探讨其可能机制。方法SD大鼠30只,5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制作重症急性胰腺炎（SAP）模型,观察各组大鼠胰腺、肺组织形态学改变,并测定血清淀粉酶及胰腺、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性。结果MG-132治疗组与胰腺炎组及假手术组比较,血清淀粉酶、胰腺及肺组织MPO活性下降（P〈0．05）,组织病理学改变均有不同程度的改善（P〈0．05）。结论制模前30min腹腔注射10mg／kg的MG-132可以明显减轻5％牛磺胆酸钠诱导的大鼠的肺损伤严重程度,并可减轻胰腺炎所致的肺损伤。     

有氧运动锻炼对心肌梗死后大鼠氧化应激及心肌重塑的影响

目的 探讨早期有氧运动对心肌梗死(心梗)后大鼠心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及心肌重塑的影响.方法 通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制作急性心梗模型,1周后将存活大鼠随机分为耐力运动组(E组)和未运动组(N组),另设假手术组(S组).运动组行游泳锻炼6周.6周后超声检测各组大鼠心功能,并检测心肌SOD、MDA及光镜和电镜下心肌形态结构.结果 与假手术组相比,运动组和未运动组心肌SOD明显下降,MDA明显上升,SOD/MDA明显下降,心肌结构紊乱,心功能明显下降;而运动组较未运动组.心肌SOD明显上升,MDA明显下降,SOD/MDA明显上升,心肌形态结构有所改善,心功能好转.结论 早期有氧运动锻炼可提高心梗后大鼠心肌抗氧化能力,改善心室重构.保护心功能.     

氟伐他汀抗氧化改善心肌梗死大鼠心室重塑

目的:探讨氟伐他汀长期应用对SD大鼠心肌梗死(AMI)心室重塑过程的影响及其机制.方法:结扎雄性大鼠左冠状动脉前降支,复制心肌梗死模型,将大鼠分为2组,AMI组(n=7)以蒸馏水灌胃,氟伐他汀组(n=8)以氟伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃;另设假手术2组,分别以蒸馏水和氟伐他汀灌胃.8周后心脏超声、血液动力学、心脏形态学分析;检测血浆总胆固醇(Tch)、一氧化氮(NO)、脂质过氧化物(LPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和心肌LPO水平;激光共聚焦显微镜检测超氧阴离子和NO的分布;RT-PCR、免疫组化检测诱导型一氧化氮合酶(NOS2)、p22phox的mRNA和蛋白水平表达.结果:与AMI组比较,氟伐他汀组左室舒张末压降低[(18.24±6.58 vs 10.74±4.71)mmHg,P<0.05]、右室相对重量减轻[(0.92±0.19 vs 0.71±0.13)g/kg,P<0.05]、左室后壁厚度减少[(3.04±0.28 vs 2.60±0.36)mm,P<0.05];AMI后射血分数无影响,但肺相对重量减轻[(5.79±2.92 vs 3.69±0.68)g/kg,P<0.05];血浆和心肌LPO水平降低[(8.64±0.59 vs 7.71±0.66)μmol/L,P<0.05;(3.12±0.38 vs 1.93±0.40)ng/μg.pro,P<0.01],NO的过度表达抑制和GPx水平增加[(436.87±47.22 vs 313.78±34.35)mg/dl,P<0.01;(66.13±8.31 vs 79.78±2.38)mg/dl,P<0.05].氟伐他汀干预后增加NOS2、p22phox mRNA和蛋白水平的表达均下降(P<0.01).血浆总胆固醇水平减低,但无显著性差异[(59.40±14.15 vs 48.30±8.83) mg/dl,P>0.05].结论:氟伐他汀参与了改善大鼠心肌梗死后心室重塑过程,其中可能包括抗氧化机制.     

IGF-1、PKC在大鼠心肌梗死后左室重构中的表达及意义

目的研究心肌梗死后左室重构(left ventricular remodeling, LVRM)过程中蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达以及药物干预研究.方法 SD雌性大鼠建立心肌梗死模型,随机分为3组,分别为单纯心肌梗死(myocardial infarction, MI)组、卡托普利(captopril, Cap)组和缬沙坦(valsartan, Val)组,另设假手术(Sham)组不结扎冠状动脉.行心脏标本病理分析;用免疫组化染色法检测血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体(AgT1R)、PKC和IGF-1蛋白的表达;采用RT-PCR方法检测IGF-1 mRNA的表达.结果①MI组左室重量(LVW)和指数(LVWI)及心肌AgT1R、PKC、IGF-1 mRNA及蛋白表达均显著增加,与Sham组比较有差异性(P《0.05, P《0.01);②卡托普利组和缬沙坦组LVWI、AgT1R、PKC、IGF-1 mRNA及蛋白表达均比MI组减少(P《0.05, P《0.01).结论 IGF-1、PKC可能在心肌梗死后大鼠左室重构过程中起重要作用.卡托普利和缬沙坦可能通过抑制IGF-1表达而改善LVRM.     

罗格列酮对大鼠急性心肌梗死后左心室重构和功能的影响

目的 评价过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮对大鼠急性心肌梗死(AMI) 后左心室重构和功能的影响.方法 AMI术后24 h存活的118只雌性SD大鼠随机分成AMI组60只和罗格列酮组58只,并开始给药治疗;另设30例对照作为假手术组.上述各组再随机分配,分别观察1、2和4周3个疗程.满疗程后均以导管法行血流动力学测定、心脏标本固定和病理分析.最终103只大鼠获完整资料.结果 梗死面积在AMI组和罗格列酮组3个疗程间差异均无显著性(42%～48%,均P>0.05).与假手术组相比,AMI组的左心室舒张末压、实际和相对重量在各时间点均显著增加(P<0.05～0.001),且左心室舒张末压在4周比1和2周时升高更显著(均P<0.01);而左心室内压最大上升和下降速率及其校正值(左心室内压最大上升和下降速率/左心室收缩压)在4周时均显著降低(均P<0.001).与AMI组相比,罗格列酮组的左心室舒张末压在各时间点均显著降低(P<0.05～0.001);实际和相对重量在4周时均显著减轻(P<0.05～0.001);而左心室内压最大上升和下降速率的校正值在4周时均显著升高(P<0.05～0.01).结论 PPAR-γ激动剂罗格列酮能有效防治大鼠急性心肌梗死后左心室重构,并改善左心室收缩和舒张功能.     

StudyonEffectofAstragalusonLeftVentricularCollagenRemodelingafterMyocardialInfarctioninRats

Objective: To study the effect of Astragalus (As) on left ventricular collagen remodeling after myocardial infarction in rats.Methods: Myocardial collagen (MC) and ratio of myocardial collagen type I and M in rat models of myocardial infarction treated with Astragalus injection were determined and compared with those in sham operated rats and in captopril(CAP) treated rats.Results: MC and ratio of MC I /IE of non-in-farcted region in the myocardial infarction rats was higher than that in the sham group. Both AS and CAP could restrain the ascending trend of these parameters.Conclusion: Astragalus is effective in lowering the elevation of MC after infarction and changing the MC I /H ratio, therefore, is beneficial to improve the systolic and diastolic function of left ventricle after acute myocardial infarction.     

心复康对心肌梗死大鼠心室重塑促血管生成的影响

[目的]观察中药心复康对心肌梗死大鼠促血管新生的影响,探讨中药对心室重塑的保护作用。[方法]采用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型,术后随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组和中剂量组,每组12只。中药高剂量[81g/(kg·d)]和中剂量组[40.5g/(kg·d)]给予中药心复康水煎剂灌胃,假手术组和模型组每天等量生理盐水灌胃。28d后处死动物,病理切片观察心脏微观结构改变;免疫组化方法计数心肌梗死灶、边缘区新生血管数。[结果]中药组大鼠心肌梗死面积明显缩小,梗死灶及周围组织中微血管密度、明显高于模型组及假手术对照组。[结论]在大鼠心肌梗死模型中,中药组能够有效促进微血管新生,减少胶原纤维的生成,减轻心肌梗死后心室重塑。     

Comparative proteomic analysis in left ventricular remodeling following myocardial infarction in rats

Objective Left ventricular remodeling (LVR) following myocardial infarction (MI) is a key pathophysiological process in which MI develops into heart failure.The exact mechanism of LVR remains unclear.We performed differential proteomic analysis on the myocardia of rats with LVR after MI,to explore the mechanism of ventricular remodeling after MI.Methods In the LVR group (n=12),after the anterior descending coronary artery was ligated,the rats were fed for four weeks before the LVR models were established.Rats in the sham-operated group (n=11) underwent thread-drawing without ligation.The hemodynamic parameters,pathological findings,and proteomics were compared between the two groups.Results In the LVR group,the left ventricular end-diastolic pressure increased,the maximal left ventricular pressure increase/decrease ratio decreased significantly,and the left ventricular systolic pressure decreased.H-E staining and Masson staining of cardiac muscle tissues of the LVR group showed myocytolysis,disarray,and collagen proliferation.Twenty-one differentially expressed proteins were detected by proteomic analysis.We validated two proteins using western blot analysis.The differentially expressed proteins could be divided into six categories:energy metabolism-related proteins,cytoskeletal proteins,protein synthesis-related proteins,channel proteins,anti-oxidationrelated proteins,and immune-related proteins.Conclusion These differentially expressed proteins might play key roles in LVR following MI.     

心复康对心肌梗死大鼠心室重塑促血管生成的影响*

[目的]观察中药心复康对心肌梗死大鼠促血管新生的影响,探讨中药对心室重塑的保护作用.[方法]采用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型,术后随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组和中剂量组,每组12只.中药高剂量[81g/(kg·d)]和中剂量组[40.5g/(kg·d)]给予中药心复康水煎剂灌胃,假手术组和模型组每天等量生理盐水灌胃.28d后处死动物,病理切片观察心脏微观结构改变;免疫组化方法计数心肌梗死灶、边缘区新生血管数.[结果]中药组大鼠心肌梗死面积明显缩小,梗死灶及周围组织中微血管密度、明显高于模型组及假手术对照组.[结论]在大鼠心肌梗死模型中,中药组能够有效促进微血管新生,减少胶原纤维的生成,减轻心肌梗死后心室重塑.     

超声心动图对心肌梗死患者后期左室重塑预测价值的初步探讨

目的 :初步探讨急性心肌梗死 (AMI)急性期超声心动图各指标对AMI后期左室重塑的预测价值。方法 :我们对 5 2例首次AMI的患者于急性期 [(5 1± 1 9)d ]及随诊期 [(10 6± 3 4)月 ]分别行超声心动图检查 ,测量并对比前后超声检查各指标的变化。结果 :随诊期左室舒末径 (LVD)、左室舒张末容积指数 (EDVI)、每搏量指数 (SVI)及二尖瓣减速时间 (DT)均较急性期增大 (P <0 0 5 ) ,5 2例患者中 37例 (71% )发生左室重塑 ,Stepwise回归分析显示 :急性期中SVI、DT对左室舒张末容积指数的变化 (ΔEDVI)有很强的预测价值。SVI及DT均与ΔEDVI呈明显的负相关 ,回归方程为ΔEDVI=49 5 5 - 0 95SVI- 0 13DT ,其确定系数R2 =0 5 0 (P <0 0 1)。结论 :AMI急性期SVI、DT的测定对AMI患者后期的左室重塑有一定的预测价值